HPLC-ELSD法和UPLC-MS/MS法评价石斛夜光丸中人参投料掺伪情况

目的建立石斛夜光丸中人参混淆品(西洋参)掺伪的检测方法,考察样品中人参的投料情况。方法分别采用HPLC-ELSD和UPLC-MS/MS法进行分析测定。HPLC-ELSD法:采用CAPCELL PAK C18 MGⅢ(S-5)(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,以乙腈-水为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,ELSD漂移管温度为105℃,气体流速为3.0 L·min^(-1);UPLC-MS/MS法:采用电喷雾离子源(ESI-),多反应监测(MRM)模式。结果91批石斛夜光丸中有35批样品检出西洋参。结论所建立方法专属性、重复性、稳定性、耐用性良好,可为石斛夜光丸中人参的质量控制与评价提供可靠方法。

高效液相色谱—蒸发光检测器测定石斛夜光丸的5种成分

目的:建立同时测定石斛夜光丸人参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1,麸炒枳壳中新橙皮苷、柚皮苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD),流动相为乙腈-水梯度洗脱,空气流速2.0 L/min,漂移管温度为110℃。采用建立的方法对样品进行测定,并使用R语言对结果进行分析。结果:所测5种成分在各自线性范围线性关系良好,相关系数r均大于0.9996,精密度、重复性、稳定性RSD均小于2.95%,平均回收率为96.7%~99.5%,RSD均小于1.90%。使用R语言对结果进行分析,不同厂家的石斛夜光丸5种成分含量差异显著。结论:该方法简便快捷、稳定,测定结果准确可靠,实现了对石斛夜光丸中麸炒枳壳、人参的质量评价,一方面为进一步提升石斛夜光丸的整体质量控制水平奠定基础,另一方面也为不同厂家石斛夜光丸的质量对比研究提供参考。

石斛夜光丸中蒽醌类成分的含量测定

以大黄素为标样，以５％ＮａＯＨ－２％ＮＨ４ＯＨ为显色剂，用紫外－可见分光光度法在５１０ｎｍ处测定了北京、天津等７厂家石斛夜光丸中游离、结合和总蒽醌的含量，测定最大变异系数为３．７９％，加样回收率为１００．４％。

统一化指纹图谱的规范数字化和定量评价研究

目的对中药统一化色谱指纹图谱的规范数字化和定量评价方法进行研究,增补5个新统一化消除参数。建立石斛夜光丸(SHYGP)的统一化指纹图谱(UFP),用30个相对统一化特征参数进行评价。方法采用RP-HPLC法建立12批SHYGP指纹图谱,用"中药色谱指纹图谱超信息特征数字化评价系统4.0"软件计算其统一化指纹图谱和30个相对统一化特征参数。用系统指纹定量法分析UFP结果并与正常HPLC谱评价结果进行比较,并用校正UFP评价了12批SHYGP质量。结果统一化参数评价以RFP和S11最佳,S5可以作标准制剂。结论 UFP能数字化评价图谱的优劣,同时能定性定量评价中药质量。

石斛夜光丸中人参二醇及人参三醇的含量测定

以北京、济南、广州等７个厂家石斛夜光丸为样品，用薄层扫描法测定样品中人参二醇及人参三醇的含量，建立了测定方法．为制定石斛夜光丸的质控标准提供了参考。

双色谱系统定量指纹图谱评价石斛夜光丸质量

目的研究在双色谱系统条件下用系统指纹定量法(SQFM)对石斛夜光丸(SHYGP)进行评价所产生的变动情况,同时考察SHYGP同一75%乙醇提取液经5℃放置70 d后指纹图谱变化。方法 SQFM的3个指标宏定性相似度(Sm)、宏定量相似度(Pm)和变动系数(α)间存在密切相关特性,在洗脱程序EP1条件下用高效液相色谱测定12批SHYGPs在203、286和326 nm波长处的指纹图谱,分别以均值法整合三波长下定量指纹图谱的鉴定结果;经70 d后重新提取样品在显著变动的洗脱程序EP2条件下同法试验和评价指纹图谱,对2次获得指纹图谱群的评价结果进行误差对比,并讨论质量鉴定等级和宏定量相似度变化。同时对75%乙醇提取液5℃存放70 d后采用EP2方法试验,同法考察变化。结果以柚皮苷(NG)为参照物峰,EP1确定38(203 nm),34(286 nm)和30(326 nm)个共有指纹峰,EP2确定32(203 nm)、37(286 nm)和26(326 nm)个共有指纹峰。经SQFM评价后的三波长指纹图谱结果按照均值法整合,对S2、S3、S4和S12等4批样品鉴定结果一致,除S6、S11外,余下6批样品鉴定结果波动仅1级,不考虑S1、S6和S11,Sm平均波动<0.04,Pm误差基本<10%(S9、S10除外)。对EP1和EP2三波长HPLC-FPs鉴定数据取平均,最终鉴定S1、S2、S3、S5和S7质量极好(1级),S4、S8和S9质量很好(2级),S10和S12质量好(3级),S11质量较好(4级),S6质量中等(5级)。结论在有效期内SQFM对同一总体样品以定量指纹图谱进行评价时,系统梯度洗脱条件的显著变化基本不影响鉴定结果。

石斛夜光丸研究进展

石斛夜光丸首见于元代旴江医家沙图穆苏《瑞竹堂经验方·羡补门》,该方原系补益肝肾类方药,后来演变为眼科专用中成药,至今仍被应用于国内外临床。近年国内对其临床应用及药理研究方兴未艾,本文对此进行了系统综述。

石斛夜光颗粒剂与丸剂的药理作用比较

实验结果表明，两种制剂均能防治大鼠半乳糖性白内障中期病变，可明显增加用免疫抑制剂处理的封闭群小鼠的免疫器官重量及提高正常小鼠持续游泳时间。药理作用强度比较，颗粒剂优于丸剂。

石斛夜光丸光感受器细胞保护效应的研究

目的探讨石斛夜光丸抗光损伤诱导光感受器细胞退行性改变的效应。方法采用BALB/c小鼠,分为正常对照组、模型组以及石斛夜光丸不同时间点给药组。模型组及石斛夜光丸治疗组接受白炽光光照30 min[光照强度为(10 000±10)lx]以建立视网膜光损伤模型。石斛夜光丸治疗组连续给药7 d,光照前暗适应24 h,治疗组分别在光照前立即给药或光照前30 min给予石斛夜光丸水煎液200μl灌胃,正常对照组和模型组给予等量0.9%NaCl溶液灌胃。光照后7 d通过光学相干断层扫描(OCT)检测小鼠视网膜形态结构。采用石蜡切片进行苏木素-伊红(HE)染色和视紫红质(RHO)、中波敏感视蛋白(M-opsin)免疫组织化学染色,以进一步明确视网膜形态学及视杆细胞、视锥细胞的病理改变情况。结果正常对照组视网膜结构完整,RHO和M-opsin表达分布正常;与正常对照组相比,模型组外核层显著变薄,光感受器细胞外节层及内节层结构紊乱,RHO和M-opsin表达显著降低;与模型组相比,石斛夜光丸两给药组视网膜形态基本完整清晰,RHO和M-opsin的表达增多。结论石斛夜光丸具有显著的抗光损伤诱导的光感受器细胞退行性改变的作用。

HPLC法测定石斛夜光丸(大蜜丸)中盐酸小檗碱的含量

[目的]建立用高效液相色谱测定石斛夜光丸中盐酸小檗碱含量的方法。[方法]采用C18柱,流动相为乙腈-0.34%磷酸二氢钾-0.17%十二烷基磺酸钠(48∶26∶26)混合液,检测波长为345nm。[结果]盐酸小檗碱在0.0428～1.1548μg/ml范围内线性关系良好,平均回收率为99.5%,RSD值为2.8%。[结论]该分析方法简便,准确,可作为该制剂的定量分析方法。

石斛夜光丸中麦冬掺伪情况考察

目的:建立眼科经方石斛夜光丸中麦冬的混淆品山麦冬(湖北麦冬、短葶山麦冬)的检查方法,考察样品中麦冬的投料状况。方法:应用超液相色谱-串联电喷雾三重四级杆质谱(HPLC-MS-MS)技术,采用Waters CORTECS® C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm, 2.7μm),以0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速:0.25 ml·min;,柱温:35℃,采用电喷雾离子源(ESI^(±)),以多反应监测(MRM)模式进行正、负离子分别扫描。结果:山麦冬的特征成分山麦冬皂苷B与短亭山麦冬皂苷在相应线性范围内线性关系良好(r>0.999),平均加样回收率为99.03%、97.96%,RSD均小于3.9%(n=9),91批石斛夜光丸样品检出山麦冬22批。结论:石斛夜光丸中存在麦冬和山麦冬的混用情况。

石斛夜光丸联合聚乙二醇滴眼液治疗干眼的临床研究

目的分析石斛夜光丸联合聚乙二醇滴眼液治疗干眼的临床疗效。方法选取2022年6月—2023年6月黑龙江中医药大学附属第一医院收治的136例干眼患者,按随机数字表法将所有患者分为对照组和治疗组,每组各68例。对照组接受聚乙二醇滴眼液治疗,使用前摇匀,每眼1滴/次,3次/d。治疗组在对照组治疗基础上口服石斛夜光丸,1丸/次,2次/d。两组疗程4周。比较两组临床疗效、荧光素染色泪膜破裂时间(FBUT)等相关临床检查指标及眼表疾病指数(OSDI)量表、干眼相关生活质量评分问卷(DEQS)、简式抑郁–焦虑–压力量表(DASS-21)评分和泪液中转化生长因子-β2(TGF-β2)、CC趋化因子配体1(CCL1)、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(s ST2)、白细胞介素(IL)-1β水平。结果治疗后,治疗组总有效率是97.06%,显著高于对照组的88.24%(P<0.05)。治疗后,两组FBUT、SⅠt和泪河高度均显著增加,而FL评分均显著降低(P<0.05);治疗后,治疗组相关临床检查指标改善优于对照组(P<0.05)。治疗后,两组OSDI评分、DEQS评分和DASS-21评分均显著降低(P<0.05);且治疗后,治疗组OSDI评分、DEQS评分和DASS-21评分均显著低于对照组(P<0.05)。治疗后,两组泪液中TGF-β2均显著升高,而泪液中CCL1、sST2、IL-1β水平均显著降低(P<0.05);治疗后,治疗组泪液中TGF-β2、CCL1、sST2、IL-1β改善优于对照组(P<0.05)。结论石斛夜光丸联合聚乙二醇滴眼液治疗干眼的效果确切,能安全有效地控制干眼,促进眼部炎症及眼表损伤缓解,进一步改善患者泪膜稳定性和泪液分泌功能,提升生活质量及精神心理状态,值得临床推广应用。

石斛夜光丸中五味子的质量控制研究

目的:建立石斛夜光丸中五味子定性鉴别方法和掺伪检查方法,以控制石斛夜光丸中五味子的投料质量。方法:采用薄层色谱法对石斛夜光丸中五味子进行定性鉴别,以环己烷-乙酸乙酯(3∶2)为展开剂,在紫外光灯(254 nm)下检视。采用液相色谱-质谱联用法对安五酯素、五味子醇甲进行测定,计算安五脂素与五味子醇甲的含量比值,如比值>2.0,则存在以南五味子代替五味子投料的情况;色谱条件:采用Agilent Eclipse C18(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,柱温35℃,以乙腈(A)^(-1)0 mmol·L^(-1)乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.25 mL·min^(-1),进样量1μL。结果:对收集的19家企业的91批石斛夜光丸进行了检测,其中1个企业的3个批次样品存在以南五味子代替五味子投料的情况,薄层色谱鉴别方法和液相色谱-质谱联用掺伪检查方法的检测结果一致。结论:本方法准确、可靠,可作为石斛夜光丸中五味子质量控制的检测方法。

石斛夜光丸治疗白内障的分子机制研究

白内障是常见的眼部疾病之一,多种因素都能导致白内障,它也是导致失明的首位原因.石斛夜光丸是古老而又常用的中成药之一.可治疗白内障、青光眼,久服有一定的疗效.然而,作用机制仍不清楚.在本研究中网络药理学,分子对接技术和细胞实验用来探索石斛夜光丸治疗白内障的分子机制.石斛夜光丸的活性成分和靶点通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP), PubChem, SuperPred和BATMAN-TCM数据库获得.与白内障相关的靶点来自GeneCards, CTD, DisGeNET, Malaccards和OMIM数据库以及通过Venny2.1.0获得了交集靶点.然后,使用Cytoscape软件构建了一个活性成分-靶点网络.通过String数据库和Cytoscape软件绘制了蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,获得核心靶点.接下来,通过Bioconduct平台得到KEGG通路富集分析.使用Autodock Vina进行分子对接,最后细胞实验验证石斛夜光丸的有效成分对H2O2引起的B-3细胞损伤的保护作用.结果表明,根据筛选标准,共筛选出1 511种石斛夜光丸活性成分和576个潜在靶点.通过在线数据库,确定了10 133个白内障相关靶点,获得了449个交集靶点.在活性成分-靶点网络中,异鼠李素、柚皮素和槲皮素是重要的活性成分.在PPI网络中,MAPK3, MAPK1, STAT3, TP53和AKT1是核心靶点.KEGG分析表明,石斛夜光丸治疗白内障的主要途径涉及PI3K-AKT,TNF和MAPK信号通路.在分子对接中,石斛夜光丸的活性化合物与核心靶点具有良好的亲和力.细胞存活实验表明,QUE,NAR和ISO可以改善H_(2)O_(2)诱导的B-3细胞损伤.对B-3细胞中总活性氧种类的测定表明,QUE, NAR和ISO能够保护H_(2)O_(2)引起的B-3细胞损伤,其机制为影响细胞凋亡以及减少细胞氧化反应.在本研究中,初步预测了石斛夜光丸治疗白内障的主要活性成分、靶点和信号通路,这将为进一步研究石斛夜光丸对白内障的保护机制和临床应用提供新的思路.

HPLC法测定石斛夜光丸中五味子醇甲的含量

目的:建立用高效液相色谱法测定石斛夜光丸中五味子醇甲含量的方法。方法:采用C18柱,流动相为甲醇-水(48∶52),检测波长为250nm。结果:五味子醇甲在0.03401～2.38μg范围内线性关系良好,平均回收率(n=6)为98.7%,RSD为2.1%。结论:本法分析方法简便,准确,可作为该制剂的定量分析方法。