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依托咪酯调控miR-204-5p/HOXC8轴对胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响
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作者 刘艳 李俊 +2 位作者 周民 夏天 夏甘霖 《疑难病杂志》 2025年第1期86-92,共7页
目的探讨依托咪酯(Eto)调节微小RNA(miR)-204-5p/同源盒基因C8(HOXC8)轴对人胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法2023年4月—2024年4月于武汉科技大学实验室进行实验,将胃癌细胞MKN45分为对照(Ctrl)组、低剂量Eto组(Eto-L,5μmol/L)... 目的探讨依托咪酯(Eto)调节微小RNA(miR)-204-5p/同源盒基因C8(HOXC8)轴对人胃癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法2023年4月—2024年4月于武汉科技大学实验室进行实验,将胃癌细胞MKN45分为对照(Ctrl)组、低剂量Eto组(Eto-L,5μmol/L)、中剂量Eto组(Eto-M,10μmol/L)、高剂量Eto组(Eto-H,20μmol/L)、Eto-H+miR-inhibitor-NC、Eto-H+miR-204-5p inhibitor组。CCK-8法、集落形成实验检测细胞增殖情况,流式细胞术检测MKN45细胞凋亡情况,Transwell实验检测细胞侵袭能力;qRT-PCR检测细胞中miR-204-5p和HOXC8 mRNA表达水平;双荧光素酶实验检测miR-204-5p和HOXC8之间的靶向关系。结果与Ctrl组比较,Eto-L组、Eto-M组、Eto-H组、Eto-H+miR-inhibitor-NC组、Eto-H+miR-204-5p inhibitor组MKN45细胞存活率、集落形成率、细胞侵入率、HOXC8 mRNA水平均显著降低(F/P=33.391/<0.001、29.646/<0.001、44.814/<0.001、45.485/<0.001),细胞凋亡率和miR-204-5p水平显著升高(F/P=78.091/<0.001、22.665/<0.001);与Eto-H+miR-inhibitor-NC组比较,Eto-H+miR-204-5p inhibitor组MKN45细胞存活率、集落形成率、细胞侵入率、HOXC8 mRNA水平均显著升高(q/P=8.099/<0.001、7.587/<0.001、7.768/<0.001、11.162/<0.001),细胞凋亡率和miR-204-5p水平显著降低(q/P=10.254/<0.001、8.596/<0.001);与HOXC8-WT和miR-NC共转染细胞比较,HOXC8-WT和miR-204-5p mimic共转染的MKN45细胞中相对荧光酶活性显著降低(t/P=5.770/<0.001)。结论Eto可能通过上调miR-204-5p、下调HOXC8,减弱胃癌细胞MKN45增殖和侵袭能力,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 依托咪酯 微小RNA-204-5p/同源盒基因C8轴 作用机制
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番茄Sl WDR204基因正调控植物干旱胁迫 被引量:7
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作者 张琳 李欢欢 +2 位作者 于淑坤 黄曼 苗敏 《安徽农业科学》 CAS 2019年第1期96-98,114,共4页
为了进一步研究Sl WDR204的功能,克隆了番茄的Sl WDR204基因,通过亚细胞定位为研究其功能提供线索,并通过农杆菌介导法,利用RNAi技术获得Sl WDR204基因下调的转基因植株。干旱胁迫试验表明,转基因番茄对干旱胁迫更加敏感,说明Sl WDR204... 为了进一步研究Sl WDR204的功能,克隆了番茄的Sl WDR204基因,通过亚细胞定位为研究其功能提供线索,并通过农杆菌介导法,利用RNAi技术获得Sl WDR204基因下调的转基因植株。干旱胁迫试验表明,转基因番茄对干旱胁迫更加敏感,说明Sl WDR204基因正向调控植物对干旱的响应,这一发现为分子育种提供了新的靶标基因,并为阐明植物抗旱的分子机理奠定了基础。 展开更多
关键词 slwdr204基因 WD40家族蛋白 基因番茄 抗旱性
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葛根素对成骨细胞中miRNA-204的调控及其与Runx2基因表达的关系 被引量:4
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作者 张莹莹 周建斌 +1 位作者 赵凤鸣 詹秀琴 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期677-682,共6页
目的研究葛根素作用于成骨细胞MC3T3-E1后miRNA表达的变化以及与Runx2基因表达的关系。方法 RT-PCR和western blot法检测Runx2的mRNA表达水平和蛋白表达水平;miRNA表达谱检测葛根素作用于成骨细胞后可能靶向Runx2的miRNA;Target Scan、P... 目的研究葛根素作用于成骨细胞MC3T3-E1后miRNA表达的变化以及与Runx2基因表达的关系。方法 RT-PCR和western blot法检测Runx2的mRNA表达水平和蛋白表达水平;miRNA表达谱检测葛根素作用于成骨细胞后可能靶向Runx2的miRNA;Target Scan、Pic Tar等靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA;RT-PCR测定miRNA-204表达量;构建Runx23’UTR/突变型Runx2 3’UTR重组质粒、合成miRNA-204mimics和miRNA-204NC共转染MC3T3-E1细胞,双荧光素酶报告基因系统验证靶基因;miRNA-204mimics和miRNA-204inhibitor转染MC3T3-E1细胞,RT-PCR和western blot检测转染前后Runx2的mRNA表达量和蛋白表达量的变化。结果与空白组比较葛根素作用后Runx2的miRNA和蛋白表达均上升;miRNA-204表达水平下降;表达谱和靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA共同有miR-204、miR-3072-3p等;过表达miRNA-204后Runx2的蛋白表达水平下降,干扰miRNA-204表达后Runx2的蛋白水平上升。结论葛根素在成骨细胞中可通过调节靶向Runx2基因的miRNA-204来促进细胞增值分化。 展开更多
关键词 成骨细胞 葛根素 RUNX2 miRNA-204 基因 转染 过表达 干扰
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Ifi204基因表达对大鼠血管外膜成纤维细胞凋亡和迁移的影响 被引量:1
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作者 田茂波 吴强 +3 位作者 宋方 龙向淑 黄晶 肖燕 《基础医学与临床》 CSCD 2015年第5期603-609,共7页
目的探讨ifi204基因过表达与沉默对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAF)凋亡和迁移的影响。方法原代培养大鼠VAF,利用携带ifi204基因的慢病毒颗粒或空载体慢病毒颗粒感染VAF,分别作为实验组(ifi204 lv组)和阴性对照组(blank lv组)。用ifi204基... 目的探讨ifi204基因过表达与沉默对大鼠血管外膜成纤维细胞(VAF)凋亡和迁移的影响。方法原代培养大鼠VAF,利用携带ifi204基因的慢病毒颗粒或空载体慢病毒颗粒感染VAF,分别作为实验组(ifi204 lv组)和阴性对照组(blank lv组)。用ifi204基因小干扰RNA瞬时干预VAF使其沉默(ifi204 siRNA组)、空白小干扰RNA作为阴性对照组(control siRNA组),未经处理的VAF作为空白对照组(negative组)。流式细胞仪检测细胞凋亡,细胞划痕法和Transwell法测定细胞迁移情况,用real-time PCR和Western blot分别检测mRNA和蛋白表达。结果与blank lv组、control siRNA组、ifi204 siRNA组和negative组相比,ifi204 lv组的P204、P53 mRNA和蛋白表达及细胞凋亡率明显上调(P<0.05),细胞迁移速度降低(P<0.05)。转染ifi204 siRNA可抑制P204、P53的mRNA和蛋白表达(P<0.05),提高细胞活力,抑制细胞凋亡(P<0.05),加快细胞迁移速度(P<0.05)。结论 ifi204基因表达对大鼠VAF细胞凋亡和迁移的影响可能与激活P53表达有关。 展开更多
关键词 ifi204基因 血管外膜成纤维细胞 凋亡 迁移
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番茄WD40家族SlWDR204调控植株形态建成的功能分析
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作者 张琳 宗宁 +2 位作者 刘奎 赵焕兰 苗敏 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2021年第1期40-45,共6页
作物的株高是非常重要的农艺性状,影响农作物的品质和产量。植物中WD40蛋白在细胞周期调控等方面具有重要作用。克隆了番茄SlWDR204基因,利用植物基因工程技术,构建植物过表达载体pBI121-35S::Sl WDR204,通过农杆菌介导法获得过表达转... 作物的株高是非常重要的农艺性状,影响农作物的品质和产量。植物中WD40蛋白在细胞周期调控等方面具有重要作用。克隆了番茄SlWDR204基因,利用植物基因工程技术,构建植物过表达载体pBI121-35S::Sl WDR204,通过农杆菌介导法获得过表达转基因植株。生物信息学分析表明该蛋白含有典型的WD40蛋白基序。定量RT-PCR分析发现在番茄各器官及果实发育不同时期该基因均有表达。观察发现SlWDR204过表达转基因植株相对于野生型植株,表现出较长的茎秆长度,表明该基因是番茄植株高度的正向调控因子。酵母双杂交文库筛选发现转录因子Sl SPL3与Sl WDR204具有相互作用,Sl WDR204与Sl SPL3可能共同调控番茄植株的茎杆发育。该研究增加了对番茄WD40蛋白参与株高调控的认知。 展开更多
关键词 番茄 slwdr204基因 株高 转录因子 SlSPL3基因
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基于基因芯片对癫痫小鼠海马组织miRNA-204表达的研究及生物信息学分析
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作者 吴琼 吕婷婷 刁丽梅 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2022年第6期493-495,共3页
目的基于基因芯片对癫痫小鼠海马组织miRNA-204表达进行分析研究。方法选取癫痫小鼠海马组织,利用基因芯片技术检测出差异基因,并利用生物信息学对其靶基因进行富集分析和通路分析。结果本实验检测到与癫痫相关差异基因miRNA-204表达下... 目的基于基因芯片对癫痫小鼠海马组织miRNA-204表达进行分析研究。方法选取癫痫小鼠海马组织,利用基因芯片技术检测出差异基因,并利用生物信息学对其靶基因进行富集分析和通路分析。结果本实验检测到与癫痫相关差异基因miRNA-204表达下调,预测到相关457个相交集靶基因,富集分析得到27个基因功能(P<0.01)和16个信号通路(P<0.05)。结论通过分析,明确miRNA-204表达下调对癫痫小鼠的影响,并分析出miRNA-204相关通路Wnt,为进一步研究miRNA-204作用于癫痫的调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 基因芯片 癫痫 miRNA-204 WNT通路 生物信息学分析
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利木赞牛抑肌素基因Q204X及nt821突变快速检测方法
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作者 徐晶 赵锐峰 +4 位作者 李炳霞 赵辉 邱继文 孙志民 李德柏 《家畜生态学报》 2007年第6期38-40,共3页
抑肌素(GDF8)是骨骼肌细胞生长的重要负调控因子。抑肌素基因突变是牛"双肌"性状形成的分子遗传基础,在不同牛品种中存在着不同的抑肌素基因突变类型,在利木赞品种中,"双肌"性状主要是抑肌素基因第2外显子的Q204X... 抑肌素(GDF8)是骨骼肌细胞生长的重要负调控因子。抑肌素基因突变是牛"双肌"性状形成的分子遗传基础,在不同牛品种中存在着不同的抑肌素基因突变类型,在利木赞品种中,"双肌"性状主要是抑肌素基因第2外显子的Q204X型突变及第3外显子nt821突变。本研究报道一种新的检测该突变的简便方法。应用突变型与正常型引物在一次PCR反应中同时检测出不同的等位基因。对Q204X突变型PCR产物克隆测序分析表明,该片段确实含有一个能导致抑肌素功能缺陷的Q204X突变。 展开更多
关键词 抑肌素基因 Q204X突变 nt821突变 利木赞
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猪miR-204组织表达与重要靶基因筛选 被引量:6
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作者 王伟 滚双宝 +8 位作者 王鹏飞 黄晓宇 谢开会 雒瑞瑞 高小莉 张博 闫尊强 杨巧丽 马艳萍 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第9期1564-1573,共10页
基于Illumina Hiseq 4000高通量测序技术筛选得到仔猪感染C型产气荚膜梭菌耐受和易感组中显著上调表达的miR-204。为研究miR-204在各组织中的表达,进一步筛选miR-204参与调控仔猪C型产气荚膜梭菌感染的关键靶基因,采用实时荧光定量PCR... 基于Illumina Hiseq 4000高通量测序技术筛选得到仔猪感染C型产气荚膜梭菌耐受和易感组中显著上调表达的miR-204。为研究miR-204在各组织中的表达,进一步筛选miR-204参与调控仔猪C型产气荚膜梭菌感染的关键靶基因,采用实时荧光定量PCR方法检测了miR-204在7日龄仔猪各组织中的表达,利用MEGA7.0软件对其成熟体序列保守性进行分析,运用TargetScan、miRDB、PicTar软件进行靶基因预测,并用DAVID软件对靶基因进行Gene Ontology和KEGG Pathway通路富集分析,进一步采用qRT-PCR方法对筛选得到的关键靶基因在猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中进行靶向关系验证。结果表明,miR-204在7日龄仔猪肾脏、肝脏、胸腺、淋巴、十二指肠和回肠组织中均高度表达,其成熟体序列在脊椎动物间高度保守。3种软件预测到的共同靶基因有114个,这些靶基因显著(P<0.05)富集在15个GO功能和13个信号通路。结合前期得到的抗性基因,筛选到4个关键靶基因NR3C1、SIRT1、BCL2L2和DLG5,转染miR-204 mimics后,靶基因SIRT1、BCL2L2和DLG5极显著(P<0.01)下调表达。miR-204是参与调控仔猪抵抗C型产气荚膜梭菌感染的重要因子,SIRT1、BCL2L2和DLG5可能是miR-204的关键靶基因,其功能还需进一步验证。 展开更多
关键词 miR-204 组织表达 基因 产气荚膜梭菌
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miR-204-5p对口腔鳞状细胞癌生物活性和Fas、Ki67基因的作用及机制 被引量:1
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作者 华永晴 南欣荣 张海峰 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第22期5633-5637,共5页
目的探究miR-204-5p对口腔鳞状细胞癌生物活性及Fas、Ki67基因的作用机制。方法把miR-204-5p mimic和miR-204-5p NC转染至口腔鳞状细胞癌中,细胞分为:空白组、NC组和miR-204-5p组,比较3组细胞中miR-204-5p mRNA表达;用CCK-8检测3组口腔... 目的探究miR-204-5p对口腔鳞状细胞癌生物活性及Fas、Ki67基因的作用机制。方法把miR-204-5p mimic和miR-204-5p NC转染至口腔鳞状细胞癌中,细胞分为:空白组、NC组和miR-204-5p组,比较3组细胞中miR-204-5p mRNA表达;用CCK-8检测3组口腔鳞状细胞癌细胞的增殖能力;用Transwell检测细胞的侵袭能力;用流式细胞仪检测细胞的凋亡能力;用蛋白质印迹法检测Fas蛋白和Ki67蛋白的表达情况。结果miR-204-5p mRNA在口腔鳞状细胞癌细胞系中表达显著降低(P<0.05);转染后的miR-204-5p组中miR-204-5p mRNA明显升高(P<0.05)。增殖能力比较显示,空白组和NC组细胞的增殖能力没有显著的差异性(P>0.05);与空白组、NC组相比,miR-204-5p组口腔鳞状细胞癌CAL27的增殖能力显著降低(P<0.05)。侵袭能力比较显示,空白组和NC组细胞的侵袭数量没有明显的变化(P>0.05);miR-204-5p组与空白组、NC组相比较细胞的侵袭数目显著减少(P<0.05)。凋亡能力比较显示,空白组和NC组人口腔鳞状细胞癌细胞系CAL27凋亡率没有显著差异性(P>0.05);和空白组、NC组相比较,miR-204-5p组细胞的凋亡能力显著增加(P<0.05)。空白组和NC组中Fas和Ki67蛋白表达没有显著差异(P>0.05);和空白组、NC组相比较,miR-204-5p组中Fas蛋白表达显著升高,Ki67蛋白表达得到明显抑制(P<0.05)。结论miR-204-5p可有效抑制口腔鳞状细胞癌的增殖和侵袭,促进其凋亡;对Fas基因的表达有促进作用,同时抑制了Ki67的表达,进而发挥改善口腔鳞状细胞癌生物学活性的作用。 展开更多
关键词 miR-204-5p 口腔鳞状细胞癌 生物活性 抑癌基因自杀相关因子(Fas) KI67
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中国北方汉族人群A204等位基因的发现及家系调查 被引量:2
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作者 杜振军 牟曦光 +2 位作者 魏莉 赵秀丽 穆兵 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期135-138,共4页
目的了解中国北方汉族人群ABO血型系统A2亚型的基因型分布特点及A204的家系遗传规律。方法应用血清学试验筛选出A亚型标本,采用PCR-SSP法对ABO血型A2亚型作基因分型检测,随后直接DNA测序;对A204先证者作家系调查。结果从3 395名献血者... 目的了解中国北方汉族人群ABO血型系统A2亚型的基因型分布特点及A204的家系遗传规律。方法应用血清学试验筛选出A亚型标本,采用PCR-SSP法对ABO血型A2亚型作基因分型检测,随后直接DNA测序;对A204先证者作家系调查。结果从3 395名献血者中筛选出23例A亚型:13例为A205、8例为A201、1例为A204、1例不能确定;A205、A201、A204基因测序结果均与genebank的参考序列相同,1例基因分型不能确定者,基因测序结果与genebank的参考序列比对,确定其基因型为A102;A204先证者的A204是由其母亲遗传而来。结论 A2等位基因在所调查的人群(中国北方汉族)中以A205为主,其次为A201,存在A204,且A204可以在家系内遗传。 展开更多
关键词 A2亚型 等位基因 A204 家系调查 献血者 汉族
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miR-204靶向SIRT1基因调控高糖作用下视网膜色素上皮细胞增殖的分子机制
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作者 桂玉敏 彭建军 郭敬 《河北医药》 CAS 2020年第7期980-983,988,共5页
目的探讨miR-204通过靶向沉默信息调节因子1(SIRT1)对高糖作用下视网膜上皮细胞ARPE-19细胞增殖的调控作用及分子机制。方法以30 mmol/L葡萄糖体外处理ARPE-19细胞,采用脂质体转染法将miR-204 inhibitor和NC-inhibitor转染至ARPE-19细胞... 目的探讨miR-204通过靶向沉默信息调节因子1(SIRT1)对高糖作用下视网膜上皮细胞ARPE-19细胞增殖的调控作用及分子机制。方法以30 mmol/L葡萄糖体外处理ARPE-19细胞,采用脂质体转染法将miR-204 inhibitor和NC-inhibitor转染至ARPE-19细胞,将ARPE-19细胞分为正常葡萄糖组(NG组)、高糖组(HG组)、阴性对照组(anti-NC组)和miR-204转染组(anti-miR-204组)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ARPE-19细胞中miR-204的表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测细胞中ARPE-19细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和SIRT1蛋白表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力。通过TargetScan等数据库预测miR-204与SIRT1互补结合位点,采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-204和SIRT1的靶向关系。结果与NG组比较,HG组ARPE-19细胞中miR-204的表达水平明显升高(P<0.05),PCNA和SIRT1蛋白表达明显下调(P<0.05),细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。与HG组和anti-NC比较,anti-miR-204组ARPE-19细胞中miR-204的表达水平明显降低(P<0.05),PCNA和SIRT1蛋白表达明显上调(P<0.05),细胞增殖能力明显升高(P<0.05)。生物信息学预测结果显示miR-204与SIRT1存在互补结合位点。双荧光素酶报告基因实验检测结果显示miR-204和SIRT1能够靶向结合。结论高糖作用下视网膜上皮细胞中miR-204的表达上调,抑制miR-204的表达可靶向SIRT1逆转高糖诱导的ARPE-19细胞增殖抑制。 展开更多
关键词 miR-204 SIRT1基因 视网膜上皮细胞 增殖
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miR-204和SIRT1在结直肠癌中的表达情况及临床意义
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作者 黄立勇 吴佳明 +2 位作者 彭玉平 李进 陈治横 《中国现代医生》 2024年第22期58-62,共5页
目的探讨miR-204和沉默信息调节因子1(silence information regulator 1,SIRT1)在结直肠癌组织中的表达情况及其临床价值。方法收集2018年5月至2020年6月嘉兴大学附属医院胃肠外科诊治的60例结直肠癌患者的癌组织标本和癌旁组织标本为... 目的探讨miR-204和沉默信息调节因子1(silence information regulator 1,SIRT1)在结直肠癌组织中的表达情况及其临床价值。方法收集2018年5月至2020年6月嘉兴大学附属医院胃肠外科诊治的60例结直肠癌患者的癌组织标本和癌旁组织标本为研究对象,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-204及SIRT1的基因表达情况,Pearson分析比较miR-204与SIRT1基因的表达相关性。采用免疫组织化学SABC法检测SIRT1蛋白表达,并比较不同SIRT1蛋白表达与临床病理特征的关系。Kaplan-Meier法分析不同SIRT1蛋白表达的结直肠癌患者的生存差异。结果癌组织中miR-204基因mRNA表达显著低于癌旁组织(P<0.05),SIRT1基因mRNA表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。癌组织中SIRT1蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05)。Pearson相关分析显示miR-204与SIRT1基因mRNA在癌旁组织和癌组织中的表达均呈负相关(r=–0.647、–0.737,P<0.05)。SIRT1蛋白的表达与结直肠癌的分化水平、浸润层次、淋巴结转移与否及TNM分期相关(P<0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤大小及肿瘤部位无关(P>0.05)。Kaplan-Meier分析显示癌组织中SIRT1阳性表达患者的生存率显著低于SIRT1阴性表达患者(χ^(2)=5.001,P=0.025)。结论结直肠癌组织中miR-204表达下调,SIRT1表达上调,二者可能通过相互影响共同促进结直肠癌的转移、侵袭,并影响患者预后。 展开更多
关键词 结直肠癌 miR-204 沉默信息调节因子1 基因表达
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微小RNA204在人肾透明细胞癌中的表达及临床意义 被引量:2
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作者 张林超 赵俊峰 孙继建 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第15期2034-2036,共3页
目的研究微小RNA204(miR-204)在人肾透明细胞癌(RCCC)中的表达及临床意义。方法收集泌尿外科行手术切除的RCCC及对应癌旁正常肾脏组织标本共65例,运用qRT-PCR技术检测miR-204在RCCC及癌旁组织中的表达水平,统计分析miR-204表达水平与患... 目的研究微小RNA204(miR-204)在人肾透明细胞癌(RCCC)中的表达及临床意义。方法收集泌尿外科行手术切除的RCCC及对应癌旁正常肾脏组织标本共65例,运用qRT-PCR技术检测miR-204在RCCC及癌旁组织中的表达水平,统计分析miR-204表达水平与患者临床病理资料间的相关性;采用人工合成的miR-204模拟物转染人RCCCCaki-1细胞,分别采用qRT-PCR及Western-Blot检测转染后miR-204下游潜在靶点Bcl-2及SIRT1 mRNA及蛋白的表达变化。结果miR-204在RCCC组织中表达水平显著低于对应癌旁正常肾组织(P<0.05);miR-204低表达与肿瘤体积增大(>3cm,P<0.05)、肿瘤淋巴结转移(P<0.05)及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期,P<0.05)显著相关;miR-204转染人RCCCCaki-1细胞后可显著降低细胞内Bcl-2及SIRT1mRNA及蛋白的表达水平(P<0.05)。结论 miR-204在RCCC组织中表达下调并与肿瘤恶性临床病理特征有关,miR-204可能通过下调Bcl-2及SIRT1的表达来抑制RCCC的发生、发展过程。 展开更多
关键词 微小RNA204 肾透明细胞癌 基因 BCL-2
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MiR-204对角膜上皮细胞增生的抑制作用 被引量:1
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作者 梁荣鑫 杜金林 黄涛 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期116-120,共5页
背景作为人角膜上皮组织的主要细胞成分,角膜上皮细胞通过迁移、增生以及分化等生物学行为在角膜上皮组织的损伤修复中发挥重要作用。微小RNA(miRNA)是内源性表达的单链非编码RNA,参与多种生物活动的调控过程,研究报道miR-204在正... 背景作为人角膜上皮组织的主要细胞成分,角膜上皮细胞通过迁移、增生以及分化等生物学行为在角膜上皮组织的损伤修复中发挥重要作用。微小RNA(miRNA)是内源性表达的单链非编码RNA,参与多种生物活动的调控过程,研究报道miR-204在正常角膜上皮组织内呈高表达,但其生物学功能仍不清楚。目的研究miR-204对角膜上皮细胞增生的调控及其分子机制。方法收集角膜屈光手术过程中患者脱落的角膜上皮组织,同时体外培养人角膜上皮细胞株(HCECs)。采用实时荧光定量PCR技术分别检测角膜上皮组织和HCECs中miR-204的表达情况。将培养的HCECs分为3个组,分别用含miR-204mimic的脂质体或空脂质体转染到HCECs内作为miR-204mimic转染组和阳性对照组,正常培养的细胞作为正常对照组。用平板克隆形成试验检测各组培养细胞的克隆数以评价细胞的增生能力;采用流式细胞仪检测不同细胞周期的细胞百分比;采用Westernblot技术检测各组细胞中磷酸化细胞内细胞周期相关蛋白p-RB、转录因子E2F1、p27、细胞周期蛋白CyclinA、细胞周期蛋白依赖性激酶CDC2、磷酸化CDC2(p-CDC2)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK2)的表达情况。结果miR-204mRNA在正常人角膜上皮组织中的相对表达量为1.077±0.268,明显高于HCECs中的0.041±0.018,差异有统计学意义(t=7.700,P〈0.001)。平板克隆形成试验显示miR-204mimic转染组细胞克隆数明显少于阳性对照组和空白对照组。流式细胞仪检测结果显示,miR-204mimic转染组G1期细胞百分比为47.75%,明显高于阳性对照组的37.23%和空白对照组的40.72%。Westernblot检测表明,miR-204mimic转染组细胞中CDK2和p-CDC2蛋白的相对表达量明显低于阳性对照组,E2F1和P27蛋白的相对表达量明显高于阳性对照组,差异均有统计学意义(t=5.39、10.65、14.87、25.11,均P〈0.01)。结论正常的角膜上皮组织中miR-204的高表达可能参与角膜上皮细胞的非增生状态的维持。miR-204可上调E2F1和p27蛋白在HCECs中的表达,抑制复合物CDK2/Cyclin A和P-CDC2/CyelinA的形成,使角膜上皮细胞停滞在G1期,从而抑制角膜上皮细胞的增生。 展开更多
关键词 角膜上皮细胞 微小RNA 细胞增生 细胞周期 基因表达 miR一204
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山西地区61例乙型肝炎病毒耐药变异与基因型检测研究分析
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作者 王晓玲 任建平 +2 位作者 王效红 高颖 杨少芳 《实用检验医师杂志》 2013年第2期102-105,共4页
目的通过对山西省乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)P区基因测序的研究,探讨HBV基因变异位点及基因分型的分布规律。方法采集61例HBV患者血清标本,采用双脱氧末端终止法对待检标本P区进行基因序列检测,用Chromas 2.23软件对... 目的通过对山西省乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)P区基因测序的研究,探讨HBV基因变异位点及基因分型的分布规律。方法采集61例HBV患者血清标本,采用双脱氧末端终止法对待检标本P区进行基因序列检测,用Chromas 2.23软件对测序结果进行分析,通过在NCBI网站进行序列比对,并进行基因分型。结果53例受检患者均检测出P区的碱基以及氨基酸序列图,其中,有28例(52.8%)发生突变,突变位点分别有rt204、rt180、rt236、rt173、rt181、n214、rt250、rt213、rt184、rt237;各突变的位点中,以rt204和rt180位点的突变比例最高,分别占67.9%和53.5%。2例为B基因型,阳性率为3.8%,其余51例均为C基因型,阳性率为96.2%。结论山西省地区HBV分布以C基因型多见;发生变异的HBV病毒株中,10个变异位点均有涉及,但是仍以rt204位点突变为主,伴随其他位点突变,提示rt204位点可能存在顺式作用元件,在HBVDNA基因转录、翻译中起到调控作用。 展开更多
关键词 P区基因测序 HBV基因变异 核苷类药物 rt204位点突变
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miRNA-204与肿瘤关系的研究进展 被引量:6
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作者 江海波 葛瑞祥 +1 位作者 钱冬喜 毛捷 《沈阳医学院学报》 2016年第6期479-482,共4页
miRNA-204在人体中广泛表达,并在很多肿瘤中表达异常。miRNA-204在人体内通过对靶基因的调节,在肿瘤的发生发展过程中起重要作用。miRNA-204常作为肿瘤的抑癌基因,且通过相关分子机制可以抑制肿瘤的侵袭、转移,也可以作为潜在的分子标... miRNA-204在人体中广泛表达,并在很多肿瘤中表达异常。miRNA-204在人体内通过对靶基因的调节,在肿瘤的发生发展过程中起重要作用。miRNA-204常作为肿瘤的抑癌基因,且通过相关分子机制可以抑制肿瘤的侵袭、转移,也可以作为潜在的分子标记物用于肿瘤的治疗。对miRNA-204的深入研究,可对肿瘤的预防及治疗提供新思路。 展开更多
关键词 miRNA-204 肿瘤 基因
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miR-204和Six1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义 被引量:2
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作者 何舟 常毅 李涛 《中国现代普通外科进展》 CAS 2022年第1期27-31,共5页
目的:研究甲状腺乳头状癌(PTC)组织中微小RNA-204(miR-204)、同源异型盒基因1(Six1)表达水平,并分析两者对PTC的诊断价值。方法:选取2016年3月—2019年3月湖北省枣阳市第一人民医院行手术治疗的PTC患者80例,取其手术切除的完整癌组织标... 目的:研究甲状腺乳头状癌(PTC)组织中微小RNA-204(miR-204)、同源异型盒基因1(Six1)表达水平,并分析两者对PTC的诊断价值。方法:选取2016年3月—2019年3月湖北省枣阳市第一人民医院行手术治疗的PTC患者80例,取其手术切除的完整癌组织标本为PTC组,取对应癌旁组织为癌旁组。采用免疫组织化学法测定Six1蛋白表达情况;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测组织中miR-204、Six1 mRNA水平;Pearson法分析PTC组织中miR-204、Six1 mRNA水平的相关性;ROC曲线分析miR-204、Six1mRNA表达水平对PTC的诊断价值;分析miR-204、Six1蛋白表达与PTC临床病理因素的关系。结果:与癌旁组比较,PTC组miR-204/U6水平显著降低(P<0.05),Six1 mRNA水平及Six1蛋白阳性表达率显著升高(P<0.05)。Pearson分析结果显示,PTC组织中miR-204和Six1 mRNA水平呈负相关(r=-0.518,P<0.05)。ROC曲线分析显示,miR-204、Six1 mRNA水平诊断PTC的AUC分别为0.869、0.858,两者联合诊断的AUC为0.951。miR-204低表达、Six1蛋白呈阳性表达与肿瘤分化程度低、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、淋巴结转移相关(P<0.05)。结论:PTC组织中miR-204异常低表达、Six1 mRNA异常高表达,两者联合检测对PTC有较高诊断价值。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 微小RNA-204 同源异型盒基因1 诊断
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LncRNA XIST、miR-204及FN1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义
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作者 孙茂林 张文伟 +6 位作者 姜立伟 臧传善 秦作荣 王效军 孙彦 刘明波 邱杰 《临床医学进展》 2021年第7期3033-3046,共14页
目的:探讨LncRNA XIST,miR-204及FN1在PTC组织和癌旁组织及LncRNA XIST在PTC细胞系中的表达及意义。方法:应用Real-time PCR技术检测20例甲状腺乳头状癌和其癌旁组织中LncRNA XIST,miR-204及FN1的表达情况,应用QPCR检测3株甲状腺癌细胞... 目的:探讨LncRNA XIST,miR-204及FN1在PTC组织和癌旁组织及LncRNA XIST在PTC细胞系中的表达及意义。方法:应用Real-time PCR技术检测20例甲状腺乳头状癌和其癌旁组织中LncRNA XIST,miR-204及FN1的表达情况,应用QPCR检测3株甲状腺癌细胞系(BCPAP, TPC-1, KTC-1) LncRNA XIST、miR-204-5p的表达水平,应用荧光原位杂交(FISH)检测PTC细胞系BCPAP中LncRNA XIST的表达定位,应用双荧光素酶报告基因检测人293T细胞的LncRNA XIST、miR-204及FN1相互作用。结果:与癌旁组相比,PTC癌组织组的LncRNA XIST的表达水平显著上调(p 【0.05),PTC癌组织组的FN1的表达水平极显著上调(p 【0.01),而PTC癌组织组的miR-204-5p的表达水平极显著下调(p 【0.01),差异均具有统计学意义;BCPAP细胞的LncRNA XIST的表达水平最高,且miR-204-5p的表达水平最低;LncRNA XIST主要在细胞质中表达;LncRNA XIST与miR-204有相互作用(p 【0.05),FN1与miR-204有相互作用(p 【0.05)。结论:LncRNA XIST在甲状腺乳头状癌中高表达,miR-204在甲状腺乳头状癌中低表达,FN1在甲状腺乳头状癌中高表达;LncRNA XIST,miR-204及FN1相互作用,参与甲状腺乳头状癌的发生发展,并可为甲状腺乳头状癌潜在诊断标志物和治疗靶点的寻找提供理论依据,LncRNA XIST可能是甲状腺乳头状癌诊断和治疗的一个新靶点。 展开更多
关键词 LncRNA XIST基因 miR-204基因 FN1基因 甲状腺乳头状癌
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miR-204与消化系统常见肿瘤关系的研究进展 被引量:1
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作者 张彩灵 覃小珊 黄赞松 《临床医学研究与实践》 2021年第18期183-186,共4页
miRNAs是一类内源性的非编码单链小RNA分子,长度约为18~22 nt个核苷酸,它能与mRNA的3′端非编码区(3′UTR)靶向结合,从而在转录或翻译水平上调控靶基因的表达。miR-204作为miRNAs的重要一员,既参与细胞的生长发育、增殖、分化及凋亡,又... miRNAs是一类内源性的非编码单链小RNA分子,长度约为18~22 nt个核苷酸,它能与mRNA的3′端非编码区(3′UTR)靶向结合,从而在转录或翻译水平上调控靶基因的表达。miR-204作为miRNAs的重要一员,既参与细胞的生长发育、增殖、分化及凋亡,又参与各类肿瘤的多个生物学过程。已有研究发现,miR-204与肿瘤的关系密切,尤其在消化系统肿瘤的发生、发展中起到重要作用。近年来,miR-204与肿瘤的研究取得了许多突破性进展。本文主要阐述miR-204与消化系统常见肿瘤关系的研究进展,旨在为消化系统常见肿瘤的基础实验及临床治疗研究提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 miR-204 消化系统肿瘤 抑癌基因 基因 作用机制 研究进展
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miR-204在肺癌组织中的表达与临床病理的关系 被引量:1
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作者 潘兆宝 吉华青 +2 位作者 韩丽芳 董安山 史立宏 《中国社区医师》 2017年第36期104-105,107,共3页
目的:探讨miR-204在肺癌组织中的表达与临床病理的关系。方法:选择行肺癌切除术的78例石蜡存档组织标本进行研究,取癌症组织作为试验组,取癌旁正常组织作为对照组。采用荧光定量实时PCR(RT-PCR)对肺组织miR-204荧光相对表达量进行检测,... 目的:探讨miR-204在肺癌组织中的表达与临床病理的关系。方法:选择行肺癌切除术的78例石蜡存档组织标本进行研究,取癌症组织作为试验组,取癌旁正常组织作为对照组。采用荧光定量实时PCR(RT-PCR)对肺组织miR-204荧光相对表达量进行检测,并分析其荧光相对表达量和性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、分化程度、组织类型的关系。结果:试验组miR-204表达荧光相对含量水平较对照组显著降低(P<0.05);miR-204表达荧光相对含量在性别、年龄方面比较,差异无统计学意义(P>0.05),而在病程、肿瘤长径、淋巴结转移、TNM分期、分化程度和组织类型等不同临床病理条件下其荧光相对含量水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肺癌组织中miR-204表达荧光相对免疫含量较正常组织明显降低,且病程越长、肿瘤越大,淋巴结转移、TNM≥Ⅲ期、低分化和非小细胞肺癌组织中其表达水平均较低,推测miR-204靶基因对肺癌发生、恶化和进展存在显著调控作用。 展开更多
关键词 miR-204基因 肺癌组织 荧光定量检测 临床病理
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