Slit/Robo信号在肿瘤发生发展中的作用

Slit/Robo信号作为神经导向因子在神经系统发育中具有导向轴突生长和排斥神经细胞迁移的重要作用,该信号还有抑制白细胞的趋化功能和在发育期吸引血管发生的作用。目前Slit/Robo的研究主要集中在中枢神经系统发育上,在肿瘤中的作用尚无定论。本文从Slit/Robo信号在肿瘤中的表达情况、在肿瘤新生血管和细胞迁移中的作用及其可能介导的信号通路等方面做一综述,探讨Slit/Robo信号作为肿瘤治疗靶点的潜在意义,对其深入研究具有重要的理论和临床意义。

Slit/Robo信号在血管新生及内皮细胞迁移中作用的研究进展

在研究轴突导向分子Slit及其受体Roundabout(Robo)轴突导向功能过程中,发现Slit/Robo信号同样参与血管新生及内皮细胞迁移的调控。但Slit/Robo信号究竟起抑制还是促进作用目前还存在争议,该文从抑制和促进两方面对Slit/Robo信号在血管新生及内皮细胞迁移中的作用进行综述,以期进一步探讨Slit/Robo信号在该领域的功能研究。

SLIT/ROBO信号通路在肿瘤、宫颈癌中作用的研究进展

人类ROBO与其配体SLIT家族的成员是肿瘤发生发展中的重要信号分子。近年来研究显示,SLIT/ROBO可作为促癌或抑癌因子参与多种肿瘤的发生、发展和转移等生物调控过程。SLIT/ROBO在宫颈癌组织中也有异常表达,且与启动子甲基化相关,具有促进宫颈癌细胞凋亡的作用。本文就SLIT/ROBO信号通路在肿瘤、宫颈癌中作用的研究进展进行综述。

电针对周围神经损伤大鼠轴突靶向再生修复的Slit/Robo信号通路的影响

目的:探讨电针对周围神经损伤大鼠轴突靶向再生修复大鼠的Slit/Robo信号通路的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠120只,Excel软件随机分成空白组、假手术组、模型组和电针组,每组30只,每组再分为7 d、15 d和23 d3个亚组,每亚组10只。后两组大鼠右坐骨神经横断后即刻端对端缝合造模。假手术组只切开相应皮肤再缝合。造模后第二天,电针组取'环跳''足三里'进行电针治疗,1次/d,每次15 min,7 d为1个疗程,连续治疗3个疗程,疗程间隔1d。空白组不予干预,模型组、假手术组予模拟电针组抓取。每疗程结束后,分别检测比较大鼠腓肠肌湿重恢复率(WWG);实时荧光定量核酸扩增检测系统(qPCR)观察比较坐骨神经Robo1mRNA的表达变化;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)观察比较坐骨神经和相应脊髓段(L4-L6) Slit2、Robo1蛋白的表达变化。结果:与空白组、假手术组比较,模型组、电针组WWG恢复率降低(P <0. 01);与模型组比较,电针组WWG恢复率逐渐升高(P <0. 05)。电针组与模型对照组比较,大鼠损伤的坐骨神经和相应脊髓段中Slit2蛋白表在第1疗程后(7 d)达到高峰后逐渐降低,3个疗程均高于模型组(P <0. 01),且两组均高于空白组和假手术组(P <0. 01);Robo1蛋白及其mRNA表达也有类似规律,但表达高峰在第2疗程后(15 d)。结论:电针治疗能增强损伤坐骨神经和相应脊髓段中Slit2蛋白、Robo1蛋白及其mRNA的表达,调控Slit/Robo信号通路可能是其促进周围神经损伤再生修复的机制之一。

生长锥导向分子Slit/Robo对神经生长的调控作用

Slit/Robo是一对生长锥导向分子。Slit蛋白能指导轴突寻找延伸目标 ,起到领航的作用 ,还能促进轴突分枝 ,并能控制轴突迁移。Robo(Roundabout)是Slit相应的受体。在果蝇体内 ,Slit/Robo能阻止神经细胞穿越中线 ;在脊椎动物 ,Slit/Robo以特殊的方式引导轴突生长 ,并决定轴突交叉发生的部位。Slit/Robo相互作用可能通过诱导胞内RhoGTPases的级联反应来影响生长锥的生长。

Slit/Robo信号通路在肿瘤发生发展中的作用

分泌型糖蛋白Slit通过结合跨膜受体Roundabout(Robo)发挥生物学活性。Slit/Robo信号通路除了在神经系统中发挥轴突导向作用外,还参与了肿瘤的发生、发展。本文侧重于从Slit/Robo结构、Slit/Robo信号在肿瘤中的表达,Slit/Robo信号对肿瘤新生血管、肿瘤细胞生长及迁移的作用等方面进行综述,为深入研究Slit/Robo信号通路与肿瘤的关系提供参考依据。

Slit/Robo信号通路在胰腺癌细胞中的表达及其对胰腺癌细胞生长的影响

目的探讨Slit/Robo信号通路在胰腺癌细胞中的表达情况,及其对胰腺癌细胞增殖的影响。方法分别采用RT-PCR、免疫细胞化学、免疫荧光方法检测胰腺癌细胞株Bx PC-3、Panc-1中Slit和Robo的表达;通过Slit/Robo信号通路阻断剂Robo N阻断该通路,采用MTT法观察其对细胞生长的影响。结果胰腺癌细胞株BxPC-3、Panc-1中存在着Slit2、Robo1基因和蛋白表达;在Robo N的作用下,胰腺癌细胞体外生长受到抑制,增殖能力下降。结论胰腺癌细胞中可能存在着Slit2/Robo1信号通路,它能够负性调节胰腺癌细胞的生长,提示Slit/Robo信号通路可能参与了胰腺癌的发生发展的过程。

Slit/Robo信号通路在妇科肿瘤发生中的作用

Slit/Robo信号作为神经导向因子在神经系统发育中具有导向轴突生长和排斥神经细胞迁移的重要作用。目前研究发现,Slit/Robo信号也可能参与了肿瘤发生发展中某些关键步骤,如细胞迁移和肿瘤新生血管的形成,但其在妇科肿瘤中的作用尚不清楚。从Slit/Robo信号在女性生殖系统生理、病理状态下的表达情况,以及参与妇科肿瘤发生的机制等方面做一综述。

七氟醚预处理对缺氧诱导因子1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响

目的评价七氟醚预处理对原代大鼠皮质神经元氧糖剥夺-复糖复氧后缺氧诱导因子(HIF)1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响。方法出生24h内的SD大鼠体外提取原代皮质神经元,以1×106/ml的密度接种于6孔板(2ml/孔)培养皿,采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)神经元正常培养;氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)神经元行氧糖剥夺90min;七氟醚预处理组(S组)在行氧糖剥夺前预先给予2%七氟醚处理1h,余同O组;HIF-1α抑制组(H组)在七氟醚预处理前行2ME(5μM/L)处理72h,余同S组。复糖复氧24h后收集神经元,采用Hoechst/PI双染色法测定神经元凋亡率;采用RT-PCR法测定HIF-1α、Slit2和Robo1mRNA的表达量;采用Western blot法测定HIF-1α、Slit2和Robo1蛋白的表达量。结果与C组比较,O组神经元PI阳性率明显升高,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显上调,Slit2和Robo1mRNA和蛋白表达量明显上调(P<0.05);与O组比较,S组神经元PI阳性率明显下降,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显上调,Slit2和Robo1mRNA和蛋白表达量明显上调(P<0.05);与S组比较,H组神经元PI阳性率明显升高,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显下调,Slit2和Robo1 mRNA和蛋白表达量明显下调(P<0.05)。结论七氟醚预处理通过HIF-1α增加Slit2/Robol信号通路的表达,抑制原代大鼠皮质神经元在氧糖剥夺-复糖复氧后的凋亡。

Slit/Robo信号与肿瘤

神经导向因子Slit信号最早是在神经系统发现,并通过受体Robo家族成员发挥轴突导向排斥作用,近年来的研究表明其在包括肾脏、肺、皮肤等多种组织表达,参与调控正常的组织细胞生理功能,此外,在肿瘤中的研究表明Slit/Robo在肿瘤细胞的表达受到动态调控,从而参与多种肿瘤的发生发展过程。本文侧重于从Slit/Robo结构、Slit/Robo信号在肿瘤细胞中的表达,对肿瘤细胞恶变、增殖、迁移的作用,以及对肿瘤血管再生的影响等几个方面做一综述,探讨Slit/Robo信号的复杂性及其对不同肿瘤发生发展的作用,对其深入研究能够揭示Slit/Robo作为辅助诊断标志和肿瘤治疗靶点的潜在意义。

Slit/Robo通路参与调控小鼠黄体细胞凋亡

本文旨在研究Slit/Robo家族成员在小鼠卵巢组织中的表达及其功能。用real-time PCR检测Slit/Robo家族成员在小鼠卵巢中的mRNA表达丰度,用免疫组织化学方法检测Slit2/Robo1在卵巢组织中的定位,用real-time PCR和免疫组织化学方法检测Slit2/Robo1在不同时期黄体组织中表达的变化,并用Slit/Robo信号通路的阻断剂ROBO1/Fc chimera在体外研究其在小鼠黄体组织中的功能。结果显示,在Slit/Robo家族成员中,配体Slit2和受体Robo1在小鼠卵巢组织中的表达丰度最高,Slit2和Robo1表达定位于小鼠的黄体细胞。与发情前期卵巢相比,间情期卵巢组织中Slit2和Robo1的mRNA表达水平均显著上调(P <0.01, P <0.001)。与妊娠黄体相比,晚期黄体Slit2和Robo1 mRNA表达水平均显著上调。阻断Slit/Robo信号通路后,晚期黄体细胞的凋亡率显著下降(P <0.05)。以上结果提示,Slit/Robo家族成员主要表达于晚期黄体组织,并参与调控黄体细胞的凋亡过程。

Slit/Robo信号在血管新生中的功能研究

分泌型糖蛋白Slit及其受体Roundabout(Robo)最初是作为一类重要的发育中神经元轴突导向分子而被发现的。目前为止对Slit/Robo信号对神经系统发育过程中轴突吸引或排斥的导向功能研究比较多,而对在发育中生长方式与其非常相似的血管发生过程中研究比较少。现有研究提示两者在发育过程中可能存在共同的信号调控机制,是Slit/Robo信号通路在血管新生中充当着重要的角色。该文就Slit/Robo信号对血管内皮细胞迁移的调节、对血管新生的作用及其可能介导的信号通路进行综述,以期进一步推动Slit/Robo信号通路在血管发生中的研究。

电针对周围神经损伤大鼠轴突导向因子Slit/Robo信号通路关键分子srGAP表达的影响

目的:基于轴突导向因子Slit/Robo信号通路探讨电针对周围神经损伤大鼠再生修复关键分子(srGAP)表达的影响。方法:SD大鼠随机分成空白组、假手术组、模型组和电针组,每组再分为7、15、23d3个亚组,每组各10只。采用右坐骨神经横断后即刻端对端缝合造模。电针组取右侧"环跳""足三里"穴电针治疗,1次/d,每次15min,7d为1个疗程,疗程间间隔1d,治疗3个疗程。每个疗程结束后检测大鼠腓肠肌湿重恢复率;Western blot法检测坐骨神经和腰椎(L)4-L6srGAP1、srGAP2、srGAP3蛋白表达变化。结果:与空白组、假手术组比较,模型组各疗程腓肠肌湿重恢复率降低(P<0.01);与模型组比较,电针组腓肠肌湿重恢复率升高(P<0.05)。模型组各疗程坐骨神经和L4—L6中srGAP1、srGAP2、srGAP3蛋白表达均高于空白组和假手术组(P<0.01);与模型组比较,电针组大鼠各疗程损伤的坐骨神经和L4—L6中srGAP1、srGAP2、srGAP3蛋白表达进一步增强(P<0.01)。结论:电针促进周围神经损伤再生修复作用,可能与其上调Slit/Robo信号通路关键分子srGAP1、srGAP2、srGAP3蛋白表达有关。

中枢神经系统Slit/Robo GTPase激活蛋白信号通路研究进展

中枢神经系统的Slit蛋白可与其跨膜受体Roundabout(Robo)蛋白结合,二者相互作用激活细胞内与Robo胞内结构域耦联的Slit-RoboGTP酶激活蛋白(Slit/Robo GTPase activating protein,sr-GAP)分子,进而触发一系列细胞信号转导产生多方面效应。此信号通路不仅参与调节中枢神经系统的发育,而且与神经元再生、胶质瘤发生和精神发育迟缓等有关。

SLIT/ROBO信号通路在女性生殖系统的研究进展

分泌性糖蛋白SLIT及其受体ROBO信号作为神经轴突导向分子在神经系统发育过程中具有排斥神经细胞迁移的作用,另外SLIT/robo信号介导细胞迁移,细胞凋亡及血管形成,在肺、肝及乳腺形成过程中有关键性作用。Slit/robo信号在组织形态学发生中的调节异常可导致肿瘤发生。Slit/robo信号通路失活与肿瘤形成及转移有关。最近研究显示slit/robo信号在女性生殖系统形成及疾病发展过程中亦有重要作用。Slit/robo信号家族成员大多数在卵巢中表达。Slits与robos受甾体激素的调节,在女性成人生殖器官例如卵巢、子宫内膜可调节细胞生理功能。在卵巢癌、子宫内膜癌及宫颈癌形成过程中Slits与robos家族成员异常表达。本文综合论述了slit/robo在女性生殖系统形成,生理及病理等方面的作用,对其深入研究具有重要意义。

Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞增殖作用的影响

目的探讨Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞系Mc3细胞生长与增殖作用的影响及其作用机制。方法免疫组织化学方法及流式细胞术细胞内因子检测法检测Mc3细胞Slit2及Robo1蛋白的表达;在Robo1受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以细胞计数法与软琼脂克隆形成实验观察Mc3细胞生长变化及用流式细胞术细胞内因子检测法检测增殖相关蛋白PCNA的表达。结果 Mc3细胞表达Slit2及Robo1蛋白,并且在R5单克隆抗体作用下,Mc3细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降。结论 Slit-Robo信号可能影响Mc3细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与粘液表皮样癌的发生及发展过程。

Slit-Robo信号对口腔癌Tb细胞增殖作用的影响

目的:探讨SlitRobo信号对人舌鳞状上皮癌细胞系Tb细胞生长与增殖的影响及其作用机制。方法:采用Westernblot免疫印迹法检测Tb细胞中Slit和Robo蛋白的表达;在Robo1受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以MTT比色法与平板克隆形成实验观察Tb细胞生长变化及用免疫组化检测增殖相关蛋白PCNA的表达。结果:Tb细胞表达Slit和Robo蛋白;在R5抗体的作用下,Tb细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降。结论:SlitRobo信号能够调控Tb细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与了口腔肿瘤的发生、发展过程。

Slit2和Robo1蛋白表达与胃癌关系的临床研究

目的:研究胃癌组织中神经迁移因子Slit2与受体Robo1的表达,探讨两者与胃癌生物学行为和血管生成的关系。方法:免疫组织化学SP法检测54例胃癌组织及28例癌旁组织中Slit2蛋白和Robo1蛋白的表达水平,观察不同临床病理学行为下Slit2蛋白和Robo1蛋白的表达变化;检测CD34标记的微血管密度(microvessel density,MVD),研究在胃癌组织中MVD与Slit2蛋白和Robo1蛋白的关系。结果:Slit2蛋白和Robo1蛋白在胃癌组织中的阳性表达率分别为63.0%和77.8%,在癌旁组织中的阳性表达率分别为3.6%和10.7%,两种组织中Slit2蛋白和Robo1蛋白的表达水平差异有统计学意义(χ2=26.586,P<0.01;χ2=33.491,P<0.01)。胃癌组织中MVD显著增高(t=19.562,P<0.01)。Slit2蛋白表达水平与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移和远处转移相关;Robo1蛋白表达水平与肿瘤大小、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移相关。Slit2与Robo1阳性表达呈正相关(r=0.4202,P<0.01)。Slit2和Robo1表达阳性者MVD显著增高(t=2.256,P<0.05;t=2.631,P<0.05)。结论:Slit2及其受体Robo1在胃癌组织中表达增加,与肿瘤的侵袭和转移密切相关,其机制可能是Slit2/Robo1信号途径能促进肿瘤血管生成。

Slit—Robo GTPase激活蛋白在坐骨神经切断后脊神经节的表达变化

目的：观察Slit—Robo GTP酶激活蛋白（srGAP）在成年哺乳类动物脊神经节（DRG）的表达及其变化，了解srGAP在神经再生中的作用。方法：应用RT-PCR、免疫印迹法、免疫组织化学方法，检测成年SD大鼠正常和坐骨神经切断后1、3、7d的DRGsrGAP1、2、3mRNA及其蛋白的表达。结果：srGAP1、3mRNA在正常DRG均有弱表达，而srGAP2不表达；坐骨神经切断后3、7d，srGAP1、3mRNA表达增强，以术后7d最高；免疫组织化学显示，srGAP1在神经元胞体、突起均有表达，在DRG内胶质细胞亦有表达，坐骨神经切断后3、7d表达增强。结论：本研究结果说明Slit-Robo信号通路存在于大鼠周围感觉神经元内，周围神经损伤可激活此信号通路。

去泛素化酶USP33通过下调SLIT2/ROBO1信号通路抑制肺腺癌的侵袭和转移

目的探讨去泛素化酶USP33参与调节SLIT2/ROBO1信号通路抑制肺腺癌的侵袭转移的机制。方法采用q PCR、免疫组化的方法检查USP33在肺腺癌中的表达,利用A549、SPC-A-1细胞,以沉默USP33后作为沉默组,空白组作为对照,72 h后用q PCR与Western blot检测USP33的沉默效果,利用划痕实验、细胞迁移和侵袭基质胶法检测USP33沉默后对细胞侵袭转移的影响,利用Western blot检测USP33的沉默后SLIT2和ROBO1表达,IL6刺激后USP33的表达。结果 q PCR、免疫组化显示与肺腺癌癌组织相比,癌旁组织USP33表达量明显增加(P<0.05);与空白组相比,qPCR、Western blot结果显示沉默组USP33的表达量明显下降(P<0.05);划痕实验,Transwell迁移实验,Boyden侵袭实验提示USP33沉默后细胞迁移、侵袭转移率明显增加(P<0.05);抑制USP33后,SLIT2和ROBO1表达均下调;IL6刺激使USP33的表达增加(P<0.05)。结论 USP33抑制A549、SPC-A-1细胞迁移、侵袭转移,其侵袭转移的机制可能与炎症因子IL6、SLIT2/ROBO1信号通路存在交叉作用。