疏风止咳提取物质量标准研究

目的建立疏风止咳提取物的质量标准,提高其质量可控性,保证成品药效。方法采用HPLC同时对疏风止咳提取物中白芍、防风、虎杖、甘草、射干和北柴胡进行专属性鉴别,色谱柱为Phenomenex Kintex C18(4.6 mm×100 mm,2.6μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸,梯度洗脱(0~25 min,10%乙腈;25~26 min,10%→14%乙腈;26~35 min,14%乙腈;35~36 min,14%→34%乙腈;36~55 min,34%乙腈),柱温40℃,流速0.8 m L/min,检测波长250 nm。采用HPLC同时测定疏风止咳提取物中芍药苷和升麻素苷含量。色谱柱为Phenomenex Luna C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸(12∶88),柱温40℃,流速1 m L/min,检测波长250 nm。结果疏风止咳提取物中白芍、防风、虎杖、甘草、射干和北柴胡HPLC色谱峰分离度好且阴性无干扰。芍药苷在0.035 93~2.514 8μg范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均加样回收率为100.54%(n=6);升麻素苷在0.006 7~0.67μg范围内线性关系良好(r=0.999 5),平均加样回收率为100.39%(n=6)。结论本研究建立的质量标准简便、可靠、准确,可快速鉴别疏风止咳提取物中白芍、防风、虎杖、甘草、射干和北柴胡,快速测定芍药苷和升麻素苷含量,为控制疏风止咳提取物的质量提供依据。

疏风止咳颗粒提取物对气道高反应损伤模型大鼠的改善作用

目的:分析疏风止咳颗粒提取物对气道高反应损伤模型大鼠的改善作用及其作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,地塞米松组,苏黄止咳胶囊组,疏风止咳颗粒提取物高剂量组、中剂量组、低剂量组,其中正常对照组14只,模型组30只,其余各组均16只,雌雄各半。实验开始第1天、第8天大鼠四肢皮下及腹腔注射卵蛋白混悬液(100 mg卵蛋白+200 mg氢氧化铝+1 mL生理盐水),每点0.2 mL,每只1 mL,正常对照组以等量生理盐水进行注射;第15天起按10 mL·kg^-1灌胃给予地塞米松(1.20 mg·kg^-1),苏黄止咳胶囊(0.41 g·kg^-1),疏风止咳颗粒提取物各剂量组[3.60 g(生药)·kg^-1、2.40 g(生药)·kg^-1、1.60 g(生药)·kg^-1],正常对照组和模型组灌胃给予等量蒸馏水。每天给药后分批将致敏大鼠置于密闭容器内,给予1%卵蛋白生理盐水混悬液进行雾化吸入30 min,雾化流量为3 mL·min^-1,正常对照组给予等量生理盐水进行雾化。持续喷雾给药3周后,采用16通道生理记录仪有创法检测大鼠气道阻力;ELISA法检测血清白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)、IgE和肺脏匀浆液中高迁移率族蛋白(high mobility group box 1 protein,HMGB-1)的表达情况;血细胞分析仪检测肺泡灌洗液中白细胞计数及分类,观察HE染色肺组织形态学变化。结果:与模型组比较,疏风止咳颗粒提取物高剂量组、中剂量组在氯化乙酰胆碱80μg·kg^-1、160μg·kg^-1引喘剂量下可显著降低模型大鼠的气道阻力(P<0.05,0.05,0.001,0.001);疏风止咳颗粒提取物高剂量组、中剂量组大鼠血清中IgE的水平显著下降(P<0.01,0.05);疏风止咳颗粒提取物高剂量组大鼠血清中IL-13水平显著下降(P<0.05);疏风止咳颗粒提取物高剂量组、中剂量组、低剂量组大鼠肺脏组织匀浆中HMGB-1水平显著下降(P<0.05,0.01,0.01);疏风止咳颗粒提取物高剂量组大鼠肺脏灌洗液中白细胞、中性粒细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞计数明显下降(P<0.01,0.05,0.05,0.01);疏风止咳颗粒提取物中剂量组白细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞计数明显下降(P<0.01,0.05,0.01);疏风止咳颗粒提取物低剂量组白细胞和嗜酸性粒细胞计数显著下降(P<0.05,0.01)。病理组织学观察发现:疏风止咳颗粒提取物高剂量组、中剂量组、低剂量组可明显改善气道高反应损伤模型大鼠肺脏气道黏膜上皮损伤、肺组织炎性细胞浸润、肺泡扩张充血、支气管平滑肌增厚、肺泡间隔增厚及肺实变等肺损伤的病理组织学变化(P<0.01,0.05,0.05)。结论:疏风止咳颗粒提取物可通过缓解气道阻力、调节肺脏组织炎症免疫网络、抑制炎性细胞浸润,从而达到改善气道高反应损伤的作用。