下调XBP1s通过Sirt3/SOD2/mtROS轴减轻缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞衰老

目的探讨剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1s)在缺氧/复氧(H/R)诱导的原代肾小管上皮细胞衰老中的作用及机制。方法将原代肾小管上皮细胞分为空白对照组(NC组)、H/R组、空载腺病毒阴性对照组(Ad-shNC组)、靶向沉默XBP1s腺病毒组(Ad-shXBP1s组)、空载腺病毒+H/R处理组(Ad-shNC+H/R组)、靶向沉默XBP1s腺病毒+H/R处理组(Ad-shXBP1s+H/R组)。检测NC组、H/R组、Ad-shNC组、Ad-shXBP1s组XBP1s的表达情况。检测Ad-shNC组、Ad-shNC+H/R组、Ad-shXBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色情况,细胞衰老标志物p53、p21、γH2AX表达情况,氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。采用染色质免疫共沉淀验证XBP1s转录调控沉默信息调节因子3(Sirt3),检测下调XBP1s后Sirt3及下游SOD2表达,采用流式细胞术检测线粒体活性氧簇(mt ROS)。结果与NC组比较,H/R组XBP1s表达增多;与Ad-sh NC组比较,Ad-sh XBP1s组XBP1s表达减少(均为P<0.001)。与Adsh NC组比较,Ad-sh NC+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数增加,p53、p21、γH2AX表达增多,ROS、MDA、mt ROS水平升高,SOD活性下降,Sirt3表达量降低,Ac-SOD2/SOD2比值升高;与Ad-sh NC+H/R组相比,Ad-sh XBP1s+H/R组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数减少,p53、p21、γH2AX表达减少,ROS、MDA、mt ROS水平下降,SOD活性升高,Sirt3表达量升高,Ac-SOD2/SOD2比值下降(均为P<0.05)。结论下调XBP1s可减轻H/R诱导的原代肾小管上皮细胞衰老,可能是通过Sirt3/SOD2/mt ROS信号轴发挥作用。

毛蕊异黄酮调节SIRT3/SOD2信号通路对小鼠气道上皮细胞损伤的改善作用

目的探讨毛蕊异黄酮(CA)对香烟烟雾(CS)诱导的小鼠气道上皮细胞损伤及沉默蛋白3/超氧化物歧化酶2(SIRT3/SOD2)信号通路的影响。方法将90只雄性BALB/c小鼠随机分为对照(Control)组、CS组、CA低剂量处理组(CA-L组)、CA高剂量处理组(CA-H组)、CA高剂量处理+SIRT3抑制剂3-TYP组(CA-H+3-TYP组),每组18只。采用小动物全身体积描记检测系统检测肺功能指标潮气量(TV)、呼气峰流速(PEF);酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清炎性因子[白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α]及氧化应激[活性氧(ROS)、SOD]水平;HE染色观察肺组织气道上皮细胞损伤;免疫组化检测气道上皮细胞屏障相关蛋白[闭合蛋白(OCLN)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)]表达;蛋白免疫印迹检测SIRT3/SOD2信号通路相关蛋白表达。结果与Control组相比,CS组TV、PEF、MAN和SOD水平及OCLN、ZO-1、SIRT3、SOD2蛋白表达水平降低,MLI及IL-6、TNF-α、ROS水平升高(P<0.05);CS组较Control组肺组织结构明显破坏,肺泡增大明显,肺泡周围伴有炎性细胞浸润,气道上皮细胞脱落明显。不同剂量CA均可减轻肺组织破坏,改善肺泡结构,减轻炎性细胞浸润,减少气道上皮细胞脱落,升高TV、PEF、MAN和SOD水平及OCLN、ZO-1、SIRT3、SOD2蛋白表达水平,降低MLI及IL-6、TNF-α、ROS水平,且高剂量CA的作用较低剂量CA显著(P<0.05);SIRT3/SOD2信号通路抑制剂3-TYP可逆转CA对CS诱导的小鼠气道上皮细胞损伤的改善作用。结论CA可改善CS诱导的小鼠气道上皮细胞损伤,其作用机制与激活SIRT3/SOD2信号通路有关。

肺炎支原体肺炎患儿血清TIMP3和SOD2水平与肠道菌群及免疫功能的关系研究

目的探究肺炎支原体肺炎(MPP)患儿血清金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP3)和超氧化物歧化酶2(SOD2)水平与肠道菌群及免疫功能的关系。方法选取MPP患儿120例作为研究对象,分为轻症组65例和重症组55例,同时选取120例在本院查体的健康儿童作为对照组,比较三组血清TIMP3、SOD2水平。Pearson法分析血清TIMP3、SOD2水平与肠道菌群及免疫功能的相关性。结果与对照组相比,轻症组和重症组血清TIMP3水平显著降低,SOD2及D-乳酸水平升高,粪便中双歧杆菌、大肠杆菌、乳酸杆菌、链球菌水平依次降低,免疫功能水平降低(P均<0.05)。相关性分析显示,MPP患儿血清TIMP3分别与双歧杆菌、大肠杆菌、乳酸杆菌、IgG、CD4^(+)/CD8^(+)呈正相关性,与D-乳酸、hs-CRP、TNF-α、WBC呈负相关性;SOD2与双歧杆菌、大肠杆菌、乳酸杆菌、IgG、IgM、补体C3、补体C4、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关性,与D-乳酸、hs-CRP、TNF-α、WBC呈正相关性(P<0.05)。结论重症MPP患儿血清TIMP3水平降低,SOD2水平升高,并且二者与MPP患儿肠道菌群及免疫功能密切相关。

基于MT3、SOD2 mRNA表达调控的醒脑再造胶囊抗脑缺血再灌注损伤作用

目的观察醒脑再造胶囊的抗脑缺血再灌注损伤作用并探讨其作用机制。方法灌胃给药醒脑再造胶囊1周后,建立SD大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注24 h模型,进行大鼠神经功能评分,2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法观察脑组织梗死范围,实时荧光定量PCR检测脑组织缺血半暗带区域金属硫蛋白3(MT_3)和超氧化物歧化酶2(SOD_2)mRNA的表达。结果醒脑再造胶囊预处理可明显降低大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能评分,缩小脑组织梗死范围,并使脑组织缺血半暗带区域MT_3和SOD_2 mRNA的表达显著增加。结论醒脑再造胶囊抗大鼠脑缺血再灌注损伤作用与上调脑组织抗氧化损伤基因MT_3和SOD_2 mRNA的表达有关。

非小细胞肺癌组织中MnSOD、SIRT3的表达及意义

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中锰超氧化物歧化酶(manganese superoxide dismutase,Mn SOD)、去乙酰化酶3(sirtuin 3,SIRT3)的表达,以及两者与NSCLC生物学特征的关系。方法采用免疫组化及Western blot法检测89例NSCLC及对应癌旁(直径≥10 cm)肺组织中Mn SOD、SIRT3蛋白的表达,探讨与NSCLC组织类型、TNM分期、分化程度、淋巴结转移的相关性。结果免疫组化及Western blot结果显示:与癌旁肺组织相比,Mn SOD、SIRT3蛋白在NSCLC中的表达明显降低;免疫组化图像分析结果显示癌旁组织中Mn SOD、SIRT3蛋白含量平均光密度值(OD值)为(0.428±0.031)、(0.403±0.035),而NSCLC组织中Mn SOD、SIRT3蛋白OD值显著降低,且两者表达与NSCLC分化程度、肿瘤T分期呈正相关(P<0.05,P<0.01);而与病理类型及有无淋巴结转移无相关性(P>0.05)。结论 NSCLC组织中MnSOD、SIRT3蛋白表达降低,两者联合检查可能对预测肿瘤的恶性程度有一定的意义。

MnSOD、SIRT3在肺腺癌组织及癌旁组织中的表达及其与临床病理、预后的关系分析

目的分析锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、去乙酰化酶3(SIRT3)在肺腺癌组织及癌旁组织中的表达及其与临床病理、预后的关系。方法选取该院心胸血管外科2016年1月至2018年12月收治的60例肺腺癌患者,均留存有肺腺癌及癌旁组织标本。采用免疫组织化学(SP法)检测肺腺癌组织及癌旁组织MnSOD、SIRT3表达,比较其在不同病理特征患者肺腺癌组织MnSOD、SIRT3表达差异,对所有患者予以持续随访,采用Cox回归模型分析影响患者预后的独立危险因素,并绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析MnSOD、SIRT3对肺腺癌患者生存时间的影响。结果肺腺癌组织中MnSOD阳性表达率、SIRT3阳性表达率明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、肺腺癌亚型及有无吸烟史的患者组织MnSOD、SIRT3表达差异无统计学意义(P>0.05),但随着组织学分级增加,肺腺癌组织MnSOD、SIRT3阳性表达率明显下降,TNM分期为Ⅲ期患者肺腺癌组织MnSOD、SIRT3阳性表达率明显低于Ⅰ+Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);Cox回归分析显示,MnSOD阴性、SIRT3阴性、组织学分级Ⅲ级、淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期均是影响肺腺癌患者生存的独立危险因素;MnSOD、SIRT3阴性患者累积生存率明显低于MnSOD、SIRT3阳性患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺腺癌患者肺腺癌组织存在MnSOD、SIRT3低表达现象,并与组织学分级、淋巴结转移、TNM分期及生存密切相关。

沉默信息调节因子3在丹酚酸A抗紫外线诱导视网膜色素上皮细胞氧化应激性损伤中的作用及机制

目的:探讨SIRT3在丹酚酸A(Sal A)抗紫外线诱导视网膜色素上皮细胞损伤中的作用及其机制。方法:将ARPE-19细胞分为对照(Sal A)组、UV组、Sal A+UV组、Sal A+UV+阴性si-RNA组、Sal A+UV+si-SIRT3组,UV照射剂量为30 mJ/cm^2,Sal A浓度为50 μmol/L,采用MTT法检测细胞存活,DCFH-DA法分析细胞内ROS水平,Cu Zn/Mn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)检测SOD2活性,Western blot分析SIRT3、SOD2、Bcl-2、Bax、cleaved-Caspase3、Cyt c的表达,RT-qPCR法检测细胞内SIRT3和SOD2的mRNA表达情况。结果:UV处理后,ARPE-19细胞内SIRT3蛋白和mRNA表达量降低,经5、25、50 μmol/L预处理后,SIRT3表达量明显增加。与对照组相比,UV组细胞凋亡率,ROS含量,Bax、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显增加,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显降低。与UV组相比,Sal A+UV组细胞凋亡率,ROS水平,SIRT3、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显降低,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显增加。与Sal A+UV相比,Sal A+UV+si-SIRT3组细胞凋亡率,ROS水平,SIRT3、cleaved-Caspase3、Cyt c表达量明显增加,细胞存活率、SOD2表达量和活性明显降低。结论:Sal A可增加SIRT3的表达,恢复SOD2活性,降低UV诱导细胞损伤作用。

MnSOD-SIRT3在佐剂性关节炎大鼠肝组织中的表达和意义

目的探讨肝脏锰超氧化物歧化酶(MnSOD)、去乙酰化酶3(SIRT3)的改变与佐剂性关节炎(AA)大鼠的关系。方法弗氏完全佐剂(FCA)足趾皮下注射诱导SD大鼠AA,造模后12、19、26 d,分批处死大鼠,计算肝脏指数,检测血清谷草转氨酶(AST);谷丙转氨酶(ALT);肝匀浆检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化;肝组织免疫组化和Western blot法检测MnSOD、SIRT3蛋白表达变化。结果与正常组大鼠比较,AA大鼠造模12 d后,肝脏指数升高,血清转氨酶升高,肝匀浆中MDA升高,GSH-Px、SOD活性下降(P<0.05,P<0.01),肝组织中MnSOD、SIRT3蛋白表达下降。结论 AA模型组大鼠存在肝损伤,肝匀浆中氧化应激指标升高,其机制与肝脏中MnSOD和SIRT3表达有一定的关联。

亚低温上调冷休克蛋白RBM3表达减轻肾脏缺血-再灌注损伤

目的探讨亚低温对肾脏缺血-再灌注损伤(IRI)的作用,以及RNA结合基序蛋白3(RBM3)及其下游效应分子在这一过程中的表达情况。方法健康SD雄性大鼠18只,随机分为正常对照(NC)组、IRI组和亚低温预处理(MHP)组,每组6只。通过检测血清肌酐水平评价肾功能,苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织损伤情况,蛋白质印迹法检测肾脏组织的RBM3、Yes相关蛋白1(YAP1)、核因子E2相关因子2(Nrf2)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量,免疫组织化学染色进一步检测RBM3及YAP1蛋白的表达情况,采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测肾脏组织细胞凋亡情况,通过测定丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性检测肾脏组织氧化应激水平。结果与NC组相比较,IRI组和MHP组血清肌酐水平、肾脏组织病理损伤评分均升高,RBM3、YAP1和Nrf2蛋白表达水平均升高,Bcl-2/Bax比值均降低,细胞凋亡率均升高,MDA含量均升高,SOD活性均下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05);与IRI组相比较,MHP组血清肌酐水平、肾脏组织病理损伤评分均降低,RBM3、YAP1和Nrf2蛋白表达水平均升高,Bcl-2/Bax比值升高,细胞凋亡率降低,MDA含量降低,SOD 活性升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 亚低温对肾脏IRI 具有保护作用,可减轻IRI 所致细胞凋亡和氧化应激损伤,其机制可能为亚低温上调RBM3 及其下游效应分子YAP1 和Nrf2 的表达水平。

烟酰胺单核苷酸通过Sirt3减轻心脏死亡供肝诱导的缺血-再灌注损伤

目的 探讨烟酰胺单核苷酸(NMN)对大鼠心脏死亡供肝诱导的缺血-再灌注损伤(IRI)的作用及机制。方法 通过“磁环+双袖套”法建立大鼠原位肝移植模型。将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、原位肝移植组(OLT组)、NMN处理+原位肝移植组(NMN组)、NMN+去乙酰化酶-3(Sirt3)抑制剂(3-TYP)+原位肝移植组(NMN+3-TYP组)。观察各组大鼠肝组织病理学改变及肝细胞凋亡情况,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,测定肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,检测肝组织Sirt3、微管相关蛋白1轻链3(LC3)Ⅱ、PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、Parkin、线粒体外膜转位酶20(TOMM20)表达水平。分析各组大鼠术后生存情况。结果 与Sham组比较,OLT组ALT、AST水平升高;与OLT组比较,NMN组ALT、AST水平均下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组ALT、AST水平升高(均为P<0.05)。Sham组大鼠肝组织结构基本正常;OLT组大鼠肝组织可见明显的淤血、空泡变性和肝细胞坏死等病理改变。OLT组Suzuki评分、细胞凋亡率较Sham组升高;NMN组Suzuki评分、细胞凋亡率较OLT组降低;NMN+3-TYP组Suzuki评分、细胞凋亡率较NMN组升高(均为P<0.05)。与Sham组比较,OLT组SOD含量下降,MDA含量升高;与OLT组比较,NMN组SOD含量升高,MDA含量下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组SOD含量下降,MDA含量升高(均为P<0.05)。与Sham组比较,OLT组Sirt3、TOMM20蛋白相对表达量下降,PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量升高;与OLT组比较,NMN组Sirt3、PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量升高,TOMM20蛋白相对表达量下降;与NMN组比较,NMN+3-TYP组PINK1、Parkin、LC3Ⅱ蛋白相对表达量下降,TOMM20蛋白相对表达量升高(均为P<0.05)。Sham组、OLT组、NMN组、NMN+3-TYP组大鼠术后7 d生存率分别为100%、50%、75%、58%。结论 NMN可通过上调Sirt3,增强肝脏抗氧化能力及诱导PINK1/Parkin介导的线粒体自噬,减轻肝IRI,从而对心脏死亡供肝发挥保护作用。

DDPH对大鼠缺血性脑损伤的保护作用

目的 研究DDPH对大鼠缺血性脑损伤的保护作用 ,并初步探讨其作用机制。方法 用线拴法制备大鼠局灶性脑缺血模型 ,观察DDPH对大鼠脑缺血后神经症状、梗死面积的影响 ;用大鼠弥漫性不完全性脑缺血模型 ,观察DDPH对脑缺血后脑组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)含量及组织病理损伤的影响。结果 DDPH1 0mg·kg-1 在缺血前 30minip ,局灶性脑缺血模型大鼠在 3h后神经症状明显改善 ,2 4h梗死面积缩小。DDPH使大鼠弥漫性不完全性脑缺血后脑组织内SOD活性增高 ,MDA含量下降 ,并明显改善神经细胞的病理性损伤。结论DDPH对大鼠缺血性脑损伤有一定保护作用 ,其机制可能与阻滞钙离子通道、提高SOD活性有关。

二苯乙烯苷对动脉粥样硬化大鼠主动脉胞间粘附分子1、血管细胞粘附分子1及血管内皮生长因子表达的影响

目的探讨二苯乙烯苷(TSG)抗动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法采用高脂饲料喂饲+维生素D37MU·kg-1ip1次制备大鼠AS模型。造模12周后治疗性ig给予TSG30,60和120mg·kg-1·d-1。给药6周后,采用黄嘌呤氧化酶法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸比色法测定血清丙二醛(MDA)含量,Western蛋白印迹法检测主动脉胞间粘附分子1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子1(VCAM-1)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达,逆转录聚合酶链反应法检测主动脉ICAM-1和VCAM-1 mRNA表达,免疫组织化学法检测主动脉VEGF蛋白的表达。结果与正常组相比,AS模型组大鼠血清SOD活性明显降低,MDA水平明显提高,主动脉ICAM-1,VCAM-1及VEGF mRNA和蛋白表达显著增高。与模型组相比,TSG给药6周能明显提高大鼠血清SOD活性,降低MDA水平,对主动脉ICAM-1,VCAM-1及VEGF mRNA和蛋白表达均有明显抑制作用。结论TSG对大鼠实验性AS具有治疗作用,其机制可能与其抗氧化和调节细胞因子分泌有关。

铝胁迫下DL-异柠檬酸-γ-内酯对杉木幼苗SOD活性的影响

采用正交回归旋转试验设计,通过苗木水培试验,应用数学建模分析活性铝、DL-异柠檬酸-γ-内酯、营养液浓度以及pH值对杉木幼苗超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果表明,在不同胁迫阶段,杉木幼苗SOD活性均与不同试验因素的线性作用紧密相关;随着胁迫时间的延长,幼苗SOD活性与不同试验因素的非线性作用下降。当活性铝、DL-异柠檬酸-γ-内酯以及培养液浓度一定时,随着胁迫时间的延长,SOD活性随着pH值的增大总体表现为一定程度的下降;当pH值、DL-异柠檬酸-γ-内酯以及培养液浓度一定时,随着胁迫时间的延长,SOD活性随着活性铝浓度的增大而显著下降;当pH值、活性铝以及培养液浓度一定时,随着胁迫时间的延长,在胁迫前期及中期(1-30d),SOD活性随着DL-异柠檬酸-γ-内酯浓度的增大总体表现为一定程度的下降,但在胁迫后期(31-45d),DL-异柠檬酸-γ-内酯浓度对SOD活性影响较小。

铜锌超氧化物歧化酶模拟化合物的合成与活性研究

分别以三 ( 2 苯并咪唑亚甲基 )胺 (NTB)和二 ( 2 苯并咪唑亚甲基 )胺 (N3)为配体 ,合成了四种Cu ,Zn超氧化物歧化酶 (SOD)的模拟化合物 [Cu(NTB) (ClO4) 2 ·CH3OH·3H2 O ,Cu(NO3) 2 ·NTB·2CH3OH·3H2 O ,Cu(NO3) 2 ·N3·4CH3OH ,Cu(ClO4) 2 ·N3·6CH3OH·6H2 O],并对它们进行了红外、紫外谱图表征 ,利用邻苯三酚自氧化法检测了活性 .活性数据值表明 ,配合物具有抑制O2 .-的活性 .其中Cu(ClO4) 2 ·N3·6CH3OH·6H2 O的活性高于其它配合物 ,IC50 =4.

1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮和牛磺酸联合干预对铝染毒大鼠大脑皮层抗氧化系统的保护作用

目的探讨1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮(deferipone,DFP)和牛磺酸联合作用对染铝大鼠大脑皮层抗氧化系统的影响。方法将70只健康SPF级雄性Wistar大鼠按体重随机分为7组,以灌胃方式染毒,其中,阴性对照组给予1 ml生理盐水,连续8周;铝染毒组、牛磺酸干预组、低剂量DFP干预组、高剂量DFP干预组、牛磺酸+低剂量DFP干预组和牛磺酸+高剂量DFP干预组在前4周分别给予281.40 mg/kg三氯化铝溶液,后4周分别给予1 ml生理盐水、400 mg/kg牛磺酸、13.82 mg/kg DFP、27.44 mg/kg DFP、400 mg/kg牛磺酸、400 mg/kg牛磺酸;牛磺酸+低剂量DFP干预组和牛磺酸+高剂量DFP干预组给予400 mg/kg牛磺酸6 h后分别给予13.82、27.44 mg/kg DFP,每天1次。测定大鼠大脑皮层SOD、GSH-Px活力和MDA含量。结果与阴性对照组比较,铝染毒组大鼠大脑皮层SOD和GSH-Px活力均较低,而MDA含量较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与铝染毒组相比,在单独干预组中,仅高剂量DFP干预组可以显著提高SOD和GSH-Px活力,降低MDA的含量;牛磺酸干预组可以显著提高GSH-Px的活力水平以及降低MDA含量。在DFP和牛磺酸的联合作用下,大鼠大脑皮层的SOD和GSH-Px活力水平以及MDA含量均基本恢复正常。其中,与牛磺酸干预组和低剂量DFP干预组比较,牛磺酸+DFP干预组可以显著提高SOD和GSH-Px活力,降低MDA含量;且以牛磺酸+低剂量DFP干预组尤为显著。结论在本实验剂量范围内,牛磺酸和DFP联合干预可以对染铝大鼠大脑皮层的抗氧化系统起到保护作用,且效果优于牛磺酸或DFP单独干预。

海仙花开花和衰老过程与膜脂过氧化

海仙花从大蕾发育至玫红花时，开花时间较长，此后即迅速衰老萎蔫．开花和衰老过程中呼吸速率出现两次高峰，花盛开为乳白花时出现第１个呼吸峰，玫红花时又出现一次较低的呼吸峰．从大蕾发育至粉红花时，ＳＯＤ和ＣＡＴ活性逐渐增高，Ｖｉｔ．Ｃ含量逐渐降低但保持较高水平，而Ｏ－２含量低且变化不大；粉红花后，ＳＯＤ和ＣＡＴ活性继续升高，Ｖｉｔ．Ｃ含量迅速降低，Ｏ－２含量较快升高；玫红花后，ＳＯＤ活性迅速降低，Ｖｉｔ．Ｃ含量达最低，Ｏ－２含量则迅速升高．开花前期花内ＭＤＡ含量低且变化不大，相对透性值缓慢升高，粉红花后，Ｏ－２引发膜脂过氧化加强致使ＭＤＡ含量和相对透性迅速升高。

动情期和动情间期小鼠输卵管中氧化应激和抗氧化基因表达差异

目的观察昆明(Kunming,KM)小鼠输卵管中氧化应激和抗氧化基因的表达是否随动情周期而改变。方法分别取动情期和动情间期小鼠输卵管进行RNA提取,用PCR芯片检测氧化应激和抗氧化基因表达的差别,然后用Real Time PCR对差异表达基因进一步验证。结果与动情间期比较,动情期小鼠输卵管中NADPH氧化酶1(NADPH oxidase1,NOX1)、谷胱甘肽过氧化物酶2(glutathion peroxidase 2,GPX2)、超氧化物歧化酶3(superoxide dismutase 3,SOD3)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)等4个基因表达上调。结论动情期小鼠输卵管中NOX1、GPX2、SOD3和NOS2等4个基因表达上调,提示其可能参与维持动情期小鼠输卵管腔内适度的活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)和一氧化氮(nitric oxide,NO)水平,为卵子受精和早胚发育提供必要第二信号分子。

不同价态锰对不同月龄大鼠脂质过氧化的影响

目的 研究不同价态锰染毒后对大鼠脑、肝和心肌内脂质过氧化(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响。方法 大鼠经腹腔分别注射氯化锰(MnCl2 ·4H2 O ,Mn2 + )和醋酸锰(C6 H9O6 Mn·2H2 O ,Mn3+ ) ,按6mg kg剂量连续染毒1个月后,测定脑、肝和心肌组织中MDA含量和SOD活力。结果 (1)经Mn2 + 染毒后大鼠脑组织MDA含量与对照组相比,差异有显著性(P <0 0 5 ) ,而Mn3+ 染毒后只有18月龄大鼠脑组织MDA含量显著高于对照组(P <0 0 5 ) ;在肝组织MDA含量,Mn2 + 组与对照组相比,差异有显著性(P <0 0 5 )。(2 )经Mn2 + 、Mn3+ 染毒后18月龄和4月龄大鼠脑组织SOD活力显著低于对照组(P <0 0 5 ) ;经Mn2 + 染毒后,18月龄和4月龄大鼠肝SOD活力明显低于对照组(P <0 0 5 ) ;经Mn3+染毒后,18月龄大鼠肝SOD活力显著低于对照组(P <0 0 5 )。(3 )心肌组织MDA含量,SOD活力与对照组相比,差异均无显著性。结论 不同价态、不同剂量锰染毒不同月龄大鼠对其不同组织MDA含量和SOD活力的影响是不同的。

中药抗氧化方对硒性白内障形成中LPO水平及SOD活性的影响

在实验中动态观察了亚硒酸钠性白内障形成过程,及中药抗氧化方(ACHM)对其晶状体内脂类过氧化(LPO)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性变化的影响。结果发现:在诱发硒性白内障的早期,出现晶状体内 LPO 水平上升,直至白内障形成后1周仍持续在上升水平,与正常大鼠比较,差异显著(P<0.01);而 SOD 活性下降迅速,至28日龄时仅为正常大鼠的1/7,硒严重破坏晶状体内抗氧化酶活性。经 ACHM 治疗,晶状体内 LPO 的生成在早期即受到控制,无明显升高,维持 LPO 水平明显低于对照组(P<0.05)。同时 SOD 活性的下降也受到抑制,酶活性明显高于对照组(P<0.01)。实验表明 ACHM 具有降低 LPO 水平和缓解 SOD 活性下降的作用,可能对防治白内障有一定意义。

龙胆苦苷预处理对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激损伤的影响及机制

目的 观察龙胆苦苷(GPS)预处理对过氧化氢(H2O2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激损伤的影响,并探讨其作用机制。方法 取对数生长期的HUVEC,随机分为正常对照组、模型组和GPS干预组。模型组加入200μmol/LH2O2培养4h建立氧化应激损伤模型;GPS干预组先加入20μmol/LGPS培养12h,然后加入200μmol/LH2O2培养4h;正常对照组仅加入0.01%DMSO。采用MTT法检测各组细胞存活率,TUNEL法检测各组细胞凋亡率;ELISA法测定各组细胞中丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blotting法检测各组细胞中PI3K/AKT信号通路蛋白PI3K、p-AKT以及凋亡相关蛋白Caspase-3、线粒体凋亡通路相关蛋白Bax、抗凋亡蛋白Bcl-2的相对表达量。结果 与正常对照组比较,模型组细胞存活率降低,细胞凋亡率升高(P均<0.01);Caspase-3、Bax蛋白表达及MDA含量升高,Bcl-2、p-AKT、PI3K蛋白表达及GSH-Px、SOD含量降低(P均<0.01)。与模型组比较,GPS干预组细胞存活率升高,细胞凋亡率降低(P均<0.01);Bcl-2、p-AKT、PI3K蛋白表达及GSH-Px、SOD含量升高,Caspase-3、Bax蛋白表达及MDA含量下降(P<0.05或<0.01)。结论 GPS可对抗H2O2造成的HUVEC氧化应激损伤,对内皮细胞具有保护作用;其机制可能为抗氧化及调控PI3K/AKT信号通路,从而抑制细胞凋亡。