基于特征图谱及多成分定量的首乌藤饮片与标准汤剂量值传递规律研究

本文建立首乌藤的含量测定方法和指纹图谱评价方法,研究首乌藤饮片到标准汤剂的量值传递规律。收集全国主产地和道地产地具有代表性的20批首乌藤药材,按《中国药典》2020年版规定制备成首乌藤饮片,并按《中药配方颗粒质量控制与标准制定技术要求》制备成首乌藤标准汤剂;采用HPLC建立适用测定含量及指纹图谱方法,以转移率、出膏率及指纹图谱相似度为指标,分析首乌藤饮片到标准汤剂的量值传递规律。结果显示,20批首乌藤标准汤剂出膏率为10.4%~16.1%,均值为12.9%,均位于均值的±30%范围内。除了四川产地的样品外,其余产地首乌藤饮片及其标准汤剂HPLC对照指纹图谱相似度均良好(>0.9),且二者具6个共有峰,并通过对照品指认其中的4个峰分别2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素、大黄素甲醚。四个已知成分的转移率分别为26.58%~53.07%(2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)、12.37%~42.84%(大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷)、3.83%~18.71%(大黄素)、0.35%~4.13%(大黄素甲醚)。本文建立了首乌藤饮片及其标准汤剂含量测定方法和指纹图谱方法,阐明了二者之间的化学成分的量值传递规律,为首乌藤水提物及其配方颗粒质量控制提供参考。

王济华运用角药治疗类风湿关节炎经验

王济华教授认为,类风湿关节炎早期多因外感风、寒、湿三邪,三者之间相互促进、互相转化,风寒表邪入里日久或郁而化热;病程日久多虚实夹杂,肝肾亏虚、气血不足,同时兼有寒湿痹阻、痰瘀互结。故王教授治疗痹证早期以祛邪散寒为主,兼顾清热利湿、化痰散结,中晚期则偏于滋养气血、补益肝肾。王济华教授运用角药治疗痹证颇有心得,组方精妙、配伍严谨,常用角药川芎-延胡索-白芍行气活血、柔筋止痛;忍冬藤-络石藤-青风藤清热通络、祛风除湿;半夏-陈皮-竹茹燥湿化痰、理气和中;白术-薏苡仁-茯苓益气健脾、利湿消肿;桑寄生-续断-杜仲滋补肝肾、强筋壮骨;酸枣仁-合欢皮-首乌藤宁心安神、解郁除烦。王教授临证时,追求阴阳调和平衡、气机升降有度,临床用药有药简力专、增效减负之功。

基于指纹图谱结合化学计量学的不同产地首乌藤标准汤剂研究

目的:通过指纹图谱结合聚类分析等统计学方法针对首乌藤标准汤剂质量标准,探究不同产地首乌藤标准汤剂的差异成分,为其质量标准制定提供据。方法:首先通过前处理考察得到的最佳指纹图谱制样方法,标定20批首乌藤标准汤剂的指纹图谱共有峰,然后结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)评价各共有峰相似度,最后结合化学模式识别方法,筛选出不同产地的差异性标志物。结果:20批首乌藤标准汤剂含有8个共有峰,其相似度评价值均在0.85以上,其中共指认出4个色谱峰;通过聚类分析和主成分分析将20批样品分为4类,同产地样品为一类;根据偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)分析筛选可知,不同产地的主要差异标志物分别是峰1(2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)、6、7(大黄素)、8(大黄素甲醚)。结论:本研究所建立的指纹图谱方法及差异性标志物的研究可为首乌藤标准汤剂及其制剂的质量标准的提升提供参考。

不同产地首乌藤指纹图谱及4种成分的含量测定

目的 建立首乌藤药材高效液相色谱指纹图谱,并同时测定4种有效成分的含量,评价不同产地首乌藤药材质量的差异。方法 采用高效液相色谱法进行测定,色谱柱为Waters Xselect HSS T3 C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0m L·min^(-1),柱温为30℃,波长为290 nm,进样量为10μL;建立15批首乌藤药材指纹图谱,通过对照品比对,对共有峰进行指认,并对4种有效成分的含量进行测定;对15批首乌藤药材指纹图谱进行相似度评价和主成分分析(PCA),并利用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)寻找不同产地首乌藤药材的差异性成分。结果 首乌藤药材指纹图谱有8个共有峰,指认出其中4个峰,分别为2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素和大黄素甲醚;除四川产区的样品外,同一省份样品的相似度值均大于0.80;PCA分析将15批首乌藤药材聚成5类,分别对应5个不同的产区,OPLS-DA法确定4个差异标志物。不同产地首乌藤主要化学成分含量差异很大,说明不同产地间首乌藤的化学成分存在较大的差异。结论 该方法能有效地分析不同产地首乌藤药材质量的差异性,为不同产地首乌藤药材质量的评价提供参考。

夜交藤中改善睡眠成分的研究

夜交藤具有改善人体睡眠等功效,通过对其有效成分的提取、分离及纯化分别得到夜交藤甙、夜交藤蒽醌以及夜交藤黄酮三种成分。按照国标(改善睡眠功能检验标准)方法,采用高、中、低三个剂最组分别进行改善睡眠功能实验,研究结果表明三种成分均有改善动物睡眠的功效(与正常对照组相比,p＜0．05)。

何首乌和夜交藤药材指纹图谱研究与评价

目的建立何首乌、夜交藤药材指纹图谱分析方法,并依据指纹图谱对两种药材进行比较,为科学评价与有效控制何首乌、夜交藤药材质量提供新方法。方法何首乌和夜交藤分别用甲醇和醋酸乙酯超声处理,提取液用HPLC进行测定。HPLC法采用C18色谱柱,乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,检测波长分别为265和290 nm,体积流量1mL/min,柱温30℃。结果建立了何首乌、夜交藤药材HPLC指纹图谱,并对不同产地何首乌、夜交藤药材进行了相似度比较。测定结果显示不同产地药材存在较大差异,化学成分组成及质量分数存在一定差异。结论所建立的方法简便、可靠,可用于不同产地何首乌、夜交藤药材的指纹图谱测定和质量评价,为全面有效控制何首乌药材的内在质量提供了依据。

复方首乌藤合剂中药材的鉴别和大黄素的测定

目的建立复方首乌藤合剂的质控方法。方法用TLC法鉴别首乌藤、川芎、五味子；用HPLC测定大黄素。结果TLC能特异地鉴别首乌藤、川芎和五味子。大黄素进样量30．4～380ng与峰面积积分的线性关系良好（r=0．9999），平均回收率为98．1％，RSD=0．9％（n=6）。结论所建方法专属性强，简便可行，重复性好，能有效控制首乌藤合剂的质量。

夜交藤煎剂的镇静催眠作用

作者对小鼠用转笼法和对大鼠用睡眠多导图描记法,研究夜交藤煎液的镇静催眠作用及对睡眠时相的影响。结果表明:转笼法,夜交藤(9g/kg)与戊巴妥钠阈下催眠剂量(20mg/kg)合用有明显的协同镇静催眠作用;睡眠多导图描记法,夜交藤(20g/kg)和安定(5mg/kg)服药一次的即时睡眠作用基本相似,即总睡眠时延长,主要是慢波睡眠时相延长,异相睡眠时期缩短.夜交藤每日二次藻胃,连续3天,催眠作用更明显,并出现明显的慢波睡眠潜伏期缩短。

首乌藤黄酮的体内抗氧化作用研究

为研究首乌藤黄酮(flavonoids fromCaulis Polygoni Multiflori,简称FCPM)的体内抗氧化作用,将ICR小鼠自由分成四组,分别灌喂高、中、低剂量FCPM和生理盐水,30 d后眼眶采血及组织取样,用试剂盒测定小鼠血清、肝脏、脑组织中MDA含量、SOD和GSH-PX酶活性及血清、肝脏中CAT酶活性.结果表明,FCPM可显著降低血清及组织MDA含量,提高小鼠的血清及组织的SOD、GSH-PX和CAT活力,表明FCPM具有显著的体内抗氧化活性.

首乌藤总黄酮的抑菌活性研究

研究首乌藤总黄酮的体外抑菌效果,为首乌藤的进一步广泛开发利用提供理论依据。用打孔法测定首乌藤总黄酮的抑菌作用,酸碱和紫外光处理对首乌藤总黄酮抑菌活性的影响。结果表明,首乌藤总黄酮对金黄色葡萄球菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒杆菌、李斯特杆菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为6.25%、12.5%、12.5%、3.125%;对枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、大肠杆菌的抑菌作用较不明显。pH和紫外光对首乌藤总黄酮的抑菌性均有一定程度的影响。

夜交藤对自由活动大鼠睡眠时相的影响

目的:观察夜交藤对自由活动大鼠睡眠时相的影响。方法:按20g/kg(生药量)的剂量,经灌胃途径给予大鼠,连续给药7天后描记大鼠皮质脑电。结果:夜交藤水煎液能延长自由活动大鼠总的睡眠时间(P<0.01),在睡眠时相上主要表现为延长SW S1和SW S2,对REMS没有明显的影响。结论:夜交藤水煎剂对正常大鼠睡眠周期有一定的影响,具有改善睡眠的作用。

何首乌及首乌藤中二蒽酮类成分研究进展

何首乌和首乌藤分别为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根和藤茎,具有多种药理活性,为传统药用植物,且在我国分布广泛。然而,近年来关于何首乌及首乌藤所引起的肝损伤风险已经引起了国家药品监督管理局的高度关注。目前,何首乌和首乌藤的肝毒性成分尚不明确。文献报道何首乌中首次分离得到的二蒽酮类成分具有潜在的肝毒性,因此从该类成分的提取分离、在线鉴别、毒性评价和含量测定等方面对其进行综述,为该类成分与何首乌肝毒性的相关性研究提供参考。

RP-HPLC测定首乌藤中大黄素的含量

目的建立首乌藤中大黄素的含量测定方法.方法采用RP-HPLC法,Alltima ODS柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-0.1%磷酸溶液(85∶15)为流动相,流速1.0 ml·min-1,检测波长256 nm.结果线性范围为4.06～50.70 μg·ml-1 (r=0.9999),平均加样回收率为98.57%,RSD=2.52%(n=9).结论所用方法准确、重复性好,可作为首乌藤的质量控制方法.

首乌藤粗提物及其不同极性黄酮组分的抗氧化活性比较

研究首乌藤黄酮粗提物及不同极性黄酮类组分的体外抗氧化活性。用普鲁士兰法和水杨酸比色法测定了首乌藤黄酮粗提物及不同极性黄酮类组分还原能力的大小和对羟基自由基的清除作用;用邻苯三酚自氧化法测定了首乌藤粗提物对超氧阴离子的清除作用,并用烘箱储藏法测定了其对油脂的抗氧化活性。实验结果表明,首乌藤黄酮粗提物及不同极性黄酮类组分具有良好的抗氧化活性。

首乌藤多糖脱色脱蛋白纯化工艺研究

目的研究大孔吸附树脂对首乌藤多糖纯化的最佳工艺条件及参数。方法以首乌藤多糖保留率、脱色率和解吸率为考察指标,对10种大孔吸附树脂进行了初步筛选,确定最佳树脂,然后以多糖保留率、脱色率和蛋白脱除率为评价指标,考察上样浓度、洗脱流速、上样量和洗脱剂用量等因素对优选树脂脱色脱蛋白纯化工艺的影响,确定最佳树脂的工艺参数。结果确定最佳的工艺参数是选用树脂DA-201,上样浓度1086.6mg/L,最大上样量2倍柱床体积,8倍柱床体积溶剂洗脱,流速1.0 mL/min,此时多糖保留率、脱色率和蛋白脱除率分别可达到85.42%,38.37%和31.84%。结论大孔吸附树脂对首乌藤多糖有较好的脱蛋白和脱色素效果,安全且操作简便,便于在首乌藤多糖的制备中推广使用。

首乌藤饮片标准汤剂质量标准研究

目的制备首乌藤饮片标准汤剂,并进行质量标准研究。方法按照标准汤剂的制备要求,制备15批不同产地首乌藤饮片的标准汤剂,以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷作为定量检测指标,计算其转移率及出膏率,并建立超高液相色谱特征图谱分析方法。结果通过对15批首乌藤饮片标准汤剂进行测定,2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的转移率为3.94%～53.53%,大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的转移率为2.53%～37.06%,出膏率为1.46%～15.91%。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件进行特征图谱分析,标定了14个共有峰,指认了其中4个色谱峰。15批首乌藤饮片标准汤剂相似度评价结果显示,其相似度均大于0.90。结论首乌藤饮片标准汤剂制备规范,测定方法精密度、稳定性和重复性良好,可为首乌藤配方颗粒的质量控制提供参考。

首乌藤药材质量标准的研究

目的：建立首乌藤药材的质量标准。方法：采用TLC法对首乌藤药材进行定性鉴别；用高效液相色谱法测定2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。结果：在TLC色谱中首乌藤斑点清晰；2,3,5,4＇-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.0309～1.54μg范围呈良好的线性关系，r=0.99965：平均回收率为95．5％，RSD=3．2％。结论：所建立的方法可准确地进行定性、定量检测，可用于首乌藤药材的质量控制。

表面活性剂辅助提取首乌藤中的总黄酮

用表面活性剂辅助提取首乌藤中总黄酮,分别考察了表面活性剂的种类和质量浓度、液固比、提取温度和加热时间对总黄酮得率的影响,通过正交试验设计以优化工艺条件,结合对照实验最终确定最佳工艺条件:表面活性剂十二烷基磺酸钠(SDS)质量浓度3 g/L,液固比30 mL/g,提取温度90℃,加热时间2.5 h。此时总黄酮得率为6.0%。与其他提取方法相比,本方法具有成本低、得率高的特点。

首乌藤超微饮片的高效液相色谱指纹图谱研究

目的研究首乌藤超微饮片的指纹图谱。方法色谱柱为大连依利特公司Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm,5μm)。流动相为乙腈-1%冰醋酸,柱温为35℃,流速为1.0 m l/m in,检测波长为254 nm,进样量为20μl。结果初步建立了首乌藤超微饮片的HPLC指纹图谱,标定了9个共有指纹峰。结论利用首乌藤超微饮片高效液相色谱(HPLC)指纹图谱可以较好地反映首乌藤超微饮片的内在质量。

RP-HPLC法测定不同产地首乌藤中大黄素

目的:建立首乌藤中大黄素的反相高效液相色谱法含量测定方法,并对不同产地和采收时间的17个样品进行了定量分析。方法:Agilent zorbax SB-C_(18)column(250 mm×4.6 mm,5μm)甲醇-水-磷酸(780∶220∶1)为流动相,检测波长286 nm。结果:大黄素在4.2～124.8μg·ml^(-1)范围内呈良好线性关系(r=1.000 0)。平均回收率103.3%,RSD为2.2%。结论:方法灵敏快速,准确可靠,可用于首乌藤的质量控制。