小鼠β细胞系MIN6细胞糖脂毒性模型中Siah1表达变化的研究

目的： Siah1作为一种E3泛素连接酶，在调控细胞凋亡过程中发挥着重要作用，文章旨在在细胞系水平构建胰岛β细胞糖脂毒性模型，检测其中Siah1的表达水平，并预测此模型下Siah1表达的调控机制。方法用高糖高脂联合处理小鼠胰岛β细胞系MIN6细胞，葡萄糖刺激的胰岛素分泌（ glucose stimula－ted insulin secretion， GSIS）实验检测MIN6细胞胰岛素分泌功能，酸乙醇抽提并检测MIN6细胞内胰岛素含量， Western印迹实验检测Parp1蛋白的剪切情况及Siah1的蛋白表达水平，定量RT－PCR分析Siah1的mR－NA水平。借助miRanda软件预测小鼠、大鼠、人这3个种属中可能调控Siah1表达的microRNAs （ miR－NAs），并在种属间进行对比分析。结果高糖高脂处理可损伤MIN6细胞的GSIS功能、减少MIN6细胞胰岛素含量，并能导致Parp1蛋白的剪切程度显著增加。该模型下， Siah1的蛋白表达水平增高，而mRNA水平几乎没有变化，这提示此过程中Siah1主要受转录后水平的调控。用miRanda软件预测可能调控Siah1表达的miRNAs，其中有19个miRNAs的结合位点在小鼠、大鼠及人这3个种属中具有同源性。结论糖脂毒性可导致MIN6细胞功能障碍及凋亡，并能增高MIN6细胞中Siah1的蛋白表达水平，而不影响Siah1的mRNA水平。