改良的Sihler's染色法显示成人输尿管和回肠壁内神经分布

目的探讨改良的Sihler’s染色法显示成人输尿管和回肠壁内神经分布的应用。方法选取教学解剖尸体中输尿管和回肠6具,最终获得12条输尿管和6段回肠进行改良的Sihler’s染色法整体染色,于X线阅片灯下、组织压片、免疫组化观察输尿管和回肠壁内神经分支、分布、走形总结两者肌内神经分支、分布规律及形态学特征。结果大体解剖很难辨认输尿管的神经来源,可见回肠系膜内一些纤细的白色神经支进入肠壁。Sihler’s染色后,见输尿管和回肠呈透明胶冻状,壁内神经支呈深蓝色,浆膜面更为清晰。输尿管外膜层内的神经与血管伴行,近似垂直进入管壁,逐渐向肌层延伸并沿纵轴分布;整体见管壁上、中段神经稀少,分支逐渐变细,相邻分支间交叉较少;输尿管下段神经较为密集,见经膀胱输尿管连接部成簇状进入输尿管下段向近端延伸的粗大神经支,分布密集,向上逐渐分出初级及次级神经支,相邻神经间有分支交错及伴行,每根神经的分支不在一个平面上固定,可观察视野内未发现神经节。回肠外形完整,浆膜层神经分支呈现深蓝色,与动脉伴行,并向肠壁分出初级及次级神经支,部分直接跨越血管网分布至肠系膜侧壁,到达肠壁的壁内神经环形、垂直分布于肠管壁,呈树枝状。相邻的神经分支相互交叉,每根神经束的分支不在一个平面上固定,可观察视野范围内未见明确神经节。Sihler’s染色透明的输尿管、回肠切取组织压片:见两者神经纤维均由外向内至黏膜层分布,输尿管壁内沿纵轴走向,肠壁呈近似垂直向对系膜侧走向,呈网状分布,分支逐渐变细,神经纤维间明显交叉,均未见明确神经节样结构。免疫组化见输尿管肌内神经纤维呈束状、纵行分布,交叉较少;回肠壁内肌间有神经纤维网格状分布,肌间见有大量的神经节结构。结论成人输尿管和回肠壁内神经能被染色,神经分布各具特色。壁外神经均伴随其支配动脉走行,壁内由外向内至黏膜层走行,分支逐渐变细,未见明确神经节。除黏膜下层外,管壁结构类似,环肌与纵行平滑肌均受内脏神经支配,器官壁外神经走向沿其动脉伴行,壁内神经有类似节段性分布规律,此结果可能为临床上回肠代输尿管类似原输尿管蠕动节律性及排尿的神经解剖提供参考。

心肌纤维化特殊染色方法比较与优化

目的 对目前已有心肌纤维化染色方法进行优化,弥补目前心肌纤维常用染色方法在定量分析中存在的胶原纤维漏读及误读等问题,为心肌纤维化半定量及诊断提供参考。方法 利用实验室前期构建的心肌组织特异性cTnT~(R141W)基因突变致扩张型心肌病转基因小鼠模型,制备心脏组织石蜡切片,分别进行马松三色(Masson’s trichrome, Masson)染色法、天狼星红(picric sirius red, PSR)染色法、天狼星红-品红(van Gieson, VG)染色法、天狼星红-固绿(sirius red/fast green staining, SR/FG)染色法染色,利用Image J 2.1.0软件对胶原纤维面积进行定量比较,并从染液浓度、染色时间、酸性溶液预染3个方面对SR/FG染色法进行优化,对后续的胶原纤维定量分析进行应用验证。结果 4种特染方法均可实现胶原纤维的分布观察,其中,优化后的SR/FG染色法,即0.1%天狼星红-苦味酸酸性溶液预染5 min,随后于0.1%天狼星红-苦味酸与0.04%固绿的混合液中染色1 h,在软件识别中具有更低的漏读率和遗失率。结论 本文优化后的SR/FG染色法较其他传统胶原纤维特染方法,胶原纤维与心肌组织着色鲜亮、颜色对比明显、稳定性佳、方便快捷,更适用于后续胶原纤维占比定量分析应用。

病理组织石蜡切片HE染色中的常见问题及解决方法

本文对于病理标本石蜡切片在HE染色过程中常见问题及相应处理方法进行了探讨。作为临床病理学检验的重要手段,病理石蜡切片HE染色具有显著的意义。本文系统性地总结了病理石蜡切片HE染色的操作步骤、可能出现的问题以及相应的处理方法。因此,高质量的HE切片对于实现疾病的精准诊断至关重要,其质量直接影响着病理诊断的及时性与准确性。方法 我们选取了本院病理科在2021年1月至2021年12月期间的2000例标本,以及6位病理技师,进行病理切片染色。对其中出现的问题进行了深入分析,并提出相应的解决对策。通过对照方案,在实施前后对比病理组织石蜡切片HE染色问题发生率、病理组织石蜡切片的优良率以及病理技师的手术质量评分等指标,对方案的有效性进行评估。结果 本研究采用的“解解法”方案执行后,病理学石蜡切片的HE染色问题率明显降低,同时病理石蜡切片的优良率明显提高(P<0.05)。在病理技师的工作品质评定项目中,涉及石蜡切片HE染色品质、操作规范以及工作状况反馈的分数均显著提高(P<0.05)。结论 石蜡切片HE染色在实践中存在着一些问题,这些问题对病理切片的准确率有重要的影响。通过对这些问题进行研究,可以有效地减少病理切片中HE染色的问题,进而提高病理切片的优良率,提升病理医师的工作水平。

单圈图的D(2)-点和可区别全染色

图G的D(2)-点和可区别全染色是指在图G的一个正常全染色φ下,G中任意两个距离不超过2的顶点u,v,其色集合中所有颜色数之和互不相同.使得G有一个k-D(2)-点和可区别全染色的最小整数k,称为图G的D(2)-点和可区别全色数.文中应用组合零点定理和权转移方法刻画了单圈图的D(2)-点和可区别全染色,并得到其D(2)-点和可区别全色数.

植物染料结构、提取方法及表征手段研究

染整加工是赋予纺织品高附加值的关键环节,正朝着绿色、环保、可持续的方向发展。天然植物染料因具有环境友好、可生物降解、可将染色织物功能化等特点,备受行业关注。文章从纺织品染色用天然植物染料的分类及化学结构分析出发,以研究成果案例为中心,重点叙述植物染料的提取方法、优势和特点,并围绕实际染色过程需要,对天然植物染料的表征手段进行综合阐述,为天然植物染料的应用和开发提供借鉴和参考。

厚冰冻切片尼氏染色方法研究

为进一步提高尼氏染色技术在厚切片形态学分析中的应用价值,以长爪沙鼠(Meriones unguiculatus)200μm冰冻脑切片为研究对象,在薄切片尼氏染色方法的基础上,对烘片、固定、洗涤和染色等实验步骤加以改良.结果发现,利用改良后的方法所制得的切片着色良好,脑区边界清晰,组织结构明显,无冰晶空洞和脱片现象.该实验结果可为科研工作者应用厚切片开展神经组织形态学研究提供重要参考.

SDS-PAGE电泳蛋白染色方法研究进展

SDS-PAGE电泳结束后,蛋白质条带染色是其中一个重要的步骤。目前蛋白质染色方法主要有考马斯亮蓝染色法、银染法、荧光染色法、负染法等,其中考马斯亮蓝染色法又分为传统考染和胶体考染;银染又分为银染A法和银染B法;每种方法各有利弊,目前,对染色方法改进主要集中在如何提高蛋白质染色的灵敏度,缩短染色时间,用无毒的化学物质去替换现在凝胶电泳中常用的有毒物等方面。如何在保持方法高灵敏度的同时,又能够有效地降低染色背景是亟待解决的问题,也是未来的发展方向。

不同检测方法对高危产妇胎儿染色体异常的诊断价值

目的 探究不同检测方法对高危产妇胎儿染色体异常检出率的诊断价值。方法 回顾性分析2018年1月-2022年8月在本院接受羊水穿刺,进行染色体核型分析以及染色体微阵列分析(CMA)检测的1130例高危产妇资料,对两种方法的检测结果进行比较和分析。结果 总共检出异常例数142例,总检出率为12.57%。染色体核型分析检测成功1128例,检测成功率为99.82%,共检出染色体异常96例,染色体异常检出率为8.51%;CMA检测成功率为100%,染色体异常108例,染色体异常检出率为9.56%,其中两种方法均检出异常。两种检测方法染色体异常检出率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同产前诊断指征孕妇的染色体异常检出率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 染色体核型分析仍然是检测染色体异常的金标准,CMA检测可以有效提高高危产妇胎儿染色体拷贝数异常(<10Mb)的检出率,为精准产前诊断提供依据。

胃癌HER-2免疫组化检测方法优化

目的对胃癌HER-2检测的染色条件进行探索,从内外部质控、程序验证方面建立较为完善的HER-2检测流程。方法从标本固定脱水时间、包埋方向、不同染色方式、烤片时间、一抗孵育时间、抗体差异几个方面分别进行试验。结果国产抗体染色强度弱于HER2/neu(4B5),但HER-2(3+)的标本在HER-2(UMAB36)抗体显色下细胞形态更清晰。结论标本固定脱水时间要适宜,脱水不足易导致免疫组化切片不完整,抗原表位丢失且有大面积非特异性着色;若条件可及,优先选择全自动免疫组化染色仪进行染色,如果选择手工染色,建议使用EDTA修复,一抗4℃孵育过夜,染色效果更佳;烤片时间要适宜,烤片时间太长会明显降低组织阳性信号,甚至产生非特异性信号,影响染色质量;HER-2(3+)的标本建议选用HER-2(UMAB36)进行染色,对于2+的标本,可选用HER2/neu(4B5)的抗体,染色强度更佳,可减少模棱两可的结果,更利于医师判读。

量化牵张成骨术中骨再生动态特征的4D形态学方法

目的牵张成骨术(DO)通过牵张器对骨骼施加稳定和缓慢的牵张力,刺激截骨间隙内新骨形成,以延长骨骼。量化DO骨再生动态特征有助于揭示DO机理,评价牵张速率和频率等因素对DO的影响。本研究旨在建立一种4D形态学方法,对DO过程中新骨形成量及其空间分布进行连续、定量测定。方法对7只雌性C57BL/6小鼠右侧股骨进行牵张成骨手术,在截骨术后第5、15、25、35、45、50天,利用活体显微CT进行扫描,并在第50天进行切片染色。通过图像配准等技术,建立一种4D形态学测量方法,计算包括骨形成速率(BFR)、骨吸收速率(BRR)、骨体积分数(BV/TV)、骨矿化水平(BML)在内的骨再生参数;并且利用模拟重复扫描和切片对该方法进行验证。结果验证结果表明,配准误差较低(3.0±0.9%),该方法获得的骨形态参数与组织切片相似性较好。骨再生过程显示,新骨在第15~25天迅速形成(BFR=13.7±5.1%),在第25天,BV/TV为25.4±9.6%,骨矿化水平较低(BML=52.6±17.9%)。随后,进入骨重塑阶段,BV/TV在第45天左右稳定在25.6±8.2%,此时新骨基本完全被矿化(BML=79.1±12.6%)。结论本研究建立了一种量化DO骨再生特征的4D形态学方法,揭示了在巩固阶段前期骨迅速形成,然后通过骨重建,骨痂区域重塑这一过程,为评价不同因素对DO影响提供了重要手段。

一种对基于甲基丙烯酸甲酯(MMA)包埋的非脱钙组织切片进行免疫组化染色的方法

本文旨在探讨对于甲基丙烯酸甲酯树脂包埋的未脱钙组织切片进行免疫组化染色的可行性。方法 在本实验中,传统的环氧树脂包埋剂被替换为甲基丙烯酸树脂包埋剂。在切片制备完成并进行正式染色前,对切片进行脱钙处理以增加碱性染料的着色。采用血管平滑肌标志物α-SMA为目的蛋白。抗体孵育过程中,多种封闭剂被采用以降低背景着色——非特异性蛋白采用血清白蛋白封闭;内源性生物素采用未标记链霉素封闭;内源性碱性磷酸酯酶采用左旋咪唑封闭。Fast-red TR显色剂的采用使得阳性区与较暗的背景能够更好的区分。最后采用甲基绿染料对细胞核进行复染。结果 在聚甲基丙烯酸甲酯包埋的骨组织切片中,α-SMA成功标记了血管的形态。结论 本实验提供的方法使树脂包埋的未脱钙组织切片能够成功地进行免疫组化染色,使得对于这类样本进行蛋白表达的检测成为可能。

神经组织染色方法的研究概况

神经组织染色是研究神经退行性疾病所必需的一项关键的实验技术。但是,由于染色步骤的复杂和外界因素的干扰,时常导致染色结果的不稳定。该文就目前国内外建立的神经组织染色方法,包括尼氏染色、神经元染色、神经胶质细胞染色、髓鞘染色、突触染色和神经纤维染色的原理、优缺点及其应用作一概述,以便指导研究者选用合适的染色方法。

高质量花生根尖细胞染色体制片方法研究

为了能快速获得用于染色体分带或者荧光原位杂交的高质量花生根尖细胞染色体制片,通过选择适当粗细的花生侧根,经过对二氯苯浸泡预处理,卡诺氏固定液固定后,直接用45%醋酸烘烤压片,得到了细胞平整、染色体分散的根尖细胞染色体制片。与HCl解离压片的方法相比,该方法中试剂对染色体影响微小。与酶解去壁低渗法相比,该方法没有酶解去壁低渗的过程,不需要用果胶酶和纤维素酶等较贵重试剂,节约了时间和成本,提高了制片效率。该方法不仅适用于花生,也适用于芝麻、水稻、玉米、大豆、青豆、番茄等多种植物。

精子形态学分析中染色方法的比较

目的:评价改良巴氏染色法、瑞-吉染色法和考马斯亮蓝染色法对形态正常精子率和顶体完整率检测结果影响。方法:分别采用改良巴氏染色法、瑞-吉染色法和考马斯亮蓝染色法对55例男性不育症患者精液涂片染色,计算形态正常精子率和顶体完整率。结果:①3种染色方法检测的形态正常精子率两两比较,差异均无显著性(P>0.05),瑞-吉染色法评价颈部和中段缺陷精子率及尾部缺陷精子率显著低于改良巴氏染色法和考马斯亮蓝染色法(P<0.05)。②3种染色方法检测的Ⅰ型、Ⅳ型顶体完整率两两比较,差异均无显著性(P>0.05),改良巴氏染色法检测的Ⅱ型和Ⅲ型顶体完整率明显高于考马斯亮蓝染色法和瑞-吉染色法(P<0.05)。③3种染色方法检测的形态正常精子率间均呈显著正相关关系(r=0.535、P<0.01,r=0.601、P<0.01,r=0.329、P<0.05)。3种染色方法检测的顶体完整率间均呈显著正相关关系(r=0.604,P<0.01,r=0.682、P<0.01,r=0.446、P<0.01)。结论:3种染色方法均可作为检测人精子形态和顶体完整率实用方法,其中改良巴氏染色法更适于精子形态学分析,瑞-吉染色法更适于顶体完整率判读。

环丙沙星铽荧光配合物与DNA的相互作用及染色新方法

合成了环丙沙星铽荧光配合物 ,并研究其与 DNA分子的相互作用 .对比 DNA分子吸附配合物分子前后的显微红外及荧光光谱发现 ,以环丙沙星分子为配体的稀土配合物同 DNA间存在相互作用 ,这种作用诱导了 DNA二级结构的构象变化 .基于这种相互作用 ,研究了环丙沙星铽配合物对口腔粘膜组织切片的荧光染色 ,得到了同经典的苏木精

黄瓜现采花粉生活力最佳染色方法的筛选

采用3种不同染色方法及离体培养法对黄瓜花粉生活力进行测定,结果显示,I-KI染色法的测定值偏低,不适用于黄瓜花粉生活力的测定;醋酸洋红染色法的测定值则明显偏高,也不适宜采用;而TTC染色法的测定值与离体培养法的测定结果相近且差异不显著,故认为是一种测定黄瓜花粉生活力较快捷、方便、精确的方法。同时还讨论了3种染色方法的应用原理及优缺点。

适合花鲈的几种染色体制备方法的比较

比较了6种适于制备花鲈(Lateolabraxjaponicus)染色体的制片方法。结果表明,细胞系(LJES)培养法和头肾 PHA活体注射 淋巴分离液富集法可制备高质量的染色体标本;外周血短期培养法和头肾 PHA活体注射法得到的结果重复性好,但制片时有红细胞的干扰;小鱼游泳法和组织浸泡法操作简单,适于野外条件下的染色体制备,但得到的染色体图象有背景杂质,分裂指数较低,仅适用于染色体组型的研究。

凝胶电泳蛋白质染色方法研究进展

蛋白质条带染色是蛋白质凝胶电泳中一个重要的步骤。目前的方法主要有考马斯亮兰染色、银染、荧光染色、负染等。将考马斯亮兰与BBR相结合进行染色,可以减少染色/脱色的次数,能够提高考马斯亮兰在蛋白质条带上的染色效果。Gallyas Intensifying方法与银染相结合,能提高用银染已经检测到的蛋白质条带的亮度,使蛋白质点之间及其与背景之间更容易区分。将银染与考马斯亮兰结合起来进行染色可以提高同一块胶上微量蛋白质检测灵敏度。目前,对染色方法改进主要集中在如何提高蛋白质染色的灵敏度,操作方便与否,费用是否昂贵等方面。如何在保持银染方法高灵敏度的同时,又能够有效地降低染色背景,用无毒的化学物质去替换现在凝胶电泳中常用的有毒物质,克服荧光染色使蛋白质化学性质改变的缺点,在保持负染不修饰蛋白质条带化学性质优势的同时,对蛋白质条带染色结果加以改善等,可能代表了蛋白质条带染色的未来发展方向。

兔豆状囊尾蚴的压片技术及染色方法研究

为了详细观察豆状囊尾蚴头节的形态结构,通过屠宰检验或病兔剖检采集的豆状囊尾蚴的囊泡,制作压片后用不同的染色方法进行了比较。结果表明,制作豆状囊尾蚴头节压片的关键是载玻片要洁净、干燥,从囊泡中取出的头节应完整无损,并尽量除去黏附在头节上的囊液。将带有头节的结节放在载玻片的中部,再在其上放一载玻片,两手在载玻片的两端均匀用力挤压,待结节全部展开即可。为了观察头节的正面结构,在压制玻片前,应用手术刀片除去原始颈节与体节部分。通过常用的几种单染色和复染色法对压片进行染色,证明单染色更有利于详细的观察头节的结构,而且几种单染色之间有互补染色效果。