电针“水沟”与“井穴”对全脑缺血大鼠脑组织钙调素活性影响的对比研究

目的 :观察电针“水沟”与“井穴”对全脑缺血大鼠脑细胞内活性钙调素 (CaM )含量的影响。方法 :采用大鼠全脑缺血再灌注模型 ,用磷酸二脂酶法测定电针后正常对照组、模型对照组、电针“水沟”穴组、电针“井穴”组、假手术对照组脑组织活性CaM的含量。结果 :脑缺血后脑组织活性CaM含量明显升高 ,电针刺激“水沟”和“井穴”均可使大鼠缺血区脑组织活性CaM含量明显降低 ,两组无显著性差异。结论 :电针“水沟”与“井穴”均能明显降低活性CaM的含量 。

不同频率提插水沟穴对大鼠局灶性脑缺血再灌注皮质细胞凋亡及NF-κB p65、Caspase-3的影响

[目的]研究不同频率提插水沟穴对大鼠局灶性脑缺血再灌注皮质缺血区NF-κB p65和Caspase-3的影响,寻求适宜针刺频率。[方法]将成年Wistar雄性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、水沟穴低频提插组、水沟穴中频提插组、水沟穴高频提插组,每组大鼠6只。空白组不造模,假手术组造模时在颈内动脉内不插入线栓,其余4组均完成局灶性脑缺血再灌注模型。空白组、假手术组和模型组均常规饲养,不进行针刺干预;水沟穴低频提插组、水沟穴中频提插组、水沟穴高频提插组均进行对应频率的针刺干预。每日两次,针刺3 d。TUNEL法检测各组大鼠皮质细胞凋亡的表达,免疫荧光检测大脑皮质NF-κB p65和Caspase-3的表达。[结果]皮质细胞凋亡的表达:各针刺组与模型组比较(P<0.01)有统计学差异,针刺低频组和针刺中频组及高频组差异有均统计学意义(P<0.01及P<0.05),针刺中频组和高频组比较无统计学差异(P>0.05))。大脑皮质NF-κB p65和Caspase-3的表达:各针刺组与模型组比较(P<0.01)有统计学差异,针刺低频组和高频组有统计学差异(P<0.01),针刺中频组和高频组比较无统计学差异(P>0.05)。[结论]针刺各个频率组都可显著降低脑缺血再灌注损伤所致的细胞凋亡,其中针刺中频组和高频组要显著优于低频组,其可能与降低皮质细胞NF-κB p65和Caspase-3的表达量有关。

电针不同神经节段穴位对大鼠胃运动异常模型胃内压的影响

目的探讨电针不同神经节段穴位对胃运动异常模型大鼠胃内压的调节作用及其效应的差异性。方法通过在大鼠胃内安置球囊的方法记录胃内压,观察电针足三里穴、内关穴、水沟穴、膻中穴、天枢穴对胃运动异常模型大鼠胃内压的影响。结果胃运动亢进和胃运动抑制模型大鼠针刺前后比较各组胃内压变化均有显著性差异(P<0.05);足三里穴组、天枢穴组与内关穴组、水沟穴组、膻中穴组比较胃内压变化有显著性差异(P<0.05);足三里穴组与天枢穴组比较胃内压变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论电针不同神经节段穴位对胃运动异常大鼠胃内压均有双向调节作用,且该调节效应有差异性,足三里、天枢穴对胃运动异常大鼠胃内压的调节作用要优于内关、水沟、膻中穴。

电针水沟穴对脑梗死模型大鼠脑血管平滑肌Calponin和Caldesmon表达的影响

目的探讨电针水沟穴对脑梗死模型大鼠脑血管平滑肌钙样蛋白(Calponin)和钙调结合蛋白(Caldesmon)表达的影响。方法78只雌性Wistar大鼠采用随机数字表法分为空白组6只,模型组、电针组和假手术组各24只。采用腔内线栓法阻滞大鼠左侧大脑中动脉,制备脑梗死模型。电针组造模后即电针水沟穴20min,空白组、假手术组、模型组大鼠仅同样抓取固定。采用免疫印迹法检测各组大鼠造模后0.5、1、3、6h脑血管平滑肌Calponin和Caldesmon表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠1、3、6h脑血管平滑肌Calponin表达量下调[(0.68±0.17)比(0.89±0.12)、(0.40±0.17)比(0.89±0.08)、(0.32±0.01)比(0.97±0.06),P均<0.05];与模型组比较,电针组大鼠3、6h脑血管平滑肌Calponin表达水平上调[(0.73±0.09)比(0.40±0.17)、(0.69±0.03)比(0.32±0.01),P均<0.05];与假手术组比较,模型组大鼠1、3、6h Caldesmon表达水平下调[(0.70±0.06)比(1.04±0.16)、(0.61±0.24)比(0.82±0.08)、(0.51±0.19)比(0.83±0.04),P均<0.05];与模型组比较,电针组大鼠1、3、6h Caldesmonn表达水平均上调[(0.80±0.10)比(0.70±0.06)、(0.73±0.06)比(0.61±0.24)、(0.60±0.06)比(0.51±0.19),P均<0.05]。结论电针水沟穴可抑制脑梗死模型大鼠脑血管平滑肌收缩关键蛋白Calponin和Caldesmon表达下调。

电针低血压大鼠水沟、足三里、内关三穴升压效应的腧穴特异性研究

目的:本实验通过对比分析电针水沟、足三里、内关对硝普钠所致低血压大鼠的升压效应,作用靶点及起效环节,从而进一步研究腧穴的特异性。方法:将硝普钠造模的SD大鼠随机分为4组,即对照组不做治疗,"水沟""足三里""内关"组电针,观察电针对其血压的影响,采用放射免疫方法,观察三穴对低血压状态下大鼠循环及心、脑、肾不同组织RAAS系统及其相关物质的影响。结果:电针可使"水沟""足三里"组血压显著升高;对循环RAAS的影响,其升压效应与循环中的肾素—血管紧张素—醛固酮并非直线相关;且二穴对心脏的RAAS系统都有特异性的靶向作用,对脑及肾脏的RAAS系统均无明显的调节作用;内关在本实验中没有显示升压效应,且对循环、心、脑、肾等部位RAAS系统均无明显的调节作用。结论:水沟、足三里对硝普钠造成的急性低血压确有显著的升压效应,而内关穴在本实验中未显示出其升压效应,这可能与三穴所作用的靶器官不同,及作用启动环节不同有关。

水沟穴古代文献应用分析

目的通过对水沟穴古代文献的整理,总结出水沟穴的应用规律。方法以《中华医典》(第4版)收录的1000部书籍为检索范围,对水沟穴主治病证、腧穴配伍、配伍主治病证、刺灸方法、刺激量等进行系统、规范整理,建立数据库。结果总结出关于水沟穴主治应用条文425条,涉及171部古籍,水沟穴配伍的使用频次为240次,与水沟穴配伍的腧穴共计109个。结论配伍前10位的穴位为合谷、百会、足三里、上星、承浆、气海、颊车、风府、中脘、委中。常用的针刺深度为刺4分,常用的灸量为灸3壮。

针刺水沟穴治疗顽固性呃逆验案两则

顽固性呃逆虽不属急重病症,但会导致疲惫感、失眠、焦虑,严重地影响患者的生活质量和康复治疗。作者于临床工作中收治顽固性呃逆患者2例,采取强刺激水沟穴,取得了较为满意的疗效。

针刺水沟穴、百会穴联合足运感区对脑卒中恢复期患者肢体功能、颅内血流动力学的影响

目的:观察针刺水沟穴、百会穴联合足运感区对脑卒中恢复期患者肢体功能、颅内血流动力学的影响。方法:选取163例脑卒中恢复期患者,按随机数字表法分为足运感区组81例及联合针刺组82例。足运感区组针刺足运感区治疗,联合针刺组给予针刺水沟穴、百会联合足运感区进行治疗。比较2组临床疗效,比较2组治疗前后神经营养素-3(NT-3)、神经生长因子(NGF)水平、中医证候评分、颅内血流动力学[收缩峰血流速度(Vs)、舒张末血流速度(Vd)、平均血流速度(Vm)]指标值、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的变化。结果:治疗后,2组NT-3、NGF水平均较治疗前上升,联合针刺组NT-3、NGF水平高于足运感区组(P<0.05)。治疗后,2组中医证候主症评分、总分均较治疗前下降(P<0.05),联合针刺组主症评分、总分均低于足运感区组(P<0.05)。治疗后,2组Vs、Vd、Vm指标值均较治疗前上升(P<0.05),联合针刺组Vs、Vd、Vm指标值高于足运感区组(P<0.05)。治疗后,2组NIHSS上肢评分、NIHSS下肢评分均较治疗前下降,联合针刺组NIHSS上肢评分、NIHSS下肢评分均低于足运感区组(P<0.05)。联合针刺组临床疗效为97.56%,足运感区组为91.12%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺水沟穴、百会联合针刺足运感区治疗脑卒中恢复期,能恢复患者上下肢肢体功能,改善颅内血流动力学,临床疗效较好。

电针“水沟”对大鼠急性脑梗死后远隔部位继发性损伤的影响

【目的】探讨电针水沟穴对急性脑梗死大鼠的治疗作用及机制。【方法】将60只SD大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)组、MCAO+皮层扩散性抑制(CSD)组和电针组,每组再分为造模后6 h、24 h、72 h 3个亚组,每亚组5只。采用改良Zea Longa再灌注法制备大鼠MCAO模型,再采用机械针刺的方式诱导产生单波CSD构建MCAO伴随CSD模型。造模成功后,电针组电针水沟穴,每次30 min。干预结束后,采用Zea Longa评分对大鼠神经行为学进行评估,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法观察海马远隔CA1区神经细胞凋亡情况,免疫荧光标记法观测海马远隔CA1区单羧酸转运体1(MCT1)/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)共表达情况,定磷法检测海马远隔CA1区Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性。【结果】(1)与MCAO+CSD组比较,电针组6、24、72 h时相神经功能缺损评分明显降低(P<0.05)。(2)与假手术组比较,其余3组各时相海马远隔CA1区神经细胞凋亡指数均显著升高(P<0.05);与MCAO组比较,MCAO+CSD组各时相神经细胞凋亡指数明显升高(P<0.05);与MCAO+CSD组比较,电针组各时相神经细胞凋亡指数均明显降低(P<0.05)。(3)与假手术组比较,MCAO组、MCAO+CSD组各时相Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性均显著降低(P<0.05);与MCAO组比较,MCAO+CSD组6 h、24 h时相Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性显著降低(P<0.05);与MCAO+CSD组比较,电针组6 h、24 h时相Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性均显著提高(P<0.05)。(4)与假手术组比较,MCAO+CSD组各时相MCT1/GFAP共表达量显著升高(P<0.05),MCAO组、电针组在24 h时相显著升高(P<0.05);与MCAO组比较,MCAO+CSD组各个时相MCT1/GFAP共表达量显著升高(P<0.05),电针组在24 h时相MCT1/GFAP共表达量显著降低(P<0.05);与MCAO+CSD组比较,电针组各个时相MCT1/GFAP共表达量显著降低(P<0.05)。【结论】电针水沟穴可有效改善大鼠急性脑梗死后远隔部位继发性损伤,其机制可能与提高海马远隔区Na^(+)-K^(+)-ATP酶活性,抑制MCT1、GFAP星形胶质细胞内正向表达的作用有关。

电针水沟穴对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区L-Ca2+通道的影响

目的:通过观察电针水沟穴对脑缺血再灌注大鼠神经功能恢复及海马CA1区L-Ca^2+通道神经电生理学特性的影响,探讨电针水沟穴治疗缺血性脑卒中的脑保护机制。方法:选用30只健康雄性成年Wistar大鼠,采用大脑中动脉线栓法建立大脑中动脉缺血(MCAO)模型。大鼠苏醒后按照Zausinger六分法进行神经功能缺损评分,选择1~3分大鼠入组,按照随机数字表法分为水沟穴组、非穴组和对照组,每组10只。水沟穴组大鼠在清醒1h后接受电针水沟穴治疗,治疗参数为连续波方波,波宽0.2ms,电流强度1mA,频率2Hz,刺激时间10min,每日1次,共治疗7d。非穴组大鼠选取水沟穴左侧旁开0.5cm进行针刺,与水沟穴组实施同等条件的电针干预。对照组造模成功后实施同等条件的抓取与固定,不实施任何干预。治疗结束后采用神经功能缺损评分评估大鼠的神经功能,随后采用酶急性分离技术获取脑缺血再灌注大鼠海马CA1区椎体神经元细胞,单细胞膜片钳技术检测海马CA1区L-Ca^2+通道的电流幅度和平均开放时间常数。结果:①神经功能缺损评分方面,干预前3组神经功能缺损评分差异无统计学意义(P>0.05),说明3组造模大鼠针刺干预前神经功能缺损评分基线一致,具有可比性。干预后,水沟穴组神经功能缺损评分明显优于干预前(P<0.05);而非穴组和对照组神经功能缺损评分与干预前比较均无统计学差异(P>0.05);水沟穴组干预后的神经功能缺损评分明显优于对照组和非穴组,差异均有统计学意义(P<0.05);非穴组干预后的神经功能缺损评分与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。②水沟穴组与对照组大鼠L-Ca^2+电流幅度比较差异有统计学意义(P<0.05);水沟穴组与非穴组L-Ca^2+电流幅度比较,差异具有统计学意义(P<0.05),水沟穴组均值小于非穴组;非穴组与对照组大鼠L-Ca^2+电流幅度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。③水沟穴组L-Ca^2+通道的平均开放时间常数明显小于对照组和非穴组,差异均有统计学意义(P<0.05);非穴组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针水沟穴可改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能,与电针非穴比较具有经穴效应的特异性。电针水沟穴可能通过降低脑缺血再灌注大鼠海马CA1区L-Ca^2+通道的电流幅度,减少L-Ca^2+通道开放时间,抑制神经细胞内钙超载的作用,促进脑缺血再灌注大鼠神经功能的恢复,起到脑保护作用。

针刺水沟穴配合主动运动治疗急性腰扭伤96例

目的:分析探讨针刺水沟穴配合主动运动治疗急性腰扭伤的临床疗效。方法:选取我院2012年10月-2014年5月收治的96例急性腰扭伤患者作为研究对象,随机分成治疗组和对照组,每组48人。对照组采用常规口服西药治疗,治疗组采用中医针刺水沟穴配合患者主动运动治疗,一个疗程后,观察临床情况。结果:治疗组的治疗总有效率(95.83%)明显高于对照组的62.50%,差异在统计学上有意义(P<0.05),且治疗组的治疗时间明显短于对照组,具有统计学意义(P<0.05)。结论:针刺水沟穴配合患者主动运动治疗急性腰扭伤具有很好的临床疗效,可有快速效缓解疼痛、改善活动受限的临床症状,效果持久,值得临床广泛应用。

水沟穴古代文献应用分析

目的通过对水沟穴古代文献的整理,总结出水沟穴的应用规律。方法以《中华医典》(第四版)收录的1000部书籍为检索范围,对水沟穴主治病证、腧穴配伍、配伍主治病证、刺灸方法、刺激量等文献进行系统、规范整理,建立数据库。结果总结出关于水沟穴主治应用条文425条,涉及171部古籍,水沟穴配伍的使用频次为240次,与水沟穴配伍的腧穴共计109个。结论配伍前10位的穴位为合谷、百会、足三里、上星、承浆、气海、颊车、风府、中脘、委中。常用的针刺深度为刺四分,常用的灸量为灸三壮。

“水沟”穴干预MCAO大鼠脑梗死面积的特异性效应及针刺参数研究

目的:探讨穴位特异性及有关影响因素对针刺效应的影响。方法:参照Zea-Longa线拴法复制大脑中动脉缺血模型(MCAO),针刺组中设立穴位组(穴取"水沟"穴)、非穴位组(穴取患侧肋下髂嵴上10mm的固定点处)进行比较研究,分别以频率(60次/min、120次/min、180次/min)与时间(5s、60s、180s)组合而成的9种不同刺激参数(组别编号Ⅰ-Ⅸ)进行干预,通过TTC染色检测脑梗死面积百分比来评价治疗效应。结果:(1)针刺穴位组可以明显缩小MCAO大鼠病灶侧脑梗死面积;在9种针刺参数的干预下,穴位组总体效应趋势优于非穴位组。(2)与模型组比较,穴位组Ⅵ减小脑梗死面积百分比的趋势最明显(P<0.05)。结论:(1)穴位针刺更能有效减少脑缺血后MCAO大鼠脑梗死面积,具有穴位特异性优势。(2)穴位组Ⅵ(频率180次/min;时间5s)可以显著减小TTC染色下脑梗死面积百分比。

“水沟”穴对脑缺血模型大鼠脑神经细胞坏死的影响--从形态学角度论证经穴的特异性

目的:从形态学角度探讨"醒脑开窍"针刺法主穴"水沟"与非穴位对脑缺血模型大鼠神经细胞坏死的抑制作用。方法:选用Wistar成年健康雄性大鼠42只,随机分为正常组、假手术组、模型对照组、非针刺组、针刺组(水沟组和非穴组)6组,每组7只。除正常组、假手术组外,其他4组参照Zea-Longa线拴法复制大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO)。针刺组分别对"水沟"穴以及非穴(胁下非经非穴点),施以频率180次/min、持续时间5 s的针刺干预。以光镜下神经细胞坏死率及电镜下神经细胞坏死程度作为评价效应指标。结果:①光镜下,与模型对照组(0.66±0.18)相比,非针刺组(0.67±0.34)和针刺非穴组(0.59±0.11)神经细胞坏死率差异均无统计学意义(P>0.05),而水沟组(0.20±0.12)神经细胞坏死率明显降低,其差异有统计学意义(P<0.001)。表明不给予任何干预(非针刺组)与给予不正确干预(非穴组),都不能减轻神经细胞的损伤,当给予正确的穴位("水沟"穴)干预时,就可明显减轻神经细胞的坏死率,体现了穴位的特异性。②电镜下,非针刺组和针刺非穴组神经细胞超微结构接近模型对照组,表现为神经细胞的高度水肿及细胞器的严重破坏;水沟组则接近正常组和假手术组,神经细胞破坏程度均较低。结论:针刺"水沟"穴可抑制MCAO大鼠神经细胞坏死,保护神经元,而非穴无此作用,显示了穴位特异性。

电针水沟穴对脑梗死模型大鼠脑血管平滑肌中L型钙通道α1C亚基及TRPC6亚基mRNA表达的影响

目的观察电针水沟穴对脑梗死模型大鼠脑血管平滑肌中细胞膜电压依赖性钙通道(VDCC)L型钙通道α1C亚基及受体门控钙通道(ROCC)瞬时受体电位通道6(TRPC6)亚基m RNA表达的影响。方法将130只SPF级雄性Wistar大鼠采用随机数字表法分为空白组(10只)、假手术组(40只)、模型组(40只)、电针组(40只)4组,除空白组外,其余3组又随机分为术后3 h、6 h、12 h、24 h 4个时相,每个时相10只。以线栓法复制大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠模型。电针组在造模后即刻针刺水沟穴,以韩氏电针仪刺激20 min。各组大鼠分别于相应时间处死,在外科显微镜下分别分离、剪取梗死侧的大脑前动脉、中动脉、后动脉各8 mm,通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测各组不同时相大鼠脑血管平滑肌中L型钙通道α1C亚基及TRPC6亚基m RNA的相对表达量。结果与空白组和假手术组比较,模型组各时相大鼠脑血管平滑肌中L型钙通道α1C亚基及TRPC6亚基m RNA相对表达量均明显上调,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,电针组各时相大鼠脑血管平滑肌中L型钙通道α1C亚基及TRPC6亚基m RNA相对表达量均明显下调,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论电针干预能显著抑制MCAO模型大鼠脑血管平滑肌中VDCC L型钙通道α1C亚基及ROCC TRPC6亚基m RNA表达的上调,从而抑制缺血后血管平滑肌痉挛,增加脑梗死区周围血流灌注。