舒筋活络方对骨关节炎患者滑膜成纤维细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:测定舒筋活络方(SHC)对骨关节炎(OA)患者滑膜成纤维细胞(FLS)增殖、迁移、侵袭的影响,明确其作用机制。方法:对胶原酶法分离培养的FLS进行形态学观察,通过MTT比色法、划痕实验、Transwell实验、ELISA法等技术测定SHC对FLS增殖、迁移、侵袭等的影响。结果:体外分离的FLS生长状态良好,具备成纤维细胞形态特性;所选药物浓度范围对FLS增殖影响较小,与空白组比较,较高浓度和低浓度的SHC对FLS增殖的影响差异均有统计学意义(P<0.05),FLS的增殖与SHC呈浓度依赖性;镜下观察到OA-FLS的迁移现象,其中,模型组48 h、72 h的迁移率与0 h时比较,差异有统计学意义(P<0.05),SHC组72 h的迁移率与0 h时比较差异有统计学意义(P<0.05),与模型组比较,48 h、72 h时,SHC组FLS迁移能力比较,差异有统计学意义(P<0.05);SHC组FLS侵袭穿过小室膜的细胞个数较空白组明显减少(P<0.05);SHC各浓度组均对MMP3的释放有不同程度的抑制作用(P<0.05)。结论:SHC调节FLS增殖、抑制FLS的迁移和侵袭,维护和修复OA患者关节内组织完整性,为OA的关节保护提供新的预防和治疗策略。

舒筋活络方对骨关节炎滑膜细胞生长特性调控的研究

目的:研究差异浓度的舒筋活络方(SHC)对骨关节炎(OA)滑膜成纤维细胞(FLS)的活性、凋亡及细胞周期的影响,进一步明确SHC治疗OA的作用机制。方法:以差异浓度的SHC干预胶原酶法消化分离培养的FLS,通过细胞增殖-毒性检测试剂盒(CCK-8)和流式细胞术(FCM)分别检测FLS的活性、凋亡和细胞周期。结果:与对照组比较,高、低浓度的SCH均不同程度的抑制FLS活性(P<0.05),呈浓度依赖性,中浓度的SCH则对FLS活性有部分促进作用;SCH的各浓度组均不同程度的诱导FLS早期凋亡与晚期凋亡(P<0.05),提高总凋亡率(P<0.05);并且延长FLS的G_(0)/G_(1)期(P<0.05),同时缩短G_(2)/M期和S期(P<0.05),呈明显的浓度依赖性,其中,高浓度组对FLS凋亡的诱导及周期的阻滞作用最明显。结论:差异浓度的SHC通过对FLS活性、凋亡和周期的调控抑制FLS的浸润性生长,减缓OA滑膜炎症反应。

舒筋活络方对Toll样受体介导的滑膜炎症调控作用

目的:探讨舒筋活络方(SHC)对Toll样受体(TLRs)介导的滑膜炎症信号转导通路及其下游炎症因子的调节作用及其相关性。方法:将高、中、低浓度的SHC分别加入脂多糖(LPS)诱导的滑膜成纤维细胞(FLS),采用流式细胞术(FCM)对固有免疫代表性元件TLR2、TLR4的表达进行测定,一氧化氮(NO)一步法、酶联免疫吸附测定(ELISA)法对下游炎症因子NO和白介素6(IL-6)浓度进行测定,采用SPSS 20.0软件进行相关性分析。结果:与空白组比较,模型组TLR2和TLR4表达显著增强(P<0.05),NO、IL-6释放量显著升高(P<0.05);与模型组比较,SHC各浓度组均不同程度抑制TLR2、TLR4表达及NO、IL-6释放(P<0.05),TLR2、TLR4阳性比例及NO、IL-6释放量随SHC浓度升高而降低;TLR2、TLR4和NO、IL-6之间均呈显著的正相关性(P<0.05)。结论:SHC通过调控固有免疫反应关联网络中互相紧密联系的各元件来调节骨关节炎(OA)进程,为中药复方影响OA病理机制的阐明提供了新的数据。