Slit-Robo信号对口腔癌Tb细胞增殖作用的影响

目的:探讨SlitRobo信号对人舌鳞状上皮癌细胞系Tb细胞生长与增殖的影响及其作用机制。方法:采用Westernblot免疫印迹法检测Tb细胞中Slit和Robo蛋白的表达;在Robo1受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以MTT比色法与平板克隆形成实验观察Tb细胞生长变化及用免疫组化检测增殖相关蛋白PCNA的表达。结果:Tb细胞表达Slit和Robo蛋白;在R5抗体的作用下,Tb细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降。结论:SlitRobo信号能够调控Tb细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与了口腔肿瘤的发生、发展过程。

Slit2/Robo1信号通路蛋白在早期糖尿病肾病肾小球中的表达及临床意义

目的探讨早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小球中Slit2和Robo1的表达与肾小球内皮细胞增生的关系及临床意义。方法收集符合Tervaert’s糖尿病肾病病理分型Ⅰ~Ⅱa期,患者24 h尿蛋白>30 mg且<500 mg,肾小球滤过率(estimate glomerular filtration rate,e GFR)>90 m L/(min·1.73 m2)等纳入标准的19例2型糖尿病DN标本,以及15例正常肾组织手术标本,采用HE染色、PAS染色和电镜观察DN肾小球组织形态结构的变化,免疫组化检测Slit2、Robo1和血管内皮细胞标记物CD31在肾小球中的表达,分析DN肾小球中Slit2和Robo1与CD31表达的相关性,以及Slit2、Robo1和CD31的表达与24 h尿蛋白以及e GFR的相关性。结果早期DN存在肾小球肥大、系膜基质轻度增多、基底膜增厚、毛细血管扩张、血管内皮细胞增大和增多等典型早期DN病理特征。Slit2表达于肾小球血管内皮、肾小管上皮和系膜细胞区域;Robo1表达于肾小球血管内皮、肾小管上皮和足细胞区域。与正常肾组织相比,早期DN肾小球中CD31的表达水平显著增高。早期DN肾小球中Slit2和Robo1的表达较正常肾组织也显著性增高(P<0.01)。相关性分析显示,早期DN肾小球中Slit2和Robo1的表达与CD31表达呈显著正相关(r=0.73,P<0.01;r=0.72,P<0.01);早期DN肾小球中Slit2、Robo1和CD31表达与e GFR呈显著正相关(r=0.78,P<0.01;r=0.81,P<0.01;r=0.57,P<0.05);早期DN肾小球中Slit2、Robo1和CD31表达与24 h尿蛋白也呈显著正相关(r=0.46,P<0.05;r=0.49,P<0.05;r=0.47,P<0.05)。结论 Slit2/Robo1信号通路可能通过参与早期DN肾小球内皮细胞增生促进病理性血管生成,从而加速蛋白尿的进展。

Slit-Robo信号在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的表达和意义

目的:了解涎腺腺样囊性癌(SACC)中Slit蛋白和其受体Robo的表达并探讨其在肿瘤嗜神经侵袭中的意义。方法:对34例SACC进行组织分型、嗜神经性分组,同时应用免疫组化方法,对SACC中Slit/Robo的表达进行检测。结果:有嗜神经现象、临床复发的SACC病例中Slit/Robo的表达较无嗜神经现象、临床无复发的病例显著升高(P<0.05)。结论:Slit/Robo在不同分组SACC中均存在不同程度的阳性表达。Slit/Robo与SACC的嗜神经性、临床复发具有密切关系。

Slit/Robo信号在肿瘤发生发展中的作用

Slit/Robo信号作为神经导向因子在神经系统发育中具有导向轴突生长和排斥神经细胞迁移的重要作用,该信号还有抑制白细胞的趋化功能和在发育期吸引血管发生的作用。目前Slit/Robo的研究主要集中在中枢神经系统发育上,在肿瘤中的作用尚无定论。本文从Slit/Robo信号在肿瘤中的表达情况、在肿瘤新生血管和细胞迁移中的作用及其可能介导的信号通路等方面做一综述,探讨Slit/Robo信号作为肿瘤治疗靶点的潜在意义,对其深入研究具有重要的理论和临床意义。

七氟醚预处理对缺氧诱导因子1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响

目的评价七氟醚预处理对原代大鼠皮质神经元氧糖剥夺-复糖复氧后缺氧诱导因子(HIF)1α表达和Slit2/Robo1信号通路的影响。方法出生24h内的SD大鼠体外提取原代皮质神经元,以1×106/ml的密度接种于6孔板(2ml/孔)培养皿,采用随机数字表法分为四组:对照组(C组)神经元正常培养;氧糖剥夺-复糖复氧组(O组)神经元行氧糖剥夺90min;七氟醚预处理组(S组)在行氧糖剥夺前预先给予2%七氟醚处理1h,余同O组;HIF-1α抑制组(H组)在七氟醚预处理前行2ME(5μM/L)处理72h,余同S组。复糖复氧24h后收集神经元,采用Hoechst/PI双染色法测定神经元凋亡率;采用RT-PCR法测定HIF-1α、Slit2和Robo1mRNA的表达量;采用Western blot法测定HIF-1α、Slit2和Robo1蛋白的表达量。结果与C组比较,O组神经元PI阳性率明显升高,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显上调,Slit2和Robo1mRNA和蛋白表达量明显上调(P<0.05);与O组比较,S组神经元PI阳性率明显下降,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显上调,Slit2和Robo1mRNA和蛋白表达量明显上调(P<0.05);与S组比较,H组神经元PI阳性率明显升高,HIF-1αmRNA和蛋白表达量明显下调,Slit2和Robo1 mRNA和蛋白表达量明显下调(P<0.05)。结论七氟醚预处理通过HIF-1α增加Slit2/Robol信号通路的表达,抑制原代大鼠皮质神经元在氧糖剥夺-复糖复氧后的凋亡。

Slit/Robo信号在血管新生及内皮细胞迁移中作用的研究进展

在研究轴突导向分子Slit及其受体Roundabout(Robo)轴突导向功能过程中,发现Slit/Robo信号同样参与血管新生及内皮细胞迁移的调控。但Slit/Robo信号究竟起抑制还是促进作用目前还存在争议,该文从抑制和促进两方面对Slit/Robo信号在血管新生及内皮细胞迁移中的作用进行综述,以期进一步探讨Slit/Robo信号在该领域的功能研究。

Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞增殖作用的影响

目的探讨Slit-Robo信号对粘液表皮样癌细胞系Mc3细胞生长与增殖作用的影响及其作用机制。方法免疫组织化学方法及流式细胞术细胞内因子检测法检测Mc3细胞Slit2及Robo1蛋白的表达;在Robo1受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以细胞计数法与软琼脂克隆形成实验观察Mc3细胞生长变化及用流式细胞术细胞内因子检测法检测增殖相关蛋白PCNA的表达。结果 Mc3细胞表达Slit2及Robo1蛋白,并且在R5单克隆抗体作用下,Mc3细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降。结论 Slit-Robo信号可能影响Mc3细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与粘液表皮样癌的发生及发展过程。

去泛素化酶USP33通过下调SLIT2/ROBO1信号通路抑制肺腺癌的侵袭和转移

目的探讨去泛素化酶USP33参与调节SLIT2/ROBO1信号通路抑制肺腺癌的侵袭转移的机制。方法采用q PCR、免疫组化的方法检查USP33在肺腺癌中的表达,利用A549、SPC-A-1细胞,以沉默USP33后作为沉默组,空白组作为对照,72 h后用q PCR与Western blot检测USP33的沉默效果,利用划痕实验、细胞迁移和侵袭基质胶法检测USP33沉默后对细胞侵袭转移的影响,利用Western blot检测USP33的沉默后SLIT2和ROBO1表达,IL6刺激后USP33的表达。结果 q PCR、免疫组化显示与肺腺癌癌组织相比,癌旁组织USP33表达量明显增加(P<0.05);与空白组相比,qPCR、Western blot结果显示沉默组USP33的表达量明显下降(P<0.05);划痕实验,Transwell迁移实验,Boyden侵袭实验提示USP33沉默后细胞迁移、侵袭转移率明显增加(P<0.05);抑制USP33后,SLIT2和ROBO1表达均下调;IL6刺激使USP33的表达增加(P<0.05)。结论 USP33抑制A549、SPC-A-1细胞迁移、侵袭转移,其侵袭转移的机制可能与炎症因子IL6、SLIT2/ROBO1信号通路存在交叉作用。

Slit3/Robo4信号通道对血管新生作用的研究进展

Slit蛋白是一种在进化上高度保守的分泌型糖蛋白,其通过与跨膜蛋白受体Robo结合调节神经元前体细胞定向迁移、神经轴突的定向生长和促进轴突发芽。Slit/Robo信号通道还对肿瘤转移、血管生成、心脏形态发生等多种生命活动具有调节作用。Robo4特异性表达于血管内皮细胞,这意味着Robo4在血管新生中起着重要作用。但近来发现Slit3是新的血管新生活性因子,可与其配体Robo4结合促进血管内皮细胞的增殖迁移,本文就Slit3/Robo4信号通道对血管新生的作用进行综述。

Slit2-Robo1信号阻断抗体及对照抗体的制备、纯化和鉴定

目的纯化Slit2-Robo1信号阻断抗体(R5抗体)及对照抗体。方法给小鼠腹腔注射杂交瘤3B2.3和CRL-1608细胞,产生的腹水应用凝胶过滤层析法和Protein A亲和层析法纯化R5抗体及对照抗体,并用SDS-PAGE和BCA法检测纯化后单克隆抗体的纯度及浓度。结果单抗纯化后电泳重链和轻链都呈一条带,R5抗体及对照抗体的质量浓度分别为0.986 mg/mL和3.57 mg/mL。结论应用层析法和Protein A亲和层析法纯化抗体,能够得到纯度较高的单克隆抗体。

Slit-Robo信号通路作用的研究进展

分泌型糖蛋白Slit及其受体Robo最初作为一类重要的神经元轴突导向因子被发现。随着对Slit-Robo信号通路作用机制研究的不断深入,该信号通路还参与血管新生、肿瘤血管发生、炎症、白细胞趋化及血管渗漏等过程。

Slit2/Robo1信号对鸡胚早期神经管及体节发育的影响

目的:探讨Slit2/Robo1对鸡胚早期神经管和体节发育的影响。方法:显微注射法将质粒注射入HH10期胚胎神经管内,活体胚胎细胞电穿孔方法转染胚胎半侧神经管,以另一侧神经管为对照侧,原位杂交及免疫荧光方法观察转染10 h后神经管的发育和神经嵴细胞迁移至体节的情况。结果:下调Robo1侧神经管发育较正常对照侧异常,同时发现Slug表达和神经嵴细胞迁移至体节路线发生改变。结论:Slit2/Robo1信号可能通过影响Slug基因表达,对胚胎早期神经管闭合、神经嵴细胞正常产生及迁移方向以及体节分化有重要作用。

Slit-Robo信号传导通路与组织损伤修复

Slit是一种分泌型的细胞外基质蛋白,它通过与其受体Roundabout(Roundabout,Robo)结合而发挥生物活性。早期研究发现Slit-Robo是神经轴突导向分子、神经元迁移的排斥因子,对白细胞趋化也有抑制作用;近年来发现Slit-Robo信号通路还能调节全身多个系统的多种细胞迁移。随着对Slit-Robo信号通路的深入研究,发现其在各种损伤、感染及肿瘤组织及其修复过程中都有表达,且其功能不尽相同。现就其在各种异常组织中的研究做一总结和回顾。

Slit-Robo信号对黏液表皮样癌细胞凋亡作用的影响

目的:探讨Slit-Robo信号对黏液表皮样癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:免疫组织化学方法检测Mc3细胞Slit2及Robol蛋白表达,R5单克隆抗体作用Mc3细胞,采用FITC-AnnexinV/PI法检测细胞凋亡率,流式细胞仪检测细胞周期,DNA梯状电泳及Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡发生,流式细胞仪细胞内抗原检测法检测Caspase-3蛋白含量。结果:Mc3细胞表达Slit2及Robol蛋白,R5抗体作用下细胞凋亡率增高,达到33.6%,形态学观察凋亡细胞明显增多并出现坏死细胞,电泳结果出现梯状条带,S期细胞明显增多,Caspase-3表达水平上调,平均荧光强度达到64%。结论:黏液表皮样癌中Slit-Robo信号可能以抑制细胞凋亡的形式参与肿瘤的形成过程,而这可能是通过Caspase-3蛋白的表达调控实现的。

Slit/Robo信号通路在妇科肿瘤发生中的作用

Slit/Robo信号作为神经导向因子在神经系统发育中具有导向轴突生长和排斥神经细胞迁移的重要作用。目前研究发现,Slit/Robo信号也可能参与了肿瘤发生发展中某些关键步骤,如细胞迁移和肿瘤新生血管的形成,但其在妇科肿瘤中的作用尚不清楚。从Slit/Robo信号在女性生殖系统生理、病理状态下的表达情况,以及参与妇科肿瘤发生的机制等方面做一综述。

Slit3/Robo4信号通路功能研究进展

Slit是一种高度保守的分泌型细胞外基质蛋白,Robo作为Slit蛋白的单次跨膜受体,二者相互作用共同调节神经细胞和非神经细胞的生长发育。Slit3是近年发现的一种强有力的促血管生成因子,与其受体Robo4结合参与血管新生、器官发育、肿瘤发生、生殖系统和乳腺调节及人类干细胞工程等过程,该文就Slit3/Robo4的最新研究现状作一综述。

Slit-Robo信号传导通路与平滑肌细胞迁移的研究进展

平滑肌细胞(SMC)是构成人体管道组织和空腔脏器的重要成分,是构成血管壁组织结构及维持血管张力的主要细胞。Slit是一种分泌型细胞外基质蛋白,它通过其受体Roundabout(Robo)作为神经轴突导向因子和神经元迁移的排斥性因子,且在内皮细胞的迁移上也有重要作用。最近的研究发现Slit-Robo信号通路还能调控平滑肌细胞迁移,但其机制尚不清楚,现就其研究现状作一综述。

Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 观察Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌的表达变化及其与浸润性乳腺癌临床病理指标的相关性,探讨Slit2/Robo1信号通路对浸润性乳腺癌病理过程的调控作用。方法 应用免疫组织化学法观察Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌、乳腺纤维腺瘤和正常乳腺组织的表达;应用卡方检验或校正的卡方检验分析Slit2和Robo1在各组间阳性率差异;采用方差分析、Kruskal-Wallis或Mann-Whitney U检验分析Slit2和Robo1的免疫组织化学染色量差异;采用非参数Spearman等级相关分析检验Slit2和Robo1与浸润性乳腺癌临床病理指标相关性。结果 Slit2定位表达于细胞质;Robo1定位表达于细胞质和细胞核。Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌的表达率和表达量明显低于乳腺纤维腺瘤和正常乳腺组织。在浸润性乳腺癌中,Slit2和Robo1具有高度相关性,且Slit2与ER、PR、Her2呈正相关(P<0.05);Robo1与ER、PR呈正相关(P<0.05)。Slit2/Robo1与浸润性乳腺癌患者年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、病理分期和组织学分级无关(P>0.05)。结论 Slit2和Robo1在浸润性乳腺癌低表达,且与其发生、发展和预后存在相关性,提示Slit2/Robo1信号通路可能参与浸润性乳腺癌的病理过程,发挥调控作用。

Slit-Robo信号通路在神经轴突生长和血管新生中作用研究进展

早期对Slit-Robo信号通路的研究集中在神经系统中,其中Slit-Robo通路在神经生长导向及多系统血管生成方面发挥重要作用。文章对Slit-Robo通路的基本结构、生物学功能及其促进血管新生方面的作用研究进展进行综述。

Slit-Robo细胞信号转导通路研究进展

Slit-Robo细胞信号转导通路调控多种多样的生理功能,不同的下游信号转导途径可产生不同的生理功能。其中最广为人知的功能是介导双侧对称生物体胚胎神经系统发育时的轴突排斥现象。近年来,作为一种在生物体内广泛表达的细胞信号转导通路,Slit-Robo的功能库已大大扩展,与神经发育、血管生成、器官及组织发育以及干细胞的增殖调节等均有关。本文就Slit-Robo细胞信号转导通路目前的研究进展做一综述。