基于F-2群体的藏鸡羽色、胫色性状的遗传分析

采用白来航、寿光鸡分别与藏鸡进行正反交交配,F1代进行自群交配产生F2群体,观察F1和F2代中羽色、胫色的表现和分离比例。结果表明,白来航鸡的白羽和寿光鸡的黑羽对藏鸡麻羽的遗传方式是完全显性遗传;麻羽是由两个或两个以上的等位基因决定的,只有同时存在这两个或两个以上的等位基因,才可能表现出麻羽来;决定胫色性状的Id/id基因为伴性遗传,隐性基因id在纯合子时有个逐步表达的过程;证实了所用白来航公鸡胫色性状的基因型为显性纯合子。

寿光鸡腺苷酸琥珀酸裂解酶ADSL基因的表达与克隆化细胞株的筛选

利用RT-PCR与RACE方法检测寿光鸡心、肝、脾、肺、肾、脑、腿肌与胸肌8种组织腺苷酸琥珀酸裂解酶（ADSL）基因mRNA的差异表达水平，构建ADSL基因融合表达载体pGEX-ADSL，转化大肠杆菌BL21（DE3），筛选阳性克隆，IPTG诱导表达，通过构建真核表达载体pEGFP-ADSL，利用脂质体介导法转染寿光鸡成纤维细胞，并进行阳性细胞的克隆化筛选与检测。结果表明：ADSL基因开放阅读框序列长为1455 bp，编码485个氨基酸;5′端非转录调控区具有典型管家基因的特征，在邻近起始密码子-28 bp处发生C→T突变，该突变使该位点变为核呼吸因子2（NRF-2）结合位点;经SDS-PAGE电泳显示，pGEX-ADSL重组融合蛋白在分子量约为80.5 ku处有特异的蛋白条带出现，与预期分子量大小一致，等电点为6.79，纯化后用Western-blot检测为寿光鸡ADSL蛋白。pEGFP-ADSL转染寿光鸡成纤维靶细胞后24、48和72 h，转染率在26.4%~41.2%之间，绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中，随表达量的增加，绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状，经药物筛选和克隆化培养，获得表达pEGFP-ADSL融合蛋白的阳性克隆细胞株，经RT-PCR扩增与Western-blot检测确认ADSL融合蛋白基因已经整合到寿光鸡成纤维细胞的基因组中，获得正常表达。研究结果为揭示我国优良地方鸡种的风味基因结构，研究其生物学功能奠定基础。

鸡CAPN1基因3′-UTR多态性及其与肉质性状的关联分析

试验利用PCR-SSCP技术对寿光鸡CAPN1基因3′-UTR的多态性进行了检测,并进一步分析了其与肉质性状的相关性。结果显示,在寿光鸡群体中检测到AA、AB 2种基因型,基因型频率分别为0.43、0.57,AB为优势基因型;A、B等位基因频率分别为0.715、0.285,A为优势等位基因;群体中未检测到BB基因型个体。经χ2检验,群体处于Hardy-Weinberg非平衡状态(P<0.05)。CAPN1基因3′-UTR的多态性对胸肌pHu、腿肌pHu、肌内脂肪含量和胸肌剪切力有显著性影响(P<0.05);对腿肌剪切力、失水率、胸肌蒸煮损失和腿肌蒸煮损失无显著性影响(P>0.05)。

CAPN1基因在寿光鸡群体中的遗传变异分析

采用PCR-SSCP方法对寿光鸡CAPN1基因进行多态性检测,并分析它们的多态性与部分肉质性状的关系。结果表明,含有CAPN1基因外显子5的引物CE5扩增的座位在群体中检测到3种基因型AA、AB和BB,基因型频率分别为0.266、0.520和0.214;等位基因A和B的频率分别为0.524和0.476。CE8引物扩增的座位在群体中也检测到3种基因型AA、AB和BB,基因型频率分别为0.378、0.510和0.112;等位基因A和B的频率分别为0.633和0.367。关联分析结果表明:含有CAPN1基因外显子5的引物CE5座位对肌内脂肪含量和腿肌蒸煮损失存在显著性影响(P<0.05),CE8座位对胸肌蒸煮损失存在显著性影响(P<0.05)。

鸡CAPN1基因多态性及其与肉质性状的关联分析

采用聚合酶链式反应-单链构象多态(PCR-SSCP)方法对147只寿光鸡CAPN1基因第4外显子进行多态性检测,分析其与部分肉质性状的关系。在CAPN1基因第4外显子上共检测到3种基因型AA、AB和BB,它们的基因型频率分别为0.286、0.510和0.204。方差分析结果表明:在寿光鸡群体中,BB基因型个体的胸肌pHu值显著高于AA基因型个体(P<0.05);AA基因型个体的肌内脂肪含量显著高于BB基因型个体(P<0.05)。

寿光鸡和汶上芦花鸡肉用性能比较分析

随机选取相同环境下饲养的90日龄汶上芦花鸡和寿光鸡各30只,测定其肉用性能,并进行品种间的比较分析。结果表明:90日龄的活体重汶上芦花鸡为939.35 g,寿光鸡为1 504 g;寿光鸡在活重、半净膛重、全净膛重和翅比率性状上极显著高于芦花鸡(P<0.01),而芦花鸡在屠体率和腿比率性状上极显著优于寿光鸡(P<0.01),半净膛率显著优于寿光鸡(P<0.05)。两个地方鸡种的胸肌pH值在宰后15 min至宰后24 h内均呈下降趋势,各时期pH值均符合正常肌肉要求范围。芦花鸡在腹脂重、腹脂率和肌内脂肪性状上高于寿光鸡,但只在腹脂率性状上存在极显著差异(P<0.01)。

寿光鸡×斗鸡杂交后代的蛋白质(酶)多态分析

以著名的地方特色品种鸡纯系寿光鸡和斗鸡组合杂交、筛选优化出的杂交后代鸡为试材 ,采用(SDS) PAGE技术对杂交后代鸡及亲本的血液蛋白质、酶蛋白和 EST(酯酶同工酶 )进行多态分析。结果表明 ,在还原条件下 ,全血样品更能显示出蛋白质 (酶 )的多态变化 ,优化杂交后代母鸡的蛋白质结构出现新的亚基组分 S1 ～ S5,存在丰富的多态、酯酶 (EST)同工酶快区 Es-1位点 ,由多等位基因支配 ,新出现 Es-1 F、Es-1 C、Es-1 A2 等位基因 ,其差异变化的频率很可能直接或间接调控影响后代品系的生产性能。提示蛋白质和EST多态的遗传变异 ,是动物群体遗传分析和种质评估。

三元复混肥和鸡粪肥中重金属含量特征分析与评价

为了解施肥对山东寿光市设施蔬菜土壤重金属输入的影响，采用随机取样的方法在寿光市收集了10个氮磷钾三元复混肥和21个鸡粪肥样品，测定了肥料中重金属Cu、Zn、Cd、Pb的含量。结果表明：鸡粪肥中Cu、Zn、Cd、Pb含量高于氮磷钾三元复混肥，但与中国有机-无机复混肥标准（GB18877-2002）相比，鸡粪肥中Cd未超标；2种类型肥料中的Pb均处于较低水平；每年通过施肥输入寿光设施蔬菜土壤的Cu、Zn、Cd、Pb量分别为3516．282、23731．500、19．473和69．011g／hm^2，其中鸡粪肥输入的量占肥料总输入量的79％～97％。

舍饲与林地放养混合模式下寿光鸡、固始鸡和罗曼蛋鸡蛋品质及肉品质的比较

本试验旨在比较寿光鸡、固始鸡和罗曼蛋鸡在舍饲与林地放养混合模式下蛋品质及肉品质的差异。选取90日龄寿光鸡、固始鸡和罗曼蛋鸡母鸡各120只,每个品种鸡设4个重复,每个重复30只,在舍饲与林地放养混合模式下采用常规基础饲粮饲喂至180日龄。结果表明:罗曼蛋鸡与寿光鸡、固始鸡相比,蛋重显著升高(P<0.05),而蛋黄颜色、蛋白高度和哈氏单位显著降低(P<0.05)。寿光鸡和固始鸡的蛋中锌、硒、钙、蛋白质和脂肪含量较罗曼蛋鸡显著升高(P<0.05),肌肉中脂肪和蛋白质含量也较罗曼蛋鸡显著升高(P<0.05)。寿光鸡、固始鸡肌肉的滴水损失率、剪切力显著低于罗曼蛋鸡(P<0.05),肉色显著高于罗曼蛋鸡(P<0.05)。寿光鸡和固始鸡肌肉中甘氨酸、谷氨酸、异亮氨酸和鲜味氨基酸含量显著高于罗曼蛋鸡(P<0.05)。总之,寿光鸡和固始鸡的蛋具有大蛋黄、高蛋白,且营养元素丰富,而罗曼蛋鸡的蛋含水量较高,蛋白质品质较差;寿光鸡和固始鸡的肌肉较罗曼蛋鸡具有较长货架期,且肌苷酸和氨基酸含量高,肉质鲜嫩,营养丰富;3个品种鸡中,寿光鸡和固始鸡的蛋品质和肉品质更佳。

应用微卫星标记评估寿光鸡的保种情况

寿光鸡是国家级地方优良品种,原产于山东省寿光市,具有重要的保种价值。本研究利用微卫星标记检测两个不同保种场寿光鸡群体的遗传多样性,评估群体遗传资源现状和保种场的保种效果。结果表明:在来自山东寿光慈伦种鸡养殖场与中国农业大学动物科技学院家禽遗传资源与育种试验基地的两个寿光鸡群体中,5个微卫星标记共有等位基因53个,各微卫星标记的等位基因数为8~15;2个群体中5个微卫星位点的平均多态信息含量(polymorphism information content,PIC)分别为0.543和0.465,平均杂合度(heterozygosity,H)分别为0.601和0.523,说明各群体的遗传多样性较为丰富;2个群体间相似性系数为0.9678,Nei氏遗传距离为0.0328,UPGMA聚类结果将2个群体聚为1类,与白洛克群体明显分开,表明2个群体遗传相似性很高。研究表明两个不同保种场的寿光鸡的保种效果良好,但在遗传多样性上仍然存在一定差别,可能是保种群体大小和保种方法的不同所致,为寿光鸡这一地方品种的保种提供了部分参考与依据。

枯草芽孢杆菌发酵制备饲料添加剂及对寿光鸡生产性能、蛋品质及肠道微生物的影响

为了研究枯草芽孢杆菌对寿光鸡生产性能、蛋品质和肠道微生物的影响,试验对枯草芽孢杆菌进行液体发酵扩培,发酵结束后活菌数可达2.14×1010 CFU/mL,芽孢转化率可达94%。采用喷雾干燥法对枯草芽孢杆菌发酵液进行干燥处理,以玉米淀粉作为保护剂,制备成饲料添加剂,菌粉活菌数可达1.85×1011 CFU/g。将32周龄寿光鸡300只随机分成5个处理组,试验1组为空白对照组,试验2、3、4、5组添加不同浓度的枯草芽孢杆菌菌粉。试验期42 d结束后,试验2、3、4、5组枯草芽孢杆菌能够显著提高寿光鸡的产蛋率(P<0.05),同时显著降低饲料消耗(P<0.05)和死淘率(P<0.05)。试验4组和试验5组的蛋黄颜色显著提高(P<0.05),试验3、4、5组的蛋壳厚度也显著提高(P<0.05)。试验2、3、4、5组盲肠食糜中大肠杆菌的数量显著减少(P<0.05),而乳酸菌的数量显著提高(P<0.05)。因此,枯草芽孢杆菌菌粉可以提高寿光鸡的生产性能、蛋品质,改善肠道健康。

青蒿复合中药制剂对寿光鸡生长和免疫性能的影响

[目的]对青蒿复合中药制剂在寿光鸡生产中的关于促生长和提高免疫力的作用进行研究。[方法]选取100只健康寿光鸡随机分为试验组和对照组,在试验组中添加青蒿复合中药制剂,对照组无添加。[结果与结论]添加青蒿中药复合制剂的寿光鸡鸡群在生长速度和NDV抗体效价提升方面有着显著效果,证明该中药制剂在促生长和免疫力提升方面有一定的作用。

寿光鸡遗传多样性及其起源进化的研究

为了更好地对寿光鸡种质资源进行保护和开发利用,以线粒体基因组(mitochondrial genome,mt DNA) D-loop区为分子标记,检测了58只寿光鸡的遗传多样性,同时探讨了寿光鸡在5个红色原鸡亚种的进化地位。结果显示:寿光鸡mt DNA D-loop区全长1 231～1 232 bp,核苷酸多样性(Pi)为(0. 005 3±0. 001 35),单倍型多样性(Hd)为(0. 864±0. 018),平均核苷酸差异(K)为6. 525;群体共发现23处单核苷酸变异位点,并由此界定了8种单倍型;系统发育分析发现,寿光鸡主要分布在A、B、C和E 4个进化分支,构成比分别为43. 1%、36. 2%、12. 1%和8. 6%。结果表明:寿光鸡在线粒体水平上具有很高的遗传多样性,有4个母系来源,本研究为寿光鸡种质资源遗传评估、有效保种和选育利用提供了理论依据。

肠炎沙门菌感染对鸡盲肠组织DNA甲基化的影响

为探讨肠炎沙门菌感染对鸡盲肠组织甲基化的影响,本研究选用2日龄肠炎沙门菌阴性寿光鸡和SPF白来航为试验材料,用肠炎沙门菌进行接种,接种后第1、3、14和21天采集盲肠组织样品提取DNA,进行甲基化水平检测。结果显示,肠炎沙门菌感染后第3天和第14天,寿光鸡基因组甲基化水平显著降低,感染后不同时间点,对照组和试验组甲基化水平均降低,且第21天对照组甲基化水平显著低于第1、3和14天;感染后各时间点,SPF鸡盲肠组织甲基化水平均低于对照组,但没有达到显著性水平,感染后不同时间点,对照组和试验组的甲基化水平均有所升高。本研究初步揭示了肠炎沙门菌感染抑制盲肠组织全基因组甲基化,这种抑制作用受遗传背景和感染后时间的影响,为今后基因组甲基化在沙门菌感染中的调控机制提供了理论依据。