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日本血吸虫铁蛋白基因的克隆、表达及其免疫诊断的研究 被引量:2
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作者 王敏 易新元 +2 位作者 曾宪芳 袁仕善 李先平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期696-699,共4页
目的 :构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白 ,并初步观察其免疫诊断价值。方法 :将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体 ,转化重组体到大肠杆菌E .coli 2 5 6 6进行表达 ;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋... 目的 :构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白 ,并初步观察其免疫诊断价值。方法 :将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体 ,转化重组体到大肠杆菌E .coli 2 5 6 6进行表达 ;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白 ;用SDS PAGE和Westernblot鉴定表达纯化产物 ;用Dot ELISA分别检测了血吸虫病人及正常人的血清。结果 :重组的日本血吸虫铁蛋白以GMC(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 ) 日本血吸虫铁蛋白融合蛋白的形式在细菌中得到高效表达 ,分子量为 4 0kD ,能被日本血吸虫感染兔血清识别。用重组铁蛋白检测 30例日本血吸虫病人血清和 30例正常人血清 ,阳性率和假阳性率分别为 93 3%和 3 3%。结论 :成功地表达纯化日本血吸虫重组铁蛋白 ,且该蛋白具有一定的免疫诊断价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 铁蛋白 基因克隆 表达 免疫诊断
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洪涝灾害年人群血吸虫感染规律 被引量:2
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作者 张世清 倪传华 +7 位作者 陈金生 吕大兵 王晓可 汪昊 汪奇志 吴维铎 方国仁 郑江 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1153-1155,共3页
目的 探索洪涝灾害年不同时段人群血吸虫感染规律。方法 于感染季节前、汛前期、洪水期、退水期分别采用kato-katz法和集卵孵化法 ,检查人群血吸虫感染情况 ,计算人群血吸虫感染率和感染度。结果 汛前期、洪水期、退水期人群血吸虫... 目的 探索洪涝灾害年不同时段人群血吸虫感染规律。方法 于感染季节前、汛前期、洪水期、退水期分别采用kato-katz法和集卵孵化法 ,检查人群血吸虫感染情况 ,计算人群血吸虫感染率和感染度。结果 汛前期、洪水期、退水期人群血吸虫感染率分别为 0 5 7% ,0 70 % ,4 4 3% ,退水期人群感染率显著高于汛前期 (χ2 =2 6 94 ,P<0 0 1)和洪水期 (χ2 =2 7 80 ,P <0 0 1)。结论 洪涝灾害年份退水期是江滩型流行区人群血吸虫感染的主要阶段 。 展开更多
关键词 江滩 洪涝灾害 血吸虫 感染规律
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日本血吸虫卵黄铁蛋白基因免疫在不同处理小鼠诱导免疫应答的观察 被引量:2
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作者 周俊梅 余新炳 +3 位作者 吴忠道 郑亦男 李焱 李晖婷 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第5期345-347,351,共4页
【目的】研究日本血吸虫卵黄铁蛋白DNA免疫在两种处理小鼠诱导的免疫应答及其保护作用。【方法】免疫小鼠分两大组进行 :实验Ⅰ组小鼠有预感染 ,实验Ⅱ组小鼠没有预感染。将构建的携带日本血吸虫卵黄铁蛋白基因的重组质粒pLXSN Fer1经... 【目的】研究日本血吸虫卵黄铁蛋白DNA免疫在两种处理小鼠诱导的免疫应答及其保护作用。【方法】免疫小鼠分两大组进行 :实验Ⅰ组小鼠有预感染 ,实验Ⅱ组小鼠没有预感染。将构建的携带日本血吸虫卵黄铁蛋白基因的重组质粒pLXSN Fer1经左后腿肌肉注射BALB/c小鼠 ,共免疫 2次 ,间隔 2周。末次免疫后 5周以血吸虫尾蚴攻击感染 ,6周后剖杀小鼠 ,计数成虫负荷及肝组织虫卵数。设空载质粒免疫组为对照组。【结果】免疫小鼠后在实验Ⅰ组主要诱生IgG1和IgG3,在实验Ⅱ组主要诱生IgG2a和IgG2b ;实验组产生较高水平的IgA和IFN γ应答。pLXSN Fer1免疫小鼠获得一定程度的减虫率 (2 6 47% ,34 0 8% )和减卵率 (4 0 0 2 % ,36 83% )。【结论】日本血吸虫卵黄铁蛋白在两种不同处理小鼠均能产生一定程度的保护作用 ,有可能成为有价值的疫苗候选分子 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 卵黄铁蛋白 MHCⅡ类基因 免疫应答 DNA免疫
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日本血吸虫重组抗原的免疫原性鉴定 被引量:2
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作者 张桂筠 张兆松 +4 位作者 沈一平 陈淑贞 吴海玮 苏川 吴观陵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1997年第5期28-30,共3页
为发展新的日本血吸虫病疫苗候选抗原分子,对已构建的阳性表达克隆PGsj24进行大量诱导表达,制备为20kD的重组抗原。以之免疫家兔,产生了较强的抗体反应。该单特导抗血清可识别成上天然蛋白中与重组蛋白相对应的抗原成分。两者分子量... 为发展新的日本血吸虫病疫苗候选抗原分子,对已构建的阳性表达克隆PGsj24进行大量诱导表达,制备为20kD的重组抗原。以之免疫家兔,产生了较强的抗体反应。该单特导抗血清可识别成上天然蛋白中与重组蛋白相对应的抗原成分。两者分子量及Westernblot识别反应带型均基本一致,说明约20kD重组蛋白确为日本血吸虫基因编码产物,具有较强的免疫原性,可刺激机体产生较强的免疫应答。 展开更多
关键词 日本血吸虫 重组抗原 免疫原性
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日本血吸虫成虫67kD抗原模拟表位的筛选及其免疫原性 被引量:1
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作者 袁仕善 易新元 +3 位作者 曾宪芳 王敏 张顺科 Larry Mc Reynolds 《中国热带医学》 CAS 2002年第4期441-443,共3页
目的 筛选日本血吸虫成虫 67kD抗原的模拟表位 ,对其免疫学活性予以鉴定。方法 用粗提日本血吸虫成虫 67kD抗原的抗体IgG作配体筛选噬菌体 12肽库 ,随机挑取三轮筛选后的噬菌体克隆 ,Dot -ELISA检测其特异性 :用混和阳性噬菌体克隆免... 目的 筛选日本血吸虫成虫 67kD抗原的模拟表位 ,对其免疫学活性予以鉴定。方法 用粗提日本血吸虫成虫 67kD抗原的抗体IgG作配体筛选噬菌体 12肽库 ,随机挑取三轮筛选后的噬菌体克隆 ,Dot -ELISA检测其特异性 :用混和阳性噬菌体克隆免疫小鼠 3次 ,攻击感染后 45d剖杀 ,计数虫荷。结果 经三轮筛选 ,特异噬菌体得到富集 ,挑取的 11个噬菌体克隆经Dot-ELISA鉴定均与 67kD抗原免疫血清呈阳性反应。混合噬菌体克隆的免疫血清可识别 67kD抗原 ,并具有一定的抗血吸虫的免疫保护效果。结论 利用噬菌体随机肽库技术获得了日本血吸虫成虫67kD抗原的模拟表位 。 展开更多
关键词 免疫原性 日本血吸虫 67kD抗原 模拟表位 免疫筛选 噬菌体随机肽库 血吸虫病
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血吸虫可溶性虫卵抗原对哮喘的抑制作用及机制研究
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作者 朱云娟 杨秀珍 +6 位作者 刘霞 吴增强 纪伟华 安桂珍 沈悦云 刘金霞 刘佩梅 《中国药物与临床》 CAS 2012年第1期5-7,I0001,共4页
目的研究血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)对哮喘发生的抑制作用及免疫调节机制。方法BALB/C小鼠腹腔及足垫注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。对照组注射生理盐水。然后用卵清白蛋白(OVA)诱导小鼠产生过敏性哮喘,剖杀小鼠,取肺组织进行病理学... 目的研究血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)对哮喘发生的抑制作用及免疫调节机制。方法BALB/C小鼠腹腔及足垫注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。对照组注射生理盐水。然后用卵清白蛋白(OVA)诱导小鼠产生过敏性哮喘,剖杀小鼠,取肺组织进行病理学检查;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片、染色后进行细胞分类计数;分离脾细胞,用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)占CD4+T细胞的比例。结果 SEA免疫并OVA致哮喘组小鼠肺组织炎症明显轻于OVA单纯哮喘对照组,只有少量炎性细胞浸润。BALF涂片染色后发现SEA免疫组BALF中的细胞密度低于对照组,其中嗜酸性粒细胞占总细胞数的比例(2.2±1.5)%明显低于对照组(19.9±4.1)%,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测结果发现SEA免疫组小鼠脾细胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞总数的(32.2±2.2)%,明显高于对照组(27.4±2.9)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SEA对哮喘的发生有一定的抑制作用,其机制可能是通过CD4+CD25+调节性T细胞影响机体的免疫调节机制。 展开更多
关键词 T淋巴细胞 调节性 哮喘 血吸虫可溶性虫卵抗原
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Selection of the Mimic Epitopes of Antigens from Schistosoma japonicum by Using Phage Display Techniques 被引量:1
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作者 王敏 易新元 +4 位作者 曾宪芳 李先平 周东明 张顺科 章洁 《Journal of Microbiology and Immunology》 2003年第1期91-94,共4页
To obtain short peptides simulating antigenic epitopes related to natural resistance against Schistosoma japonicum (S.j) in rats, and to explore their immune protection against S.j in mice, phage random peptide librar... To obtain short peptides simulating antigenic epitopes related to natural resistance against Schistosoma japonicum (S.j) in rats, and to explore their immune protection against S.j in mice, phage random peptide library of 12 amino acids were screened with purified IgG from normal rat sera. Positive clones that were obtained after three rounds of biopanning were detected by ELISA, and two of them were sequenced. Kunming mice were immunized with mixed phage clones. Each mouse was challenged with 40±1 S.j cercariae, and all mice were perfused 45 days post-challenge. The worms and the liver eggs were counted. The results were that the specific phages binding to IgG were enriched 300 folds after three rounds of biopanning. Twenty clones were detected by ELISA and 19 of them bound to the specific IgG of rat sera. The sequence of two clones revealed no homology with other sequences in the GenBank. Compared with the control groups, the reduction rates of the worm burden and liver egg were 33.6% and 59.8%, respectively. It was concluded that the specific peptides, which simulate antigenic molecules correlated with natural resistance to S.j in rats could be obtained by immunosceening phage random peptide library and a protective immunity against S.j can be detected by these epitopes in mice. 展开更多
关键词 shistosoma japonicum Antigenic peptides IMMUNOSCREENING Phage random peptide library
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CD4^+ CD25^+调节性T细胞在血吸虫可溶性虫卵抗原影响哮喘中的作用研究 被引量:8
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作者 朱云娟 杨秀珍 +7 位作者 刘霞 吴增强 纪伟华 安桂珍 沈悦云 刘金霞 李健 刘佩梅 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第9期663-665,693,F0003,共5页
目的研究血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)与哮喘发生的关系及其对CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)及相关基因Foxp3表达的影响。方法 BALB/C小鼠腹腔及足垫共注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。对照组注射生理盐水。然后用卵清白蛋白(OVA... 目的研究血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)与哮喘发生的关系及其对CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)及相关基因Foxp3表达的影响。方法 BALB/C小鼠腹腔及足垫共注射SEA 50μg/只,每周1次,共4次。对照组注射生理盐水。然后用卵清白蛋白(OVA)诱导小鼠产生过敏性哮喘。剖杀小鼠,取肺组织,做病理学检查;收集支气管肺泡灌洗液(BALF),涂片、染色后进行细胞分类计数;分离脾细胞,用流式细胞仪检测CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)占CD4+T细胞的比例;提取脾脏RNA,以逆转录得到的cDNA为模板扩增Foxp3基因,检测脾脏Foxp3mRNA表达水平。结果 SEA免疫并OVA致哮喘组小鼠肺组织炎症较OVA单纯哮喘对照组轻,只有少量炎性细胞浸润。BALF涂片染色检查SEA免疫组BALF中的细胞密度低于对照组,其中嗜酸粒细胞占总细胞数的(2.22±1.52)%,对照组占(19.93±4.08)%,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测SEA免疫组小鼠脾细胞中CD4+CD25+Treg占CD4+T细胞总数的(32.24±2.19)%,对照组占(27.41±2.87)%,差异有统计学意义(P<0.05);PCR检测SEA免疫组脾细胞Foxp3mRNA表达水平高于对照组。结论 SEA对哮喘的发生有一定抑制作用,可能通过CD4+CD25+Treg影响机体的免疫调节机制。 展开更多
关键词 血吸虫可溶性虫卵抗原 调节性T细胞 哮喘 FOXP3
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