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家蚕翅原基发育关联基因BmHMGS的鉴定与表达特征分析
1
作者
蒋诗梦
钟杨生
+3 位作者
林碧敏
陈芳艳
严会超
林健荣
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期242-248,共7页
家蚕幼虫的翅原基最终发育为成虫的翅,翅原基发育与家蚕的变态发育紧密关联。为了研究激素作用下家蚕翅原基发育的分子调控机制,以经过蜕皮激素20E体外诱导培养和未经诱导培养的家蚕5龄幼虫翅原基为材料分别提取总蛋白质,利用Shotgun质...
家蚕幼虫的翅原基最终发育为成虫的翅,翅原基发育与家蚕的变态发育紧密关联。为了研究激素作用下家蚕翅原基发育的分子调控机制,以经过蜕皮激素20E体外诱导培养和未经诱导培养的家蚕5龄幼虫翅原基为材料分别提取总蛋白质,利用Shotgun质谱分析在20E诱导组的翅原基中获得132种差异蛋白,在未经20E诱导组的翅原基中获得76种差异蛋白。进一步通过生物信息学技术及GO分类法在20E诱导组的翅原基的差异蛋白中,筛选到1个具有生物调节作用的酶类蛋白基因Bm HMGS作为翅原基发育相关的候选基因,设计引物并以上蔟1 d的蚕体翅原基总RNA反转录得到的c DNA为模板,克隆了该基因。通过qRT-PCR检测到Bm HMGS基因在幼虫5龄1 d、上蔟3 d、蛹期1 d蚕体内的表达量较高,其中在上蔟3 d的表达量达到峰值。构建重组载体进行Bm HMGS的原核表达并制备抗体后,采用Western blot技术在5龄1~7 d和上蔟1~3 d的蚕体翅原基、脂肪体中及上蔟1~3 d的生殖腺中都可以检测到Bm HMGS的表达,并且在翅原基中的表达没有发育时期特异性。研究结果表明,从20E诱导组的家蚕翅原基中鉴定的Bm HMGS与翅原基发育相关,其表达在5龄至上蔟阶段没有时期和组织的特异性,推测Bm HMGS是一个具有多种生物学功能的基因。
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关键词
家蚕翅原基
体外培养
蜕皮激素
shotgun质谱
BmHMGS基因
表达特征
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职称材料
题名
家蚕翅原基发育关联基因BmHMGS的鉴定与表达特征分析
1
作者
蒋诗梦
钟杨生
林碧敏
陈芳艳
严会超
林健荣
机构
华南农业大学动物科学学院
湖南省蚕桑科学研究所
出处
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第2期242-248,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.31272368)
现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-22)
公益性行业(农业)科研专项(No.201403064)
文摘
家蚕幼虫的翅原基最终发育为成虫的翅,翅原基发育与家蚕的变态发育紧密关联。为了研究激素作用下家蚕翅原基发育的分子调控机制,以经过蜕皮激素20E体外诱导培养和未经诱导培养的家蚕5龄幼虫翅原基为材料分别提取总蛋白质,利用Shotgun质谱分析在20E诱导组的翅原基中获得132种差异蛋白,在未经20E诱导组的翅原基中获得76种差异蛋白。进一步通过生物信息学技术及GO分类法在20E诱导组的翅原基的差异蛋白中,筛选到1个具有生物调节作用的酶类蛋白基因Bm HMGS作为翅原基发育相关的候选基因,设计引物并以上蔟1 d的蚕体翅原基总RNA反转录得到的c DNA为模板,克隆了该基因。通过qRT-PCR检测到Bm HMGS基因在幼虫5龄1 d、上蔟3 d、蛹期1 d蚕体内的表达量较高,其中在上蔟3 d的表达量达到峰值。构建重组载体进行Bm HMGS的原核表达并制备抗体后,采用Western blot技术在5龄1~7 d和上蔟1~3 d的蚕体翅原基、脂肪体中及上蔟1~3 d的生殖腺中都可以检测到Bm HMGS的表达,并且在翅原基中的表达没有发育时期特异性。研究结果表明,从20E诱导组的家蚕翅原基中鉴定的Bm HMGS与翅原基发育相关,其表达在5龄至上蔟阶段没有时期和组织的特异性,推测Bm HMGS是一个具有多种生物学功能的基因。
关键词
家蚕翅原基
体外培养
蜕皮激素
shotgun质谱
BmHMGS基因
表达特征
Keywords
Wing disc of Bombyx mori
In vitro culture
Ecdysone 20E
shotgun
mass spectrometry
BmHMGS gene
Expression characteristic
分类号
S881.2 [农业科学—特种经济动物饲养]
Q786 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
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1
家蚕翅原基发育关联基因BmHMGS的鉴定与表达特征分析
蒋诗梦
钟杨生
林碧敏
陈芳艳
严会超
林健荣
《蚕业科学》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
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参考文献
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