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采用定点整合表达技术构建t-PA表达CHO工程细胞株
被引量:
5
1
作者
吴本传
陈昭烈
+3 位作者
刘红
郝振明
刘兴茂
黄培堂
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2004年第4期221-224,共4页
运用Flp InTM 定点整合表达系统构建表达组织型纤溶酶原激活剂 (tissue type plasminogenactivator ,t PA)的CHO工程细胞株。将pcDNA5 /FRT载体和携带t PA基因的 pJOD S载体用Hind/KpnI双酶切 ,再将回收的 2 .0kbt PAcDNA片段和pcDNA5 /...
运用Flp InTM 定点整合表达系统构建表达组织型纤溶酶原激活剂 (tissue type plasminogenactivator ,t PA)的CHO工程细胞株。将pcDNA5 /FRT载体和携带t PA基因的 pJOD S载体用Hind/KpnI双酶切 ,再将回收的 2 .0kbt PAcDNA片段和pcDNA5 /FRT载体连接 ,构建 pcDNA5 /FRT/t PA质粒 ;应用Flp InTM定点整合表达系统 ,将t PAcDNA定点插入Flp lnTM CHO细胞基因组中的 1个单拷贝位点上 ,以潮霉素B筛选定点整合t PAcDNA的细胞克隆。经筛选和体外纤维蛋白溶解活性检测 ,获得了t PA表达水平为 15 0 0~ 2 0 0 0IU/ (10 6cells·day)的CHO工程细胞株。
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关键词
定点整合
t-pa
表达
中国仓鼠卵巢细胞
下载PDF
职称材料
题名
采用定点整合表达技术构建t-PA表达CHO工程细胞株
被引量:
5
1
作者
吴本传
陈昭烈
刘红
郝振明
刘兴茂
黄培堂
机构
军事医学科学院生物工程研究所
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2004年第4期221-224,共4页
基金
国家高技术研究与发展计划项目资助 (No .2 0 0 1AA2 15 461)
文摘
运用Flp InTM 定点整合表达系统构建表达组织型纤溶酶原激活剂 (tissue type plasminogenactivator ,t PA)的CHO工程细胞株。将pcDNA5 /FRT载体和携带t PA基因的 pJOD S载体用Hind/KpnI双酶切 ,再将回收的 2 .0kbt PAcDNA片段和pcDNA5 /FRT载体连接 ,构建 pcDNA5 /FRT/t PA质粒 ;应用Flp InTM定点整合表达系统 ,将t PAcDNA定点插入Flp lnTM CHO细胞基因组中的 1个单拷贝位点上 ,以潮霉素B筛选定点整合t PAcDNA的细胞克隆。经筛选和体外纤维蛋白溶解活性检测 ,获得了t PA表达水平为 15 0 0~ 2 0 0 0IU/ (10 6cells·day)的CHO工程细胞株。
关键词
定点整合
t-pa
表达
中国仓鼠卵巢细胞
Keywords
site specific integration
,
t-pa
,
expression
,
cho cel ls
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
采用定点整合表达技术构建t-PA表达CHO工程细胞株
吴本传
陈昭烈
刘红
郝振明
刘兴茂
黄培堂
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2004
5
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职称材料
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参考文献
引证文献
统计分析
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