下调Slit/Robo通路抑制兔血管成形术后血管再狭窄

目的:探讨下调Slit/Robo通路对兔血管成形术后血管再狭窄的影响及机制。方法:将30只雄性新西兰大白兔分成3组,即空白组、对照组及实验组,每组10只。高脂饲养,除空白组外均制作髂动脉内皮剥脱血管狭窄模型。普通喂养4周后在血管狭窄部位行经皮球囊扩张成形术制作再狭窄模型。随后予R5抗体进行腹腔注射。继续喂养4周后再次血管造影检查,用图像工作站对血管造影结果行血管狭窄分析,并测定血清中Slit2、Robo1浓度,取髂动脉行HE染色。结果:成功建立兔髂动脉成形术后血管再狭窄动物模型。对照组及实验组与空白组相比,Slit2、Robo1血清浓度均显著升高(P<0.01),但实验组经R5抗体干预后,Slit2、Robo1血清浓度较对照组明显降低(P<0.05),经血管造影证实髂动脉血管面积狭窄率及直径狭窄率均降低(P<0.05)。结论:兔血管再狭窄模型Slit2/Robo1的表达显著增高,R5抗体可有效抑制Slit2/Robo1的表达,下调Slit2/Robo1信号通路可治疗兔血管成形术后再狭窄。

Slit/Robo通路参与调控小鼠黄体细胞凋亡

本文旨在研究Slit/Robo家族成员在小鼠卵巢组织中的表达及其功能。用real-time PCR检测Slit/Robo家族成员在小鼠卵巢中的mRNA表达丰度,用免疫组织化学方法检测Slit2/Robo1在卵巢组织中的定位,用real-time PCR和免疫组织化学方法检测Slit2/Robo1在不同时期黄体组织中表达的变化,并用Slit/Robo信号通路的阻断剂ROBO1/Fc chimera在体外研究其在小鼠黄体组织中的功能。结果显示,在Slit/Robo家族成员中,配体Slit2和受体Robo1在小鼠卵巢组织中的表达丰度最高,Slit2和Robo1表达定位于小鼠的黄体细胞。与发情前期卵巢相比,间情期卵巢组织中Slit2和Robo1的mRNA表达水平均显著上调(P <0.01, P <0.001)。与妊娠黄体相比,晚期黄体Slit2和Robo1 mRNA表达水平均显著上调。阻断Slit/Robo信号通路后,晚期黄体细胞的凋亡率显著下降(P <0.05)。以上结果提示,Slit/Robo家族成员主要表达于晚期黄体组织,并参与调控黄体细胞的凋亡过程。

Slit2/Robo1信号通路蛋白在早期糖尿病肾病肾小球中的表达及临床意义

目的探讨早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小球中Slit2和Robo1的表达与肾小球内皮细胞增生的关系及临床意义。方法收集符合Tervaert’s糖尿病肾病病理分型Ⅰ~Ⅱa期,患者24 h尿蛋白>30 mg且<500 mg,肾小球滤过率(estimate glomerular filtration rate,e GFR)>90 m L/(min·1.73 m2)等纳入标准的19例2型糖尿病DN标本,以及15例正常肾组织手术标本,采用HE染色、PAS染色和电镜观察DN肾小球组织形态结构的变化,免疫组化检测Slit2、Robo1和血管内皮细胞标记物CD31在肾小球中的表达,分析DN肾小球中Slit2和Robo1与CD31表达的相关性,以及Slit2、Robo1和CD31的表达与24 h尿蛋白以及e GFR的相关性。结果早期DN存在肾小球肥大、系膜基质轻度增多、基底膜增厚、毛细血管扩张、血管内皮细胞增大和增多等典型早期DN病理特征。Slit2表达于肾小球血管内皮、肾小管上皮和系膜细胞区域;Robo1表达于肾小球血管内皮、肾小管上皮和足细胞区域。与正常肾组织相比,早期DN肾小球中CD31的表达水平显著增高。早期DN肾小球中Slit2和Robo1的表达较正常肾组织也显著性增高(P<0.01)。相关性分析显示,早期DN肾小球中Slit2和Robo1的表达与CD31表达呈显著正相关(r=0.73,P<0.01;r=0.72,P<0.01);早期DN肾小球中Slit2、Robo1和CD31表达与e GFR呈显著正相关(r=0.78,P<0.01;r=0.81,P<0.01;r=0.57,P<0.05);早期DN肾小球中Slit2、Robo1和CD31表达与24 h尿蛋白也呈显著正相关(r=0.46,P<0.05;r=0.49,P<0.05;r=0.47,P<0.05)。结论 Slit2/Robo1信号通路可能通过参与早期DN肾小球内皮细胞增生促进病理性血管生成,从而加速蛋白尿的进展。

七氟醚预处理对缺氧诱导因子1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响

目的评价七氟醚预处理对原代大鼠皮质神经元氧糖剥夺-复糖复氧后缺氧诱导因子(HIF)1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响。方法出生24h内的SD大鼠体外提取原代皮质神经元,以1×106/ml的密度接种于6孔板(2ml/孔)培养皿,采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)神经元正常培养;氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)神经元行氧糖剥夺90min;七氟醚预处理组(S组)在行氧糖剥夺前预先给予2%七氟醚处理1h,余同O组;HIF-1α抑制组(H组)在七氟醚预处理前行2ME(5μM/L)处理72h,余同S组。复糖复氧24h后收集神经元,采用Hoechst/PI双染色法测定神经元凋亡率;采用RT-PCR法测定HIF-1α、Slit2和Robo1mRNA的表达量;采用Western blot法测定HIF-1α、Slit2和Robo1蛋白的表达量。结果与C组比较,O组神经元PI阳性率明显升高,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显上调,Slit2和Robo1mRNA和蛋白表达量明显上调(P<0.05);与O组比较,S组神经元PI阳性率明显下降,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显上调,Slit2和Robo1mRNA和蛋白表达量明显上调(P<0.05);与S组比较,H组神经元PI阳性率明显升高,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显下调,Slit2和Robo1 mRNA和蛋白表达量明显下调(P<0.05)。结论七氟醚预处理通过HIF-1α增加Slit2/Robol信号通路的表达,抑制原代大鼠皮质神经元在氧糖剥夺-复糖复氧后的凋亡。

去泛素化酶USP33通过下调SLIT2/ROBO1信号通路抑制肺腺癌的侵袭和转移

目的探讨去泛素化酶USP33参与调节SLIT2/ROBO1信号通路抑制肺腺癌的侵袭转移的机制。方法采用q PCR、免疫组化的方法检查USP33在肺腺癌中的表达,利用A549、SPC-A-1细胞,以沉默USP33后作为沉默组,空白组作为对照,72 h后用q PCR与Western blot检测USP33的沉默效果,利用划痕实验、细胞迁移和侵袭基质胶法检测USP33沉默后对细胞侵袭转移的影响,利用Western blot检测USP33的沉默后SLIT2和ROBO1表达,IL6刺激后USP33的表达。结果 q PCR、免疫组化显示与肺腺癌癌组织相比,癌旁组织USP33表达量明显增加(P<0.05);与空白组相比,qPCR、Western blot结果显示沉默组USP33的表达量明显下降(P<0.05);划痕实验,Transwell迁移实验,Boyden侵袭实验提示USP33沉默后细胞迁移、侵袭转移率明显增加(P<0.05);抑制USP33后,SLIT2和ROBO1表达均下调;IL6刺激使USP33的表达增加(P<0.05)。结论 USP33抑制A549、SPC-A-1细胞迁移、侵袭转移,其侵袭转移的机制可能与炎症因子IL6、SLIT2/ROBO1信号通路存在交叉作用。

Slit-Robo信号通路作用的研究进展

分泌型糖蛋白Slit及其受体Robo最初作为一类重要的神经元轴突导向因子被发现。随着对Slit-Robo信号通路作用机制研究的不断深入,该信号通路还参与血管新生、肿瘤血管发生、炎症、白细胞趋化及血管渗漏等过程。

Slit-Robo信号传导通路与组织损伤修复

Slit是一种分泌型的细胞外基质蛋白,它通过与其受体Roundabout(Roundabout,Robo)结合而发挥生物活性。早期研究发现Slit-Robo是神经轴突导向分子、神经元迁移的排斥因子,对白细胞趋化也有抑制作用;近年来发现Slit-Robo信号通路还能调节全身多个系统的多种细胞迁移。随着对Slit-Robo信号通路的深入研究,发现其在各种损伤、感染及肿瘤组织及其修复过程中都有表达,且其功能不尽相同。现就其在各种异常组织中的研究做一总结和回顾。

Slit/Robo信号通路在妇科肿瘤发生中的作用

Slit/Robo信号作为神经导向因子在神经系统发育中具有导向轴突生长和排斥神经细胞迁移的重要作用。目前研究发现,Slit/Robo信号也可能参与了肿瘤发生发展中某些关键步骤,如细胞迁移和肿瘤新生血管的形成,但其在妇科肿瘤中的作用尚不清楚。从Slit/Robo信号在女性生殖系统生理、病理状态下的表达情况,以及参与妇科肿瘤发生的机制等方面做一综述。

Slit3/Robo4信号通路功能研究进展

Slit是一种高度保守的分泌型细胞外基质蛋白,Robo作为Slit蛋白的单次跨膜受体,二者相互作用共同调节神经细胞和非神经细胞的生长发育。Slit3是近年发现的一种强有力的促血管生成因子,与其受体Robo4结合参与血管新生、器官发育、肿瘤发生、生殖系统和乳腺调节及人类干细胞工程等过程,该文就Slit3/Robo4的最新研究现状作一综述。

Slit-Robo信号传导通路与平滑肌细胞迁移的研究进展

平滑肌细胞(SMC)是构成人体管道组织和空腔脏器的重要成分,是构成血管壁组织结构及维持血管张力的主要细胞。Slit是一种分泌型细胞外基质蛋白,它通过其受体Roundabout(Robo)作为神经轴突导向因子和神经元迁移的排斥性因子,且在内皮细胞的迁移上也有重要作用。最近的研究发现Slit-Robo信号通路还能调控平滑肌细胞迁移,但其机制尚不清楚,现就其研究现状作一综述。

Slit-Robo信号通路在神经轴突生长和血管新生中作用研究进展

早期对Slit-Robo信号通路的研究集中在神经系统中,其中Slit-Robo通路在神经生长导向及多系统血管生成方面发挥重要作用。文章对Slit-Robo通路的基本结构、生物学功能及其促进血管新生方面的作用研究进展进行综述。

Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 观察Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌的表达变化及其与浸润性乳腺癌临床病理指标的相关性,探讨Slit2/Robo1信号通路对浸润性乳腺癌病理过程的调控作用。方法 应用免疫组织化学法观察Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌、乳腺纤维腺瘤和正常乳腺组织的表达;应用卡方检验或校正的卡方检验分析Slit2和Robo1在各组间阳性率差异;采用方差分析、Kruskal-Wallis或Mann-Whitney U检验分析Slit2和Robo1的免疫组织化学染色量差异;采用非参数Spearman等级相关分析检验Slit2和Robo1与浸润性乳腺癌临床病理指标相关性。结果 Slit2定位表达于细胞质;Robo1定位表达于细胞质和细胞核。Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌的表达率和表达量明显低于乳腺纤维腺瘤和正常乳腺组织。在浸润性乳腺癌中,Slit2和Robo1具有高度相关性,且Slit2与ER、PR、Her2呈正相关(P<0.05);Robo1与ER、PR呈正相关(P<0.05)。Slit2/Robo1与浸润性乳腺癌患者年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、病理分期和组织学分级无关(P>0.05)。结论 Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌低表达,且与其发生、发展和预后存在相关性,提示Slit2/Robo1信号通路可能参与浸润性乳腺癌的病理过程,发挥调控作用。

Slit2/Robo4信号通路在神经元迁移中的活力与凋亡影响

目的探讨Slit2/Robo4信号通路在神经元迁移中的活力与凋亡影响,为阐明脑缺血后神经血管新生的机制提供理论和实验依据。方法选择成年雄性远交群（SD）大鼠,建立缺血性脑卒中动物模型,采用Western blot方法测定梗死侧与非梗死侧Slit2和Robo4的表达。取原代培养10-14d的神经元种六孔板,分为加药组H2O2（100μmol/L）、对照组、H2O2（100μmol/L）＋Slit2（3μg/mL）组,行MTT方法检测细胞活力与双染流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 Western blot结果显示,梗死侧Slit2和Robo4表达均较非梗死侧明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。100μmol/L H2O2处理原代培养神经元24h会导致Slit2和Robo4表达升高（P〈0.05）。MTT结果示,H2O2、H2O2＋Slit2组细胞活力都有明显下降,其中,H2O2＋Slit2组的细胞存活率明显高于单纯H2O2组（P〈0.05）。流式细胞学显示,H2O2＋Slit2组的细胞凋亡率明显低于H2O2组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论缺血性脑卒中有内源性Slit2/Robo4信号通路的激活,而外源性Slit2可以促进氧化应激时神经元的存活能力,抑制其凋亡作用,从而起到神经保护作用。

SLIT/ROBO信号通路在肿瘤、宫颈癌中作用的研究进展

人类ROBO与其配体SLIT家族的成员是肿瘤发生发展中的重要信号分子。近年来研究显示,SLIT/ROBO可作为促癌或抑癌因子参与多种肿瘤的发生、发展和转移等生物调控过程。SLIT/ROBO在宫颈癌组织中也有异常表达,且与启动子甲基化相关,具有促进宫颈癌细胞凋亡的作用。本文就SLIT/ROBO信号通路在肿瘤、宫颈癌中作用的研究进展进行综述。

电针对周围神经损伤大鼠轴突靶向再生修复的Slit/Robo信号通路的影响

目的:探讨电针对周围神经损伤大鼠轴突靶向再生修复大鼠的Slit/Robo信号通路的影响。方法:清洁级健康雄性SD大鼠120只,Excel软件随机分成空白组、假手术组、模型组和电针组,每组30只,每组再分为7 d、15 d和23 d3个亚组,每亚组10只。后两组大鼠右坐骨神经横断后即刻端对端缝合造模。假手术组只切开相应皮肤再缝合。造模后第二天,电针组取'环跳''足三里'进行电针治疗,1次/d,每次15 min,7 d为1个疗程,连续治疗3个疗程,疗程间隔1d。空白组不予干预,模型组、假手术组予模拟电针组抓取。每疗程结束后,分别检测比较大鼠腓肠肌湿重恢复率(WWG);实时荧光定量核酸扩增检测系统(qPCR)观察比较坐骨神经Robo1mRNA的表达变化;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)观察比较坐骨神经和相应脊髓段(L4-L6) Slit2、Robo1蛋白的表达变化。结果:与空白组、假手术组比较,模型组、电针组WWG恢复率降低(P <0. 01);与模型组比较,电针组WWG恢复率逐渐升高(P <0. 05)。电针组与模型对照组比较,大鼠损伤的坐骨神经和相应脊髓段中Slit2蛋白表在第1疗程后(7 d)达到高峰后逐渐降低,3个疗程均高于模型组(P <0. 01),且两组均高于空白组和假手术组(P <0. 01);Robo1蛋白及其mRNA表达也有类似规律,但表达高峰在第2疗程后(15 d)。结论:电针治疗能增强损伤坐骨神经和相应脊髓段中Slit2蛋白、Robo1蛋白及其mRNA的表达,调控Slit/Robo信号通路可能是其促进周围神经损伤再生修复的机制之一。

Slit2/Robo4信号通路在内皮细胞迁移中的研究进展

Slit是一种分泌型细胞外基质蛋白,通过结合其受体Roundabout(Robo)发挥生物活性。Slit/Robo信号通路早期研究主要集中在神经系统,在神经系统中作为轴突导向分子、神经元迁移排斥因子。随着研究进展,发现在心血管系统中,Slit2/Robo4在内皮细胞迁移、血管的生成、新生血管渗透、心腔形成等多个方面发挥着生物学活性,现就Slit2/Robo4信号通路对内皮细胞迁移的作用及其相关下游分子作一综述。

Slit-Robo细胞信号转导通路研究进展

Slit-Robo细胞信号转导通路调控多种多样的生理功能,不同的下游信号转导途径可产生不同的生理功能。其中最广为人知的功能是介导双侧对称生物体胚胎神经系统发育时的轴突排斥现象。近年来,作为一种在生物体内广泛表达的细胞信号转导通路,Slit-Robo的功能库已大大扩展,与神经发育、血管生成、器官及组织发育以及干细胞的增殖调节等均有关。本文就Slit-Robo细胞信号转导通路目前的研究进展做一综述。

Slit2/Robo4/Rho信号通路在野百合碱诱导的大鼠肝窦阻塞综合征中的变化及意义

目的探讨Slit2/Robo4/Rho信号通路在野百合碱(MCT)导致肝窦阻塞综合征(HSOS)发病中的作用。方法34只SD大鼠随机分为正常对照组和实验组。实验组大鼠给予MCT灌胃(160 mg/kg),分批在造模后第1、2、4天随机处死,正常组第4天处死。收集血液样本和肝组织,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,观察肝脏组织学变化,测定肝脏α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达和肝脏Slit2、Robo4、RhoA、Rac1、Cdc42及基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9 mRNA和蛋白的变化。结果大鼠单次灌胃MCT(160 mg/kg)后,第1天肝窦淤血、肝细胞变性和中央静脉内皮损伤;第2天肝窦淤血扩张明显;第4天肝脏病变加重,可见窦周纤维化。与正常对照组比较,各实验组大鼠的肝指数均升高(P <0.05),实验组第2、4天AST水平升高(P <0.01),第2天ALT升高(P <0.01)。与正常对照比较,各实验组α-SMA表达升高(P <0.01)。各实验组Slit2和Robo4 mRNA和蛋白低于正常对照(P <0.01),随着给药时间的延长,实验组大鼠Slit2和Robo4 mRNA和蛋白的表达逐渐降低(P <0.05);而各实验组RhoA、Rac1、Cdc42及MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白高于正常对照组,且表达逐步升高(P <0.05)。结论单次MCT摄入可使大鼠发生HSOS,且肝损伤呈进行性加重。Slit2/Robo4/Rho信号通路、肝星状细胞激活及MMP-2、MMP-9升高可能是MCT致HSOS发生的重要作用机制之一。

肺癌相关的 Slit2－Robo1信号通路的研究进展

恶性肿瘤的生长和转移离不开新生血管的形成。 Slit2－Robo1信号通路最初是在神经系统中被发现，且在轴突导向生长和神经细胞迁移过程中发挥重要作用，血管系统和神经系统的结构和功能具有相似之处，近年来研究发现Slit2－Robo1信号通路在血管系统，特别是肿瘤血管中具有重要的作用，并在不同肿瘤中发挥的作用不同，已发现Slit2－Robo1可以抑制乳腺癌脑转移的扩散，同时，Slit2－Robo1也可以促进黑素瘤中的肿瘤生长。本文对与肺癌相关的Slit2－Robo1信号通路现状做一综述。

Slit/Robo信号通路在胰腺癌细胞中的表达及其对胰腺癌细胞生长的影响

目的探讨Slit/Robo信号通路在胰腺癌细胞中的表达情况,及其对胰腺癌细胞增殖的影响。方法分别采用RT-PCR、免疫细胞化学、免疫荧光方法检测胰腺癌细胞株Bx PC-3、Panc-1中Slit和Robo的表达;通过Slit/Robo信号通路阻断剂Robo N阻断该通路,采用MTT法观察其对细胞生长的影响。结果胰腺癌细胞株BxPC-3、Panc-1中存在着Slit2、Robo1基因和蛋白表达;在Robo N的作用下,胰腺癌细胞体外生长受到抑制,增殖能力下降。结论胰腺癌细胞中可能存在着Slit2/Robo1信号通路,它能够负性调节胰腺癌细胞的生长,提示Slit/Robo信号通路可能参与了胰腺癌的发生发展的过程。