红豆杉愈伤组织中紫杉烷类成分sinenxan A的微生物转化研究

目的 研究紫杉烷类化合物sinenxanA的微生物转化情况。方法 分别利用两株真菌 (刺囊毛霉AS3 345 0、刺孢小克银汉霉AS 3 340 0 )和一株细菌 (普通变形菌AS 1 12 0 8)对sinenxanA进行生物转化。结果 得到 3个转化产物 ,分别为 10 去乙酰 sinenxanA1,6α 羟基 10 去乙酰sinenxanA2 ,9α 羟基 10 去乙酰sinenxanA3。 结论SinenxanA易被微生物转化 ,10位乙酰基化学性质比较活泼。

红豆杉愈伤组织中sinenxans高产细胞系的选择及其培养

目的：对国产红豆杉愈伤组织中的ｓｉｎｅｎｘａｎｓ高产细胞系进行选择及培养，为半合成类紫杉醇抗癌药提供充足的前体化合物。方法：红豆杉培养细胞采用平板培养及二分法继代培养，应用高效液相色谱法测定培养物中的ｓｉｎｅｎｘａｎｓ含量，选择出ｓｉｎｅｎｘａｎｓ高产细胞系并扩大培养。结果：Ｓｉｎｅｎｘａｎｓ的含量在不同种红豆杉的愈伤组织及同种不同无性系间存在明显的差异，并与培养物的色泽有一定的相关性；不同的培养基组成与培养方式对高产细胞系的生长有较大影响；获得了一个ｓｉｎｅｎｘａｎｓ高产细胞系Ｔｓ１９，其ｓｉｎｅｎｘａｎｓ含量达细胞干重的４．０％；在一个培养周期中，Ｔｓ１９组织培养物生长缓慢，ｓｉｎｅｎｘａｎｓ的含量在培养前期有所下降，而在培养后期可达到最高水平。结论：在一定的培养条件下，选择出的ｓｉｎｅｎｘａｎｓ高产细胞系的ｓｉｎｅｎｘａｎｓ含量稳定。

紫杉烷类化合物 SINENXAN A 的结构修饰及其衍生物的构效关系研究

为寻找新的综合性能好的紫杉烷类化合物，对ｓｉｎｅｎｘａｎＡ（ＳＩＡ）进行结构修饰。在ＳＩＡ及其修饰物的Ｃ１４位引入不同的的侧链，共合成新的紫杉醇类似物２１个，对其中的１５个化合物进行了３种癌细胞的体外抗肿瘤活性测定，这些化合物的活性与紫杉醇比较，相差甚远。本文初步讨论了ＳＩＡ衍生物的构效关系。

红豆杉组织培养中SINENXANS高产细胞系Ts19的几种同工酶动态比较研究

对从中国红豆杉的茎来源的愈伤组织经筛选而得的ｓｉｎｅｎｘａｎｓ高产细胞系Ｔｓ１９的过氧化物酶（ＰＯＤ）、酯酶（ＥＳＴ）、细胞色素氧化酶（ＣＯＤ）、淀粉酶（ＡＭＬ）、多酚氧化酶（ＰＰＯ）及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的同工酶，可溶性蛋白的含量及电泳谱带、超氧化物歧化酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）的活性作了比较研究。并与培养过程中ｓｉｎｅｎｘａｎｓ含量的动态变化相比较，探索了这几种同工酶的酶谱和两种酶活性与ｓｉｎｅｎｘａｎｓ的生物合成的关系。旨在为建立紫杉醇生物合成的中间代谢模型奠定基础。

Entry into Major Groups Retaining Taxol via Sinenxan A

Compound 1 as a key intermediate of 1, 7, 9-trideoxytaxol was synthesized in ten steps from a biosynthetically available taxane, Sinenxan A. The key steps in the synthesis were deoxygenation at C-14, allylic oxidation at C-13 and construction of the oxetane ring.

Chemistry of Taxoid Sinenxan A: (Ⅰ) Epimerization of the 14β-hydroxyl Group

Compound 2 with 14β-hydroxyl group was successfully converted into its epimerized α-counterpart via oxidation - reduction.The elimination product (6) was auto-oxidized to epoxide 8,even in the solid state

Reactivity of C-10 Function in Sinenxan A and Its Derivatives

The allylic nature of C-10 in sinenxan A (1) leads to facile SN1 and eliminion reactions

高效液相色谱法测定红豆杉组织培养物中SINENXANS的含量

报道了高效液相色谱法测定红豆杉组织培养物中ｓｉｎｅｎｘａｎｓ含量的方法，其操作简便，可快速、准确地进行样品测定．样品以石油醚（６０～９０℃）—丙酮（５２０）提取后，用Ｓｅｐ－ＰａｋＣ１８进行柱前预处理．采用ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ１８柱，以甲醇—乙腈—水（６５１５２０）为流动相，流速１．０ｍＬ／ｍｉｎ，于２２７ｎｍ处进行检测．被检测成分的色谱峰分离完全，方法线性良好．

10位结构修饰14β-侧链紫杉醇衍生物的合成及其抗肿瘤活性

为了寻找高效低毒、抗瘤谱广、综合性能好又不依赖自然资源的新一代紫杉醇类抗癌药 ,以组织培养得到的紫杉烷sinenxanA为最初起始原料 ,以紫杉烷中间体 (3)和 (16 )为合成原料合成了 10位为羰基、羟基、甲氧基乙酸酯、苄氧基乙酸酯、羟乙酸酯等共 6个新的 14β 侧链紫杉醇衍生物 .并对目标化合物进行了抗肿瘤体外试验和微管蛋白聚合试验 .结果表明所有化合物对KB细胞的IC50 >10 μg ,在浓度为 10～ 5 μmol/L时对微管蛋白无聚合作用 .说明分子的 10位结构修饰对活性无明显影响 .

紫杉烷类多药耐药逆转剂的合成及其逆转耐药活性

目的 设计合成一系列新型紫杉烷类化合物并进行逆转多药耐药肿瘤细胞耐药活性的筛选。方法 以本所生物合成的紫杉烷 ,SinenxanA为原料 ,合成了 1 0个 (I1～ 7,II1 ,2 ,III)新的紫杉烷类化合物 ,其结构经FABMS ,2DNMR确证 ,并对多药耐药癌细胞进行了逆转耐药性的试验。结果 9个 (I2～ 7,II1 ,2 ,III)化合物对多药耐药的人口腔上皮癌细胞KB V2 0 0 ,能够显著逆转其耐药性 ,增强抗癌药的活性 ,其中化合物I2 ,I3 ,I4逆转活性明显好于已知对照药Verapamil。结论 紫杉烷类化合物作为多药耐药逆转剂有较好的逆转耐药活性 。

14β-侧链紫杉醇衍生物的合成及抗肿瘤活性

为了寻找高效低毒、抗瘤谱广、综合性能好又不依赖自然资源的新一代紫杉醇类抗癌药 ,以组织培养得到的紫杉烷 sinenxan A为最初起始原料 ,以中间体 6为本文合成原料分别经 5步和 6步合成了两个新的 14β-侧链紫杉醇衍生物 ,并首次观察到紫杉烷的 10位羰基 / 9位羟基在硅胶中转变为 10位羟基 / 9位羰基。将目标化合物进行了抗肿瘤体外试验和微管聚合试验。结果表明 ,这两个化合物对 KB细胞的 IC50 >10 μg,在浓度为 10 μM时对微管无聚合作用。

紫杉醇类似物的合成及抗肿瘤活性

ＳｉｎｅｎｘａｎＡ（ＳＩＡ）为生物合成法得到的新紫杉烷化合物。为寻找有抗肿瘤活性的新型ｔａｘｏｌ类似物，对ＳＩＡ进行结构修饰。设计合成了１０个化合物，在母核中引入四氢呋喃环，在１４β位或１０β位连接ｔａｘｏｌ／ｔａｘｏｔｅｒｅ侧链，部分化合物显示一定的抗肿瘤活性。