HPLC-ELSD同时测定腺梗豨莶草中6个二萜成分的含量

为了研究腺梗豨莶草中6个二萜成分(对映海松烯型二萜:奇任醇、Hythiemoside B和豨莶精醇;对映贝壳杉烷型二萜:对映-17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸和对映-16α氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸)的含量,本试验建立了高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)同时测定二萜类化合物含量。样品粉碎过筛加甲醇和乙酸乙酯回流提取,蒸发减压除去溶剂,甲醇溶解,0.45μm滤膜滤过,取续滤液进行测定。色谱条件:色谱柱为Waters Symmetry Shield^(TM)RP18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.3%甲酸水溶液-乙腈(v/v),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min。蒸发光散射检测器漂移管温度为103℃,雾化气流速为3.0 L/min。应用该方法测定腺梗豨莶草样品不同部位中6个二萜类化合物的含量,同时比较叶、枝、茎中对映海松烯型二萜、对映贝壳杉型二萜和总二萜含量的差异。结果显示,6个二萜成分在其线性范围内线性关系良好(r≥0.9992);日内和日间精密度相对标准偏差(RSD)均小于3.5%;回收率介于96.5%~101.5%,RSD均小于2.3%;腺梗豨莶草不同部位(叶、枝、茎)的二萜类化合物含量差异较大。结果表明,本试验所建立的HPLC-ELSD方法简便、准确、重复性好,为腺梗豨莶草药材全面的质量评价和临床应用中最佳药用部位的选择提供了参考。

毛梗豨莶正丁醇部位化学成分研究

目的研究毛梗豨莶正丁醇部位的化学成分。方法毛梗豨莶正丁醇部位采用硅胶、ODS及制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到17个化合物,分别鉴定为orientalin B(1)、ent-2-oxo-15,16,19-trihydroxypimar-8(14)-ene(2)、ent-12α,16-epoxy-2β,15α,19-trihydroxypimar-8-ene(3)、ent-12α,16-epoxy-2β,15α,19-trihydroxypimar-8(14)-ene(4)、奇壬醇(5)、benzyl-O-β-D-glucopyranoside(6)、hexyl-β-glucopyranoside(7)、(Z)-3-hexenyl-β-D-glucopyranoside(8)、phenylethyl-O-β-D-glucopyranoside(9)、(6 R,9S)-3-oxo-α-ionol-β-D-glucopyranoside(10)、2-methoxy-4-(2-propenyl)phenyl-β-D-glucoside(11)、4-allyl-2,6-dimethoxyphenyl glucoside(12)、2-hydroxy-methylphenyl-1-O-β-D-glucopyranoside(13)、icarside B 2(14)、everlastoside D(15)、(2 S,4R,5S,7S,9S,10R,13S,15R)-2,7,15,16,19-pentahydroxypimar-8(14)-ene(16)、benzyl-β-D-apiofuranosyl-(1″→6′)-β-D-glucopyranoside(17)。化合物9显示较弱的ABTS自由基清除能力;化合物15显示DPPH自由基清除活性和较强的ABTS自由基清除活性。结论化合物7~9、14、15为首次从豨莶属中分离得到,化合物2~4、7~17为首次从该植物中分离得到。化合物9和15具有一定的抗氧化能力。

毛梗莶化学成分的研究Ⅱ

目的：对毛梗莶（Ｓｉｅｇｅｓｂｅｃｋｉａｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ）的化学成分进行分离、鉴定研究。方法：采用各种层析色谱技术进行分离。从毛梗莶中分离到了５个化合物，用ＩＲ，ＭＳ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ和２ＤＮＭＲ光谱鉴定化合物。结果：经光谱鉴定化合物为Ⅰ对映１６β，１７二羟基贝壳杉１９羧酸（ｅｎｔ１６β，１７ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｋａｕｒａｎ１９ｏｉｃａｃｉｄ），化合物Ⅱ为单棕榈酸甘油脂（ｇｌｙｃｅｒａｌｍｏｎｏｐａｌｍｉｔａｔｅ），化合物Ⅲ为对映贝壳杉１６β，１７，１８三醇（ｅｎｔｋａｕｒａｎ１６β，１７，１８ｔｒｉｏｌ），化合物Ⅳ为１８羟基贝壳杉１６烯１９羧酸（１８ｈｙｄｒｏｘｙｈａｕｒａｎ１６ｅｎ１９ｏｉｃａｃｉｄ），化合物Ⅴ为胡萝卜苷（Ｄａｕｃｏｓｔｅｒｏｌ）。结论：化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为首次从该植物中得到。

毛梗莶化学成分的研究Ⅰ

目的：对毛梗莶（ＳｉｅｇｅｓｂｅｃｋｉａｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓＭａｋｉｎｏ．）地上部分的化学成分进行分离，并鉴定其化学结构。方法：采用柱层色谱法进行分离，从中分离到６个化合物，用ＩＲ，ＭＳ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲ和２ＤＮＭＲ等光谱技术鉴定化合物的结构。结果：经光谱鉴定化合物为：化合物Ⅰ大花酸（ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒｉｃａｃｉｄ），化合物Ⅱ１６β，１７二羟基贝壳杉烷（１６β，１７ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｋａｕｒａｎｅ），化合物Ⅲ阿魏酸（ｆｅｒｕｌｉｃａｃｉｄ），化合物Ⅳ二十七烷醇（ｈｅｐｔａｃｏｓａｎｏｌ），化合物Ⅴβ谷甾醇（βｓｉｔｏｓｔｅｒｏｌ），化合物Ⅵ琥珀酸（ｓｕｃｉｎｉｃａｃｉｄ）。结论：化合物Ⅰ，Ⅱ为ｋａｕｒａｎｅ型二萜类化合物，化合物Ⅲ、Ⅳ、Ⅵ为首次从该植物中分离得到。

腺梗豨莶的化学成分研究(Ⅰ)

目的 研究腺梗莶的化学成分。方法 采用硅胶柱层析分离 ,通过 IR,1 H、1 3CNMR、MS波谱分析确定化学结构。结果 分得 3个化合物 ,经光谱数据的分析 ,分别鉴定为对映 - 16 β,17,18-三羟基 -贝壳杉 - 19-羧酸 ( )、对映 - 16β,17-二羟基 -贝壳杉 - 19-羧酸 ( )、奇任醇 ( )。结论 其中化合物

毛梗稀莶抗生育活性成分的研究

自菊科植物毛梗豨莶Siegesbeckia glabrescens Mak的全草中分得一个新的二萜甙,命名为豨莶新甙(neodarutoside),经光谱(IR,~1 HNMR,^(13) CNMR和MS)分析,确定结构为(I);同时分得的二萜有豨莶精醇(darutigenol,Ⅳ)和豨莶甙(d&rutoside,Ⅴ)。豨莶甙(Ⅴ)在20～40 mg/kg剂量时,对大鼠有明显抗早孕作用。

腺梗豨莶草乙酸乙酯部位化学成分的研究

目的研究腺梗豨莶草Siegesbeckia pubescens Makino乙酸乙酯部位的化学成分。方法该部位采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI、RP-18以及HPLC色谱柱进行分离纯化,1H-NMR、13C-NMR结合报道文献进行结构鉴定。结果从中分离鉴定出7个化合物,分别为16βH-17-羟基-贝壳杉烷-19-羧酸(1)、对映-16βH,17,18-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸(2)、对映-16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸(3)、18-乙酰基-豨莶酸(4)、3,7-二甲氧基槲皮素(5)、3-甲氧基槲皮素(6)和奇壬醇(7)。结论化合物1和6为首次从该植物里分离得到。

腺梗豨莶草正丁醇部位化学成分研究

目的:研究腺梗豨莶草正丁醇部位化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI、RP-18等分离材料,利用反复柱色谱结合高效液相制备色谱的方法分离纯化,利用核磁共振波谱数据结合文献进行结构鉴定。结果:从腺梗豨莶正丁醇部位共分离得到10个单体化合物,分别鉴定为:对映-16-O-乙酰基-2α,16,19-三羟基海松烷-8(14)-烯(1)、对映-15-O-乙酰基-2α,16,19-三羟基海松烷-8(14)-烯(2)、奇壬醇(3)、豨莶苷(4)、对映-2β,15,16-三羟基海松烷-8(14)-烯-19-羧酸(5)、木犀草素(6)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(7)、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、(6S,9R)-roseoside(9)、腺苷(10)。结论:其中,化合物1、2、6~10为首次从该植物中分离得到。

腺梗豨莶IIA对深静脉血栓形成大鼠vWF及ICAM-1水平的影响

目的:观察腺梗豨莶IIA对深静脉血栓形成大鼠vWF及ICAM-1水平的影响。方法:SD大鼠60只随机平均分入正常对照组、模型对照组、阿司匹林组、肝素组、腺梗豨莶IIA高、低剂量组,采用环形缩窄下肢股静脉管腔1/2限流,直流电持续电击损伤法造下肢深静脉血栓模型,造模6h后采血。酶联免疫法(ELISA)测定血清中vWF及ICAM-1的含量。结果:深静脉血栓形成模型大鼠血清中vWF、ICAM-1水平明显升高,腺梗莶IIA可以降低vWF、ICAM-1水平,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:腺梗豨莶IIA能改善炎性反应,减轻静脉血栓大鼠血管内皮细胞的损伤,有明显的血管内皮保护作用。

毛梗希莶的化学成分

从毛梗希莶（Ｓｉｅｂｅｓｂｅｃｋｉａｇｌａｂｒｅｓｃｅｎｓ）的乙醇提取物中分到胡萝卜甙和３个二萜类成分，根据光谱和化学证据，３个二萜的化学结构被分别确定为：对映－１６β，１７－二羟基贝壳杉烷－１９－酸（１），腺梗希莶甙（２）和希莶甙（３）。对映二羟基－１６β，１７－贝壳杉烷－酸和腺梗希莶甙系首次从毛梗希莶中到。

腺梗豨莶IIA对深静脉血栓形成大鼠血红素氧合酶-1活性的影响

目的观察腺梗豨莶ⅡA对深静脉血栓形成大鼠血红素氧合酶-1活性的影响。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、阿司匹林组、肝素组、腺梗豨莶ⅡA高剂量组、腺梗豨莶ⅡA低剂量组,采用环形缩窄下肢股静脉管腔1/2限流,直流电持续电击损伤造下肢深静脉血栓模型,缝合腹壁6 h后重新打开,剥离静脉取出血栓称湿重及干重,并采用分光光度法检测HO-1活性。结果腺梗豨莶ⅡA对结扎并电击损伤管壁造成的股静脉血栓的重量有明显减轻作用并能诱导HO-1活性增加,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论腺梗豨莶ⅡA能诱导HO-1表达,保护血管内皮细胞功能,起到抗血栓的作用。

HPLC-UV法同时测定豨莶草中绿原酸和黄芩苷的含量

目的建立同时测定豨莶草中绿原酸和黄芩苷含量的方法。方法采用高效液相色谱-紫外检测法。色谱柱为Elite C18柱（200 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为体积分数0.1%磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^-1,柱温为30℃,检测波长为280 nm。结果绿原酸和黄芩苷质量浓度分别在3.840～23.04 mg·L^-1（r=0.999 9）和0.480～2.88 mg·L^-1（r=0.999 7）内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.9%和101.1%,RSD均为1.7%。结论该法专属、简便、准确,可用于同时测定豨莶草中绿原酸和黄芩苷的含量,为全面评价豨莶草药材质量提供了依据。

HPLC-RID法测定腺梗豨莶药材中奇壬醇等5种化合物的含量

目的建立测定腺梗稀莶中ent-1够，17，18-三羟基贝壳杉烷-19-羧酸、奇壬醇、ent-17，18-二羟基贝壳杉烷-19-羧酸、稀莶苷、ent-16β，17-二羟基贝壳杉烷-19-羧酸含量的高效液相色谱示差折光检测方法（HPLC-RID）。方法以十八烷基硅烷键合相为固定相，流动相为体积分数0．5％甲酸溶液-乙腈（体积比72：28），示差检测器光学元件温度为40℃，流速为1．0mL·min^-1。结果5种化合物线性关系良好（r〉0．999），ent-16β，17，18-三羟基贝壳杉烷-19-羧酸和ent-17，18-二羟基贝壳杉烷-19-羧酸的线性范围为0．10～0．50g·L^-1，奇壬醇的线性范围为0．50～2．5g·L^-1，稀莶苷的线性范围为0．20-1．0g·L^-1，ent-16β，17-二羟基贝壳杉烷-19-羧酸的线性范围为0．42～2．1g·L^-1;平均加样回收率在98．3％-101．1％内，RSD小于3．5％。结论该方法简便、准确、重复性良好，适用于腺梗旆莶中5种成分的同时测定。

HPLC-RID法测定腺梗豨莶药材中豨莶精醇等4种化合物的含量

目的建立测定腺梗豨莶中豨莶精醇、16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸、16α氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸和3＇,4＇-二甲氧基槲皮素含量的高效液相色谱示差折光检测方法（HPLC-RID）。方法以十八烷基硅烷键合相为固定相,流动相为体积分数0.3%甲酸溶液-乙腈（体积比42∶55）,流速为1.0 mL·min-1,示差检测器光学元件温度为40℃,柱温30℃。结果豨莶精醇的线性范围为0.202-2.02 g·L-1,16β,17-二羟基-贝壳杉烷-19-羧酸的线性范围为0.510-5.10 g·L-1,16α氢-贝壳杉烷-17,19-二羧酸的线性范围为0.298-2.98 g·L-1,3＇,4＇-二甲氧基槲皮素的线性范围为0.100-1.00 g·L-1,4种化合物线性关系良好（r〉0.999）;平均加样回收率在99.2%-104.9%内;RSD小于3.4%。结论该方法简便、准确、重复性良好,适用于腺梗豨莶中4种成分的同时测定。

腺梗豨莶化学成分的分离与鉴定

目的对中药腺梗豨莶（Siegesbeckia pubescens Makino．）进行化学成分的研究。方法通过硅胶柱色谱、ODS、Sephadex LH-20和制备HPLC等手段分离，利用理化性质和光谱方法鉴定结构。结果分离得到8个化合物，分别鉴定为过氧化麦角固醇（ergosterol peroxide，1）、尿嘧啶（uracil，2）、豆甾-4-烯-3-酮（stigmast-4-en-3-one，3）、豆甾醇（stigmasterol，4）、奇任醇（kirenol，5）、琥珀酸（succinic acid，6）β-谷甾醇（β-sitosterol，7）、胡萝卜苷（daucosterol，8）。结论化合物1—3首次从该属植物中得到。

毛梗豨莶化学成分的研究

目的研究毛梗豨莶Siegesbeckia glabrescens Makino的化学成分。方法毛梗豨莶95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI柱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到11个化合物,分别鉴定为奇任醇(1)、豨莶精醇(2)、isopropylidenkirenol (3)、3α,15,16-trihydroxy-ent-pimara-8(14)-en-15,16-acetonide (4)、16α,17-dihydroxy-ent-kaura-19-oic acid (5)、2-desoxy-4-epi-pulchellin (6)、aphanamol I (7)、3-O-甲基槲皮素(8)、槲皮素(9)、香草醛(10)、反式对羟基肉桂酸(11)。结论化合物4～7、10为首次从该植物中分离得到。

Research progress on chemical constituents in Sigesbeckiae Herba and their pharmacological activities

Sigesbeckiae Herba,a dry whole plant of Sigesbeckia glabrescens Makino,Sigesbeckia pubescens Makino and Sigesbeckia orientalis L.,is a traditional Chinese medicine used to dispel dampness,dredge meridians and collaterals,clear heat and detoxicate.Its chemical components are complex and abundant,including mainly diterpenoids,sesquiterpenoids and flavonoids.Among them,diterpenoids are the main active components.Modern pharmacological studies have found that the compounds isolated from Sigesbeckiae Herba have anti-inflammatory,anti-tumor,antithrombus and other pharmacological activities.This review systematically summarized the chemical components identified from Sigesbeckiae Herba and their pharmacological activities by searching Chinese and English databases,in order to provide references for the further development of Sigesbeckiae Herba and the improvement of its quality standards.

ent-Pimarane Diterpenoid Dimers from Sigesbeckia glabrescens with Potent Anti-inflammatory Activities

Chromatographic purification of Sigesbeckia glabrescens extracts led to three undescribed ent-pimarane diterpenoid dimers,named glabreside A—C(1-3).Their structures were confirmed by comprehensive spectroscopic analyses,and the structures of compound 1 and 3 were confirmed by X-ray crystallography.The results of anti-inflammatory activity assay showed that glabreside C(3)exhibited the most potent inhibition activity on nitric oxide(NO)production induced by lipopolysaccharide(LPS)in BV2 microglia compared with the other two compounds.Glabreside C also increased the protein expression level of heme oxygenase-1(HO-1),and suppressed inducible nitric oxide synthase(iNOS)and cyclooxygenase 2(COX2)in LPS-stimulated BV2 cells.Mechanistically,glabreside C exerts its anti-inflammatory effect by inhibiting AKT/MAPKs signaling pathway.These findings indicate the vital role of ent-pimarane diterpenoid dimers in explaining the anti-inflammatory activity of S.glabrescens and provide important evidence for further development and utilization of Sigesbeckiae Herba.These results also suggest that glabreside C is a potential lead compound for anti-inflammatory drugs.

毛梗豨莶草化学成分研究Ⅱ

目的：本课题组前期对自建的江西100种中草药提取物组分库样品进行活性筛选时，发现毛梗稀莶草Siegesbeckia glabrescens的二氯甲烷和乙酸乙酯萃取部位具有显著的抑制细胞程序性坏死的生理活性。为明确毛梗稀莶草的活性组分，本课题组对毛梗稀莶草二氯甲烷和乙酸乙酯萃取部位进行系统化学成分分离，以期寻找具有抑制细胞程序性坏死的目标化合物。方法：采用正相硅胶柱色谱（二氯甲烷-甲醇20：1-0：1），反相ODS柱色谱（30％-100％甲醇），LH-20羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱、重结晶等方法对毛梗稀莶草二氯甲烷和乙酸乙酯萃取部位进行分离和纯化，根据理化性质及’H．NMR，13C-NMR波谱数据进行化合物结构鉴定。结果：从毛梗稀莶草中分离并纯化出9个化合物，分别鉴定为2-methoxy-4-（2-propen-1-y1）penyl-6-acetate-β-D-glucopyranoside（1），苄醇嵋-D-吡喃葡萄糖苷（2），香豆素（3），棕榈酸（4），咖啡酸乙酯（5），反式对羟基肉桂酸（6），β-谷甾醇（7），卢-胡萝卜苷（8），豆甾醇（9）。结论：化合物1-6为首次从该植物中分离得到。

毛梗豨莶草黄酮类化学成分分离鉴定

目的:本课题组前期对自建的江西100种中草药提取物组分库样品进行活性筛选时,发现毛梗豨莶草Siegesbeckia glabresce的乙酸乙酯萃取部位具有显著的抑制细胞程序性坏死的生理活性。为明确毛梗豨莶草的活性组分,本课题组对毛梗豨莶草乙酸乙酯萃取部位进行系统化学成分分离,以其寻找具有抑制细胞程序性坏死的目标化合物。方法:采用正相硅胶柱色谱(二氯甲烷-甲醇,20∶1~0∶1),反相ODS柱色谱(30%~100%甲醇),Sephadex LH-20柱色谱、重结晶等方法对毛梗豨莶草乙酸乙酯萃取部位进行分离和纯化,根据理化性质及~1H-NMR,^(13)C-NMR波谱数据进行化合物结构鉴定。结果:此次报道从毛梗豨莶草中分离并纯化的9个黄酮类化合物,分别鉴定为:3,4-二甲氧基-2',4'-二羟基查尔酮(1);7-O-(β-Dglucopyranosyl)-galactin(2);7,3',4'-三羟基黄酮(3);5,6,7,3',4',5'-六甲氧基黄酮(4);8,3',4'-三羟基-7-甲氧基二氢黄酮(5);5,4'-二羟基-7,3'-二甲氧基二氢黄酮醇(6);7,4'-二羟基-3'-甲氧基二氢黄酮(7);木犀草素(8);槲皮素(9)。结论:化合物1~7为首次从该植物中分离得到。