窄叶鲜卑花(Sibiraea angustata)nrDNA ITS和cpDNA trnL-F序列分子进化特点的分析

应用PCR产物直接测序法分析了窄叶鲜卑花居群间nrDNA(核糖体DNA)ITS序列和cpDNA(叶绿体DNA)trnL-F的碱基差异,并与cpDNAtrnS-G序列和rpl20-rps12序列进行比较,从而初步研究两套植物基因组的变异速率。采用改良的CTAB法从硅胶干燥的窄叶鲜卑花叶片中提取总DNA,并对nrDNA ITS和cpDNAtrnL-F区域进行扩增、纯化、测序。nrDNA ITS序列共有601 bp,有变异位点3处,变异位点百分率为0.05%,(G+C)含量为41.4%。cpDNAtrnL-F序列共有927 bp,有变异位点1处,变异位点百分率0.01%,(G+C)含量为32.6%,两种序列的核苷酸多样性非常低。比较发现,窄叶鲜卑花nrDNA ITS区域较cpDNAtrnS-G序列和rpl20-rps12序列保守,变异速率较慢,比cpDNAtrnL-F序列变异速率稍快。通过对ITS序列单倍型(haplotype)进行分析发现,窄叶鲜卑花现有分布范围经历了居群近期范围扩张,与叶绿体基因组(trnS-G和rpl20-rps12序列)得出的结论一致。因此,窄叶鲜卑花nrDNA ITS序列适合该种的谱系地理学研究。

柳茶多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节及抗炎作用

为研究柳茶多糖(SAPs)对免疫抑制小鼠的免疫调节及抗炎作用,利用环磷酰胺皮下注射造模法制备免疫抑制小鼠模型,并在基础上进行SAPs灌胃试验。将110只小鼠随机分成6组,即生理盐水对照组(PS组,20只)、环磷酰胺模型组(CTX组,15只)、盐酸左旋咪唑阳性组(LH组,15只)以及SAPs低、中、高剂量组(SAPs-L、SAPs-M、SAPs-H组,每组各20只),在试验第1~10天,除PS组按0.01 mL/g BW的剂量皮下注射生理盐水外,其余试验组均按照与PS组相同的剂量皮下注射80 mg/kg BW环磷酰胺(生理盐水溶解),每天1次。造模成功后,SAPs-L、SAPs-M、SAPs-H组小鼠分别按200、400、800 mg/kg BW的给药量灌胃SAPs(生理盐水溶解),LH组按30 mg/kg BW的给药量灌胃盐酸左旋咪唑(生理盐水溶解),CTX组与PS组按0.01 mL/g BW的剂量灌胃生理盐水。灌胃试验从第11天开始,每天1次,持续20 d。测定小鼠体重增长率、免疫器官(脾脏、胸腺)与内脏器官(心脏、肝脏、肺脏和肾脏)指数、碳粒廓清指数与吞噬指数、血常规指标;采用酶联免疫吸附测定法检测血浆中白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及免疫球蛋白A(IgA)含量;采用蛋清致小鼠足趾肿胀测定SAPs抗炎效果。结果显示:环磷酰胺开始造模后的第1~10天,除PS组外其他试验组小鼠体重增长率和日采食量均出现急剧下降,从第11天开始灌胃试验后,SAPs-L、SAPs-M及SAPs-H组小鼠体重增长率和日采食量逐渐上调并趋于PS组。与PS组比较,CTX组小鼠免疫器官与内脏器官指数、碳粒廓清指数与吞噬指数、血常规指标(白细胞数、红细胞数、血小板数、淋巴细胞数、中性粒细胞数、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比和中性粒细胞百分比)以及血浆中IL-2、IFN-γ、TNF-α、IgA含量均显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),而SAPs-M组小鼠上述指标则较CTX组显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),并能有效抑制蛋清致小鼠足趾肿胀的程度。由此可知,400 mg/kg BW SAPs对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的特异性、非特异性免疫功能具有增强作用,并能缓解蛋清所致小鼠炎性反应。

氮添加对川西高寒灌丛凋落枝化学计量特征及养分归还的影响

氮(N)是陆地生态系统初级生产力的重要限制因子,大气N沉降的增加将会对植物的化学元素含量和生物量产生重要影响,进而影响凋落物的化学计量特征及其养分归还。高寒灌丛是陆地生态系统的重要组成部分,但有关N沉降对高寒灌丛凋落物尤其是凋落枝的化学元素和生物量的研究还较为缺乏,难以深入揭示N沉降对高寒灌丛土壤碳(C)和养分循环的影响机理。基于此,以青藏高原东部地区的优势高寒灌丛类型—窄叶鲜卑花(Sibiraea angustata(Rehd.)Hand.-Mazz.)灌丛为研究对象,连续4年人工模拟N沉降,分析了凋落枝C、N、磷(P)、木质素和纤维素化学计量特征及其归还量对不同N添加浓度(0、20、50、100 kg hm^(-2)a^(-1))的响应趋势。结果表明:(1)N添加对凋落枝C、N含量无显著性影响(P>0.05),而对P、木质素和纤维素含量有显著性影响(P<0.05),但不同年份间的影响趋势不一致;(2)4年的N添加并未改变凋落枝的C/N、N/P,但显著降低了凋落枝的木质素/N(第3年)、C/P(第1年和第4年)和C/N/P(第1年);(3)随着N添加浓度的增加,凋落枝C、N、P、木质素和纤维素4年累积归还量呈显著的二次方变化趋势(P<0.05),并在中N处理(50 kg hm^(-2)a^(-1))下达到最大。研究认为,N添加对凋落枝化学计量特征的影响具有较大的年际变异,短期、适当的N添加通过增加凋落枝的生物量而并非改变其化学计量特征促进了凋落枝碳和养分的归还。

藏药柳茶提取物调节肥胖大鼠脂代谢的作用机制研究

目的:探讨藏药柳茶调节单纯性肥胖大鼠脂质代谢的作用机制。方法:复制单纯性肥胖大鼠模型,以藏药柳茶提取物高、中、低不同剂量灌胃给药8 w后,剥离肾周脂肪制作组织切片,显微镜下观察脂肪细胞数量及形态。实时荧光定量RT-PCR法检测脂肪组织中脂联素(Adiponectin)、脂联素受体2(AdipoR2)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome Proliferator-activated Recep-torsγ,PPARγ)mRNA水平变化。用Western Blot检测脂肪组织AMPK蛋白表达情况。结果:与模型组比较,使用柳茶提取物8 w后400倍显微镜下全视野范围内脂肪细胞直径减小、数量增加。脂肪组织中Adiponectin、AdipoR2、AMPK、PPARγmRNA水平均有不同程度升高。柳茶中剂量组大鼠脂肪组织AMPK蛋白表达量显著高于模型组。结论:藏药柳茶的减肥作用机制可能是通过脂联素的信号转导途径来完成的。

藏药柳茶叶乙醇水提取物中化学成分的鉴定

采用多种色谱分离技术对藏药柳茶叶80%乙醇提取物进行分离纯化,得到了9个化合物。根据其理化性质与NMR谱数据对化合物进行了结构鉴定,分别为金丝桃苷(hyperoside,Ⅰ)、槲皮素(quercetin,Ⅱ)、芸香苷(rutin,Ⅲ)、槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside,Ⅳ)、儿茶素(catechin,Ⅴ)、香草酸(vanillic acid,Ⅵ)、熊果苷(arbutin,Ⅶ)、异阿魏酸(isoferulic acid,Ⅷ)和胡萝卜苷(daucosterol,Ⅸ)。化合物中除Ⅳ、Ⅷ和Ⅸ外,其余6个化合物为首次从该属植物中分离鉴别。

鲜卑花酯的分离和结构

窄叶鲜卑花Sibiraea angustata(Rehd.)Hand.-Mazz.为蔷薇科植物,分布于青海、甘肃、四川和云南等省.生长在海拔3000～4000米的灌丛中或砂石滩上。甘肃民间用其枝叶治疗消化不良,胃痛等疾病,称之为柳茶。我们从其枝叶中已分离鉴定了六个三萜类化合物。本文继续报道从窄叶鲜卑花枝叶中分离鉴定的两个化合物,其中Ⅰ为新化合物,命名为鲜卑花酯(sibirate,Ⅰ)另一个是阿魏酸(ferulic acid,Ⅱ)。

施氮对青藏高原东缘窄叶鲜卑花灌丛土壤呼吸的影响

开展土壤呼吸对大气氮沉降增加的响应研究对预测陆地生态系统碳循环具有重要意义。采用外施氮肥模拟氮沉降,结合壕沟法分离土壤呼吸组分,研究青藏高原东缘主要的灌丛类型——窄叶鲜卑花(Sibiraea angustata)灌丛土壤呼吸对不同施氮水平(N0(对照)、N2、N5和N10分别相当于0、2、5和10 g N m-2a-1浓度的氮沉降)的短期响应。结果表明:试验期间(2012年5—10月份),(1)土壤呼吸呈现明显的季节变化,施氮对生长季土壤总呼吸、异养呼吸无显著影响,而对自养呼吸有显著的抑制作用(P<0.05)。(2)土壤呼吸也存在显著的日变化,施氮对一天中土壤总呼吸及其组分均有显著影响(P<0.001)。总体上,施氮促进了土壤总呼吸、异养呼吸,而抑制了自养呼吸。(3)施氮对土壤总呼吸、异养呼吸平均每月排放CO2通量无显著影响,而对自养呼吸平均每月排放CO2通量有显著的抑制作用(P<0.05),并在不同月份对土壤呼吸及其组分的影响不同。(4)土壤总呼吸、异养呼吸与地下5 cm土壤温度之间具有较好的指数关系(P<0.001),而与土壤含水量相关性较弱。关于土壤呼吸各组分对大气氮沉降响应差异的机理有待进一步研究。

藏药柳茶提取物对单纯性肥胖大鼠脂质代谢的影响

目的观察藏药柳茶对单纯性肥胖大鼠脂质代谢的影响,初步探讨其作用机制。方法:复制单纯性肥胖大鼠模型,藏药柳茶水提取物灌胃给药8周后,检测体重、体长,计算Lee’s指数,分离并称取肾周及睾周脂肪重量;生化法检测血糖(GLU)、血总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的含量;放射免疫法检测血清瘦素(LEP)和胰岛素(INS);琼脂糖凝胶电泳检测脂肪细胞凋亡状况。结果:柳茶治疗后动物血糖、血脂含量明显降低,血瘦素和胰岛素水平下降。但实验未见到明显促脂肪细胞凋亡的作用。结论:藏药柳茶可明显抑制大鼠体重增长,其作用机制可能与改善瘦素和胰岛素抵抗、加快脂肪代谢有关。

窄叶鲜卑花的化学成分

目的:研究窄叶鲜卑花(Sibiraea angustata)的化学成分。方法:采用柱色谱进行分离纯化,通过理化方法和光谱分析鉴定化合物结构。结果:从窄叶鲜卑花中分离得到6个化合物,经鉴定为十八酸(octade-canoic acid)(Ⅰ),lanosta-8,24-dien-3-acetyloxy-26-oic acid(Ⅱ),胡萝卜甾醇(daucosterol)(Ⅲ),异阿魏酸(isoferulicacid)(Ⅳ),咖啡酸(caffeic acid)(Ⅴ),咖啡酸山梨醇酯(caffeic acid glucitol ester)(Ⅵ)。结论:以上化合物均为从窄叶鲜卑花中首次分得,其中化合物Ⅵ为新化合物。

窄叶鲜卑花的化学成分研究

从窄叶鲜卑花（Sibiraeaangustata（Rehd．）Hand-Mazz．）枝叶中分离得到7个结晶，经解析各种光谱数据，分别鉴定为：白桦脂醇（betulinol）（Ⅰ）、灵芝酸Z（ganoderiacidZ）（Ⅱ）、熊果酸（ursolicacid）（Ⅲ）、正三十烷醇（n－triacontanol）（Ⅳ）、正二十四烷酸（n-tetracosanoicacid）（Ⅴ）、二十九烷醇-10（10－nonacosanol）（Ⅵ）、二十二烷醇-10（10-docosanol（Ⅶ）.除熊果酸（Ⅲ）外，其它6个化合物均系首次从该植物中获得。

窄叶鲜卑花地上部分化学成分研究

目的：对窄叶鲜卑花地上部分水提物的化学成分进行研究。方法：采用HP-20大孔吸附树脂、凝胶柱色谱、反相中压柱色谱和高效制备液相色谱等方法进行分离纯化,运用理化性质、波谱数据并结合文献鉴定结构。结果：从窄叶鲜卑花地上部分中分离纯化了11个化合物,分别鉴定为：对甲氧基肉桂酸（Ⅰ）、原儿茶醛（Ⅱ）、槲皮素（Ⅲ）、异鼠李素（Ⅳ）、quercetin 3-O-β-D-galactopyranoside（Ⅴ）、9-O-[β-D-glucopyranoside]-3,4,5-trimethoxy cinnamyl alcohol（Ⅵ）、syringaresinol-4＇-O-β-D-monoglucoside（Ⅶ）、芦丁（Ⅷ）、sibiraic acid（Ⅸ）、sibiscolacton（Ⅹ）、甲基阿魏酸（Ⅺ）。结论：其中,化合物Ⅰ~Ⅷ为首次从该属植物中分离得到。

藏药柳茶的化学成分研究

目的 研究藏药柳茶的化学成分。方法 乙醇回流提取,反复硅胶柱层析。结果 分得5个化合物,光谱鉴定分别为甲基阿魏酸(Ⅰ)、β-谷甾醇(Ⅱ)、二十醇(Ⅲ)、二十九烷醇-10(Ⅳ)和十一烷醇(Ⅴ)。结论 除二十九烷醇-10外,其余4种化合物为首次从该植物中获得。

窄叶鲜卑花化学成分研究(Ⅰ)

用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱等色谱技术分离纯化窄叶鲜卑花的化学成分,通过理化方法和波谱数据确定化合物结构.从窄叶鲜卑花二氯甲烷浸膏中分离并鉴定了9个化合物:香草醛(1)、甲基阿魏酸(2)、对甲氧基桂皮酸(3)、N,N′-二环己基脲(4)、Valencic acid(5)、ω-羟基-3-甲氧基-4-羟基苯乙酮(6)、异阿魏酸(7)、咖啡酸(8)及3,4-二羟基苯甲酸(9),除化合物2、7及8外,其他化合物都为从该植物中首次报道,化合物5及6首次从蔷薇科得到,化合物4首次从植物体内得到.以上结果可为该药材的进一步研究开发提供参考.

干旱胁迫对窄叶鲜卑花种子萌发及幼苗生长的影响

[目的]研究干旱胁迫对窄叶鲜卑花种子萌发及幼苗生长的影响,为野生种驯化和种群恢复提供参考。[方法]以窄叶鲜卑花种子为实验材料,采用不同浓度聚乙二醇(PEG-6000)模拟干旱胁迫环境,研究干旱协迫强度对窄叶鲜卑花种子的吸胀速率、发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和种子抗旱萌发指数及幼苗生长情况的影响。[结果]随着干旱胁迫程度的加剧,窄叶鲜卑花种子的吸水过程表现出急速吸水期、缓慢上升期和吸水平稳期3个阶段;其发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数和种子抗旱萌发指数及苗高、根长,苗重与胁迫强度均呈负相关;当PEG浓度达30%时,种子萌发完全被抑制。另一方面,种子群体萌动、萌发和出苗达50%所需时间随胁迫强度的增加而越发延迟,且各阶段对环境临界水势要求不同,出苗阶段最为严格,表明种子出苗过程对环境水分胁迫较为敏感,耐旱能力较弱。[结论]干旱胁迫显著抑制了窄叶鲜卑花种子的萌发和幼苗生长,也说明水分是窄叶鲜卑花种子萌发和幼苗形成的主导因素之一,在较干旱地区种植需要考虑水分的供给。

RP-HPLC测定藏药柳茶中阿魏酸和异阿魏酸的含量

目的建立测定藏药柳茶中阿魏酸与异阿魏酸含量的方法。方法采用高效液相色谱法。岛津CLC—ODS色谱柱（150mm×6mm，5μm），流动相为0．1％磷酸水溶液-甲醇（71：29），流速1ml·min^-1，检测波长322nm，柱温30℃。结果阿魏酸和异阿魏酸浓度分别在2．31—36．96μg·ml^-1（r=0．9989）和8．09—129．44μg·ml^-1（r=0．9998）范围内与峰面积呈良好的线性关系；样品中阿魏酸和异阿魏酸平均回收率分别为98．16％和98．58％，RSD分别为0．49％和0．70％（n=3）。结论所建方法准确、简便，适用于藏药柳茶中阿魏酸和异阿魏酸的含量测定。

藏药柳茶挥发油化学成分的研究

目的 对藏药柳茶的挥发油进行化学成分分析。方法 应用水蒸气蒸馏法从藏药柳茶中提取挥发油 ,用GC -MS联用法鉴定化合物 ,峰面积归一法测定其百分含量。结果 鉴定了 4 3个化合物 ,占挥发油总量的 82 .6 8%。结论 柳茶的主成分为E -罗勒烯酮和芳樟醇。

藏药柳茶的药用功效研究进展

柳茶为种子植物蔷薇科鲜卑花属植物窄叶鲜卑花的一种(Sibiraea angustata(Rehd.)Hand.-Mazz),广泛分布于我国青海、四川、甘肃、云南及西藏等地,是藏族民间常用药物之一。其主要含有三萜类化合物、有机酸、有机酯、烷烃类等活性成分。研究发现柳茶具有调节糖脂代谢、减轻体重、抗氧化、调节免疫、保肝、抗肿瘤、延缓衰老、抑菌及促进消化等多种药用功效。

柳茶对高脂血症大鼠血脂、超氧化物歧化酶及丙二醛的影响

目的观察柳茶对实验性高脂血症大鼠血脂、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛含量的影响。方法以喂饲法建立高脂血症大鼠模型,将大鼠分为正常对照组、模型组、柳茶(生药)15、7.5 g/kg组4组。检测大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、丙二醛含量及SOD活性。结果柳茶可明显降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL、丙二醛含量,提高HDL含量及SOD活性。结论柳茶对高脂血症大鼠具有调血脂及抗脂质过氧化作用。

柳茶对CCl＿4肝损伤的保护作用及机理初探

柳茶能显著防止ＣＣｌ＿４中毒小鼠鼠ＳＧＰＴ，ＳＧＯＴ升高；降低肝ＭＤＡ；提高肝、血ＧＳＨ含量和ＧＳＨ－ｐｘ活性。柳茶能诱导肝微粒体蛋白及细胞色素Ｐ－４５０的合成。表明柳茶的保肝作用可能与其清除自由基、抑制脂质过氧化有关。

藏药柳茶的化学成分研究

目的探讨藏药柳茶的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱进行分离,用制备型薄层色谱和制备型高效液相色谱对柳茶的乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构。结果从柳茶中分离得到11个化合物,分别为二氢芥子醇(1)、二氢松柏醇(2)、咖啡酸甲酯(3)、5,7-二甲氧基香豆素(4)、4-甲氧基肉桂酸(5)、3,4-二羟基苯甲酸(6)、柚皮素(7)、山柰酚(8)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(9)、假升麻苷A(10)、假升麻苷B(11)。结论以上11个化合物均为从柳茶中首次分离得到,其中除1,3,6化合物外,其余均为首次从鲜卑花属植物内分离得到。