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单链莫奈林基因表达载体的构建及其分泌表达
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作者 袁汉英 艾华水 +3 位作者 范长胜 高卜渝 黄路生 李育阳 《复旦学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期536-540,共5页
根据甜蛋白莫奈林的氨基酸序列,选择酵母偏爱密码子,化学合成单链莫奈林(Single ChainMonellin,SCM)基因片段,并拼接成全基因.基因的DNA序列分析表明,合成的单链莫奈林基因与设计的一致.该基因插入于毕赤氏酵母整合型质粒pPIC9K中置于A... 根据甜蛋白莫奈林的氨基酸序列,选择酵母偏爱密码子,化学合成单链莫奈林(Single ChainMonellin,SCM)基因片段,并拼接成全基因.基因的DNA序列分析表明,合成的单链莫奈林基因与设计的一致.该基因插入于毕赤氏酵母整合型质粒pPIC9K中置于AOXI启动子的控制下,并通过电转化技术将重组质粒pPIC9K/SCM导入Pichiapastoris,在含有G418的YEPD平板上筛选整合型的多拷贝的转化子.转化子在BMMY培养基中经甲醇诱导表达,用SDS PAGE检测发酵液,表明SCM的分泌表达蛋白可达发酵液蛋白含量的90%. 展开更多
关键词 单链莫奈林基因 毕赤氏酵母 分泌表达
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