转化生长因子-β1及Sirt1/2参与高血压诱导的血管平滑肌细胞缝隙连接蛋白-43的表达及细胞增殖

为探讨转化生长因子-β1及组蛋白去乙酰化酶Sirt1和Sirt2在高血压诱导的血管平滑肌细胞缝隙连接蛋白-43表达及细胞增殖中的作用,研究了腹主动脉窄缩诱导高血压大鼠和正常大鼠胸主动脉转化生长因子-β1、缝隙连接蛋白-43、Sirt1和Sirt2,以及细胞增殖标志蛋白增殖细胞核抗原表达的变化;观察Sirt1和Sirt2在转化生长因子-β1刺激大鼠VSMCs缝隙连接蛋白-43的表达及细胞增殖中的作用。结果显示,高血压大鼠胸主动脉的转化生长因子-β1、缝隙连接蛋白-43、TGF-β1、Sirt1和Sirt2的表达及细胞增殖较正常大鼠均明显升高;转化生长因子-β1促进了大鼠血管平滑肌细胞缝隙连接蛋白-43的表达和增殖,Sirt1与Sirt2的抑制剂Salermide有效抑制了转化生长因子-β1诱导的血管平滑肌细胞缝隙连接蛋白-43的表达与细胞增殖。结果表明,高血压通过上调转化生长因子-β1来诱导VSMCs缝隙连接蛋白-43的表达和细胞增殖,而Sirt1和Sirt2可能在其中起调控作用。

探讨血清外泌体miRNA-132及SIRT1在2型糖尿病伴轻度认知障碍中的诊断价值

目的本研究旨在探索血清外泌体miRNA-132及沉默信息调节因子1(SIRT1)在2型糖尿病(T2DM)伴轻度认知障碍(MCI)患者中的表达水平,以及作为诊断T2DM伴MCI的诊断价值。方法本实验选取泰州市人民医院内分泌科60例2型糖尿病患者,其中认知正常组(T2DM+NCI)30例,轻度认知障碍组(T2DM+MCI)30例,检测血清外泌体miRNA-132及SIRT1的表达水平。结果与T2DM+NCI组相比,T2DM+MCI组患者中性别、年龄、受教育程度、LPA有差异性,具有统计学意义(P<0.05);且血清外泌体miRNA-132、血清SIRT1表达水平降低,亦具有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线显示血清外泌体miRNA-132在单独检测时,其灵敏度为0.933,特异度为0.5,曲线下面积(AUC)为0.727。血清SIRT1在单独检测时,灵敏度为0.433,特异度为1,曲线下面积(AUC)为0.673。两者联合检测时,灵敏度为0.867,特异度为0.6,曲线下面积(AUC)为0.752。结论与T2DM+NCI组相比,T2DM+MCI组患者中miRNA-132、SIRT1表达水平同向降低。血清外泌体miRNA-132及血清SIRT1对诊断T2DM伴轻度认知障碍具有一定的意义,二者联合检测时诊断价值更高。

miR-204通过下调Bcl-2和Sirt1表达抑制肝癌细胞生长

目的探讨微小RNA 204(miR-204)在肝细胞癌中的表达、临床意义及可能分子机制。方法收集手术切除的60例肝细胞癌及对应癌旁肝组织,实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-204在肝癌及癌旁组织中的表达,免疫组织化学染色检测miR-204下游潜在靶点Bcl-2与组蛋白脱乙酰酶1(Sirt1)的表达;用人工合成的miR-204模拟物转染人SMMC-7721肝癌细胞,MTT法及流式细胞术检测SMMC-7721细胞的增殖、凋亡的情况,qRT-PCR、Western blot法分别检测Bcl-2与Sirt1的mRNA和蛋白表达。结果 miR-204在肝癌组织中表达水平显著低于对应癌旁组织;肝癌组织中miR-204低表达与肿瘤大小、肿瘤个数、肿瘤TNM分期显著相关;miR-204低表达组Bcl-2与Sirt1蛋白表达显著高于miR-204高表达组,相关性分析结果显示肝癌组织中miR-204与Bcl-2、Sirt1蛋白表达呈显著负相关;miR-204可显著抑制SMMC-7721细胞的增殖并促进其凋亡,并下调Bcl-2与Sirt1的mRNA与蛋白表达水平。结论 miR-204在肝癌组织中表达下调并与肝癌恶性临床病理特征有关,miR-204抑制肝癌细胞增殖、促进其凋亡的作用可能与下调Bcl-2和Sirt1表达有关。

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠肝脏SIRT1、UCP2表达的变化

目的观察2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠肝脏沉默调节蛋白1(SIRT1)、线粒体脱偶连蛋白2(UCP2)表达的情况,探讨T2DM合并NAFLD的可能发病机制。方法雄性SD大鼠24只,随机分为正常对照组(NC组,12只)和T2DM合并NAFLD模型组(MC组,12只)。NC组喂以常规饲料,MC组喂以高脂高糖饲料。12周末隔夜空腹给予MC组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(30 mg/kg)1次,破坏部分胰岛,NC组注射相应体积的柠檬酸缓冲液。14周末测定两组大鼠体质量、空腹血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、游离脂肪酸、空腹胰岛素、计算胰岛素抵抗指数,并观察肝脏组织的病理变化,免疫组化法及Real-time PCR法测定肝脏组织中SIRT1、UCP2的表达情况。结果 14周时MC组大鼠空腹血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、极低密度脂蛋白、游离脂肪酸、空腹胰岛素、计算胰岛素抵抗指数均较NC组大鼠升高(P<0.05),高密度脂蛋白较NC组减低(P<0.05)。病理组织学结果表明NC组大鼠肝组织结构完整,肝细胞排列紧密成肝索,细胞质丰富,细胞核圆形;MC组大鼠肝细胞高度气球样变,胞质中有大量脂滴空泡,肝组织均可见中至重度脂肪肝。在免疫组化和mRNA水平上表明,MC组肝脏SIRT1表达较NC组明显降低(P<0.05),而UCP2表达较NC组明显升高(P<0.05)。结论在T2DM合并NAFLD大鼠肝脏组织中SIRT1表达显著降低,UCP2表达显著升高。

运动训练和白藜芦醇改善2型糖尿病大鼠脂代谢异常的SIRT1机制研究

目的研究7周游泳训练和/或白藜芦醇(Rv)干预对2型糖尿病(T2DM)大鼠脂肪组织SIRT1表达的影响,探讨SIRT1在运动训练和/或Rv干预对T2DM脂代谢影响中的作用。方法 96只雄性SD大鼠随机分为基础饲料(NC)喂养的正常对照组、正常运动组、正常Rv组、正常运动Rv组、T2DM组、T2DM运动组、T2DM Rv组、T2DM运动Rv组和高脂饲料(HF)喂养的T2DM组、T2DM运动组、T2DM Rv组、T2DM运动Rv组,每组8只。7周干预后,测定血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、FFA和内脏脂肪SIRT1、PPARγ、aP2的表达量。结果 (1)较正常对照组,T2DM大鼠TG、TC、LDL-C和FFA均显著升高(P<0.05或P<0.01),HF组TC、FFA含量均高于NC组(P<0.05);T2DM大鼠内脏脂肪组织SIRT1、PPARγ和aP2表达显著降低(P<0.01),两饲料干预组间无显著差异(P>0.05);(2)7周单独或共同干预均降低NC喂养T2DM大鼠血清TG(P<0.05)、TC(P<0.05)和LDL-C(P<0.01)含量,降低HF喂养T2DM大鼠血清TC(P<0.05)、LDL-C(P<0.01)和FFA(P<0.05)的含量,共同干预较单独干预无显著差异(P>0.05);(3)7周单独或共同干预均导致正常大鼠和T2DM大鼠内脏脂肪组织SIRT1和aP2表达升高(P<0.01),共同干预较单独干预无显著差异(P>0.05);但单独或共同干预对正常大鼠内脏脂肪组织PPARγ表达无显著影响(P>0.05),却促进了T2DM大鼠PPARγ表达增加(P<0.01),共同干预较单独干预无显著差异。结论高脂饮食加剧了T2DM大鼠脂代谢异常程度,7周游泳训练和/或RV能改善T2DM大鼠脂代谢异常,共同干预较单独干预无显著差异。可能通过促进PPARγ和aP2的表达改善了T2DM大鼠脂代谢异常,内脏脂肪组织SIRT1表达升高可能起着关键调节作用。

2型糖尿病大鼠心肌PI3K/Akt/mTOR信号通路的改变及Sirt1的调控机制研究

目的检测Sirt1及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白在糖尿病大鼠心肌及高糖培养的H9C2细胞中的表达变化,明确其在糖尿病心肌病发生发展中的作用。方法高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为糖尿病2周、4周、8周模型组和对照组,超声心动图检测大鼠心功能变化,Western blot检测大鼠心肌Sirt1、PI3K、Akt、mTOR、S6K1蛋白表达变化。将H9C2细胞分为正常对照组、DMSO组(78.12 mmol·L^(-1))、高糖(HG)组(33 mmol·L^(-1))、白藜芦醇(Res)组(20μmol·L^(-1))、尼克酰胺(Nam)组(40 mmol·L^(-1)),Western blot及qRT-PCR研究心肌细胞Sirt1、PI3K、Akt、mTOR、S6K1相关蛋白基因转录及表达,研究Sirt1对该信号通路的调控机制。结果在动物实验中,与2周DM大鼠比较,8周DM大鼠心肌Sirt1蛋白表达明显增加。2周模型组大鼠相对于正常对照组心肌PI3K、Akt、mTOR、S6K1表达明显增加,且S6K1表达4周模型组比2周模型组增加更明显,但8周表达降低。在高糖培养的H9C2细胞中,与对照组相比,高糖组Sirt1,PI3K,Akt,mTOR和S6K1表达明显增高。Nam处理组Sirt1表达明显降低,PI3K,Akt,mTOR和S6K1表达增高。Res处理组Sirt1表达明显增高,而PI3K,Akt,mTOR和S6K1表达降低。结论 Sirt1通过负调控PI3K/Akt/mTOR信号通路参与糖尿病心肌损伤,参与早期糖尿病心肌病的发生发展。

SIRT1通过AKT通路和ERK1/2通路共同调节退变髓核细胞细胞外基质的合成

目的研究沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1/sirtuin 1)对已退变的人椎间盘髓核细胞(DNPCs)合成细胞外基质的影响。方法对人DNPCs进行分离、培养及其细胞鉴定,第一部分取P2代细胞用白藜芦醇(RES,SIRT1激动剂)、二甲双胍(MET,SIRT1激动剂)、尼克酰胺(NAM,SIRT1抑制剂)、SIRT1-siRNA进行相应处理,采用Western印迹检测Ⅱ型胶原(COLLA2α1)、聚蛋白多糖(Aggrecan)及其p-AKT、t-AKT、p-ERK1/2、t-EKR1/2。第二部分先RES与P2代细胞共培养后分别加入PI3K与ERK的特异性抑制剂LY294002、PD98059,观察COLLA2α1、Aggrecan的表达情况。结果用SIRT1激动剂刺激以后COLLA2α1、Aggrecan的表达显著提高,AKT及其ERK1/2的磷酸化水平也相应提高,用NAM及其SIRT1-siRNA处理后COLLA2α1、Aggrecan的表达显著降低,AKT及其ERK1/2的磷酸化水平也显著降低。用LY294002和PD98059分别处理后观察到COLLA2α1、Aggrecan的表达亦显著降低。结论 SIRT1可通过AKT及其ERK1/2两条通路上调人DNPCs细胞外基质的表达,抑制椎间盘的变性,为进一步研究椎间盘退变的机制、组织工程学、基因治疗等奠定了基础。

橙皮苷通过SIRT1/Nrf2/HO-1信号通路改善2型糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤的机制研究

目的:观察橙皮苷对2型糖尿病心肌缺血/再灌注损伤的保护作用及其对SIRT1/Nrf2/HO-1信号通路的影响。方法:SD大鼠空白组、模型组、缺血再灌注组、橙皮苷组、SIRT1抑制剂组和橙皮苷+SIRT1抑制剂组,每组10只。除空白组外,余下各组大鼠均通过高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射复制2型糖尿病大鼠模型。随后采用左冠状动脉前降支结扎30 min和再灌注2 h构建心肌缺血/再灌注损伤模型。分别通过HE染色检测各组da鼠心肌组织病理形态的改变,试剂盒法检测血清LDH、CK-MB和心肌组织中SOD、GSH、MDA的水平,免疫组化和Western blot法检测心肌组织中4-HNE和SIRT1/Nrf2/HO-1信号通路中相关蛋白的表达丰度。结果:与缺血再灌注组大鼠相比,橙皮苷能够显著抑制心肌细胞坏死和炎症细胞浸润,降低LDH活性、CK-MB和MDA的水平,增加SOD活性、GSH含量和4-HNE蛋白的表达水平,差异均具有统计学意义(P<0.01)。此外,与缺血再灌注组相比,橙皮苷组SIRT1、Nrf2和HO-1蛋白的表达均显著上调,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:橙皮苷通过激活SIRT1/Nrf2/HO-1信号通路抑制氧化应激,改善糖尿病心肌缺血再灌注损伤。

SIRT1激活ERK1/2通路抑制大鼠心肌缺血再灌注时内质网应激相关蛋白的表达

目的研究大鼠心肌缺血再灌注时沉默信息调节因子1(SIRT1)对心肌内质网应激相关凋亡的影响及其与ERK1/2信号通路的关系。方法将大鼠随机分为6组:假手术组、缺血再灌注组、白藜芦醇+缺血再灌注组、白藜芦醇+EX527+缺血再灌注组、白藜芦醇+PD98059+缺血再灌注组、PD98059+缺血再灌注组,每组12只。结扎大鼠冠状动脉左前降支建立大鼠心肌I/R损伤模型。TUNEL法检测心肌细胞凋亡;比色法检测LDH、CK-MB活性。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测心肌GRP78、caspase-12和CHOP mRNA的表达;Western印迹检测SIRTl、caspase-12、CHOP、磷酸化ERK1/2和总ERK1/2蛋白的表达。结果 Res+I/R组与I/R组相比,心肌凋亡指数降低(P<0.05),血清LDH及CK-MB活性降低,内质网应激相关凋亡的指标GRP78、caspase-12及CHOP的蛋白表达量和mRNA均降低(P<0.05);给予SIRT1抑制剂后与Res+I/R组相比,以上指标升高;Res+I/R组与I/R组相比,SIRT1及磷酸化ERK1/2蛋白的表达量均增加(P<0.05);而Res+EX+I/R组与Res+I/R组相比,SIRT1、磷酸化ERK1/2蛋白的表达量又降低(P<0.05)。结论 SIRT1能够抑制大鼠在体缺血再灌注心肌的内质网应激凋亡相关蛋白表达,发挥保护心肌的作用,其机制可能与ERK1/2通路激活有关。

越鞠甘麦大枣汤对产后抑郁小鼠海马SIRT1-ERK1/2信号通路的影响

目的探讨越鞠甘麦大枣汤对产后抑郁症(PPD)小鼠的抗抑郁作用及其对小鼠海马SIRT1-ERK1/2信号通路的影响。方法 40只雌性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组、艾司西酞普兰组和越鞠甘麦大枣汤组,每组10只。除对照组外,各组小鼠均接受束缚刺激6周。对照组和应激小鼠均与正常雄性Balb/C小鼠合笼交配,小鼠分娩3周后,给药2周观察药效,蛋白免疫印迹检测小鼠海马SIRT1、ERK1/2、P-ERK1/2、P90RSK及CREB的表达。结果与对照组相比,模型组小鼠糖水偏好下降(P <0.05),强迫游泳不动时间增加(P <0.01),体质量降低(P <0.05)。越鞠甘麦大枣汤和艾司西酞普兰均增加小鼠糖水偏好(均P <0.05),降低小鼠强迫游泳不动时间(均P <0.05)。分子水平上,与对照组相比,模型组小鼠海马SIRT1、P-ERK/ERK、P90RSK、CREB等蛋白的表达降低(均P <0.05);越鞠甘麦大枣汤和艾司西酞普兰均增加小鼠海马SIRT1、P-ERK/ERK、P90RSK、CERB等蛋白的表达(均P <0.05)。结论越鞠甘麦大枣汤能改善PPD小鼠的抑郁样行为,可能与其上调小鼠海马SIRT1-ERK1/2信号通路有关。

2型糖尿病大鼠主动脉Wnt/β-catenin信号通路的变化及SIRT1的调节作用

目的检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白及沉默信息调节因子(SIRT1)在2型糖尿病大鼠主动脉中的表达变化,探究SIRT1对Wnt/β-catenin信号通路的调节作用,明确二者在糖尿病主动脉病变发生发展中的作用。方法高脂饮食联合链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,实验将大鼠分为空白对照组、糖尿病2、4、8和12周模型组,血清检测空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),空腹胰岛素(FINS),HE染色法观察主动脉病理结构变化,RT-PCR法和Western blot法检测主动脉Wnt2、β-catenin、TCF4、SIRT1和s FRP2等相关蛋白基因转录及表达变化。结果与正常组比较,2型糖尿病大鼠TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低,随着时间延长,糖尿病大鼠各时间点模型组与2周模型组相比较,TC、TG、LDL-C水平升高越来越明显,HDL-C水平降低更明显,差异均具有显著性(P<0.01);显微镜下糖尿病组大鼠主动脉可见不同程度局灶性内皮细胞空泡变性、甚至坏死。糖尿病组大鼠相对于正常对照组主动脉Wnt2和β-catenin的表达在2周及4周明显增加(P<0.01),4周后维持在较高水平;而TCF4、SIRT1的表达与正常对照组相比表现为持续的增加(P<0.01);s FRP2的表达在持续的降低(P<0.01)。结论 2型糖尿病大鼠主动脉病变发生发展过程中,SIRT1通过调节s FRP2的表达来调控Wnt/β-catenin信号通路的激活,参与糖尿病主动脉损伤的发生发展过程,进一步研究其在糖尿病主动脉损伤中的作用机制可能为糖尿病主动脉病找到新的治疗靶点。

葛根素通过SIRT1/PGC-1α信号通路对2型糖尿病小鼠胰腺线粒体的氧化应激损伤保护作用的研究

目的研究葛根素(puerarin,PR)通过SIRT1/PGC-1α信号通路对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)小鼠胰腺线粒体氧化应激损伤的作用。方法以链脲佐菌素与高脂高糖饮食构建T2DM小鼠模型。将模型小鼠随机分成模型、二甲双胍(40 mg·kg-1·d-1)、PR(20、40、80 mg·kg-1·d-1)组,连续灌胃给药8周,每日1次。末次给药后,血糖仪检测FBG。HE染色观察胰腺病理学变化。试剂盒检测法检测胰腺的·OH、ROS、ATP含量、Mn-SOD、CAT、ComplexⅠ、Ⅲ、Ⅳ的活性。Western blot法检测胰腺的NRF1、TFAM、Mfn1、OPA1的表达。RT-PCR法检测SIRT1、PGC-1α mRNA在胰腺中的表达。结果与模型组相比,PR干预组的FBG含量下降(P <0.05),胰岛形态好转,胰腺中CAT、Mn-SOD、ComplexⅠ、Ⅲ、Ⅳ活性增加,ATP含量增多,·OH、ROS的含量减少(P <0.05)。NRF1、TFAM、Mfn1、OPA1蛋白及SIRT1、PGC-1αmR NA的表达升高(P <0.05)。结论PR可使T2DM小鼠FBG及ROS下降,其作用机理可能为PR调控SIRT1/PGC-1α信号通路,达到对胰腺组织的保护作用。

能量代谢分子SIRT1在运动改善2型糖尿病骨代谢中的作用机制

背景:能量代谢调控2型糖尿病骨代谢是近来生命医学领域的研究热点。长期糖、脂等能量代谢的紊乱导致胰岛素抵抗,引发2型糖尿病。而沉默信息调节因子1(SIRT1)作为一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)依赖的组蛋白去乙酰化酶,是调控能量代谢关键因子,还参与骨代谢、基因转录、细胞衰老、凋亡及焦亡等。目的:分析近年来有关SIRT1在运动改善骨代谢中的作用机制的相关文献,研究其现状和研究进展。方法:在PubMed、CNKI等数据库进行检索,中文关键词:SIRT1,运动,2型糖尿病,骨形成,骨吸收;英文关键词:SIRT1,exercise,type 2 diabetes,bone formation,bone resorption。结果与结论:①成骨细胞和破骨细胞的分化和功能发挥以及相互之间的代谢平衡是保障骨代谢稳态的关键。而一旦发生紊乱将会导致骨组织形态结构退化,这也是2型糖尿病并发症骨质疏松发生的重要机制;②能量代谢紊乱是引发2型糖尿病的关键,那么SIRT1作为调控能量代谢关键因子,其可通过Wnt、转化生长因子β等途径介导成骨细胞和破骨细胞分化及功能;③近来,研究发现运动可显著改善2型糖尿病的能量代谢和骨代谢,文章从成骨细胞、破骨细胞出发,通过综述目前国内外相关研究,探究SIRT1在运动改善2型糖尿病骨代谢中的作用机制。

艾托格列净联合二甲双胍对2型糖尿病患者血糖、血脂及GLUT4、SIRT1水平的影响

目的观察艾托格列净联合二甲双胍对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血糖、血脂及GLUT4、SIRT1水平的影响。方法随机选取2022年1—4月于齐齐哈尔市第一医院就诊的初诊T2DM患者共60例作为研究对象,采用数表法分为对照组和观察组,每组30例。两组均给予常规饮食、运动指导,对照组给予二甲双胍,观察组给予二甲双胍联合艾托格列净,治疗3个月后,比较两组患者血糖、血脂及血清GLUT4、SIRT1水平。结果治疗前,两组血糖、血脂及血清GLUT4、SIRT1水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组血糖、血脂及血清GLUT4、SIRT1水平均改善,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组血清GLUT4、SIRT1水平分别为(5.96±0.66)、(9.23±1.05)μg/L高于对照组的(2.82±0.41)、(7.99±0.99)μg/L,差异有统计学意义(t=22.135、4.706,P<0.05)。观察组FPG、FINS、HbA1c、TC、TG、LDL水平及HOMA-IR低于对照组,HDL水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论艾托格列净联合二甲双胍可以有效控制T2DM患者的血糖和血脂水平,提高血清GLUT4、SIRT1水平,进而改善胰岛素抵抗。

自发性2型糖尿病大鼠腹主动脉SIRT1的表达及二甲双胍的干预研究

目的:观察自发性2型糖尿病(T2DM)OLETF大鼠腹主动脉组蛋白去乙酰化酶1(SIRT1)的表达,以及二甲双胍对其表达的影响,探讨SIRT1在T2DM动脉粥样硬化发生发展中的作用。方法:自发性T2DM OLETF大鼠17只,分为模型组和治疗组,治疗组以二甲双胍灌胃治疗12周。以同种系非糖尿病LETO大鼠为正常对照组。应用实时荧光定量法检测腹主动脉SIRT1的表达水平。结果:模型组腹主动脉SIRT1 mRNA表达较对照组明显降低(P<0.05),而二甲双胍治疗12周后SIRT1 mRNA的表达较模型组明显升高(P<0.05)。结论:动脉中SIRT1的表达降低可能在T2DM及其大血管并发症的发生发展中具有重要作用,而二甲双胍可能通过升高SIRT1 mRNA的表达具有保护糖尿病大血管的作用。

血清lncRNAXIST和SIRT1水平与DR的关系及其诊断价值

目的:检测2型糖尿病(T2DM)患者血清长链非编码RNA(lncRNA)X非活性特异性转录本(XIST)、沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)表达水平,并探讨其与糖尿病视网膜病变(DR)的相关性及其诊断价值。方法:前瞻性研究。选取2022-01/2023-02在我院收治T2DM患者214例作为研究对象。根据是否发生视网膜病变,分为非DR组126例126眼,DR组88例88眼。另选取同期体检健康者130例为对照组。检测三组血清lncRNA XIST、SIRT1水平并进行比较。采用Pearson法分析lncRNA XIST和SIRT1表达与DR的关系,受试者工作特征(ROC)曲线评价血清lncRNA XIST、SIRT1单独及联合对DR的预测价值,多因素Logistic回归分析影响T2DM患者发生DR的因素。结果:与对照组比较,非DR组和DR组血清lncRNA XIST、SIRT1水平依次降低(均P<0.05);DR患者血清lncRNA XIST和SIRT1水平呈正相关(r=0.639,P<0.05);ROC分析显示,血清lncRNA XIST、SIRT1联合预测DR的曲线下面积(AUC)为0.940,高于血清lncRNA XIST、SIRT1单独检测的AUC(0.855、0.875)。Logistic回归分析显示,lncRNA XIST(OR=0.752)、SIRT1(OR=0.694)是DR发生的影响因素(均P<0.01)。结论:DR患者血清lncRNA XIST、SIRT1水平均降低,lncRNA XIST联合SIRT1对DR发生有较好的评估效能。

miR-9-5p及其靶基因Sirt 1在华南地区2型糖尿病患者血清中的表达

目的探讨mi R-9-5p及Sirt1的表达量与华南地区2型糖尿病的相关性。方法构建含有野生型及缺失型mi R-9-5p结合位点的Sirt1 3'-UTR报告基因载体,行荧光素酶报告基因。收集华南地区123例糖尿病患者和130例正常者的血清标本,采用q RT-PCR技术检测血清中mi R-9-5p的表达量,采用ELISA检测血清中Sirt1蛋白的表达量。分析mi R-9-5p、Sirt1的表达量与华南地区2型糖尿病的相关性。结果 mi R-9-5p可显著下调野生型而非缺失型Sirt1报告基因的荧光素酶活性,提示mi R-9-5p可靶向调控Sirt1。此外,在2型糖尿病患者血清中mi R-9-5p与Sirt1表达呈负相关(r=-0.087,P=0.033);在正常对照组血清中mi R-9-5p与Sirt1表达也呈负相关(r=-0.076,P=0.041)。且mi R-9-5p的表达量与2型糖尿病患者的年龄呈正相关,而Sirt1则相反(P均<0.05);mi R-9-5p及Sirt1的表达与2型糖尿病患者的性别无关。结论在华南地区2型糖尿病患者血清中,mi R-9-5p高表达,Sirt1低表达,mi R-9-5p联合Sirt1有望成为早期诊断2型糖尿病的联合指标。

芒柄花苷经AMPK/SIRT1/FoxO1通路对2型糖尿病肾病大鼠肾损伤的改善作用

目的:探讨芒柄花苷经AMPK/SIRT1/FoxO1通路对2型糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的改善作用。方法:用腹腔注射链脲佐菌素准备大鼠DN模型,芒柄花苷低剂量组和芒柄花苷高剂量组大鼠分别灌胃给予芒柄花苷(剂量分别为50mg/kg和200mg/kg),阳性对照组灌胃给予二甲双胍(250mg/kg),阴性对照组和模型组灌胃给予等量生理盐水,持续16周。测定大鼠血清中BUN、Scr和血糖水平,对大鼠肾脏进行病理学检查,同时采用Western Blot法检测肾组织中SOD、GSH-PX、MDA、AMPK、SIRT1、FoxO1、FN和LC3B蛋白水平。结果:模型组大鼠肾小球异常肥大,系膜细胞增殖,系膜基质增加,间质纤维化;芒柄花苷和二甲双胍治疗后,肾小球形态逐渐恢复正常,肾小球内的炎症和纤维化程度也有不同程度的改善。与阴性对照组比较,模型组、芒柄花苷低剂量组、芒柄花苷高剂量组和阳性对照组各组大鼠BUN、Scr、血糖、MDA、FoxO1和FN水平升高,SOD、GSH-PX、AMPK、SIRT1和LC3B水平降低(P<0.05)。与模型组比较,芒柄花苷低剂量组、芒柄花苷高剂量组和阳性对照组大鼠BUN、Scr、血糖、MDA、FoxO1和FN水平降低,SOD、GSH-PX、AMPK、SIRT1和LC3B水平升高(P<0.05)。与芒柄花苷低剂量组比较,芒柄花苷高剂量组和阳性对照组大鼠BUN、Scr、血糖、MDA、FoxO1和FN水平降低,SOD、GSH-PX、AMPK、SIRT1和LC3B水平升高(P<0.05)。芒柄花苷高剂量组和阳性对照组各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:芒柄花苷对2型糖尿病肾病大鼠肾损伤具有明显的改善作用,其机制可能是与芒柄花苷激活AMPK/SIRT1/FoxO1通路有关。

二甲双胍对2型糖尿病模型大鼠肾功能及肾组织SIRT1表达的影响

目的观察二甲双胍(MET)对2型糖尿病(T2DM)模型大鼠肾组织沉默调节蛋白1(SIRT1)mRNA和蛋白表达的影响,探讨MET对糖尿病肾功能损害的修复作用机制。方法30只T2DM模型大鼠随机分为糖尿病组(T2DM组)、格列本脲组(GLY组,5 mg·kg^(-1)·d^(-1))和二甲双胍组(MET组,300 mg·kg^(-1)·d^(-1)),同时设立正常对照组(NC组)。8周后,观察各组大鼠糖化血红蛋白(HbA1c)、血糖(BG)、尿素氮(BUN)、尿白蛋白排泄和肾小球基底膜厚度(GBMT)情况;免疫组化检测肾小管SIRT1蛋白表达;real-time PCR检测肾组织SIRT1 mRNA表达;ELISA检测尿SIRT1蛋白排泄。结果 8周末,MET组及GLY组BG、Hb A1c、尿白蛋白/尿肌酐(UACR)、尿SIRT1/尿肌酐(USIR)和GBMT明显低于T2DM组,高于NC组(P<0.05);MET组与GLY组BG、Hb A1c和GBMT差异无统计学意义(P>0.05),但UACR明显降低(P<0.05);MET组肾组织SIRT1 mRNA和蛋白表达高于T2DM组,但低于NC组(P<0.05);MET组肾组织SIRT1表达高于GLY组(P<0.05),尿SIRT1蛋白排泄低于GLY组(P<0.05)。结论二甲双胍可增加T2DM大鼠肾组织SIRT1表达,该作用可能与其肾脏保护有关。

SIRT1基因多态性对血糖控制不佳的2型糖尿病患者接受利拉鲁肽联合二甲双胍治疗效果的影响

目的本研究旨在探讨SIRT1基因多态性对血糖控制不佳的2型糖尿病患者接受利拉鲁肽联合二甲双胍治疗临床疗效的影响。方法研究纳入接受2型糖尿病治疗血糖控制不佳患者216例,采用利拉鲁肽联合二甲双胍治疗方案,26周后评价临床疗效,分析患者SIRT1基因多态性与疗效之间的关系。结果216例患者接受26周利拉鲁肽联合二甲双胍治疗后,HbA1c、FPG、2h PG和BMI指标均明显下降,且与治疗前相比差异有统计学意义(P<0.05)。TC/CC型患者HbA1c、FPG、BMI、2h PG各指标比TT型患者下降更为明显,差异有统计学意义(P<0.05)。SIRT1基因多态性分析显示患者Rs12778366位点基因型分布频率均符合哈迪温伯格平衡。另外对145例患者STIR1基因mRNA表达分析发现,TT型患者mRNA表达水平也显著低于TC/CC型患者(P<0.001)。结论利拉鲁肽联合二甲双胍在治疗既往血糖控制不佳的2型糖尿病患者中安全有效,且携带C等位基因的患者疗效更好;SIRT1基因Rs12778366位点可能通过影响SIRT1基因mRNA的表达而影响利拉鲁肽联合二甲双胍的临床疗效。