人Shisa样蛋白1(SHISAL1)抗原表位区预测及其小鼠多克隆抗体的制备

目的优化人Shisa样蛋白1(SHISAL1)抗原后制备小鼠抗多克隆抗体,并鉴定抗体特异性.方法利用生物信息学方法预测SHISAL1蛋白的抗原表位区,选取SHISAL1蛋白第28~97位氨基酸残基组成的多肽作为抗原,并命名为(SHISAL1-N);利用分子克隆技术,将其编码序列克隆后插入pET-28a载体中构建重组质粒pET28a-SHISAL1-N.然后将pET28a-SHISAL1-N和已构建的pET28a-SHISAL1全长重组质粒转化BL21(DE3),用异丙基-β-D硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达.两种蛋白纯化后分别免疫雌性昆明小鼠,Western blot法、免疫沉淀及免疫荧光细胞化学染色法观察两种抗体的特异性与灵敏性.结果成功构建pET28a-SHISAL1-N重组质粒,诱导两种融合蛋白表达,获得两种类型的SHISAL1小鼠多克隆抗体.Western blot结果表明以SHISAL1为免疫原所制备的抗体特异性和灵敏性较差,而以SHISAL1-N免疫原所制备的抗体能特异性识别不同的细胞内源性的SHISAL1蛋白;免疫沉淀结果表明SHISAL1-N抗体可以结合肝癌细胞中的SHIISAL1蛋白;免疫荧光细胞化学染色结果证明SHISAL1-N抗体与细胞质中的SHISAL1蛋白特异性结合.结论成功优化SHISAL1抗原并制备了小鼠抗人SHISAL1多克隆抗体,可应用于Western blot实验、免疫沉淀和免疫荧光细胞化学染色.

小鼠抗人Shisa样蛋白1(SSL1)多克隆抗体的制备和应用

目的制备抗Shisa样蛋白l(SSLl)的多克隆抗体,并探讨其在SMMC-7721肝癌细胞中的定位。方法通过反转录PCR从HepG2肝癌细胞中克隆人SSL1基因,将其插入到pET-28a中构建pET28a-SSLl原核表达载体,导入大肠杆菌BU1(DE3)中,用异丙基-B-D-硫代半乳毗喃糖昔(IPTG)诱导融合蛋白大量表达,通过Ni-NTA亲和层析柱纯化蛋白;然后,利用纯化的蛋白免疫雌性昆明小白鼠,Western blot法鉴定抗体特异性,免疫荧光细胞化学染色法观察SSL1在SMMC-7721亚细胞中的表达,并用高尔基体荧光探针Golgi-Tracker Red对高尔基复合体进行标记以明确SSL1在SMMC-7721亚细胞中的定位。结果成功扩增SSL1基因,构建重组原核表达质粒pET28a-SSLl,经诱导获得较高纯度的SSL1蛋白,制备了抗SSL1多克隆抗体。免疫荧光染色结果显示,SSL1主要在SMMC-7721细胞的细胞质中表达,Golgi-Tracker Red标记结果表明,SSL1主要定位于SMMC-7721细胞的高尔基体上。结论成功制备了有较高特异性的小鼠抗SSL1多克隆抗体,并确定SSL1定位于SMMC-7721细胞的高尔基体。

TLS1.3协议更新发展及其攻击与防御研究

SSL/TLS(Secure Sockets Layer/Transport Layer Security)协议旨在为网络通信提供安全的信道,为通信双方提供认证、机密性和完整性。由于协议的复杂及其设计和实现上的漏洞导致许多安全隐患,新版本TLS1.3的制定引起信息安全学术界和产业界广泛的关注。概述TLS1.3的协议结构。在此基础上,对TLS1.3几个革新性的改变:密钥编排表、PSK和0-RTT进行了系统性地分析与梳理。对近10年协议受到的攻击按照协议的层次分类进行概述,提炼出每种攻击的原理以及TLS1.3针对这些攻击作出的应对措施。对TLS协议的未来发展作出预测并提出建议。

日本NHK采用SSL C1OO

随着数字地面广播在日本的起步日本国家广播公司NHK札幌分公司正在更换原来的模拟地面广播把SSL C100数字调音台——NHK采用的第三代SSL控制台(图）运用到其T-1设备控制台中。

电子商务的安全技术与协议研究

一、引言 随着计算机网络和通信技术的迅速发展,借助于Internet等公共网络快速高效地实现各种商务活动的电子商务也在不断地向前发展,并在全世界范围内得到了普及和应用.

LTE传输安全组网技术及规划要点

在LTE网络中,eNodeB回传采用IP分组承载传送网。IP网络除了简单灵活、扁平化、完全开放等特点外,还使承载的业务面临各种信息安全问题。通过详细分析802.1x、IPSec、SSL和PKI等传输安全关键技术,提出了不同层次的传输安全保护组网建议,以解决eNodeB与EPC核心网之间的通信安全问题。

DMT全面进入扩声领域 参与国家大剧院音响工程技术研讨会

国家大剧院音响工程技术研讨会3月中旬在北京召开．众家齐聚一堂。传新科技院潜在的设备供应商也参与了此次盛会．并展出了SSL C100和Yamaha PMlD现场扩声调音台.受到专家的普遍关注和好评。这标志着传新科技开始首次进入扩声领域，把握更多的机遇．接受更大的挑战，迈向更高的平台。

ENERGY STAR Lamps V2.0新版标准变化分析及应对措施

简单介绍了能源之星计划,重点阐述灯类产品能源之星标准Lamps V1.1版和V2.0版本的差异。通过分析,帮助企业了解新旧标准的变化及带来的影响,掌握面临的挑战和机遇。