藏成药四味姜黄汤散质量标准研究

目的：建立藏成药四味姜黄汤散（姜黄、小檗皮、余甘子、蒺藜）的质量控制方法。方法：采用薄层色谱法鉴别本制剂中的姜黄、小檗皮、余甘子、蒺藜；采用高效液相色谱法测定本制剂中姜黄素含量。结果：薄层色谱可鉴别出姜黄、小檗皮、余甘子、蒺藜的特征斑点。HPLC法测定的姜黄素含量在0．0224—0．179μg范围内线性关系良好，r=0．9997；平均回收率为99．4％（n=9），RSD为1．46％。结论：本法专属性强，结果准确可靠，可作为藏成药四味姜黄汤散的质量控制方法。

HPLC法测定藏药四味姜黄汤散中没食子酸的含量

目的:建立HPLC法测定藏药四味姜黄汤散中没食子酸含量的方法.方法:采用Swell ChromstarTMC18柱(4.6mmⅹ250 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(5:95:0.05),柱温:30℃,检测波长为280nm,流速1 mL/min.结果:没食子酸在151.84～911.04 ng范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率(n=9)为99.0%,RSD为1.14%.结论:本方法快速、简便,准确可靠,可用于四味姜黄汤散制剂的质量控制.

HPLC法测定四味姜黄汤散中姜黄素的含量

目的建立测定四味姜黄汤散中姜黄素含量的方法。方法采用HPLC法进行含量测定。色谱柱:DiamonsilC18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-水-醋酸(体积比=80︰20︰1);检测波长:428nm;柱温:(30±2)℃。结果姜黄素质量浓度在1～30mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程为A=2.38×105ρ–688.4(r=0.9999),平均回收率为99.8%(RSD=0.75%)。结论该方法准确度高、专属性好,可用于四味姜黄汤散中姜黄素的含量测定。

HPLC法同时测定四味姜黄汤散中3种成分

目的建立HPLC法同时测定藏药四味姜黄汤散（姜黄、小檗皮、余甘子、蒺藜）中盐酸小檗碱、槲皮素和姜黄素的含有量。方法四味姜黄汤散甲醇-10%盐酸提取液的分析采用菲罗门Luna-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为0.1%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;检测波长为360 nm（盐酸小檗碱、槲皮素）和428 nm（姜黄素）;柱温30℃。结果盐酸小檗碱、槲皮素和姜黄素的线性范围分别为39.6~198μg/m L、0.326~1.63μg/m L和25.6~128μg/m L（r≥0.999 8）。3种成分的平均回收率在96.9%~98.9%之间。结论该方法简单、灵敏、准确,可用于四味姜黄散的质量控制。

四味姜黄汤散对糖尿病肾病大鼠PI3K/Akt信号通路的调节作用

目的探究四味姜黄汤散对DN大鼠肾脏的保护作用,以及对磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidyl inositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B, PKB/Akt)信号通路的影响。方法将大鼠按随机数字表法分为假手术组,模型组,四味姜黄汤散低、中、高剂量组(以下简称"低、中、高剂量组")及卡托普利组,每组12只。除假手术组外,其余各组大鼠制备糖尿病模型。造模结束后,四味姜黄汤散低、中、高剂量组大鼠灌胃四味姜黄汤散12、24、48 mg/g,卡托普利组灌胃卡托普利溶液30 mg/kg,假手术组及模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药8周。给药4周、8周测定大鼠尿液中24 h尿蛋白,采用酶联免疫法检测血清TG、TC、BUN、SCr水平,末次给药结束后取肾组织,测定肾脏肥大指数,HE、Masson染色观察大鼠肾组织病理学改变,电镜观察肾组织超微结构变化;Westerin blot法检测肾组织中胰岛素受体底物2(insulin receptor substrate 2, IRS-2)、p-PI3K、p-Akt蛋白表达情况;免疫组化法检测肾组织中肾病蛋白(Nephrin)、足突蛋白质(Podocin)蛋白阳性表达情况。结果与模型组比较,四味姜黄汤散低、中、高剂量组大鼠体重升高,肾脏肥大指数及第4、8周24 h尿蛋白降低(P<0.05),血清TC、TG、SCr、BUN降低(P<0.05),肾小球硬化评分、肾小管间质损伤评分、肾小管间质胶原纤维比例均降低(P<0.05);肾组织p-PI3K蛋白[(0.42±0.06)、(0.61±0.09)、(0.76±0.05)比(0.21±0.03)]、IRS-2蛋白[(0.34±0.03)、(0.61±0.10)、(0.78±0.09)比(0.24±0.03)]、p-Akt蛋白[(0.28±0.06)、(0.43±0.07)、(0.69±0.05)比(0.15±0.03)]表达升高(P<0.05);Nephrin阳性表达率[(31.78±3.14)%、(42.54±5.15)%、(50.97±7.13)%比(22.86±3.07)%]、Podocin阳性表达率[(33.67±4.59)%、(50.54±11.41)%、(61.03±7.55)%比(22.64±2.97)%]升高(P<0.05)。结论四味姜黄汤散可缓解DN大鼠肾脏损伤,其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,缓解足细胞损伤有关。