Effect of Shuanghuanglian Propolis Oral Liquid on Immune Function of Broilers

The effects on immune function of broilers was studied by adding different doses of Shuanghuanglian propolis oral liquid in drinking water, to provide a theoretical basis for application and promotion of Shuanghuanglian propolis oral liquid. Ninety one-day-old broilers were randomly divided into three groups ： group I was designed as control; groups Ⅱ and Ⅲ were added with 0.5 and 1.0 mL/L Shuanghuanglian propolis oral liquid in drinking water, respectively. Compared with group I, all tested indicators in groups Ⅱ and Ⅲ were increased at varying degrees as follows ： bursa of fabricius index increased by 5.74% （P 〈 0.05 ） and 7.66% （P 〈 0.05 ） ; thymus index increased by 1.47% （P 〉 0.05 ） and 2.06% （P 〈 0.05 ） ; spleen index increased by 5.88% （P 〉 0.05 ） and 7.84% （ P 〈 0.05 ） ; Newcastle disease virus （NDV） antibody titer increased by 11.99% （P 〈 0.05 ） and 16.94% （P 〈 0.05 ） ; IL-2 content increased by 2.71% （P 〉 0.05） and 4.52% （P 〈 0.05 ） ; IL -6 content increased by 4.04% （P 〉 0.05 ） and 7.26% （ P 〈 0.05 ）, respectively. The results showed that adding 0.5 and 1.0 mL/L Shuanghuangllan propolis oral liquid in drinking water could improve the immune function of broiler and immune effect of ND vaccine.

Effects of Shuanghuanglian Propolis Oral Liquid on Growth Performance and Intestinal Microflora of Broilers

[ Objective] The paper was to investigate the effects of adding different levels of Shuanghuanglian propelis oral liquid in drinking water on growth performance and intestinal microflora of broilers. [ Method] Ninety one-day-old broilers were randomly divided into three groups （group I, group 1I and group III）： group I was the control group, and groups II and III were added with 0.5 and 1.0 mL/L Shuanghuanglian prepolis oral liquid in drinking water, respec- tively. [ Result] Compared with broilers in group I, the average daily gains of broilers in group II and group III increased significantly （ P 〈 0.05 ） ; the feed gain ratio of broilers in group III was significandy lower than that in group I （ P 〈 0.05 ） ; the number of intestinal LactobaciUus spp. in group II and group III in- creased significantly （ P 〈 0.05 ） ; the number of Salmonella spp. and Escherichia coli in group lII decreased significantly （ P 〈 0.05 ） ; the number of Bgrdobacterium spp. increased significantly （ P 〈 0.05 ）. [ Conclusion] Adding 0.5 and 1.0 mL/L Shuanghuanglian propolis oral liquid in drinking water could improve growth performance and intestinal micreflora of broilers, and the dose of 1.0 mL/L is recommended in clinical application.

双黄连口服液质量一致性评价研究

目的:探索建立双黄连口服液(SHLO)质量一致性评价方法,并对常见市售8个厂家的产品进行质量分级。方法:建立SHLO中6个指标成分的高效液相色谱含量测定方法,从同厂家不同批次、不同厂家角度分析样品含量均一性;用3个质量一致性参数[批内一致性差异(PA)、批间一致性差异(PB)、指纹图谱相似率(PC)]表征不同厂家产品质量一致性水平;运用主成分分析(PCA)模型提取一致性区分因子(P),实现对8个厂家样品质量一致性分级。结果:建立的高效液相色谱含量测定方法简便且方法学验证合格;40批样品中绿原酸、黄芩苷、连翘苷的质量浓度分别为0.66~1.25、12.71~21.89、0.39~0.66 mg·mL^(–1),均符合《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)2020年版对该制剂的限度要求,非《中国药典》2020年版指标成分新绿原酸、连翘酯苷A、汉黄芩苷的质量浓度分别为0.75~1.44、0.07~0.94、0.001 3~1.930 0 mg·mL^(–1),且同厂家样品均一性较好、不同厂家样品存在一定差异;8个厂家样品PA为1.2%~7.7%、PB为16.6%~39.1%、PC为99.3%~99.9%,依据P可将8个生产厂家样品分为3类,其中厂家F、R产品的一致性较好。结论:建立了简便的SHLO多成分定量方法,结合3个一致性评价参数和PCA模型可对不同生产厂家样品质量进行区分,数据结果可为各生产厂家质量标准提升提供参考。

双黄连口服液对H9亚型禽流感的预防和治疗效果

为了评价双黄连口服液对H9亚型禽流感的预防和治疗效果,分别在SPF鸡感染H9亚型禽流感病毒前和感染后口服双黄连口服液,病毒感染后3、5、7、10 d采集喉头和泄殖腔棉拭子,通过实时荧光定量RT-PCR检测排毒率,并在感染后5、7 d剖检观察组织病变,进行病理组织学观察。结果显示,双黄连口服液可降低H9亚型禽流感病毒感染鸡的排毒率,缩短排毒周期,治疗组和预防治疗组病毒感染后10 d排毒率为0,极显著低于病毒感染组排毒率6/10(60%)(P<0.01);治疗组和预防治疗组SPF鸡在感染后5 d和7 d喉头、气管黏膜、肺脏的组织损伤较小;且与治疗组相比,预防治疗组排毒率更低,喉头、气管、肺脏组织病理损伤更轻微。结果表明,双黄连口服液不仅可降低感染鸡的排毒率,缩短鸡体排毒时间。针对呼吸道病原,双黄连口服液预防治疗效果优于感染后治疗效果。该研究为双黄连口服液更好地应用于临床呼吸道疫病的防控提供了新的策略。

阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液治疗儿童肺炎支原体肺炎的效果分析

目的:分析阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液治疗儿童肺炎支原体肺炎(MPP)的效果。方法:选取2022年7月—2023年6月联勤保障部队第九九一医院收治的MPP患儿96例作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组和研究组,各48例。对照组采用阿奇霉素序贯疗法,研究组在对照组基础上联合双黄连口服液治疗。比较两组治疗效果、症状消失时间、炎性因子水平以及不良反应发生情况。结果:研究组治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P=0.025)。研究组咳嗽、发热、肺部啰音消失时间均早于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。治疗前,两组白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组IL-6、hs-CRP水平降低,研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液治疗儿童MPP效果理想,可促进症状消退,抑制炎性反应,且未增加不良反应发生风险。

多波长RP-HPLC法测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸和连翘苷

目的:建立同时测定双黄连口服液(黄芩、金银花、连翘)中黄芩苷、绿原酸和连翘苷的分析方法。方法:采用多波长RP-HPLC法,色谱柱为Agilent Zorbax SB C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:(A)0.3%的甲酸水溶液、(B)乙腈;线性梯度洗脱依次为14%～20%/0～12 min,20%～30%/12～13 min,30%～65%/13～25 min和65%/25～35 min;柱温:30℃;流速:1.0 mL/min。结果:黄芩苷、绿原酸和连翘苷分别在0.225～3.60μg,0.032 4～0.518 4μg,0.135～2.16μg的范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.5%,102.0%,99.62%,RSD分别为0.75%,3.9%,1.1%。结论:本法简便、准确、重现性好,可用于双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸和连翘苷的同时测定。

双黄连口服液中主要活性成分体外抗菌效应相关性研究

目的研究双黄连口服液中主要活性成分体外抗菌效应权重和相关性。方法采用正交试验设计,通过L8(27)表对双黄连口服液中各主要活性成分进行不同组合,观察各活性成分组合溶液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌的体外抑制作用,得出其MIC、MBC和抑菌环直径,并用SPSS统计软件进行数据分析。结果 4种主要活性成分对革兰氏阳性细菌金黄色葡萄球菌的抗菌作用权重依次为:黄芩苷>连翘酯苷A>绿原酸>连翘苷;对革兰氏阴性细菌大肠杆菌的抗菌作用权重依次为:连翘酯苷A>黄芩苷>绿原酸>连翘苷;对真菌代表菌白色念珠菌的抗菌作用权重依次为:黄芩苷>连翘酯苷A>绿原酸>连翘苷。结论连翘酯苷A、黄芩苷为双黄连口服液抗菌药效的主要影响因素,虽然连翘酯苷A在该复方中含量远低于黄芩苷,但在复方抗菌药效方面发挥着重要作用。

HPCE法测定双黄连口服液中的黄芩苷和绿原酸

目的：建立双黄连口服液中黄芩苷和绿原酸含量测定的毛细管电泳法。方法：用毛细管区带电泳和紫外检测模式测定双黄连口服液中黄芩苷和绿原酸的含量，电泳条件：以４０ ｍ ｍｏｌ·Ｌ－ １ 硼砂为电泳介质（ 测定黄芩苷和绿原酸的ｐＨ值分别为９－００ 和９－５５） ，未涂层弹性融硅毛细管（５０ μｍ ×３９－５ ｃｍ ，有效分离长度３４－８ ｃｍ） 为分离通道，压力进样（６８－９５ ｋＰａ·ｓ），１７ ｋＶ恒压电泳（２５ ℃） ，黄芩苷和绿原酸的检测波长分别为２８５ ，３２６ ｎｍ 。结果：在２０～６４０μｇ·ｍＬ－１ 和８ ～４００ μｇ·ｍＬ－１ 范围内，黄芩苷和绿原酸可分别进行定量分析，二者加样回收率分别为１００－６０ ％ ±２－３６ ％ 和９９－６８％ ±２－２７ ％ 。结论：本方法简便、快速，结果准确，重现性好。

双黄连口服液抗炎作用的代谢组学研究

目的运用代谢组学方法研究角叉菜胶致大鼠足肿胀后的变化及双黄连口服液发挥抗炎作用的相关代谢途径。方法大鼠血清和尿液的代谢指纹利用核磁共振氢谱(1H-NMR)进行表征,综合使用多变量统计分析方法如主成分分析、正交偏最小二乘判别分析和单变量统计分析方法探讨炎症引起相关代谢标志物含有量变化。结果双黄连口服液可以使角叉菜胶致大鼠足肿胀后发生紊乱的机体代谢表型回归到正常水平。在血清和尿液中分别选取了12种和10种生物标志物含有量变化作对比。结论双黄连口服液能有效地缓解角叉菜胶导致的大鼠机体脂质和糖代谢失衡,同时,可以调节肠道菌群。

双黄连口服液联合庆大霉素的体外抗菌作用研究

目的研究双黄连口服液和庆大霉素联用对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的体外抗菌作用。方法采用微量溶液稀释法,测定双黄连口服液和庆大霉素分别对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC);采用棋盘联合药敏试验法,测定双黄连口服液和庆大霉素联用分别对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的部分抑菌浓度(FIC)指数。结果双黄连口服液对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC分别是46.88 mg.mL-1(稀释度1∶32)和375 mg.mL-1(稀释度为1∶4);庆大霉素对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的MIC分别是0.25和1 U.mL-1;双黄连口服液和庆大霉素联用对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的FIC指数均是0.56。结论双黄连口服液联用庆大霉素对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌药敏结果均呈相加作用。

HPLC波长转换法同时检测双黄连口服液中4种有效成分的含量

目的建立高效液相色谱波长转换法同时测定双黄连口服液中绿原酸、连翘苷、黄芩苷和汉黄芩素含量。方法采用Phenomenex C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相A为甲醇,流动相B为乙腈,流动相C为0.1%磷酸水溶液;流速为1.0 mL/min;柱温为30℃;进样器温度为5℃;洗脱程序:0～8 min为B∶C=12∶88,9～19 min为A∶B∶C=35∶12∶53,20～27 min为A∶B∶C=35∶40∶25,28～35 min为B∶C=12∶18;检测波长程序:0～8 min为326 nm,9～19 min为226 nm、278 nm,20～27 min为278 nm。结果绿原酸、连翘苷、黄芩苷和汉黄芩素保留时间分别为6.33,15.48,16.69,24.04 min。以峰面积对进样质量线性回归,绿原酸、连翘苷、黄芩苷、汉黄芩素的回归方程分别为Y=41.647X-0.158(r=0.9999),Y=31.391X-0.164(r=0.9999),Y=55.847X+2.290(r=0.9996),Y=74.652X+0.045(r=0.9997),线性范围分别为0.06～0.48μg,0.02～0.45μg,0.375～4.500μg,0.002～0.090μg。绿原酸、连翘苷、黄芩苷和汉黄芩素回收率分别为95.90%、97.02%、95.16%、91.34%。结论本方法简便可行、准确快速,可用于双黄连口服液中4种主要有效成分的含量测定。

阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液对支原体肺炎患儿T淋巴细胞亚群及血清炎症因子水平的影响

目的:探讨阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液对支原体肺炎患儿T淋巴细胞亚群及血清白细胞介素(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)水平的影响。方法:研究对象为2015年3月至2016年12月172例支原体肺炎患儿,采取简单随机法将其分成两组,每组86例。两组患儿均给予阿奇霉素序贯疗法治疗,观察组联合给予双黄连口服液,对比两组临床疗效、治疗前后T淋巴细胞亚群及血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平的变化情况。结果:观察组的总有效率为96.51%,较对照组(88.37%)明显上升(P<0.05)。两组患儿治疗后T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+比例、CD4+/CD8+均较治疗前显著升高(P<0.01),CD8+、血清IL-6、TNF-α、hs-CRP水平较治疗前显著下降,且观察组患儿以上指标的改善程度较对照组更明显,组间、组内不同时间比较均有统计学意义(P<0.01)。两组患儿不良反应的发生率对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:阿奇霉素序贯疗法联合双黄连口服液治疗小儿支原体肺炎可有效改善患儿的免疫功能,减轻炎症反应,疗效确切,且安全性高。

双黄连口服液中绿原酸含量的影响因素研究

为找出双黄连口服液中绿原酸含量下降过快的原因,通过改进工艺达到改善双黄连口服液中绿原酸稳定性的目的。采用HPLC法测定各样品中的绿原酸含量,考察金银花提取、精制等环节的处理方法;通过拆分处方考察处方中其他药味及添加的各种辅料,如缓冲液、抗氧剂、增溶剂、络合剂对绿原酸稳定性的影响。结果表明:金银花混提、单提和提取温度对绿原酸的提取效率无显著影响;pH值是影响口服液中绿原酸含量变化的主要因素,通过调节口服液pH值的方法,改进了双黄连口服液的制备工艺,口服液中绿原酸的稳定性增强。考察了黄芩苷、缓冲液、抗氧化剂、增溶剂和络合剂5个影响绿原酸含量的因素,明确了缓冲液的影响最大,黄芩苷、抗氧化剂、增溶剂和络合剂影响较小。

RP-HPLC测定双黄连口服液中连翘苷含量

目的 :建立测定双黄连口服液 (金银花 ,黄芩 ,连翘 ,等 )中连翘苷含量的方法。方法 :通过RP SPE法处理样品 ,再以RP HPLC作定量分析 ;色谱条件 :PRODIGYODS( 3) ( 15 0mm× 4 .6mm ,5 μm)C18柱为色谱柱 ,甲醇 水 冰醋酸 ( 4 0∶6 0∶1)为流动相 ,检测波长为 2 2 7nm。结果 :连翘苷色谱峰与其它色谱峰分离良好 ,进样量在 0 .1μg～ 2 .0 μg范围内 ,呈良好线性关系 (r =0 .9997) ,平均回收率为 10 2 .2 % ,RSD为 0 .6 1% (n =6 )。结论 :本法简便快捷 ,结果可靠 。

双黄连口服制剂药理作用及质量评价方法综述

中药是中华民族的瑰宝,中成药的质量控制与质量标准一直为人们所关注,是实现中药现代化的重要前提。双黄连口服液是由金银花、黄芩、连翘3味中药组成,具有辛凉解表、清热解毒的作用,是家庭的日常用药,对它的质量控制也吸引很多专家学者研究,对它指纹图谱的研究更是成为热点,该文将通过对文献调研,就双黄连口服制剂的药理作用及其质量评价方法做简要综述。

高效液相色谱法测定双黄连口服液有效部位中连翘苷含量

目的建立双黄连口服液有效部位中连翘苷的含量测定方法。方法采用大连依利特Hypersil ODS2 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05%磷酸水(35∶65),流速1.0 mL/min,检测波长278 nm。结果连翘苷在0.1436～1.436μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.91%,RSD=2.95%。结论所建立的方法简便、准确,可作为双黄连口服液有效部位的质量控制方法。

HPLC/MS同时测定双黄连口服液中的4种有效成分

目的建立双黄连口服液(金银花、黄芩、连翘等)中4种有效成分(绿原酸、咖啡酸、黄芩苷和木犀草素)的HPLC/MS同时测定方法。方法采用Zorbax SB C18色谱柱,以含0.2%甲酸0.4 mmol/L醋酸钠的水(A)-甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱,0～10 min,35%B;11～25 min,65%B;26～30 min,35%B。体积流量为0.35 mL/min,柱温25℃;在ESI正离子模式下,采用分时段SIM模式:0～7.0 min,m/z 377.4;7.0～12 min,m/z 181.0;12～18 min,m/z 447.1;18～25 min,m/z 287.1。结果绿原酸、咖啡酸、黄芩苷和木犀草素的线性范围分别为0.050～50.0μg/mL(r=0.999 0)、0.030～25.0μg/mL(r=0.998 9)、0.040～300μg/mL(r=0.999 7)和0.010～25.0μg/mL(r=0.999 3);进样精密度RSD值分别为2.0%、2.5%、2.1%和2.4%;加标回收率及其RSD分别为98.5%(RSD 2.7%)、98.8%(RSD 3.7%)、98.5%(RSD1.3%)和99.2%(RSD 2.2%)。结论此方法准确,快速,重复性好,有望为双黄连口服液的质量控制提供依据。

双黄连口服液的HPLC指纹图谱研究

目的:建立双黄连口服液的HPLC指纹图谱。方法:用Cosmosil C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,甲醇-水梯度洗脱;流速:1.0mL/min;柱温:30℃;检测波长330nm。结果:指纹图谱13个共有峰,对其中4个峰进行指认,分别是绿原酸、松脂醇-β-D-葡萄糖苷、连翘酯苷和黄芩苷。结论:该分析方法具有很好的精密度、重现性和稳定性,共有峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%,符合指纹图谱相关要求,可作为双黄连口服液质量控制的一种有效方法。

双黄连口服液中黄芩苷含量近红外测定方法的建立与验证

目的:建立与验证快速分析双黄连口服液中黄芩苷含量的近红外光谱法。方法:采用透射模式采集样品近红外光谱数据,以偏最小二乘法建立光谱数据与HPLC法分析结果的定量校正模型,根据R、RMSEC、RMSEP等参数评价模型的定量性能;以准确性轮廓方法,验证近红外模型的准确度和精密度。结果:偏最小二乘定量校正模型R为0.9902,RMSEC为0.4223,RMSEP为0.4162;在β-期望容许误差极限为95%、容许极限为12%、风险极限为5%的约束下,模型验证结果表明分析方法准确度、精密度、不确定度满足要求,最低定量限为5.32 mg.mL-1。结论:双黄连口服液中黄芩苷近红外定量模型稳健可靠。此外,准确性轮廓作为一种新的验证方法,可运用于中药体系近红外分析模型验证。

用山银花与金银花制备双黄连口服液质量比较研究

目的比较山银花与金银花制备双黄连口服液质量可能存在的差异,为山银花用于双黄连口服液的制备提供依据。方法分别用山银花与金银花按照《中国药典》2015年版双黄连口服液的制备方法,采用煎煮法进行制备,并按照双黄连口服液质量标准分别检测其所含的绿原酸、黄芩苷和连翘苷含量,通过紫外分光光度计和TLC法对2种不同双黄连口服液进行鉴别比较。结果山银花与金银花制备的双黄连口服液中绿原酸、黄芩苷和连翘苷的含量均符合《中国药典》要求,且山银花制备的双黄连口服液中绿原酸和连翘苷含量高于金银花;紫外分光光度计与TLC法检测,山银花与金银花制备双黄连口服液差异较小。结论山银花制备的双黄连口服液达到《中国药典》质量标准,分别用山银花与金银花制备的双黄连口服液比较二者无明显的质量差异,表明山银花可替代金银花用于制备双黄连口服液。