未破裂颅内动脉瘤患者血清SIRT1和HMGB1的表达及临床意义

目的探讨沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在未破裂颅内动脉瘤患者血清中的表达变化及临床意义。方法选取江油市人民医院2020-01—2021-01住院治疗的80例未破裂颅内动脉瘤患者,另选取同期门诊健康体检者40例为对照组。比较2组临床资料和血清SIRT1、HMGB1水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清SIRT1、HMGB1水平对未破裂颅内动脉瘤的评估价值。结果未破裂颅内动脉瘤患者血清SIRT1水平显著低于对照组,HMGB1水平显著高于对照组(P<0.05)。未破裂颅内动脉瘤患者血清SIRT1、HMGB1表达水平与瘤数目、瘤直径显著相关(P<0.05)。ROC曲线显示,血清SIRT1、HMGB1联合预测未破裂颅内动脉瘤的AUC为0.944,敏感性为96.15%,特异性为87.04%,优于各自单独预测(Z二者联合-SIRT1=2.296,P=0.022;Z二者联合-HMGB1=2.759,P=0.006)。结论未破裂颅内动脉瘤患者血清SIRT1显著低表达,HMGB1显著高表达,两者与瘤数目、瘤直径等临床病理特征显著相关,二者联合检测对未破裂颅内动脉瘤患者具有较好的预测价值。

SIRT1在儿童呼吸系统疾病中的研究进展

沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)是一种高度保守的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖的Ⅲ类组蛋白去乙酰化酶,通过对组蛋白和非组蛋白在内的靶蛋白的去乙酰化作用发挥生理学效应。在呼吸系统中,SIRT1参与调节炎症反应、氧化应激、细胞凋亡和自噬等过程。SIRT1的活性异常与肺炎、哮喘、急性肺损伤、慢性阻塞性肺疾病、特发性肺纤维化、肺癌等呼吸系统疾病的发生与发展密切相关。近年来,随着对SIRT1与呼吸系统疾病的关系以及调控SIRT1药物的深入研究,为呼吸系统疾病的治疗提供了新的思路。本文就SIRT1在儿童呼吸系统疾病发病机制中的作用及其最新研究进展做一综述,以更好地将SIRT1作为一个靶点服务于儿童呼吸系统疾病。

血清PTX-3联合SIRT1对缺血性肠病患者的诊断及预后价值分析

目的分析血清正五聚体蛋白-3(PTX-3)联合沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)对缺血性肠病(IBD)的诊断及预后价值。方法选取2020年12月至2022年12月四川省成都市新都区第三人民医院消化内科收治的126例IBD患者作为观察组,另选取同期在四川省成都市新都区第三人民医院进行体检的98例健康者作为对照组。对观察组患者进行为期一年的随访调查,根据患者预后生存情况分为预后良好组(69例)和预后不良组(57例)。采用酶联免疫吸附试验检测所有研究对象的血清PTX-3、SIRT1水平。比较观察组和对照组的血清PTX-3、SIRT1水平,以及预后良好组和预后不良组的临床资料。采用多因素Logistic回归分析IBD患者预后不良的危险因素;采用Pearson相关分析IBD患者血清PTX-3水平与SIRT1水平的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PTX-3、SIRT1单独及2项指标联合检测对IBD的诊断价值。结果观察组血清PTX-3水平高于对照组,血清SIRT1水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。预后不良组的体质量指数、PTX-3水平均高于预后良好组,SIRT1水平低于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清PTX-3水平上升、血清SIRT1水平下降是IBD患者预后不良的危险因素(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,IBD患者血清PTX-3水平与SIRT1水平呈负相关(r=-0.447,P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,2项指标联合检测诊断IBD的曲线下面积(AUC)大于血清PTX-3、SIRT1单独诊断IBD的AUC(Z=2.827、2.712,P=0.004、0.007)。结论IBD患者血清PTX-3水平升高、SIRT1水平降低,2项指标水平与IBD患者的预后密切相关,且2项指标联合检测对IBD具有较高的诊断价值。

息肉样脉络膜视网膜病变患者泪液p38 MAPK mRNA、 Sirt1 mRNA水平与康柏西普治疗效果的关系

目的探讨息肉样脉络膜视网膜病变(PCV)患者泪液p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)mRNA、沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt1)mRNA水平与康柏西普治疗效果的关系。方法选取2020年8月至2022年4月该院94例PCV患者作为观察组,根据康柏西普治疗效果分为效果良好亚组、效果较差亚组,选取同期年龄、性别匹配的健康体检者94例作为对照组。2组均检测泪液p38 MAPK mRNA、Sirt1 mRNA及血管内皮生长因子(VEGF)水平。分析泪液p38 MAPK mRNA、Sirt1 mRNA水平与VEGF的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析泪液p38 MAPK mRNA、Sirt1 mRNA及VEGF对康柏西普治疗效果的预测价值。采用多因素Logistic回归分析康柏西普治疗效果的影响因素。结果观察组治疗前、治疗12周泪液p38 MAPK mRNA及VEGF水平高于对照组,Sirt1 mRNA水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组治疗12周泪液p38 MAPK mRNA及VEGF水平低于治疗前,Sirt1 mRNA水平高于治疗前,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前、治疗12周泪液p38 MAPK mRNA水平与VEGF水平呈正相关(r=0.717、0.338,P<0.001),治疗前、治疗12周泪液Sirt1 mRNA水平与VEGF水平呈负相关(r=-0.766、-0.396,P<0.001)。94例PCV患者随访1年,息肉完全消退率为40.66%。效果较差亚组治疗前、治疗12周p38 MAPK mRNA及VEGF水平高于效果良好亚组,Sirt1 mRNA水平低于效果良好亚组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗12周泪液p38 MAPK mRNA、Sirt1 mRNA及VEGF联合预测PCV患者康柏西普治疗效果的曲线下面积(AUC)大于单项指标预测的AUC(P<0.05)。p38 MAPK mRNA、Sirt1 mRNA均是PCV患者康柏西普治疗效果的影响因素(P<0.05)。结论PCV患者p38 MAPK mRNA、Sirt1 mRNA表达异常,二者均与康柏西普治疗效果有关。

替罗非班通过SIRT1/VEGF信号通路减轻急性脑梗死大鼠神经元损伤

目的探讨替罗非班能否通过沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路减轻急性脑梗死(ACI)大鼠神经元损伤。方法将75只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、替罗非班(60μg/kg)组、SIRT1抑制剂(5 mg/kg SIRT1特异性抑制剂EX-527)组、替罗非班+SIRT1抑制剂组,每组15只。除假手术组外,其他4组大鼠构建ACI模型。对各组大鼠进行神经功能评分;采用氯化三苯基四氮唑染色检测大鼠脑梗死体积百分数;采用硫代巴比妥酸法检测大鼠血清丙二醛水平,采用比色法检测血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,采用微板法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)水平;采用H-E染色检测大鼠脑组织病理变化;采用TUNEL染色检测大鼠神经元凋亡水平;采用蛋白质印迹法检测大鼠海马组织中SIRT1、VEGF蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织海马区病理损伤严重,神经功能评分、脑梗死体积百分数、血清丙二醛水平、神经元凋亡率均较高(P均<0.05),血清GSH-Px、SOD水平及海马组织中SIRT1、VEGF蛋白表达水平均降低(P均<0.05)。与模型组比较,替罗非班组、替罗非班+SIRT1抑制剂组大鼠脑组织海马区病理损伤减轻,神经功能评分、脑梗死体积百分数、血清丙二醛水平、神经元凋亡率均降低(P均<0.05),血清GSH-Px、SOD水平及海马组织中SIRT1、VEGF蛋白表达水平均升高(P均<0.05);而SIRT1抑制剂组大鼠相应指标变化呈相反趋势(P均<0.05)。结论替罗非班可能通过激活SIRT1/VEGF信号通路抑制氧化应激和神经元凋亡,进而减轻ACI大鼠的神经元损伤。

血清SIRT1、GLP-2水平与溃疡性结肠炎患者病情严重程度及临床转归的关系

目的:探讨溃疡性结肠炎(UC)患者血清沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、胰高血糖素样肽2(GLP-2)表达水平与病情严重程度和临床转归的相关性。方法:选取88例UC患者(UC组)作为研究对象,按照Mayo评分将患者分为活动期组(n=59)与缓解期组(n=29),根据预后结果将患者分为好转组(n=61)与未好转组(n=27);另选取同期健康体检者50名作为对照组。比较各组患者血清SIRT1、GLP-2水平,采用ROC曲线评价SIRT1、GLP-2对患者临床转归的预测效能。结果:与对照组相比,UC组血清SIRT1、GLP-2水平均降低(P<0.05)。活动期组患者血清SIRT1、GLP-2水平低于缓解期组(P<0.05),且活动期组患者随着病情加重,血清SIRT1、GLP-2水平逐渐降低(P<0.05)。与好转组比较,未好转组血清SIRT1、GLP-2水平均降低(P<0.05)。Logistic回归分析表明,血清SIRT1、GLP-2水平降低是UC患者治疗后未好转的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清SIRT1、GLP-2水平预测UC患者治疗后未好转的曲线下面积(AUC)为0.722、0.713,二者联合预测的AUC为0.832,高于单独预测(P<0.05)。结论:SIRT1、GLP-2表达降低与UC患者疾病活动度及病情程度相关,并对患者临床转归有较高预测能力,二者可作为UC的诊断指标。

SIRT1对低氧诱导肺动脉内皮细胞损伤的保护作用及机制

目的探讨沉默信息调节因子1相关酶(SIRT1)对低氧诱导肺动脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法体外培养人肺动脉内皮细胞,将细胞分为8组:对照组、低氧组、SRT1720(SIRT1激动剂)组、EX-527(SIRT1抑制剂)组、低氧+SRT1720组、低氧+EX-527组、低氧+TEMPOL(mitoROS抑制剂)组和低氧+NAC(ROS抑制剂)组。正常组细胞置于正常细胞培养箱中培养,低氧模型细胞置于3%O2,5%CO_(2)低氧舱中处理24 h,其余组分别予SRT1720、EX-527、TEMPOL和NAC处理24 h后低氧处理。DHE和MitoSOX染色法检测细胞内及线粒体活性氧水平,试剂盒检测细胞MDA水平,免疫荧光法检测细胞沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)、核苷酸结合寡聚化片段结构域样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(Caspase-1)、发动蛋白相关GTP酶(Drp1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)水平,JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位水平,ELISA法检测细胞炎症因子IL-1β和IL-18水平,免疫印迹法检测细胞Gasdermin D(GSDMD)蛋白水平。结果与对照组相比,低氧组肺动脉内皮细胞的SIRT1蛋白表达降低(P<0.01),胞内ROS、mitoROS、MDA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、Drp1蛋白表达和炎症因子IL-18和IL-1β水平均升高(P均<0.01),线粒体膜电位(MMP)水平、Mfn2蛋白表达均降低(P均<0.01)。与低氧组相比,低氧+SRT1720组、低氧+TEMPOL组和低氧+NAC组人肺动脉内皮细胞的SIRT1蛋白表达增加(P均<0.05),胞内ROS、mitoROS、MDA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、Drp1蛋白表达和炎症因子IL-18和IL-1β水平均降低(P均<0.05),MMP水平、Mfn2蛋白表达均增加(P均<0.01);而低氧+EX-527组人肺动脉内皮细胞的胞内ROS、mitoROS、MDA、NLRP3、Caspase-1、GSDMD、Drp1蛋白表达和炎症因子IL-18和IL-1β水平均升高(P均<0.05),MMP水平、Mfn2蛋白表达均降低(P均<0.05)。结论SIRT1可通过抑制线粒体ROS的形成和NLRP3介导焦亡发生,对低氧诱导肺动脉内皮细胞损伤有保护作用。

五味子丙素通过SIRT1/PGC-1α/NRF1通路减轻脂多糖诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤机制的研究

目的探讨五味子丙素通过沉默信息调节因子2相关酶1(silencing information regulator 2 related enzyme 1,SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活物1α(peroxisome proliferator activated receptorγcoactivator-1α,PGC-1α)/核呼吸因子1(nuclear respiratory factor 1,NRF1)通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响机制。方法通过LPS诱导建立大鼠心肌细胞损伤模型。将正常培养的大鼠心肌细胞H9c2分组为:对照组、LPS组、LPS+低剂量五味子丙素组、LPS+中剂量五味子丙素组、LPS+高剂量五味子丙素组、LPS+高剂量五味子丙素+SIRT1/PGC-1α/NRF1通路抑制剂尼克酰胺(niacinamide,NA)组。MTT法检测细胞存活率;试剂盒检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(malondialdehyle,MDA)、超氧化物歧化酶(superaxide dismutase,SOD)、还原性谷胱甘肽(glutathione,GSH)、氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、磷酸肌酸激酶(creatine pho sphate kinase,CPK)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;流式细胞仪检测凋亡率;western blot检测SIRT1、PGC-1α、NRF1蛋白表达水平。结果与模型组比较,低、中、高剂量五味子丙素能够依次提高LPS诱导的H9c2细胞存活率、SOD和GSH活性及SIRT1、PGC-1α、NRF1蛋白表达水平,同时依次降低凋亡率、AST、CPK、LDH、MDA和ROS水平(P<0.05)。SIRT1/PGC-1α/NRF1通路抑制剂NA可逆转五味子丙素对LPS诱导H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用(P<0.05)。结论五味子丙素可能通过激活SIRT1/PGC-1α/NRF1通路减轻LPS诱导的H9c2细胞氧化应激损伤。

救绝止喘汤加味联合小青龙汤对慢性阻塞性肺疾病患者SAA、SIRT1、MSP水平的影响

目的:研究救绝止喘汤加味联合小青龙汤对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者血清淀粉样蛋白A(SAA)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)、巨噬细胞刺激蛋白(MSP)水平的影响。方法:选取2016年6月至2020年11月在我院就诊的COPD患者154例,按照随机数字表法分为联合组和小青龙汤组,各77例,两组患者均治疗3月。小青龙汤组使用小青龙汤对患者进行治疗,联合组在小青龙汤组基础上增加救绝止喘汤加味治疗,检测患者治疗前、治疗1月后、治疗3月后SAA、SIRT1、MSP水平及炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血浆降钙素原(PCT)],检测患者肺功能指标[第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、FVC/FEV_(1)],评定患者中医证候评分,统计治疗效果。结果:2组患者治疗1月后、治疗3月后SAA、MSP、TNF-α、PCT水平及胸闷、气短、咯痰、咳嗽评分均低于治疗前,SIRT1、FVC、FEV_(1)、FVC/FEV_(1)水平高于治疗前;与小青龙汤组相比,联合组治疗后SAA、MSP、TNF-α、PCT水平及胸闷、气短、咯痰、咳嗽评分均降低,SIRT1、FVC、FEV_(1)、FVC/FEV_(1)水平及治疗3月后总有效率均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:救绝止喘汤加味联合小青龙汤可改善COPD患者SAA、SIRT1、MSP水平,提高患者抗炎功能及抗氧化应激水平,临床疗效较好。

电针对胰岛素抵抗大鼠肝脏组织SIRT1/ATG7信号通路的影响

目的观察电针对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏组织SIRT1/ATG7信号通路的影响,探讨电针治疗IR的潜在机制。方法将Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、SIRT1激活剂组和SIRT1抑制剂+电针组,每组各8只。建立IR大鼠模型,电针组选取中脘、关元、足三里及丰隆进行电针干预;SIRT1激活剂组灌胃给予白藜芦醇处理;SIRT1抑制剂+电针组腹腔注射EX527并实施与电针组相同的电针治疗。检测各组大鼠的餐后血糖(PBG)、腹腔胰岛素耐量(IPITT)及葡萄糖输注率(GIR)。采用免疫共沉淀技术检测ATG7的乙酰化水平。采用Western blot法检测大鼠肝脏组织中SIRT1、ATG7、p-GSK-3β蛋白表达量。结果与正常组相比,模型组PBG、IPITT水平显著升高(均P<0.01),GIR显著降低(P<0.01),肝脏组织p-GSK-3β蛋白表达显著升高(P<0.01),SIRT1、ATG7蛋白表达显著降低(均P<0.01),ATG7蛋白乙酰化水平升高;与模型组相比,电针组PBG显著降低(P<0.05),电针组与SIRT1激活剂组GIR显著升高(均P<0.05),IPITT水平、肝脏组织p-GSK-3β蛋白表达显著降低(均P<0.05),SIRT1、ATG7蛋白表达显著升高(均P<0.05),ATG7蛋白乙酰化水平降低;与电针组相比,SIRT1抑制剂+电针组GIR、肝脏组织ATG7蛋白表达显著降低(均P<0.05),ATG7蛋白乙酰化水平升高。结论电针可以通过激活肝脏SIRT1/ATG7信号通路,提高全身与肝脏胰岛素敏感性,改善IR。

NADH通过SIRT1/Nrf2通路缓解小鼠抗结核药物性肝损伤及凋亡

目的探究烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)通过SIRT1/Nrf2通路调控小鼠抗结核药物性肝损伤和凋亡的机制。方法将24只6周龄SPF级雄性小鼠按体质量随机分成4组:ADLI组[90 mg/(kg·d)异烟肼+135 mg/(kg·d)利福平+315 mg/(kg·d)吡嗪酰胺灌胃]、对照组[与抗结核药物性肝损伤(ADLI)组等体积生理盐水灌胃]、NADH组(对照组基础上应用30 mg/kg NADH灌胃)和NADH干预组(ADLI组基础上应用30 mg/kg NADH灌胃),每组6只,连续灌胃7 d,收集血清和肝组织。qRT-PCR法和Western blot法分别检测SIRT1/Nrf2通路中的沉默信息调节因子1(SIRT1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和凋亡相关指标B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、人胱天蛋白酶3(caspase-3)的mRNA和蛋白表达情况;HE染色法观察小鼠肝脏组织形态;称取小鼠肝脏质量,将其质量除以体质量获得肝脏指数;微板法检测肝损伤指标谷氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)的水平。结果与对照组相比,ADLI组SIRT1和Nrf2蛋白、mRNA表达水平下降(P<0.05);肝组织结构紊乱,细胞明显肿胀、边界不清;小鼠体质量下降,肝指数上升;抗凋亡因子Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低,凋亡因子Bax、caspase-3 mRNA和蛋白表达增强;肝损伤指标ALT、AST、LDH水平升高(P<0.05)。而与ADLI组相比,NADH干预后,SIRT1、Nrf2的mRNA和蛋白表达升高;肝组织结构清晰,细胞呈多边形;抗凋亡因子Bcl-2 mRNA和蛋白表达升高,凋亡因子Bax、caspase-3 mRNA和蛋白水平降低;小鼠体质量上升,肝指数下降;肝损伤指标ALT、AST、LDH表达降低(P<0.05)。结论NADH可能通过调控SIRT1/Nrf2通路缓解小鼠抗结核药物性肝损伤和细胞凋亡。

大黄酸通过Sirt1/AMPK信号通路对非酒精性脂肪性肝病小鼠肝功能及肝细胞脂代谢的影响

目的:研究不同浓度大黄酸灌胃通过沉默信息调节因子2相关酶1(Sirt1)/amp活化蛋白激酶(AMPK)信号通路对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的肝功能及肝细胞脂代谢的影响。方法:实验小鼠分为空白组,模型组,低、高剂量大黄酸组和高剂量大黄酸+Sirt1抑制剂(高剂量大黄酸+EX527)组。动物实验:除空白组外其余各组小鼠采用连续饲喂高脂饲料(8周)构建NAFLD小鼠模型。8周干预完成后各组小鼠于处死前称重并记录,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、游离脂肪酸(NEFA)水平;ELISA法检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肝脏组织乙酰辅酶羧化酶(ACC)水平;苏木精伊红染色(HE)及油红O染色检验肝组织硬化程度及细胞脂肪病变水平。细胞实验:采用200μmol/L棕榈酸(PA)处理AML-12细胞24 h构建NAFLD细胞模型。全自动生化分析仪检测TG含量;油红O染色观察AML-12细胞脂质积累情况;Western Blot法检测肝脏组织和AML-12细胞中Sirt1、AMPKα、磷酸化AMPKα(p-AMPKα)蛋白表达。结果:与空白组相比,模型组小鼠体重和肝脏湿重升高,肝脏组织明显损伤,AML-12细胞中TG含量及小鼠血清TG、TC、MDA、ALT、AST、NEFA水平显著升高,肝脏组织ACC含量降低(P<0.05),肝脏组织和AML-12细胞中Sirt1、p-AMPKα/AMPKα表达降低,脂肪病变严重,脂质积累增高(P<0.05)。与模型组相比,低、高剂量大黄酸组小鼠体重和肝脏湿重降低,肝脏组织损伤减轻,AML-12细胞中TG含量及小鼠血清TG、TC、MDA、ALT、AST、NEFA水平显著降低,肝脏组织ACC含量升高(P<0.05),肝脏组织和AML-12细胞中Sirt1、p-AMPKα/AMPKα表达升高,脂肪病变减轻,脂质积累降低(P<0.05)。与高剂量大黄酸组相比,高剂量大黄酸+EX527组各项指标均有所逆转(P<0.05)。结论:大黄酸可有效通过调节小鼠肝细胞脂代谢改善NAFLD小鼠肝功能水平,其机制可能与激活Sirt1/AMPK信号通路有关。

血清SIRT1水平对慢性心力衰竭患者预后的预测价值分析

目的探讨血清沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)水平对慢性心力衰竭(CHF)患者预后的预测价值。方法选取2013年1月~2016年6月于常州市第四人民医院心血管内科收治的97例CHF患者为CHF组,CHF组根据NYHA分级分为Ⅱ级(n=41),Ⅲ级(n=34),Ⅳ级(n=22),另选取同期于我院体检的健康志愿者40例为对照组(n=40),采用酶联免疫吸附试验检测所有研究对象血清SIRT1、N末端B型钠尿肽原(NT-proBNP)水平;采用彩色超声多普勒检测仪检查受试者左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVEDD);比较对照组及CHF组不同分级的CHF患者的血清SIRT1、NT-proBNP水平及LVEF、LVEDD情况;采用Peason相关性分析SIRT1与LVEF、LVEDD及NT-proBNP的相关性;随访2年,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析SIRT1对患者预后的预测价值。结果CHF患者血清SIRT1水平、LVEF均低于对照组,且随着NYHA分级的增加,SIRT1水平、LVEF呈下降趋势,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);而CHF患者NT-proBNP、LVEDD均高于对照组,且随着NYHA分级的增加,NT-proBNP、LVEDD呈上升趋势,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。Peason相关性分析显示,CHF患者SIRT1与LVEF呈正相关关系,与NT-proBNP、LVEDD呈负相关关系(P<0.05)。随访结果表明,2年内因CHF死亡人数为32例,其中存活者平均血清SIRT1为(1160.72±96.39)pg/ml,死亡者平均血清SIRT1为(598.24±114.58)pg/ml,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清SIRT1的曲线下面积为0.755,此时其预测患者死亡的敏感度、特异性分别为73.8%、70.0%。结论CHF患者血清SIRT1水平明显降低,且心功能越差,SIRT1水平降低越明显,血清SIRT1水平对CHF患者预后具有较高的预测价值。

COPD患者外周血SIRT1及NF-KB、MMP-9的表达水平分析

探讨COPD患者外周血沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)及核因子κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平及作用。比较患者SIRT1、NF-κB、MMP-9等水平情况。结果显示患者血清SIRT1水平随病情加重而降低,患者血清NF-κB、MMP-9水平随病情加重而增高。COPD稳定期组和急性加重组患者SIRT1mRNA和蛋白相对表达量明显低于对照组;NF-κB、MMP-9mRNA和蛋白相对表达量明显高于对照组。实验证明COPD患者SIRT1表达水平降低与肺功能下降相关,可作为COPD潜在标志物;SIRT1可能通过对NF-κB、MMP-9的调节作用来调控COPD的发生与发展。

MicroRNA-181a、SIRT1水平与新生儿急性呼吸窘迫综合征严重程度及预后的相关性

目的分析新生儿急性呼吸窘迫综合征(ARDS)血清microRNA-181a(miR-181a)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)水平变化,探讨二者与其病情严重程度及预后的关系。方法选取2017年10月—2021年7月东南大学附属中大医院江北院区收治的162例ARDS患儿为ARDS组,根据氧合指数分为轻度组60例、中度组53例、重度组49例;根据预后情况分为预后不良组68例和预后良好组94例。另选取同期64名健康新生儿为对照组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清miR-181a mRNA相对表达量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清SIRT1、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。Pearson/Spearman相关性分析ARDS患儿血清miR-181a、SIRT1水平与氧合指数、炎症因子的相关性。ROC曲线分析血清miR-181a、SIRT1水平单独及联合对ARDS患儿预后不良的评估价值。结果ARDS组血清miR-181a mRNA相对表达量、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均高于对照组(P<0.05);SIRT1水平低于对照组(P<0.05)。重度组和中度组患儿血清miR-181a mRNA相对表达量、IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于轻度组,且重度组血清miR-181a mRNA相对表达量、IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于中度组(P<0.05);而重度组和中度组患儿血清SIRT1水平低于轻度组,且重度组血清SIRT1水平低于中度组(P<0.05)。相关性分析显示,ARDS患儿血清miR-181a与SIRT1水平呈负相关(rs=-0.788,P<0.05),与氧合指数、IL-1β、IL-6、TNF-α水平呈正相关(r=0.780、0.833、0.776和0.804,均P<0.05);SIRT1与氧合指数、IL-1β、IL-6、TNF-α水平呈负相关(rs/r=-0.836、-0.716、-0.691和-0.754,均P<0.05)。预后不良组血清miR-181a mRNA相对表达量高于预后良好组,SIRT1水平低于预后良好组(P<0.05)。ROC曲线结果显示,miR-181a评估ARDS患儿预后不良的最佳截断值为1.59,敏感性为80.88%(95%CI:0.717,0.857),特异性为70.21%(95%CI:0.652,0.757);SIRT1评估ARDS患儿预后不良的最佳截断值为0.70 ng/ml,敏感性为76.47%(95%CI:0.712,0.796),特异性为87.23%(95%CI:0.832,0.917)。两者联合评估ARDS患儿预后不良的敏感性为85.29%(95%CI:0.788,0.902),特异性为81.91%(95%CI:0.774,0.886)。结论新生儿ARDS血清miR-181a、SIRT1水平与ARDS患儿病情严重程度及预后密切相关,可作为新生儿ARDS预后评估指标。

安石榴苷通过SIRT1/PGC-1α/NRF1通路对实验性结肠炎小鼠肠黏膜损伤的影响及其机制

目的从沉默信息调节因子1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)/核呼吸因子-1(NRF1)通路的角度探究安石榴苷(PUN)对实验性小鼠溃疡性结肠炎(UC)肠黏膜损伤的影响,并初步探究其作用机制。方法C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、PUN低、高剂量组、SIRT1抑制剂组、PUN+SIRT1抑制剂组,每组12只。葡聚糖硫酸钠诱导建立实验性UC小鼠模型,观察小鼠UC症状并进行疾病活动指数评分;电镜观察结肠组织肠黏膜屏障结构损伤;HE染色及碘酸雪夫染色观察结肠组织病理损伤;ELISA法检测炎症因子如白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-17(IL-17)及氧化应激产物-髓过氧化物酶(MPO)、细胞内活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平;免疫组化染色观察SIRT1阳性表达;Western blot法检测SIRT1/PGC-1α/NRF1通路相关蛋白、抗氧化蛋白-超氧化物歧化酶2(SOD2)及谷胱甘肽S-转移酶(GST)、抗凋亡蛋白(Bcl2)、肠屏障结构相关蛋白(occludin、ZO-1)表达。结果与正常对照组相比,模型组UC疾病活动指数评分升高,小鼠肠黏膜屏障结构损伤、炎症浸润及杯状细胞损伤、凋亡等病理现象加重,炎症因子及氧化应激相关因子表达升高,SIRT1/PGC-1α/NRF1介导的抗氧化、抗凋亡途径激活(P<0.05)。与模型组相比,PUN低、高剂量均可进一步促进SIRT1/PGC-1α/NRF1介导的抗氧化、抗凋亡途径激活,改善小鼠肠黏膜屏障结构损伤、炎症浸润及杯状细胞损伤、凋亡等病理现象,降低UC小鼠疾病活动指数评分(P<0.05)。SIRT1抑制剂可逆转PUN的上述作用(P<0.05)。结论安石榴苷可通过激活SIRT1/PGC-1α/NRF1通路介导的抗炎、抗氧化、抗凋亡保护途径,改善实验性溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜病理损伤程度。

SIRT1、ATF4、KL-6蛋白在COPD患者肺组织中的表达及与气道重塑的相关性研究

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织标本的沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)、活化转录因子4(ATF4)、涎液化糖链抗原-6(KL-6)蛋白水平差异及与气道重塑的相关性。方法 分别收集2020年1月至2021年5月在该院呼吸内科就诊的合并肺肿瘤的急性加重期COPD、稳定期COPD的肺叶切除组织蜡块标本各40例,分别纳入急性期组、稳定期组;另外选取40例该院实验室保存的行肺肿瘤肺叶切除术非COPD患者的组织蜡块标本作为对照组,采用Western blotting法检测3组肺组织标本的SIRT1、ATF4、KL-6蛋白水平并进行对比。绘制ROC曲线分析肺组织SIRT1、ATF4、KL-6蛋白在COPD患者病情诊断中的应用价值;以气道壁面积占总横截面积比(WA%)作为气道重塑评估指标,分为无气道重塑组、轻中度组、重度组,对比不同气道重塑程度COPD患者的肺组织SIRT1、ATF4、KL-6蛋白表达差异,分析肺组织SIRT1、ATF4、KL-6蛋白水平与COPD患者气道重塑程度的相关性。结果 (1)与对照组相比,急性期组、稳定期组的肺组织SIRT1蛋白水平均明显降低(P<0.05),急性期组、稳定期组的肺组织ATF4、KL-6蛋白水平明显升高(P<0.05);与稳定期组相比,急性期组的肺组织SIRT1蛋白水平明显降低(P<0.05),急性期组的肺组织ATF4、KL-6蛋白水平均明显升高(P<0.05)。(2)SIRT1、ATF4、KL-6蛋白单独检测以及联合检测诊断COPD的灵敏度、特异度均>70.00%,AUC均>0.740。(3)与无气道重塑组相比,轻中度组、重度组的肺组织ATF4、KL-6蛋白水平明显升高(P<0.05),且SIRT1蛋白水平明显降低(P<0.05);与轻中组相比,重度组的肺组织SIRT1蛋白水平明显降低(P<0.05),且ATF4、KL-6蛋白水平均明显升高(P<0.05)。(4)COPD患者肺组织的SIRT1蛋白表达与气道重塑WA%呈负相关(r=-0.635,P<0.001),ATF4、KL-6蛋白表达与气道重塑WA%呈正相关(r=0.768、0.892,P<0.001)。结论 SIRT1蛋白在COPD患者肺组织中呈低表达,ATF4、KL-6蛋白在COPD患者肺组织中呈高表达,SIRT1、ATF4、KL-6蛋白与COPD病情发展以及气道重塑有关。检测肺组织中SIRT1、ATF4、KL-6蛋白的表达对判断COPD病情发展均有良好的诊断效能,可将调控SIRT1、ATF4、KL-6蛋白在肺组织中的水平作为后续临床COPD、气道重塑治疗的新研究方向。

银杏二萜内酯葡胺注射液对局灶性脑缺血大鼠SIRT1/HIF-1α/VEGF信号通路及突触可塑性的影响

目的研究银杏二萜内酯葡胺注射液对局灶性脑缺血大鼠沉默信息调节因子2相关酶1/缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子(SIRT1/HIF-1α/VEGF)信号通路及突触可塑性的影响。方法SD大鼠随机分为假手术组(等量生理盐水)、模型组(等量生理盐水)、尼莫地平组(16.2 mg·kg^(-1))、银杏二萜内酯葡胺注射液低(1.3 mg·kg^(-1))、中(2.6 mg·kg^(-1))、高(5.2 mg·kg^(-1))组,模型组、尼莫地平组、银杏二萜内酯葡胺注射液低、中、高组采用大脑中动脉栓塞(MCAO)建立局灶性脑缺血大鼠模型,假手术组只分离颈总动脉及颈内、颈外动脉。术后24 h用药干预,每天1次,连续7 d。评估术后24 h、7 d各组大鼠神经功能缺损评分,检测脑含水量及脑梗死率,采用免疫印迹(WB)法检测缺血侧脑组织突触后密度蛋白-95(PSD-95)、突触素(SYN)及SIRT1、HIF-1α、VEGF蛋白表达量。结果术后7 d,与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死率显著增加(P<0.05),脑组织SIRT1、HIF-1α、VEGF、PSD-95、SYN蛋白表达量显著降低(P<0.05);与模型组比较,尼莫地平组、银杏二萜内酯葡胺注射液低、中、高组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、脑梗死率显著降低(P<0.05),脑组织SIRT1、HIF-1α、VEGF、PSD-95、SYN蛋白表达量显著升高(P<0.05),其中银杏二萜内酯葡胺注射液中、高组依次优于尼莫地平组(P<0.05)。结论银杏二萜内酯葡胺注射液可对抗局灶性脑缺血,改善大鼠神经功能,可能与促进SIRT1/HIF-1α/VEGF信号通路激活及脑缺血后突触可塑性形成有关。

高糖培养对大鼠肾小管上皮细胞中SIRT1和PGC-1α水平及线粒体功能的影响

目的 探讨高糖培养肾小管上皮细胞中沉默配对型信息调节因子2同源物1(SIRT1)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC-1α)表达水平及线粒体功能的影响。方法 取对数生长期的大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E细胞)设立对照组(正常血糖水平,NG组)和高糖组(HG组),培养48 h后,采用流式细胞仪检测线粒体活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位(ΔΨm),采用紫外分光光度法检测线粒体腺嘌呤核苷三磷酸(ATP),采用Western blot法检测PGC-1α、SIRT1和cleaved-Caspase-3蛋白的表达。结果 与NG组比较,HG组ROS和ATP明显增加、ΔΨm水平明显下降,PGC-1α、SIRT1蛋白表达降低,cleaved-Caspase-3蛋白表达明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论 高糖诱导可使大鼠近端肾小管上皮细胞线粒体功能障碍,其机制可能与高糖降低SIRT1和PGC-1α表达有关。

外周血SIRT1、sTREM-1水平与COPD疾病发展的相关性研究

目的探讨外周血沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)、血清髓样细胞触发受体-1(sTREM-1)水平与慢性阻塞性肺疾病(COPD)疾病发展的相关性。方法选取2017年1月至2019年7月在本院治疗的COPD患者182例(COPD组),其中COPD急性加重期患者78例、COPD稳定期患者104例,同时选取健康体检者100例作为对照组,检测外周血SIRT1、sTREM-1水平,测量COPD患者第一秒用力呼气容积(FEV1)和FEV1占预计值比例(FEV1%)。结果COPD组外周血SIRT1为(0.78±0.22)ng/ml,明显低于对照组(P<0.05),而sTREM-1为(94.40±32.21)pg/ml,明显高于对照组(P<0.05);COPD急性加重期患者外周血SIRT1明显低于COPD稳定期患者(P<0.05),而sTREM-1明显高于COPD稳定期患者(P<0.05)。COPD急性加重期患者FEV1和FEV1%分别为(41.02±9.88)L和(64.40±10.15)%,明显低于COPD稳定期患者(均P<0.05)。SIRT1与FEV1和FEV1%呈正相关(r=0.343和0.350,均P<0.05),sTREM-1与FEV1和FEV1%呈负相关(r=﹣0.401和﹣0.433,均P<0.05),SIRT1与sTREM-1呈负相关(r=﹣0.302,P<0.05)。结论COPD患者外周血SIRT1降低,而sTREM-1升高,可能在疾病进展中有一定作用,两者水平与患者肺功能有一定关系。