芥子微波和恒温鼓风烘烤炮制工艺研究

目的:优化芥子微波和恒温鼓风烘烤炮制工艺。方法:建立白芥子苷含量测定方法;按照析因设计试验法,通过CRITIC法计算外观性状、芥子碱硫氰酸盐和白芥子苷3个指标的权重系数,以综合评分为指标,考察微波火力、恒温鼓风烘烤温度、加热时间对炮制品的影响,选出2种炮制工艺的最佳炮制品;通过噻唑蓝(MTT)比色法考察最佳炮制品与传统文火清炒炮制品对HaCaT细胞活力的影响。结果:芥子微波大火加热2 min、150℃恒温鼓风烘烤30 min得到的炒芥子综合评分最高,芥子碱硫氰酸盐含量符合2020年版《中华人民共和国药典》要求;与传统炮制品比较,白芥子苷含量更高,在800μg/mL浓度时对HaCaT细胞均无明显毒性。结论:微波、恒温鼓风烘烤芥子炮制工艺合理、可行、易操作,可为炒芥子的规范化生产提供参考依据。

“冬病夏治”方中白芥子促进延胡索乙素经穴、非经穴部位皮肤渗透性比较研究

目的:比较“冬病夏治”方中有、无白芥子配伍以及经穴、非经穴给药,对延胡索乙素皮肤渗透性的影响。方法:弗氏完全佐剂法制备类风湿性关节炎家兔模型,随机将48只模型家兔分为空白组(不加白芥子)、非经穴白芥子低剂量组、非经穴白芥子中剂量组、非经穴白芥子高剂量组、非经穴组(处方量)、“足三里”白芥子低剂量组、“足三里”白芥子中剂量组和“足三里”白芥子高剂量组,每组6只,取模型家兔“足三里”穴位处皮肤,非穴位处皮肤,Franz扩散法进行体外释放实验,UPLC法测定延胡索乙素的含量,计算累积透过量,绘制12 h内释放曲线图,比较累积渗透率。结果:空白组的累积透过量、稳态渗透速率和累积渗透率显著低于白芥子配伍的高、中、低剂量组(P<0.01)。在白芥子促进下,经穴给药的累积透过量、稳态渗透速率和累积渗透率均显著高于非经穴给药(P<0.01),白芥子高剂量组促渗效果倍数高于中、低剂量组。结论:白芥子在“冬病夏治”方中起到“药物-透皮促进剂”的“双重”作用。透皮促进体现在两个方面,一是穴位用药优于非穴位用药;二是随白芥子用量增加而增强。因此,该方更优的透皮给药方案应当是方中重用白芥子,于穴位处贴敷用药。

黄芥敷胸膏辅助治疗小儿肺炎疗效观察

目的 观察黄芥敷胸膏辅助治疗小儿肺炎的临床疗效。方法 将2020年5月—2022年5月上海中医药大学附属龙华医院儿科收治的100例痰热闭肺型肺炎患儿随机分为对照组和观察组,每组50例。对照组予西医常规治疗,观察组在对照组的基础上联合黄芥敷胸膏外敷,每天1次,治疗7 d。观察2组临床疗效,比较2组患儿治疗前后主症、次症评分及主症起效时间评分,同时进行安全性评价。结果 观察组总有效率为100%(50/50),对照组总有效率为92%(46/50),观察组临床疗效优于对照组(P<0.05)。治疗后2组发热、痰鸣、咳嗽、喘息、肺部啰音评分及总积分均较治疗前明显降低(P均<0.05),且观察组咳嗽、痰鸣、肺部啰音评分及总积分明显低于对照组(P均<0.05)。治疗后2组精神、面色、胸闷、出汗、口渴、咽红、睡眠、饮食、大小便评分及总积分均较治疗前明显降低(P均<0.05),且观察组出汗、睡眠、饮食、大小便评分及总积分均明显低于对照组(P均<0.05),2组精神、面色、胸闷、出汗、口渴、咽红评分比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。观察组发热、痰鸣、咳嗽、喘息、肺部啰音起效时间评分及总主症起效时间评分均明显低于对照组(P均<0.05)。2组治疗过程中均未见明显不良反应。结论 黄芥敷胸膏治疗小儿肺炎临床疗效好,可明显改善患儿主要症状及次要症状,缩短疗程,安全性良好。

基于TLR4/NF-κB炎性轴的白芥子经皮给药对类风湿性关节炎大鼠调控机制研究

目的:探讨白芥子经皮给药通过Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)炎性轴对类风湿性关节炎(RA)大鼠的治疗作用。方法:50只大鼠随机分为对照组(空白对照组)、模型组、阳性药组、白芥子组及白芥子+TLR4激活剂组,每组10只。除对照组外,其余组制备佐剂性RA模型。阳性药组右后足涂抹0.27 g/kg扶他林,白芥子组涂抹4.50 g/kg白芥子涂剂,白芥子+TLR4激活剂组涂抹4.50 g/kg白芥子涂剂同时踝关节注射0.25 mg/kg TLR4激活剂LPS,对照组和模型组涂抹等量的面粉糊作对照,制备模型前3 d开始给药,连续18 d。测量不同时间左右后足肿胀度,末次给药后检测热痛和机械痛阈值、血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α),Western blot法检测踝关节滑膜组织中TLR4、NF-κB蛋白表达情况。结果:与模型组比较,阳性药组、白芥子组及白芥子+TLR4激活剂组建模不同时间右后足肿胀度均降低,其中阳性药组和白芥子组均低于白芥子+TLR4激活剂组,白芥子组建模9 d右后足肿胀度低于阳性药组(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组、白芥子组及白芥子+TLR4激活剂组右后足热痛及机械痛阈值均升高,其中阳性药组高于白芥子组,白芥子组高于白芥子+TLR4激活剂组(P<0.05)。与模型组比较,阳性药组、白芥子组及白芥子+TLR4激活剂组血清IL-1β、TNF-α水平及踝关节滑膜组织中TLR4、NF-κB蛋白相对表达量均降低,其中阳性药组和白芥子组低于白芥子+TLR4激活剂组(P<0.05),阳性药组与白芥子组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:白芥子经皮给药通过抑制TLR4/NF-κB炎性轴发挥作用,可有效治疗RA模型大鼠。

常用十字花科药用植物中芥子碱的分布研究

十字花科植物中的芥子碱是一种非常有价值的天然抗氧剂,在抗衰老药物的研究中受到了许多学者的重视。为了考察芥子碱在我国药用植物中的分布情况,采用反相高效液相色谱法测定了我国常用的4种十字花科药用植物白芥子、莱菔子、葶苈子、黄芥子中该成分的含量。采用的色谱柱为A lltim a Pheny l柱(250mm×4.6mm i.d.,5μm);流动相:3%醋酸溶液和乙腈的混合溶液,梯度洗脱;检测波长:326nm;柱温:25℃。该法快速,准确度高,重现性好,方法的建立不仅为上述4种药材的质量监测提供了有效的定量分析方法,而且对于芥子碱的深入研究具有重要意义。

斑蝥、白芥子发泡规律的研究

目的:探讨斑蝥、白芥子用于天灸疗法时的发泡规律,找出控制发泡程度的条件。方法:选取健康受试者175人随机分为5组,观察不同药物或药量的发泡率、发泡时间、发泡大小及疼痛程度。结果:同种药物不同剂量组的发泡率差异有显著性意义(P<0·05),发泡时间差异无显著性意义(P>0·05);不同药物组发泡时间差异有显著性意义(P<0·05),斑蝥组发泡时间长;每穴0·05g药物组所发的泡大于每穴0·01g药物组(P<0·05);各组间的疼痛率存在差异(P<0·05),以每穴用0·05g白芥子的疼痛率最高。结论:斑蝥、白芥子的发泡规律不同,临床应用时可用贴敷药量和时间控制发泡程度。

伏九贴敷疗法皮肤刺激性与抗哮喘作用相关性研究

目的 ：建立卵蛋白诱导的豚鼠哮喘模型,考察伏九贴敷药物中生、炒白芥子的不同配比对豚鼠皮肤的刺激性以及抗哮喘作用,以寻找确保治疗效果的同时皮肤刺激性小的适宜药物配比。方法 ：以不同配比生、炒白芥子制作的伏九贴敷分别贴于豚鼠大椎、肺俞和肾俞穴位,每次贴敷4 h,隔日贴敷1次,连续14 d。以地塞米松（0.5 mg/kg）作为阳性药,观察豚鼠皮肤刺激性反应并记录评分,采用苏木精-伊红染色考察各组豚鼠皮肤组织和肺组织病理学变化。结果 ：3组伏九贴敷均对豚鼠皮肤有一定刺激性,随着伏九贴敷中炒白芥子比例的增加,皮肤刺激性降低,但抗哮喘作用减弱。结论 ：适当的皮肤刺激性对伏九贴敷的抗哮喘作用是有必要的;伏九贴敷中生白芥子和炒白芥子的比例各半时,既可维持伏九贴敷的疗效,又能减轻其对皮肤的副作用。

白芥子不同配比穴位贴敷防治支气管哮喘的皮肤反应及疗效分析

目的:研究白芥子不同配比穴位贴敷防治支气管哮喘所出现的皮肤反应与疗效之间关系。方法:将所纳入的90例支气管哮喘患者随机分为A、B、C 3组,每组30例。贴敷药物中除白芥子外,余药相同。A组全部为生白芥子,B组生白芥子、炒白芥子各半,C组全部为炒白芥子。三伏天穴位贴敷,每伏贴敷一次,共3次。观察由不同配比白芥子而引起的皮肤反应以及各组疗效。结果:穴位贴敷后A、B、C3组皮肤反应积分依次降低,3组皮肤反应差异有统计学意义(P<0.05),A、B、C3组临床总有效率分别为93.33%、90.00%、73.33%,3组疗效组间比较无显著差异(p>0.05)。结论:穴位贴敷防治支气管哮喘是一种行之有效的方法,随生白芥子比例增加3组患者皮肤反应逐渐加重,但并非皮肤反应越强疗效越显著,适度的皮肤反应即可达到良好的疗效。

白芥子涂方巴布剂与传统剂型抗豚鼠哮喘效应的比较

目的研究白芥子涂方巴布剂抗豚鼠哮喘的效应,并与传统剂型比较。方法以卵清蛋白形成豚鼠哮喘模型,采用现代药理方法,制成“白芥子涂方”巴布剂后,敷贴于豚鼠背部,分别观察其与传统剂型抗哮喘的效应。结果巴布剂可明显延长豚鼠诱导后哮喘潜伏期,明显减轻其哮喘发作程度,缩短哮喘持续时间,改善肺组织病理状态。但首次诱导哮喘发作潜伏期,传统剂型仍优于巴布剂。结论白芥子涂方巴布剂具有较好的预防和控制实验性哮喘发作,减轻其发作程度的效果。虽有必要在延长诱喘潜伏期方面再作研究,但因其在剂型方面有较大优越性,值得进一步研究推广与应用。

白芥子对蛇床子体外经皮渗透的影响

探讨白芥子促透皮吸收的物质基础.以蛇床子为研究对象,采用改良Franz扩散池,以离体Wistar大鼠背部皮肤为透皮模型,考察白芥子中白芥子碱、白芥子苷和黄酮、白芥子多糖、白芥子脂肪油、白芥子挥发油及不同促渗剂对蛇床子中蛇床子素体外经皮渗透的影响.结果表明,白芥子中挥发油和不同促渗剂均能促进蛇床子素经皮吸收,其作用强弱依次为5%薄荷油(17.842 9μg·cm-2·h-1)>5%冰片(17.004 2μg·cm-2·h-1)>5%氮酮(16.656 0μg·cm-2·h-1)>0.5%白芥子挥发油(16.610 1μg·cm-2·h-1).白芥子中挥发油对蛇床子中蛇床子素具有促透皮吸收作用,百分含量以0.5%为最佳.

生、烤芥子挥发油化学成分比较研究

目的:研究不同加工方法对芥子挥发油化学成分的影响。方法:采用水蒸气蒸馏法提取生芥子、烤芥子挥发油,运用毛细管气相色谱-质谱-数据系统联用方法对生芥子、烤芥子挥发油的化学成分进行了分析,用气相色谱面积归一法分别计算了各成分的相对含量。结果:生、烤芥子挥发油的主要化学成分基本相同,主成分为烯丙基异硫氰酸酯、4-异硫氰基-1-丁烯,生芥子挥发油含有更多的成分。结论:加工方法对芥子挥发油的成分有明显的影响,生芥子挥发油中检测到较多含量较低的含异硫氰基的物质。

正交试验法优选白芥子延胡索甘遂合并提取的工艺

目的测定芥子碱硫氰酸盐的含量,并优选白芥子与延胡索、甘遂合并提取的最佳工艺。方法采用正交试验法,以乙醇浓度(A)、溶剂用量(B)、提取时间(C)为考察因素,每个因素设立3个水平进行试验。结果因素A对芥子碱硫氰酸盐的含量有显著影响;而因素C和B则无显著性差异。结论最佳工艺为加药材总重8倍量的60%乙醇,回流提取2次,每次1h。

白细咳喘膏中芥子碱硫氰酸盐的含量测定

目的测定白细咳喘膏中芥子碱硫氰酸盐的含量,为制定该制剂的质量标准奠定基础。方法采用HPLC法,色谱柱:DIKMA inertsil(pH=3,5μm,250mm×4.6mm);以乙腈为流动相A,以3%醋酸溶液为流动相B,按比例进行梯度洗脱;检测波长:326nm;流速:1.0mL/min;柱温:室温。结果线性范围为0.8～4.0μg(r=0.9996,n=5),平均回收率100.83%,RSD=1.95%(n=5)。结论该法快速、简便,重现性和稳定性良好,可用于该制剂的质量控制。

气相色谱法测定白芥子挥发油中异硫氰酸烯丙酯的含量

目的采用气相色谱法测定白芥子挥发油中异硫氰酸烯丙酯的含量。方法采用水蒸气蒸馏法进行挥发油提取,通过气相色谱法测定异硫氰酸烯丙酯含量。色谱柱:RTX-5毛细管柱(30m×0.53mm×3.0μm);进样口温度:230℃;检测器温度:260℃;载气为高纯氮气,流速为3ml/min;进样方式为分流进样,分流比为10∶1;进样量:2μl。结果异硫氰酸烯丙酯在10～100μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 6);平均回收率为97.64%(RSD=2.39%)。结论本方法简单、灵敏、重复性好,可用于白芥子挥发油中异硫氰酸烯丙酯的含量测定。

杨树组织特异性强启动子的筛选

为了筛选到具有木质部组织特异性并有较强功能的启动子,将河北林木种质资源与森林保护重点实验室前期已获得的MDCes A启动子、JCes AP启动子、DMDCes AP启动子（含2个串联MDCes AP启动子）融合GUS报告基因的p MDCes AP-GUS、p JCes AP-GUS、p DMDCes AP-GUS这3个植物表达载体,通过农杆菌介导转化杨树,对转化后的杨树进行GUS活性的定性及荧光定量检测,以比较3个启动子在转基因植物中的表达能力和水平。筛选到的组织特异启动子与抗天牛基因融合,将提高毒蛋白在相应部位的表达量,这对天牛类蛀干害虫的防治具有重大意义。

中药外敷对哮喘豚鼠肺组织β和M受体含量的影响

目的观察豚鼠哮喘急性发作时肺组织β肾上腺素能受体和M胆碱能受体含量变化及中药外敷对其影响。方法用Hutson法造模和诱喘 ,治疗组予中药外敷 ,对照组予 0 .9%生理盐水浸润纱布外敷 ,2周后取肺组织 ,用放射配基结合分析法测定其中β受体和M受体含量。 结果豚鼠哮喘急性发作时肺组织β受体含量明显降低 ,M受体含量明显升高 ,而中药外敷能使其恢复正常。结论提高肺组织 β受体含量和降低M受体含量是中药外敷治疗哮喘的机理之一。

化痰法为指导的白芥子相关药组对肝纤维化大鼠VEGF、bFGF表达的影响

目的:对白芥子及其药组对实验性肝纤维化大鼠VEGF、b FGF、CoⅣ、LN的影响进行研究。方法:60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组、白芥子组、白芥子+丹参组、白芥子+黄芪组。除空白对照组外,其余各组均采用大鼠背部皮下注射50%CCl40.1 m L·100 g-1,2次·周-1,连续造模12周。阳性对照组、白芥子组、白芥子+丹参组、白芥子+黄芪组于造模的第7周开始给药,阳性对照组给予秋水仙碱0.4 mg·kg-1,白芥子组、白芥子+丹参组、白芥子+黄芪组的剂量分别为1.0 g·kg-1,共7周。采用放射免疫分析法检测肝组织匀浆CoⅣ、LN,免疫组织化学法检测各组大鼠肝组织VEGF、b FGF蛋白的表达。结果:模型组与正常组比较:CoⅣ、LN显著增高(P<0.01),VEGF、b FGF蛋白的表达显著增高(P<0.05);白芥子组、白芥子+丹参组、白芥子+黄芪组与模型组比较:CoⅣ、LN显著减低(P<0.05),VEGF、b FGF蛋白的表达显著减低(P<0.05)。结论:以化痰理论为指导的白芥子及其药物组合对肝纤维化大鼠有一定的防治作用,其机制可能与影响VEGF、b FGF蛋白的表达有关。

芥子碱的提取纯化及HPLC法含量测定

目的:从白芥子中提取纯化芥子碱硫氰酸盐,并测定其含量,为中药外用制剂提供高纯度的天然透皮吸收促进剂。方法:白芥子脱脂,用不同浓度乙醇提取、浓缩物加20%硫氰酸钾溶液析晶,用蒸馏水反复重结晶。采用高效液相色谱法测定含量。色谱柱:Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:2%醋酸-乙腈(15∶85),检测波长:326 nm,流速:1.0 m L/min,柱温:30℃。结果:用80%乙醇提取,蒸馏水和20%硫氰酸钾溶液比例为4∶1时,所得芥子碱呈浅黄色针状结晶,得率0.51%,含量95.70%。结论:采用本法提取纯化芥子碱,方法简单,纯度高,可为中药外用制剂选择天然透皮促进剂提供参考。

对羟基苯乙腈急性毒性及其镇咳祛痰作用研究

目的:考察对羟基苯乙腈的急性毒性及其镇咳、祛痰作用。方法:从炒白芥子中分离纯化对羟基苯乙腈。采用改良寇氏法确定小鼠灌胃给药的LD50。以25%的浓氨水诱发实验动物咳、痰,以实验动物的咳嗽潜伏期、2min内咳嗽次数、气管酚红排痰量为评价指标,观察对羟基苯乙腈的镇咳、祛痰作用。结果:对羟基苯乙腈的半数致死量为288.3 mg/kg。对羟基苯乙腈低、中、高剂量组实验动物的咳嗽潜伏期分别为(16.67±5.70)s、(20.17±4.93)s、(23.45±6.53)s,均长于阴性对照组实验动物的咳嗽潜伏期(14.53±3.86)s;与阳性对照组相比,组间差异不显著。对羟基苯乙腈低、中、高剂量组实验动物2min内咳嗽次数分别为(34.77±11.47)次、(24.95±7.46)次、(26.25±7.68)次,均少于阴性对照组(43.76±9.49)次,且与阳性对照组相比,组间差异不显著。低、中、高剂量对羟基苯乙腈均可提高痰液分泌量。结论:对羟基苯乙腈具有一定的毒性且镇咳、祛痰作用明显。

白芥子挥发油促进冬病夏治方经皮渗透研究

目的研究白芥子挥发油对冬病夏治方中多个有效成分的促进透皮吸收作用。方法采用体外透皮试验,以离体大鼠皮肤为透皮屏障,以冬病夏治方各中药中的有效成分延胡索乙素、细辛脂素、盐酸麻黄碱、黄芩苷作为模型药物,HPLC法测定各模型药物透过量,观察白芥子挥发油(0.5%、2%、5%)对各模型药物的经皮促渗透作用。结果白芥子挥发油浓度较低时(0.5%)对各模型药物无明显的促进经皮渗透作用,随着浓度的增大,白芥子挥发油(2%,5%)可显著促进有效成分延胡索乙素、细辛脂素、盐酸麻黄碱、黄芩苷经皮渗透吸收,且呈浓度依赖性,即浓度越大,促透效果越好。结论白芥子挥发油能促进冬病夏治方中有效成分延胡索乙素、细辛脂素、盐酸麻黄碱、黄芩苷经皮渗透吸收,白芥子作为处方中君药起到了治疗与促进药物渗透双重作用,从而达到增效的目的。