SLC6A8通过BNIP3L调控线粒体自噬促进肝癌细胞增殖

目的:探讨SLC6A8通过BNIP3L调控线粒体自噬对肝癌细胞增殖的影响。方法:通过TCGA数据库分析SLC6A8基因在肝癌组织中的表达情况,并与BNIP3L表达进行相关性分析。使用RT-PCR和Western blot技术检测SLC6A8过表达人肝癌Huh-7及Hep3B细胞中SLC6A8和BNIP3L的表达。免疫荧光标记和CCK-8检测法用于观察SLC6A8过表达人肝癌Huh-7及Hep3B细胞线粒体自噬和细胞增殖率。使用CCK-8检测法评估在沉默BNIP3L后SLC6A8过表达人肝癌Huh-7及Hep3B细胞增殖率。结果:SLC6A8在肝癌组织中显著高表达,并与BNIP3L表达呈正相关。SLC6A8过表达可显著促进线粒体自噬和人肝癌Huh-7及Hep3B细胞的增殖。此外,SLC6A8过表达显著促进BNIP3L mRNA和蛋白的表达。沉默BNIP3L后,SLC6A8过表达对肝癌细胞增殖的促进作用被逆转。结论:SLC6A8在肝癌组织中的高表达与BNIP3L有正相关性,且SLC6A8的过表达能促进线粒体自噬和肝癌细胞的增殖,沉默BNIP3L可逆转SLC6A8过表达对肝癌细胞增殖促进作用。这为肝癌的治疗提供了新的靶点和策略。

SLC6A8 promotes liver cancer cell proliferation by regulating mitochondrial autophagy through BNIP3L

Objective: To investigate the effect of SLC6A8 on the proliferation of liver cancer cells by regulating mitophagy through BNIP3L. Methods: The expression of the SLC6A8 gene in liver cancer tissues was analyzed using the TCGA database, and its correlation with BNIP3L expression was assessed. RT-PCR and Western blot techniques were employed to detect the expression of SLC6A8 and BNIP3L in human liver cancer Huh-7 and Hep3B cells. Immunofluorescence labeling and CCK-8 assay were used to observe mitochondrial autophagy and cell proliferation rate in SLC6A8-overexpressing Huh-7 and Hep3B cells. Evaluate the proliferation rate of SLC6A8-overexpressing Huh-7 and Hep3B cells after silencing BNIP3L using the CCK-8 detection method. Results: SLC6A8 was significantly overexpressed in liver cancer tissues and positively correlated with BNIP3L expression. Overexpression of SLC6A8 significantly promoted mitochondrial autophagy and proliferation of Huh-7 and Hep3B cells. Additionally, SLC6A8 overexpression significantly enhanced the expression of BNIP3L mRNA and protein. Upon BNIP3L silencing, the proliferative effect of SLC6A8 overexpression on liver cancer cells was reversed. Conclusion: High expression of SLC6A8 in liver cancer tissues is positively correlated with BNIP3L, and overexpression of SLC6A8 promotes mitochondrial autophagy and liver cancer cell proliferation. Silencing BNIP3L can reverses the effect of overexpression of SLC6A8 on liver cancer cell proliferation. This provides new targets and strategies for the treatment of liver cancer.

脑肌酸缺乏综合征Ⅰ型两家系临床特征及SLC6A8基因变异分析

该文报道2例由SLC6A8基因变异导致的脑肌酸缺乏综合征Ⅰ型(CCDS1)的临床及遗传学特征。2例患儿均为男性,年龄分别为2岁10个月、8岁11个月,主要表现为精神运动发育落后、抽搐。均有一哥哥出现类似症状,患儿1母亲轻度智力低下。经家系基因分析发现X染色体上SLC6A8基因分别存在c.200G>A(p.Gly67Asp)和c.626_627delCT(p.Pro209Argfs*87)变异,变异均来自患儿母亲。这2个变异分别评级为可能致病性变异、致病性变异,既往未见文献报道。该研究拓展了SLC6A8基因突变谱,对精神运动发育落后、癫痫的男性患者的诊断具有重要意义。

SLC6A8基因变异致脑肌酸缺乏综合征1例患儿的临床与遗传学分析

目的探讨1例由SLC6A8基因变异所致脑肌酸缺乏综合征(CCDS)患儿的临床表现及遗传学特点。方法选取2021年3月5日因"间断抽搐发作1月余"就诊于复旦大学附属儿科医院的1例CCDS患儿作为研究对象,收集其临床资料。应用全外显子组测序(WES)对患儿进行基因变异分析,对可能的变异位点通过Sanger测序进行验证并应用转录组测序(RNA-seq)技术验证剪接变异。结果患儿为1岁10月龄男性,精神运动发育落后,1岁9月龄始无热惊厥发作,母亲与外婆均有惊厥发作史,患儿头颅MRS示双侧基底节区及丘脑肌酸峰降低,提示脑肌酸缺乏。WES结果发现患儿X染色体SLC6A8基因存在c.1767+1_1767+2insA剪接变异,母亲及外婆均为该变异杂合子。RNA-seq结果显示患儿SLC6A8基因exon12处存在异常可变剪接事件,该变异导致蛋白发生截短。根据美国医学遗传学与基因组学学会变异指南,c.1767+1_1767+2insA评级为可能致病变异(PVS1_Strong+PM2_Supporting+PP4)。结论SLC6A8基因c.1767+1_1767+2insA变异考虑是该CCDS患儿致病原因。该变异的检出丰富了该基因的变异谱。

肌酸相关基因在小鼠中枢神经系统中的表达模式分析

肌酸能够维持细胞中ATP的平衡,在细胞能量代谢方面发挥了关键作用.肌酸合成和转运异常会引起肌酸缺乏综合征,造成神经发育迟缓和神经退行性疾病.截至目前,肌酸相关调控基因在中枢神经系统中的表达模式尚不清楚.前期通过筛选转录组数据库,初步发现肌酸相关基因Slc6a8、Gatm和Gamt主要表达在少突胶质谱系细胞中.为验证这一发现,通过RNA原位杂交,分别检测了Slc6a8、Gatm、Gamt在不同发育阶段小鼠脑和脊髓组织中的表达模式.结合免疫组化,进一步确认Slc6a8、Gatm、Gamt主要表达于分化后的少突胶质细胞中.上述研究结果表明,在中枢神经系统中,少突胶质细胞可能是主要的肌酸合成细胞,对整个中枢神经系统的肌酸稳态维持及能量代谢具有重要的支持功能.

SLC6A8基因新发突变致肌酸缺乏综合征一家系

对2018年9月新乡医学院第一附属医院儿科确诊的 SLC6A8基因突变致肌酸缺乏综合征(CDS)一家系的临床特征、遗传学和生化特点进行分析。患儿,男,初诊时13岁,因"间断呕吐1年"就诊,对症支持治疗后好转,间隔7个月,再次发病住院确诊。自幼进食少,便秘。12岁始出现呕吐伴严重便秘,间断发作。患儿1岁6个月会走。2岁会叫爸妈,检查时只会说简单句子。很少与父母交流。其兄有严重智力障碍和癫痫。其母存在认知功能障碍,有反复死产和流产史。初诊患儿查体:体质量22 kg(< P3),身高131 cm(< P3),头围52 cm,重度智力障碍,表情呆滞,交流困难,宽前额,骨骼肌萎缩,弓形足。头颅磁共振成像示患儿双侧侧脑室轻度对称性扩大。脑磁共振波谱检查示患儿双侧海马未见异常。智力障碍相关基因测序发现,患儿 SLC6A8基因c.626(exon3)-c.627(exon3)delCT半合子突变,其母及兄均携带该变异基因,其父及外祖母均无该基因突变。患儿尿肌酸/肌酐比值增高,胍基乙酸正常,进一步证实 SLC6A8基因新发位点移码突变致CDS。临床上遇到不明原因智力障碍男童,反复出现胃肠道症状,尤其是婴儿期出现喂养困难及生长发育迟缓时,行尿胍基乙酸和肌酸/肌酐比值测定筛查及基因检测可早期诊断CDS。

SLC6A8基因突变家系1例报道

目的 探讨基因检测在脑肌酸缺乏综合征早期诊断中的临床意义,提高广大临床工作者对本病的认识。方法 报道1例通过基因检测确诊的肌酸缺乏综合征1型的中国家庭,该家庭兄弟二人均有明显的智力障碍,父母表型正常。对患者进行详细的病史询、电生理检查和全外显子组测序,基因检测结果通过一代测序验证。结果 在中国家庭中发现了SLC6A8基因的一个新的变异位点c.1569G>A,该变异为无义变异,兄弟二人均为半合子,遗传自母亲,母亲为杂合子,父亲为野生型。结论 扩大了中国人群中SLC6A8基因的变异谱。通过全外显子组测序并结合患者详细的临床评估有利于早期诊断肌酸缺乏综合征。

X连锁隐性遗传脑肌酸缺乏综合征1型1家系基因检测与产前诊断

目的 分析脑肌酸缺乏综合征(cerebral creatine deficiency syndrome, CCDS)1型1家系的致病基因突变情况,并进行产前诊断。方法 采集先证者及其父母外周血提取基因组DNA,采用靶向捕获方法对基因组全部外显子区域进行测序,经比对分析发现可疑变异位点,采用Sanger测序法进行验证。明确致病变异后,采集母亲羊水,进行产前诊断并随访。结果 先证者存在SLC6A8基因(NM_005629) c.1631C>T错义变异,该突变可导致其编码的544位脯氨酸被异亮氨酸代替;先证者母亲存在SLC6A8基因c.1631C>T杂合变异;先证者父亲SLC6A8基因c.1631C>T位点为野生型。Sanger测序显示,胎儿SLC6A8基因c.1631C>T位点为野生型。出生后随访3个月,发育正常,未见CCDS 1型表型。结论 SLC6A8基因c.1631C>T错义变异是该CCDS 1型家系的致病原因,基因诊断和产前诊断可有效降低生育CCDS 1型患儿的风险。