非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织中Smac/DIABLO的表达及其意义

目的探究非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠肝组织中Smac/DIABLO的表达及其意义。方法将大鼠随机分为对照组、高脂组,对照组采用基础饲料喂养,高脂组采用高脂肪饲料喂养。分别于喂养第4、8、12周观察大鼠体质量和肝脏指数变化,检测血脂指标TG、TC和肝功能指标ALT、AST;HE染色和油红O染色观察肝组织病理变化,流式细胞术检测肝细胞凋亡,免疫组化检测Smac/DIABLO、Caspase-3蛋白表达,Western blotting检测Smac/DIABLO、X染色体连锁凋亡抑制蛋白(X-linked apoptosis inhibitory protein,XIAP)、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达,qRT-PCR检测Smac/DIABLO、XIAP、Caspase-3、Caspase-9基因的表达。结果与对照组相比,高脂组大鼠在第4、8、12周肝细胞排列紊乱,有明显的脂肪液泡、炎症细胞浸润、脂质堆积严重,体质量、肝脏指数、TC、TG、ALT、AST、NAS评分、凋亡率显著升高(P<0.05);免疫组化结果显示,相比于对照组,高脂组大鼠肝组织Smac/DIABLO、Caspase-3表达升高,IOD值显著升高(P<0.05);Western blotting和qRT-PCR结果显示,相比于对照组,高脂组大鼠肝组织Smac/DIABLO、Caspase-3、Caspase-9蛋白及mRNA表达显著升高,XIAP表达显著降低(P<0.05)。结论NAFLD大鼠肝组织Smac/DIABLO蛋白表达显著升高,与其肝细胞凋亡密切相关。

Smac/DIABLO在过氧化氢所致C_2C_(12)肌原细胞凋亡中的作用

为探讨Smac/DIABLO在过氧化氢 (H2 O2 )所致C2 C12 肌原细胞凋亡中的作用 ,采用Hoechst 3 3 2 58染色 ,观察H2 O2 (0 5mmol/L)处理C2 C12 肌原细胞不同时间后 ,细胞核形态学改变并计算凋亡核百分率 ,DNA抽提及琼脂糖电泳观察凋亡特征性梯状带 ,利用细胞成分分离后蛋白质印迹分析H2 O2 是否导致Smac/DIABLO从线粒体释放 ,采用Caspase检测试剂盒及蛋白质印迹分析Caspase 3和Caspase 9的活化 ,转染Smac/DIABLO基因 ,观察Smac/DIABLO过表达对H2 O2 所致的C2 C12 肌原细胞凋亡的影响 .结果表明 :H2 O2 处理 1h后 ,Smac/DIABLO从C2 C12 肌原细胞线粒体释放入胞浆 ,2h更明显 ;H2 O2 处理 4h后 ,Caspase 3和Caspase 9活化 ,12h达高峰 ;H2 O2 处理 2 4h后 ,C2 C12 肌原细胞显示特征性的凋亡形态改变 ,凋亡核百分率明显升高 ,DNA电泳出现明显“梯状”条带 .与单纯过氧化氢损伤组相比 ,Smac/DIABLO高表达的C2 C12 肌原细胞经过氧化氢损伤组的Caspase 3和Caspase 9的活化、凋亡核百分率的升高、“梯状”条带的出现均更明显 .结果表明 ,H2 O2 可导致Smac/DIABLO从C2 C12 肌原细胞线粒体释放 ,促进Caspase 9和Caspase

Livin、Smac/DIABLO和PTEN在胃癌组织中的表达及其与胃癌的相关性

目的:探讨凋亡抑制蛋白Livin及线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和PTEN在胃癌发生发展分子机制中的调控作用及意义.方法:实时荧光定量PCR检测75例手术切除胃癌患者组织,20例癌旁组织及20例正常胃组织中LivinmRNA和Smac/DIABLOmRNA的表达,Westernblot结合免疫组织化学法检测两者与PTEN蛋白的表达及组织学定位.结果:正常胃组织及癌旁组织中均无LivinmRNA表达,胃癌组织中LivinmRNA相对表达量显著上调(6.374±4.759),其表达在低分化胃癌组及淋巴结转移组具有显著差异(χ2=9.60,5.51,P<0.01或0.05),与肿瘤大小,浸润程度及TNM分期等病理表现无关;Smac/DIABLOmRNA胃癌组织中的表达水平低于正常胃组织及癌旁组织,但差异无显著性(0.731±0.420vs1.104±0.276,1.061±0.737,均P>0.05),Smac/DIABLOmRNA的表达水平与胃癌各临床病理因素无关;其蛋白表达量与Smac/DIABLOmRNA的表达水平存在差异.Smac/DIABLO在肠型胃癌与弥漫型胃癌中的表达有显著差异(χ2=5.06,P<0.05).正常胃黏膜及胃癌组织中未检出PTEN蛋白表达.结论:Livin、Smac/DIABLO及PTEN的表达水平在不同阶段及病理类型的胃癌中存在差异.实时荧光定量PCR检测Livin及Smac/DIABLO的表达量,有可能为判断胃癌的发生,分化程度及预测化疗敏感性提供新的指标.

凋亡相关基因Livin、Smac/DIABLO在胃癌组织中的表达及其意义

背景与目的:作为一种促凋亡基因,Smac/DIABLO与凋亡抑制基因Livin相互作用,共同参与调控细胞癌变的起始及发展。本研究检测凋亡抑制蛋白Livin及线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO在胃癌组织中的表达,观察其表达水平与胃癌各临床病理因素的关系。方法:应用实时荧光定量PCR SYBR Green荧光染料法检测75例手术切除的胃癌组织、20例癌旁组织及正常胃组织中Livin mRNA和Smac/DIABLO mRNA的表达,Western blot结合及免疫组化SP法检测两种蛋白的表达及组织学定位。结果:正常胃组织及癌旁组织中均无Livin mRNA表达,胃癌组织中Livin mRNA表达显著上调,相对表达量为6.374±4.759,低分化胃腺癌组织及有淋巴结转移组的相对表达量显著高于中高分化胃腺癌组织(P<0.05),其表达与肿瘤大小、浸润深度及TNM分期无关,Livin蛋白的表达结果与之相符;胃癌组织中Smac/DIABLO mRNA的表达(0.731±0.420)低于正常胃组织(1.104±0.276)及癌旁组织(1.061±0.737),但差异无统计学意义(P>0.05),Smac/DIABLO mRNA表达水平与胃癌各临床病理因素无关;Smac/DIABLO蛋白表达与mRNA表达存在差异。Smac/DIABLO在肠型胃癌(84.38%)与弥漫型胃癌(60.65%)中的表达有一定差异(P<0.05)。结论:Livin与Smac/DIABLO在不同阶段和不同病理类型胃癌中的表达及相关性存在差异,Livin基因高表达与胃癌的发生及分化转移密切相关。

二氮嗪对冷保存诱导的大鼠供心Smac/DIABLO蛋白表达的抑制作用

目的:探讨线粒体ATP敏感性钾离子通道(mitoKATP)开放剂二氮嗪(DE)对离体大鼠供心不同时程冷保存时促凋亡蛋白Smac/DIABLO表达的影响及机制。方法:SD大鼠随机分为3组,包括空白对照组、单纯冷保存组、DE组(Celsior保存液中含30μmol/L DE),后2组又按冷保存时程不同,分别分为3、6、9、12 h组。实验结束后采用原位末端标记染色法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,采用Western blotting法检测心肌组织中caspase-3蛋白及胞浆Smac/DIABLO蛋白表达。结果:(1)在Celsior保存液中加入DE后,心肌细胞凋亡指数及caspase-3蛋白表达显著低于相应单纯冷保存组。(2)DE可使Smac/DIABLO蛋白表达高峰由冷保存6 h延迟至9 h。(3)DE的上述作用可被mitoKATP通道特异性阻断剂5-羟基葵酸盐(5-HD)所取消。结论:DE具有对抗冷保存诱导心肌细胞凋亡的作用,这种保护作用可能与其激活mitoKATP通道和减少促凋亡蛋白Smac/DIABLO表达有关。

Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株中survivin和SMAC/DIABLO基因表达的影响

目的观察survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人卵巢癌细胞株SKOV3中survivin、Smac/DIABLO表达的影响,探讨survivin、Smac/DIABLO在ASODN诱导卵巢癌细胞凋亡和细胞周期改变中的作用和分子机制。方法用脂质体(LipofectamineTM2000)介导survivin ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,用MTT比色法检测细胞生长活性,流式细胞学技术检测细胞凋亡指数、细胞周期分布及survivin、Smac蛋白表达改变,逆转录酶链反应检测survivin、Smac/DIABLO基因表达改变。结果同对照组比较,不同浓度ASODN作用后细胞生长明显减慢,转染后48hIC50在600nmol/l左右。用600nmol/L ASODN转染48h后,细胞凋亡指数(AI)明显增加,(t=6.3671,P<0.05);更多的细胞停留在G0/G1期(t=10.3832,P<0.01)。Survivin mRNA和蛋白表达明显下调(t=3.5031,P<0.05,t=7.8146,P<0.01),SmacmRNA和蛋白表达上调(t=2.8011,P<0.05,t=11.3917,P<0.01)。结论ASODN诱导细胞凋亡,使更多的细胞停留在G0/G1期,减少进入有丝分裂细胞数的作用,是通过下调survivin基因,上调Smac基因表达来共同完成的,survivin、Smac/DIABLO基因在调节SKOV3细胞周期、凋亡的功能上密切相关,二者的相互作用是卵巢癌发生、发展的重要分子机制之一。

促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1相互作用的筛选和鉴定

目的利用酵母双杂交技术筛选线粒体促凋亡因子野生型Smac/DIABLO的相互作用蛋白。方法①设计促凋亡因子野生型Smac/DIABLO引物,利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增野生型Smac/DIABLO基因片段,构建酵母真核表达载体pDBLeu-Smac/DIABLO。②pDBLeu-Smac/DIABLO诱饵质粒转化酵母MaV203,Western blot检测融合蛋白在酵母中的正确表达,自激活作用的检测并确定抑制His基础表达的3AT浓度。③对成人肝cDNA文库的筛选。选择能同时激活His、Ura、LacZ3个报告基因的克隆为阳性,利用回转实验和GST-pull down对阳性克隆进行鉴定。结果成功构建pDBLeu-Smac/DIABLO载体,转化酵母细胞MaV203,无细胞毒性,无自激活作用,3AT浓度为25mmol/L。经回转实验和GST-pull down证实了线粒体促凋亡因子Smac/DIABLO与核受体NR4A1之间具有相互作用。结论Smac/DIABLO可能通过与核受体NR4A1的相互作用来影响核受体NR4A1对细胞生存或者凋亡的调控。

丝裂霉素C与表达Smac/DIABLO的肿瘤靶向腺相关病毒联用对抗恶性黑色素瘤的效果

目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导促凋亡因子Smac/DIABLO是否能提高恶性黑色素瘤细胞对丝裂霉素(MMC)的敏感性。方法将携有目的基因的rAAV加入到培养液中转染肿瘤细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,RT-PCR检测Smac/DIABLO基因的表达,MTT法测定肿瘤细胞增殖,流式细胞术测定肿瘤细胞的凋亡;动物在体实验测定抗肿瘤效果。结果 rAAV转染96h后几乎所有细胞表达明亮的黄绿色荧光。RT-PCR检测发现转染48h后目的基因Smac/DIABLO稳定表达。MTT检测显示rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+MMC对肿瘤细胞的抑制率最高(P<0.05)。流式细胞检测结果显示,rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+MMC组肿瘤细胞的凋亡率明显高于生理盐水(HBSS)组、MMC组和rAAV-hTERT/Smac/DIABLO组(P<0.01)。动物实验结果表明,rAAV-hTERT/Smac/DIABLO+MMC有非常强的抑制肿瘤作用,其抗癌效果优于HBSS、MMC、rAAV-hTERT/EGFP和rAAV-hTERT/Smac/DIABL组。结论 rAAV-hTERT/Smac/DIABLO在体内、体外均能提高肿瘤细胞对MMC的敏感性。此作用与Smac/DIABLO的促凋亡作用有关。

Livin与Smac/DIABLO在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Livin与Smac/DIABLO蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法,检测100例结直肠癌组织和30例癌旁正常组织中Livin和Smac/DIABLO蛋白的表达情况。结果结直肠癌、癌旁正常组织中Livin蛋白阳性表达率分别为64.0%(64/100)、16.7%(5/30),差异具有统计学意义(P<0.05);结直肠癌、癌旁正常组织中Smac/DIABLO蛋白阳性表达率分别为36.0%(36/100)、80.0%(24/30),差异具有统计学意义(P<0.05)。两者表达与结直肠癌临床分期、肿瘤浸润深度及淋巴结转移密切相关,P<0.05。Livin与Smac/DIABLO表达间呈显著负相关,γ=-0.245,P<0.05。结论 Livin高表达及Smac/DIABLO低表达或失活,可能在结直肠癌的发生发展中起重要作用。

Smac/DIABLO和Survivin shRNA联合转染对大肠癌Lovo细胞凋亡的影响

背景与目的:Smac/DIABLO是一种新发现的促凋亡蛋白,通过阻滞凋亡抑制蛋白(包括Survivin),激活caspase-9和caspase-3而发挥作用。本实验研究线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和沉默凋亡抑制基因Survivin联合应用对大肠癌细胞凋亡的影响及其促凋亡机制。方法:构建Survivin的shRNA-EGFP质粒和Smac-pcDNA3.1质粒,将其用脂质体单、共转染至大肠癌Lovo细胞;Western blot检测survivin基因和Smac基因的蛋白表达;Ho-chest33258染色观察凋亡核形态学变化,并粗略计数凋亡率;流式细胞仪PI单染测凋亡周期;caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3活性。结果:转染48h后单、共转染组的Smac蛋白水平增加而Survivin蛋白水平下降;单、共转染组Hochest33258染色可见明显的凋亡核形态学变化,凋亡率高于各对照组,且共转染组凋亡率(18.5±1.7)%高于单转染组(9.6±1.8)%、(15.0±0.3)%;Smac组G0/G1期增多为(51.0±6.2)%,而Survivin shRNA组S期细胞增多为(53.3±1.3)%(P<0.05);caspase-3活性比Smac和Survivin shRNA共转组为(169±3)%,高于Smac组(143±5)%、Survivin shRNA组(152±6)%,且都高于各对照组(P<0.05)。结论:Smac/DIABLO和Sur-vivin shRNA协同作用激活caspase-3途径,抑制大肠癌Lovo细胞生长而促进细胞凋亡,Smac阻滞细胞周期于G0/G1期而RNA干扰Survivin后细胞周期阻滞于S期。

Smac/DIABLO对胰腺癌SW1990细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的研究Smac/DIABLO与胰腺癌对TRAIL和吉西他滨化疗敏感性的关系。方法构建Flagpc3.1-Smac外源表达质粒,在SW1990细胞中过表达SMAC,采用实时定量荧光PCR方法检测Smac mRNA水平;应用Western免疫印迹法检测caspase-3、caspase-9和Bcl-2蛋白水平;利用MTT法检测转染Flag-pc3.1-Smac和TRAIL、吉西他滨处理后SW1990细胞增殖能力的改变;利用流式细胞术检测转染Flag-pc3.1-Smac后SW1990细胞的凋亡情况。结果转染Flag-pc3.1-Smac后,SW1990细胞中Smac mRNA和蛋白质表达水平显著高于对照组;MTT试验显示,过表达Flag-pc3.1-Smac的SW1990细胞在1~5 d的培养期中490 nm处吸光值均低于对照组。结论 Smac/DIABLO促进胰腺癌SW1990细胞凋亡,并增加对TRAIL和吉西他滨的化疗敏感性。

Smac/DIABLO与Livin在乳腺癌组织表达及其临床意义

目的:探讨凋亡促进因子Smac/DIABLO和凋亡抑制因子Livin在人乳腺癌组织中的表达及相关性,分析其与乳腺癌转移复发的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测76例乳腺癌组织和相应的癌旁组织中Livin和Smac蛋白的表达情况。结果:76例乳腺癌组织中Livin蛋白表达的阳性率为67.8%(51/76),显著高于相应的癌旁组织的59.2%(36/76),P<0.05;乳腺癌组织中Smac表达为52.6%(40/76),显著低于癌旁组织的75.0%(57/76),P<0.05。两者的表达与组织学分级、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移以及术后复发密切相关,P<0.05。Livin和Smac表达呈显著负相关,γ=-0.238,P<0.05。结论:Livin的高表达及Smac/DIABLO的低表达或失活可能在乳腺癌的发生、发展中起重要作用。

急性肝衰竭大鼠肝组织中Smac/DIABLO和caspase-3的表达变化

研究显示急性肝衰竭（AHF）与肝细胞凋亡密切相关,而Smac/DIABLO是线粒体凋亡途径的重要促进因子.目的：动态观察AHF模型大鼠肝组织中Smac/DIABLO、caspase-3的表达变化,探讨两者的变化在AHF中的意义.方法：以D-半乳糖胺腹腔注射诱导大鼠AHF模型,于造模后12 h、24 h、48 h、72 h、120 h、168 h和240 h分批处死大鼠,以RT-PCR和免疫组化方法检测肝组织Smac/DIABLO、caspase-3 mRNA和蛋白表达.同时检测血清肝功能指标.结果：AHF模型建立后,大鼠血清ALT、AST、总胆红素水平迅速升高,白蛋白水平则明显下降,于48 h或72 h后逐渐好转.模型大鼠肝组织中Smac/DIABLO、caspase-3 mRNA和蛋白表达随病情加重而逐渐增强,于72 h时达高峰,其后随病情好转而逐渐下降,其蛋白表达在中央静脉周围、门管区和坏死区周围最为明显.结论：AHF模型大鼠肝组织中Smac/DIABLO、caspase-3的表达随疾病进程而波动,观察其表达变化有利于AHF预后的判断.抑制Smac/DIABLO在线粒体凋亡途径中的作用,为AHF的治疗提供了新的思路.

鼻咽癌组织中XIAP和Smac/DIABLO的表达及意义

目的研究鼻咽癌组织中X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)与其拮抗蛋白Smac/DIABLO的表达及其意义。方法以50例鼻咽癌患者鼻咽部活体组织石蜡标本和20例鼻咽部慢性炎症组织石蜡标本为研究对象,利用组织芯片技术同时采用S-P免疫组织化学方法检测鼻咽癌组织芯片中XIAP和Smac/DIABLO的表达。结果 (1)鼻咽癌中XIAP的阳性表达明显高于鼻咽部慢性炎症组织,差异有统计学意义(P<0.05);鼻咽癌中Smac/DI-ABLO的阳性表达均明显低于鼻咽部慢性炎症组织,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Smac/DIABLO在XIAP阳性的鼻咽癌石蜡标本中的阳性表达率低于在XIAP阴性的鼻咽癌石蜡标本中,XIAP和Smac/DIABLO表达均呈明显负相关(P<0.05)。结论 XIAP在鼻咽癌中高表达,Smac/DIABLO在鼻咽癌中低表达,鼻咽癌中XIAP和Smac/DIABLO表达呈负相关。XIAP和Smac/DIABLO可能是鼻咽癌细胞凋亡信号传导网络中的重要一环,其与鼻咽癌的发生、发展密切相关。

Smac/DIABLO过表达对人结肠癌细胞凋亡的影响

背景:Smac/DIABLO是一种线粒体促凋亡蛋白,研究表明其在结肠癌细胞中表达降低。目的:研究Smac/DIABLO对人结肠癌细胞生长的影响及其可能的促凋亡机制。方法:将pcDNA3.1-Smac质粒或pcDNA3.1空质粒以脂质体转染入人结肠癌细胞株LoVo,以未转染细胞作为空白对照。以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Smac mRNA表达,蛋白质印迹法检测Smac蛋白表达,Hoechst33258染色观察凋亡细胞核形态学变化,AnnexinV-FITC/PI双染流式细胞仪分析检测细胞凋亡率,PI染色流式细胞仪分析检测细胞周期,Caspase-3分光光度法检测试剂盒检测Caspase-3活性。结果:pcDNA3.1-Smac质粒转染12h后,LoVo细胞SmacmRNA表达增加;转染48h后,Smac蛋白表达增加。转染48h后,Smac组LoVo细胞呈现明显凋亡细胞核形态学特征,凋亡率显著高于LoVo细胞组和空质粒组,G0/G1期细胞增多,Caspase-3活性亦显著高于空质粒组(P<0.05)。结论:Smac/DIABLO可激活caspase-3途径,抑制人结肠癌细胞生长,促进细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0/G1期。

附子多糖抗心肌细胞凋亡的Smac/Diablo机制研究

目的:建立体外缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)模型,以模拟在体心肌细胞缺血/再灌注损伤,观察附子多糖(FPS)对H/R后心肌细胞凋亡的影响,并以Smac/Diablo为切入点探讨其作用机制。方法:采用原代培养的乳鼠心肌细胞建立缺氧/复氧模型,随机分为:正常对照组(Control)、缺氧/复氧组(H/R)、附子多糖(0.1、1、10mg/mL)组。MTT法测定细胞的存活率,流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,荧光定量PCR检测BCL-2 mRNA的表达量,Western blot检测胞浆Smac/Diablo蛋白的表达。结果:与对照组比较,H/R组细胞存活率降低,细胞凋亡率显著增加,BCL-2 mRNA的表达量减少,胞浆中Smac/Diablo的表达增加。与H/R组比较,经附子多糖处理24 h后,附子多糖可呈剂量依赖性增加心肌细胞的存活率,抑制细胞凋亡率,促进BCL-2 mRNA的表达,降低胞浆中Smac/Diablo的表达,在10 mg/mL浓度时保护效应达到峰值。结论:FPS可抑制缺氧复氧后心肌细胞凋亡的发生,作用机制可能与其促进BCL-2 mRNA的表达,保护线粒体,抑制Smac/Diablo的释放,从而阻碍细胞凋亡的线粒体信号转导有关。

低温保存诱导大鼠心肌细胞Smac／DIABLO蛋白表达的动态变化

目的:观察大鼠供心不同时程低温保存后线粒体Smac/DIABLO蛋白表达的差异。方法:根据不同的低温保存时程,SD大鼠随机分5组(n=8)。采用Langendorff离体鼠心灌注法停搏大鼠心脏,检测心脏在4℃条件下Cel-sior保存液中分别保存0、3、6、9、12h后,心肌细胞线粒体内超氧化物岐化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。并采用Westorn blotting蛋白印迹分析法观察心肌细胞Smac/DIABLO蛋白表达情况,原位末端标记(TUNEL)染色法检测心肌细胞凋亡。结果:①随着低温保存时间的延长,心肌细胞线粒体内SOD活性随之降低,MDA含量随之升高,心肌细胞凋亡指数也逐渐增高。②随着低温保存时间的延长,Smac/DIABLO蛋白表达逐渐增多,至低温保存6h后最为显著,随后又逐渐减弱。结论:随着低温保存时间的延长,可能由于心肌细胞抗氧自由基的能力逐步减弱,致使诱导细胞凋亡的心肌线粒体Smac/DIABLO蛋白表达逐渐增强,心肌细胞凋亡逐渐增多。

食管鳞癌中Survivin和Smac/Diablo的表达及意义

目的:探讨Survivin和Smac/Diablo在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法对80例经病理确诊为食管鳞癌的病例和相对应的30例病理确定为正常组织及30例癌旁组织进行Survivin蛋白和Smac/Diablo蛋白半定量免疫组化分析。结果:Survivin在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为81.25%,10.0%,3.33%,有显著性差异(χ2=72.983,P<0.01)。Smac/Diablo在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为61.25%,76.67%,93.33%,有显著性差异(χ2=11.518,P<0.01)。Survivin和Smac/Diablo表达与患者的年龄、性别、分化程度、浸润深度等均无明显关系(P>0.05)。但与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05)。在Smac阳性组中的表达率为23.21%(13/56),在Smac/Diablo阴性组中的表达率为16.67%(9/54),两者间有统计学差异(P<0.05),两者关联性较强,呈负相关。Survivin阳性率与淋巴结转移呈低度正相关(r=0.329,P<0.05),Smac/Diablo阳性率与淋巴结转移呈负相关(r=-0.733,P<0.05)。结论:Survivin蛋白和Smac/Diablo蛋白表达与食管癌的病理分期,淋巴结转移都有着密切的关系,Smac/Diablo在食管鳞癌组织中低表达,其表达和Survivin呈明显的负相关,两者可能在食管鳞癌细胞凋亡信号传导网络中发挥重要作用。

大鼠脑损伤后XIAP与Smac/DIABLO表达的实验研究

目的:观察大鼠颅脑损伤后脑组织中XIAP与Smac/DIABLO表达变化及神经细胞凋亡,探讨颅脑损伤后神经细胞凋亡机制。方法:36只健康雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(sham组)及脑损伤组(TBI组),采用自由落体法建立大鼠脑损伤模型,用免疫组织化学方法检测XIAP、Smac/DIABLO的表达,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:与sham组相比,TBI组XIAP与Smac/DIABLO的表达和TUNEL(+)细胞数均显著增加(P<0.05)。结论:颅脑损伤可诱导XIAP与Smac/DIABLO的表达,提示XIAP对脑损伤后神经细胞继发凋亡损害起保护作用,而Smac/DIABLO则促进神经细胞的凋亡。

XIAP和Smac/DIABLO在乳腺癌发生、发展中的表达及意义

目的:探讨XIAP、Smac/DIABLO基因的表达及二者的相对关系在乳腺癌发生和发展中的作用。方法:采用实时定量PCR方法检测正常乳腺组织(6例)、乳腺增生组织(16例)、乳腺癌组织(62例)中XIAP mRNA和Smac/DIABLO mRNA的表达,并分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果:在所有标本中均检测到了XIAP和Smac/DIABLO的表达,乳腺癌组织中的XIAP mRNA水平和XIAP/Smac比值明显高于正常乳腺组织和乳腺增生组织(P<0.05);从原位癌到浸润性乳腺癌,XIAP mRNA水平和XIAP/Smac比值无明显提高(P>0.05);Smac/DIABLO mRNA水平在正常乳腺组织、乳腺增生组织和乳腺癌组织中基本保持恒定。发生淋巴结转移的乳腺癌组织中的XIAP/Smac比值明显高于无淋巴结转移的乳腺癌组织(P<0.05)。结论:XIAP和Smac/DIABLO间的平衡在乳腺癌发生、发展过程中被逐渐打破,XIAP的相对高表达诱导凋亡抵抗,对乳腺癌的发生、发展起促进作用。