秋水仙碱诱导重瓣大岩桐(Sinningia speciosa)多倍体的研究

以重瓣大岩桐叶片为外植体，经秋水仙碱处理得到大量的多倍体植株。在培养基中加入秋水仙碱20mgL-1处理一周，可使重瓣大岩桐的诱变率达到62．5％．对再生植株进行形态学观察表明，多倍体植株比二倍体的茎粗壮，叶片增大，加厚。细胞学鉴定四倍体染色体数为2n＝4x＝52而二倍体的染色体数为2n＝26形态学观察和细胞学观察有很好的符合性。对多倍体植株进行过氧化物同工酶分析表明，多倍体植株的同工酶酶谱与二倍体有很大的差异，在四倍体的酶谱中观察到了两条新谱带。

观赏植物大岩桐(Sinningia speciosa)组织培养体系的建立和优化

实验探索了热带观赏植物大岩桐离体快繁的有效途径,以大岩桐叶片作为外植体,建立再生体系。各阶段的最佳培养基配比结果如下:初代培养基:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L;壮苗培养基:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.8 mg/L;生根培养基:1/2MS,得到的组培苗经炼苗移栽后成活率高达100%。该体系的建立为其规模化生产及遗传改良提供了前提条件。

赤霉素对大岩桐花蕾离体培养直接再生花芽的影响(简报)

植物经过一定时期的营养生长(或感受外界信号)后,就能产生成花刺激物.成花刺激物被运输到茎尖,诱导发生一系列的反应.随后其分生组织在一定时期内处于一个相对稳定的状态,即成花决定态.

大岩桐快繁体系优化研究

以大岩桐种子无菌萌发获得无菌苗为试材,进行大岩桐快繁体系建立的研究.结果表明:MS+BA 2.0 mg/L是诱导愈伤组织和丛芽形成的合适培养基;MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L是继代增殖的最佳培养基,增殖系数达4.7;诱导生根培养基1/2MS+IBA 0.4 mg/L,生根率达100%,且根系健壮;在腐质土∶椰糠∶珍珠岩=1∶1∶2的混合基质上,生根苗有98%的成活率,移栽苗的生长状况最好,是大岩桐试管苗移栽的合适基质.

大岩桐试管结球的初步研究

对大岩桐试管结球技术进行了初步研究。结果表明 ,蔗糖浓度、活性炭 (AC)以及不同的培养方式对大岩桐试管结球具有明显影响 ,其中 ,5 %蔗糖浓度、1 .5

大岩桐组织培养与快速繁殖

以大岩桐无菌苗为试材,进行增殖培养。经试验筛选出此阶段最适合的培养基,试管苗增殖最佳培养基为:MS+2.0 mg/L BA+0.62 mg/LNAA。实验表明,添加番茄汁抑制了试管苗增殖,添加活性炭抑制了试管苗的增殖和生长。

大岩桐花萼切块离体培养直接再生花芽的形态观察(简报)

The morphological changes in the cultures of sepal segments in Sinningia speciosa Hiern were observed with Zeiss Stemi 2000-C Stereomicroscope from 0 to 65 days after culture in vitro. The light yellow globular protuberances were observed on the cut edge and the surface of sepal segments after culture for 24 days. Then the globular protuberances grew bigger gradually. A lot of floral buds on the surface of sepal segments formed after culture for 60 days. The morphological changes in the cultures of sepal segments were studied with light microscopy after culture for 0 to 30 days as well. The cells of tissues of sepal segments arranged regularly and no dividing cell was observed on the first day culture. There appeared some small meristematic centers of dividing cells on cut edge and the lower epidermis on the 7th day after culture. To the 20th day culture in vitro, the floral organ primordia were differentiated on the cut edge. On the 30th day culture, floral buds with petal, stamen primordia were observed. In addition, the morphological changes in the cultures of sepal segment were studied during the 14 to 30 days culture with scanning microscopy as well.

重瓣紫蓝大岩桐组培苗的花同源异型现象(简报)

由于花同源异型突变体可作为研究花形态建成的分子遗传分析模式系统,近十几年来,人们对于花同源异型基因的分离、鉴定[1]及转化均产生了很大兴趣[2],并对花器官特征决定基因的功能提出了"ABC"控制模型[3,4]和"异时性"(heterochrony)假说[5,6].

大岩桐SPY同源基因的克隆及其功能分析

以大岩桐幼叶为材料,利用RACE技术克隆到SPY基因的全长cDNA,命名为SsSPY(Genbank:ACF96937)。序列分析表明,SsSPY包含一个完整的ORF,长度为2805bp,编码934个氨基酸;含有SPY基因所共有的TPR保守结构域。通过蛋白序列比对,发现SsSPY与矮牵牛的PhSPY有82%的同源性,与拟南芥的SPY有81%的同源性,与大麦的HvSPY有74%的同源性。将SsSPY置于CaMV35S启动子控制下在烟草中异位表达,转基因烟草表现出株高、花芽数、分枝数显著增加,节间变长等新表型,表明SsSPY参与了转基因烟草株形的发育及花芽的分化。

大岩桐的组培快繁及其产业化技术研究

以大岩桐叶为外植体,进行丛生芽和生根诱导试验,以期建立大岩桐产业化组培快繁的工艺流程和最佳培养方式。结果表明:丛生芽增殖最佳培养基为6-BA 1.5 mg/L+NAA0.05 mg/L,增殖倍数达6.67倍,在珍珠岩、蛭石、河砂组成混合的介质中完成诱导生根、壮苗和练苗,生根率达96%,移栽后成活率达90%以上。

大岩桐叶片组织培养及其组织学观察

大岩桐盆栽植株叶片进行培养,成功获得了再生植株,对其组织培养过程的组织学观察,表明MS培养基上附加不同浓度的NAA和BA对愈伤组织的形成影响不大,但对不定芽的分化有较大影响,得出最佳培养基组合为MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L。山沙+土(1∶1)可促进小苗后期生长,加速成苗。

重瓣大岩桐离体培养的两种途径

以大岩桐的茎段、叶片、茎尖为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的激素组合进行离体培养研究。结果表明：适宜外植体灭菌的方法为先用75%的乙醇表面消毒10 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌4~5 min,或者先用75%的乙醇表面消毒5 s后再用0.1%Hg Cl2灭菌6 min。3种外植体均可获得组培苗,叶片通过愈伤组织诱导途径可获得组培小苗;茎段和茎尖通过不定芽途径可获得组培小苗。最适宜的愈伤分化培养基为MS＋6-BA 0.50 mg/L＋IBA 1.00 mg/L,适宜的不定芽增殖培养基为MS＋6-BA 0.50 mg/L或者MS＋6-BA 0.50 mg/L＋IBA 1.00 mg/L,适宜的生根培养基为MS＋IBA1.00^2.00 mg/L,降低蔗糖含量有利于生根。MS＋IBA 2.00 mg/L＋AC 0.10 g/L有利于生根培养。

植物激素对大岩桐愈伤组织诱导和芽分化增殖的影响

以大岩桐(Sinningia specioca)的幼嫩茎、叶片为外植体,通过正交实验的方法探讨不同浓度和比例的植物激素对愈伤组织诱导和芽分化增殖的影响。实验结果表明:大岩桐愈伤组织的形成最佳激素组合为2,4二-氯苯氧乙酸2.0 mg/L+6苄-基嘌呤0.1 mg/L+萘乙酸0.3 mg/L;芽分化的最佳激素组合为6苄-基嘌呤0.5mg/L+萘乙酸0.1 mg/L。

影响大岩桐试管块茎形成的若干因素

对大岩桐试管块茎形成的若干因素进行了研究,结果表明,外植体类型、碳源种类、光照条件以及BA浓度对大岩桐试管块茎形成具有明显影响,以叶为外植体比项芽更有利于块茎的形成;食用白糖可代替蔗糖促进块茎的形成,从而可以大大降低生产成本;全光照条件更有利于块茎的形成;而BA则会抑制大岩桐试管块茎的形成。

大岩桐的试管生根诱导与移栽技术研究

为了给大岩桐产业化开发提供理论依据和技术支撑,以无菌苗大岩桐的分化芽为试材,用IBA浓度分别为0 mg/L、0.2 mg/L0、.4 mg/L0、.6 mg/L的1/2 MS培养基进行生根诱导比较。生根苗经过炼苗处理后,栽植于6种不同的混合基质中,比较生根苗的成活率。结果显示:当IBA浓度为0.4 mg/L时,大岩桐的生根率达100%,且根系健康粗壮;混合基质按腐质土∶椰糠∶珍珠岩=1∶1∶2进行配比,生根苗有98%的成活率,移栽苗的生长状况最好,是大岩桐试管苗移栽的合适基质。

大岩桐叶片培养再生植株的研究

以大岩桐（ＳｉｎｎｉｇｉａｓｐｅｃｉｏｓａＢｅｎｔｈ．ｅｔＨｏｏｋ）叶片为试材，接种于ＭＳ附加不同激素组合的培养基上，成功地经愈伤组织亚球状体至不定芽途径形成大量再生植株并移栽成活。在各种细胞分裂素中，６－苄基嘌呤（ＢＡ）的效果优于激动素（ＫＴ）。生长素萘乙酸（ＮＡＡ）与ＢＡ及ＫＴ配合使用时愈伤组织诱导、球状体分化及不定芽增殖均有明显的增效作用。其最适宜的培养基组成为：ＭＳ＋ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ在这个培养基上，愈伤组织诱导率为９４％，球状体分化率为１８８％，不定芽在口周内增殖５倍。最适宜的生极培养基为：ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ，生根率在９０％以上，试管苗移栽成活率在８０％以上。

连续组织培养引起大岩桐再生植株的表型变化

将大岩桐叶片外植体接种于含有BA 2.0 mg.L-1和NAA 0.2 mg.L-1的MS培养基上,建立了大岩桐的高效离体再生体系。在经过连续5代的组织培养以后,20.94%的大岩桐再生植株出现了体细胞无性系变异;包括轮生叶序、叶缘缺刻、叶柄上着生两个叶片、叶片上产生异源突起和花的同源异型现象等。这些表型出现的频率分别为3.72%、6.98%、1.40%、7.91%和0.93%。扫描电镜的结果显示,体细胞无性系变异叶片表面产生了异源分生组织。

培养基组成对大岩桐继代培养和腋芽增殖的影响

为了优化大岩桐组培快繁条件,以其组培苗为试验材料,研究了不同浓度MS培养基中无机盐大量成分、蔗糖、琼脂、6-BA对继代培养和腋芽增殖生长的影响。结果表明:MS无机盐大量成分和蔗糖浓度对继代培养的组培苗的鲜重、株高、根长具有显著影响;6-BA对腋芽再生增殖倍数影响极显著,MS培养基使用1/2浓度的无机盐大量成分,添加40 g/L蔗糖、6.0 g/L琼脂配合0.2 mg/L 6-BA可以取得较好的继代培养和腋芽增殖效果。

大岩桐腋芽丛生的诱导及植株再生

用大岩桐茎段为外植体,以MS为基本培养基,对添加不同浓度和比例的外源激素对大岩桐腋芽丛生的诱导、增殖及植株再生的影响进行探讨。结果表明:腋芽丛生诱导培养基以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L效果最佳;腋芽增殖培养基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L效果最佳;生根培养基以1/2 MS+NAA 0.2 mg/L效果最佳。

大岩桐的繁殖方法

对大岩桐的有性及无性繁殖做了一些实验 ,有性繁殖以紫红色单瓣品种为实验材料。单瓣大岩桐在自然条件下很少结实 ,但经人工授粉后座果率可达 1 0 0 % ;无性繁殖在上扦插有两点突破 ,一是用同一个叶柄扦插 2～ 3次 ,得到 2～ 3棵苗 ,二是用花柄扦插也有成活的 ,成苗率 2 0 %左右。