六味地黄汤调控TGF-β及Smad家族蛋白表达对肾间质纤维化的影响研究

目的探究六味地黄汤抑制肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)的干预作用及机制。方法将30只SPF级SD大鼠随机均分为假手术组、模型组、阳性药物组、中药高剂量组和中药低剂量组,每组6只。除假手术组外,其余各组采用左侧输尿管结扎术制备RIF模型。造模结束后,假手术组和模型组予以蒸馏水灌胃,阳性药物组予以醋酸泼尼松片0.2 mg/kg灌胃,中药低、高剂量组分别予以六味地黄汤0.5、1 mg/kg灌胃,疗程为21 d。治疗结束后,采用HE染色法评估肾间质损伤,Masson染色法检测肾间质胶原蛋白沉积和纤维化,RT-PCR测定肾间质转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、针对半身不遂同源物2的重组母体(recombinant mothers against decapentaplegic homolog 2,Smad2)、Smad3、Smad7的mRNA表达,Western blot测定肾间质TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的蛋白表达。结果与假手术组相比,模型组的病理呈现系膜增生、间质增宽、胶原蛋白大面积沉积和明显纤维化,且TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05)。与模型组相比,阳性药物组和中药低、高剂量组的病理表现均减轻,且TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。与中药低剂量组相比,阳性药物组和中药高剂量组的TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7的mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。结论六味地黄汤能够减轻RIF大鼠的肾间质纤维化程度,且高剂量效果更佳,其机制可能与调控TGF-β及Smad家族蛋白表达有关。

活血利水复方对自发性高血压大鼠转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路介导下游结缔组织生长因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达及血管重塑的影响

目的:基于转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路探讨活血利水中药复方对自发性高血压大鼠血管重塑的保护作用及机制。方法:将自发性高血压大鼠随机分为模型组、卡托普利组、活血利水复方低剂量组、活血利水复方中剂量组、活血利水复方高剂量组,Wistar大鼠作为空白组,每组10只。给予相应药物灌胃,4周后采用酶联免疫吸附试验方法检测血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量;采用逆转录聚合酶链反应检测大鼠主动脉组织转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达,并取冠状动脉组织进行马松三色染色。结果:与空白组比较,模型组血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,各药物组大鼠干预后血清中C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的含量不同程度降低(P<0.01)。其中,卡托普利组和活血利水复方高剂量组上述3项指标表达最低,与其他组的差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);卡托普利组和活血利水复方高剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,模型组大鼠主动脉转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,卡托普利组及活血利水复方低剂量组、活血利水复方中剂量组、活血利水复方高剂量组大鼠主动脉组织转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达不同程度降低(P<0.05或P<0.01)。结论:活血利水中药复方可通过调控转化生长因子-β1/SMAD家族蛋白信号通路及下游结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原mRNA表达水平,降低C反应蛋白、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6等炎症因子的表达,抑制炎症反应,从而改善高血压病炎症状态及血管重塑,其机制可能与降低转化生长因子-β1、结缔组织生长因子及Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原蛋白沉积有关。

Smad蛋白家族与骨形态发生蛋白信号传导

Sm ad蛋白直接参与转化生长因子 (TGF-β)、骨形态发生蛋白 (BMP)和活化素的信号传导 ,TGF-β和 BMP是调节骨代谢的信息转导是由 Sm ad蛋白家族成员承担的。在已经鉴定的 8种 Sm ads成员中 ,与骨代谢密切相关的是 Sm ad 1、Sm ad 5及 Smad 4。实验证明在成骨细胞系 Sm ad是 BMP信号转导的关键因子 ,对 Smad蛋白家族的了解将有助于对 TGF-β和

Smads蛋白家族在大鼠放射性肝纤维化形成过程中的表达

目的 探讨Smad2/3/7、TGF-β1蛋白在大鼠放射性肝纤维化（RHF）形成过程中的表达情况.方法 建立雄性SD大鼠RHF模型.将实验大鼠随机分为正常对照组、照射组（2周、4周、8周、12周、26周）,除正常对照组外,其余各组大鼠均制备成RHF模型.在照射后第2周、4周、8周、12周、26周末,分别剖检各组大鼠,取肝脏标本备用.光学显微镜下观察大鼠肝脏组织HE染色变化,免疫组织化学法测大鼠肝脏组织Smad2/3/7、TGF-β1蛋白含量表达.结果 与正常对照组相比,照射组大鼠肝脏损伤及纤维化程度明显增加,肝脏组织免疫组织化学Smad2蛋白含量增加（P＜0.05）,Smad3、TGF-β1蛋白含量明显增加（P＜0.01）,Smad7蛋白含量明显减少（P＜0.01）.结论 随着大鼠RHF的加重,Smad2/3、TGF-β1蛋白表达增加,Smad7蛋白表达下调.

TGF-β家族信号的细胞内传导蛋白:SMAD蛋白家族

SMADs是新近发现的参与TGF β超家族的信号在细胞内传导的一族蛋白 ,包括 8个成员 ,分别称SMAD1～ 8。SMAD1、2、3、5和 8属于一类 ,它们被TGF β的受体或BMP的受体激活而磷酸化 ,称为受体调节SMAD ,传导TGF β或BMP的信号。SMAD6和 7属于另一类 ,它们抑制受体调节SMAD的信号传导。SMAD4是第三类 ,它是受体调节SMAD传导信号的伴侣。受体调节SMAD传导信号必须先与SMAD4结合形成异源复合物 ,才能进到核中 。

微小RNA-190b-5p靶向调控Smad4及对TGF-β1诱导的直肠癌细胞迁移侵袭和上皮间质转化的影响

目的探讨微小RNA-190b-5p(miR-190b-5p)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的直肠癌细胞迁移侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。方法给予直肠癌SW1463细胞miR-190b-5p模拟物(mimic)和/或TGF-β1处理,采用实时荧光定量PCR测定miR-190b-5p表达水平;Western blot检测钙黏蛋白E、波形蛋白和SMAD家族蛋白4(Smad4)的蛋白表达水平;Transwell实验检测SW1463细胞的迁移侵袭能力,双荧光素酶报告基因实验验证miR-190b-5p与Smad4的靶向关系。结果与正常人结肠上皮细胞CCD841 con相比,SW1463细胞的miR-190b-5p表达降低。TGF-β1处理诱导SW1463细胞的miR-190b-5p表达水平进一步降低,促进EMT且增强细胞迁移侵袭能力和Smad4蛋白表达水平。过表达miR-190b-5p可抑制TGF-β1诱导的EMT及细胞迁移侵袭过程和Smad4表达上调。结论miR-190b-5p可能通过抑制Smad4表达来阻断TGF-β/Smad信号通路诱导的直肠癌细胞EMT和侵袭迁移过程,miR-190b-5p/Smad4有成为直肠癌治疗靶点的潜能。

哮喘气道重塑中smads蛋白变化及其对免疫的影响机制

哮喘气道重塑是气道炎症长期作用的结果,亦是哮喘不易根治的主要原因。研究发现TGF-β/smad蛋白信号通路在气道重塑的发生中起到至关重要的作用,Th17/CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘发生中的作用也日益受到人们的关注,但其具体作用及其相关发生机制及联系还不是很明确,所以阐明smads蛋白家族生物学特性、smads蛋白家族对哮喘气道重塑的影响、Th17/CD4+CD25+调节性T细胞与气道重塑的关系、气道重塑中Smads蛋白家族对Th17/CD4+CD25+调节性T细胞的影响将为哮喘气道重塑发生机制的研究提供一个新的方向。

ERK/Smad通路在BMP2介导的牙髓干细胞增殖、分化中的作用

目的探讨细胞外调节蛋白激酶(ERK)/SMAD家族(Smad)通路在骨形态蛋白(BMP)-2诱导的人牙髓干细胞(hDPSCs)增殖、分化中的调节作用。方法将前磨牙hDPSCs分为空白组、荧光蛋白(GFP)组、BMP2组(80 ng/ml)、BMP2+ERK通路抑制剂(U0126)组(80 ng/ml+25μmol/L);空白组正常培养不做任何处理,GFP组转染重组腺病毒空载体溶液作为对照,BMP2组转染BMP2重组腺病毒溶液,BMP2+U0126组在BMP2组基础上加入U0126溶液进行干预培养。各组均培养7 d后,用CCK-8检测hDPSCs细胞的增殖能力;用碱性磷酸酶(ALP)染色法及茜素红染色法检测其分化能力;用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测BMP2、Runt转录因子蛋白(Runx)2、牙本质涎磷蛋白(DSPP)和骨唾液蛋白(BSP)基因表达;用蛋白Western印迹法检测各组细胞中ERK1/2及其磷酸化(p)-ERK1/2、Smad1/5/8及其磷酸化蛋白(p-Smad1/5/8)、Runx2、DSPP、BSP蛋白表达水平。结果hDPSCs分离培养的第3代hDPSCs呈长梭形且阳性表达CD29、CD44及波形蛋白,阴性表达CD34及角蛋白。与空白组比较,BMP2组细胞ALP染色区域所占百分比、矿化结节能力和BMP2、Runx2、DSPP、BSP mRNA表达水平及p-ERK1/2/ERK1/2、p-Smad1/5/8/Smad1/5/8、Runx2、DSPP、BSP蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与BMP2组比较,BMP2+U0126组除BMP2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)外,其余上述指标均明显降低(P<0.05);GFP组和空白组相比上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论ERK/Smad通路在BMP2介导的hDPSCs细胞增殖、分化作用中处于激活活化状态,发挥重要作用。

淫羊藿苷基于GDF-9/Smads对多囊卵巢小鼠排卵的作用

目的探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)对多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)小鼠排卵障碍和卵泡发育的作用。方法取50只小鼠,40只用脱氢表雄酮法建立PCOS模型,随机分为模型组及ICA低剂量、中剂量和高剂量组,每组10只,剩余10只未建立模型的小鼠作为对照组。ICA低剂量、中剂量和高剂量组分别按25、50、75 mg·kg^(-1)腹腔注射0.5 mL ICA(溶于9 g·L^(-1)氯化钠注射液0.5 mL中),对照组和模型组腹腔注射9 g·L^(-1)氯化钠注射液,比较各组小鼠激素水平、脏器指数、卵巢形态学差异、卵母细胞凋亡率、生长分化因子9(growth differentiation factor-9,GDF-9)、骨形成蛋白Ⅱ型受体(bone morphogenetic protein typeⅡreceptor,BMPR-Ⅱ)、激活素受体样激酶5(activin receptor like kinase 5,ALK5)、磷酸化Smad蛋白2(phospho-Smad protein 2,p-Smad2)及p-Smad3蛋白水平的差异。结果HE结果显示ICA各剂量组小鼠各级卵泡数量增多,颗粒细胞层数增加、囊性卵泡数量减少;ICA各剂量组睾酮激素(testosterone,T)、促黄体生成激素(luteinizinghor mone,LH)、抗缪勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)水平、卵巢指数、囊性卵泡数量以及卵泡细胞凋亡率较模型组降低,卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、雌二醇(estradiol,E 2)水平、子宫指数、生长卵泡数量、黄体数量、GDF-9、BMPR-Ⅱ、ALK5、p-Smad2、p-Smad3蛋白表达水平较模型组升高(P<0.05);T、LH、AMH水平及卵巢指数、囊性卵泡数量、卵泡细胞凋亡率与ICA呈剂量依赖性降低,E 2、FSH水平、子宫指数、生长卵泡数量、黄体数量以及GDF-9、BMPR-Ⅱ、ALK5、p-Smad2和p-Smad3蛋白的表达水平与ICA呈剂量依赖性升高(P<0.05)。结论ICA能有效调节PCOS小鼠生殖激素水平,改善内分泌代谢,促进卵泡发育、成熟,减少卵泡凋亡,改善排卵,可能与调控GDF-9/Smads信号通路蛋白的表达有关。

丹参多酚酸酯调控SMAD2/FKBP1A/NF-κB轴对骨质疏松症大鼠破骨细胞分化和骨吸收的影响

目的:探讨丹参多酚酸酯(Sal)对骨质疏松症大鼠破骨细胞分化和骨吸收的影响,阐明其作用机制。方法:体内实验,采用去势法建立骨质疏松症大鼠模型,30只雌性大鼠随机分为假手术组、模型组和Sal组(建模4周后隔天腹腔注射40 mg·kg^(-1) Sal,共4周)。采用HE染色法观察各组大鼠股骨组织病理形态表现,双能X射线骨密度仪检测各组大鼠股骨骨密度(BMD),三点弯曲试验检测各组大鼠股骨最大载荷。体外实验,采用30μg·L^(-1)巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和100μg·L^(-1)核因子κB(NF-κB)配体(RANKL)诱导骨髓巨噬细胞(BMMs)分化,细胞分为对照组、RANKL组、RANKL+Sal组(10 mg·L^(-1)Sal)、RANKL+Sal+空载体(vector)组(10 mg·L^(-1) Sal和2 mg·L^(-1) vector)、RANKL+Sal+LV-FKBP1A组[10 mg·L^(-1) Sal和2 mg·L^(-1)慢病毒介导的FKBP1A过表达载体(LV-FKBP1A)]、RANKL+Sal+LV-FKBP1A+QNZ组(10 mg·L^(-1) Sal、2 mg·L^(-1) LV-FKBP1A和10 nmol·L-1NF-κB抑制剂QNZ),MTT法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Co-IP实验验证SMAD2和FKBP1A的相互作用,Westernblotting法检测各组大鼠骨组织和各组细胞中SMAD家族蛋白2(SMAD2)、FK506结合蛋白1A(FKBP1A)和磷酸化核因子-κB P65(p-P65)蛋白表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠血清和各组细胞中抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠骨组织和各组细胞中组织蛋白酶K(CTSK)和降钙素受体(CTR)mRNA表达水平。结果:体内实验,与模型组比较,Sal组大鼠骨小梁数量明显增加,大鼠股骨BMD和最大负载明显升高(P<0.01),血清中TRAP5b水平明显降低(P<0.01),骨组织中SMAD2及FKBP1A蛋白表达水平和CTSK及CTRmRNA表达水平明显降低(P<0.01)。Co-IP实验结果证实SMAD2与FKBP1A蛋白存在相互作用。体外实验,与RANKL组比较,RANKL+Sal组细胞增殖活性明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTRmRNA表达水平明显降低(P<0.01);与RANKL+Sal+vector组比较,RANKL+Sal+LV-FKBP1A组细胞凋亡率明显降低(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTRmRNA表达水平明显升高(P<0.01);与RANKL+Sal+LVFKBP1A组比较,RANKL+Sal+LV-FKBP1A+QNZ组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),细胞中TRAP5b水平,SMAD2、FKBP1A及p-P65蛋白表达水平和CTSK及CTRmRNA表达水平明显降低(P<0.01)。结论:Sal通过调控SMAD2和FKBP1A蛋白的相互作用,抑制NF-κB活化,缓解大鼠骨质疏松症。

p-Smad2/3、Smad7在大鼠实验性肾间质纤维化模型中的表达

目的观察TGF-β1/Sm ads信号传导途径在大鼠肾间质纤维化中的表达。方法W istar大鼠分为对照组、假手术组及模型组。行单侧输尿管结扎术(UUO)建立肾梗阻模型,分别于术后第3、6、14和28天处死动物。MASSON染色观察肾间质病变程度,免疫组化检测TGF-β1、p-Sm ad2/3、I型胶原以及α-SMA的改变,W estern b lot和RT-PCR方法分别检测TGF-β1、p-Sm ad2/3、Sm ad7蛋白及其mRNA表达水平。结果与对照组、假手术组相比,模型组于术后3天肾TGF-β1蛋白及mRNA、p-Sm ad2/3蛋白水平开始升高,Sm ad7蛋白表达开始减少而mRNA水平却升高,同时I型胶原、α-SMA水平升高。第14天TGF-β1、Sm ad7的变化达到峰值(P<0.01),在第28天有所回落。结论TGF-β1/Sm ads信号传导途径在肾间质纤维化形成中可能起着重要促细胞外基质沉积的作用。

Smad2/3上调促进大鼠梗阻性肾病的纤维化和凋亡

目的观察TGF-β1/Smads信号传导途径对大鼠肾间质纤维化表达的影响。方法40只Wistar大鼠分为假手术组及模型组。单侧输尿管结扎术式(UUO)建立肾梗阻模型。分别于术后3、6、14和28d处死动物。应用免疫组织化学和流式细胞学技术来检测TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3和观察细胞外基质以及细胞凋亡的改变。MASSON染色观察肾间质病变程度。结果与假手术组相比,模型组于术后3d梗阻肾TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3开始升高,细胞凋亡百分率同时升高,I型胶原及α-平滑肌肌动蛋白(-αSMA)水平亦升高。第6d各项指标水平显著升高。第14、28d升高更加明显(P<0.01)。B3、B6、B14和B28组之间也随天数增加而显著升高(P<0.01)。肾间质病变面积增加显著(P<0.01)。结论在肾间质纤维化中TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3及细胞凋亡明显上升,同时I型胶原及-αSMA表达升高及肾间质纤维化程度增加。TGF-β1/Smads信号传导途径在肾间质纤维化形成中可能起着重要促细胞外基质沉积和细胞凋亡的作用。

黄芪颗粒对病毒性心肌炎模型大鼠心肌细胞中Cav-3、Smad3表达的影响

目的:研究黄芪颗粒对病毒性心肌炎模型大鼠心肌细胞中小凹蛋白3(Cav-3)和Smad家族蛋白3(Smad3)表达的影响。方法:将90只大鼠随机分为正常组、模型组、参麦注射液组[阳性药物,0.2 g/(kg·d)]和黄芪颗粒低、中、高剂量组[0.42、0.84、1.68 g/(kg·d)],每组15只。除正常组外,其余各组大鼠均ip CVB3病毒复制病毒性心肌炎模型。造模同时各给药组大鼠ig相应药物,正常组和模型组大鼠ig生理盐水,连续15 d。各组分别于给药3、9、15 d后取5只大鼠进行实验,观察大鼠心肌组织病理改变,并进行评分;检测心肌细胞中Cav-3、Smad3 mRNA及其蛋白的表达。结果:给药15 d后,与正常组比较,模型组大鼠心肌纤维大量增生,发生明显病变,病理评分和心肌细胞中Cav-3、Smad3 mRNA及其蛋白水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠心肌组织病变得到改善,病理评分和心肌细胞中Cav-3、Smad3 mRNA及其蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:黄芪多糖可明显下调病毒性心肌炎模型大鼠心肌细胞中Cav-3、Smad3基因的表达,推测是其防治病毒性心肌炎的作用机制之一。

依托咪酯对脂多糖诱导人气道平滑肌细胞炎性损伤的改善作用及其机制

目的观察依托咪酯对脂多糖(LPS)诱导人气道平滑肌细胞(ASMCs)炎性损伤的改善作用,并探讨其机制。方法取对数生长期的人ASMCs分为对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组。对照组常规培养ASMCs;LPS组加入500 ng/mL的LPS;依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组加入500 ng/mL的LPS后,再分别加入5µg/mL、10µg/mL、20µg/mL的依托咪酯。各组细胞继续培养72 h,采用ELISA法检测细胞中炎性因子IL-2、IL-6、TNF-α,采用MTT法测算细胞存活率,采用流式细胞法检测细胞凋亡率,采用荧光定量PCR法检测细胞中转化生长因子(TGF)-β1、Smad家族蛋白3(Smad3)mRNA,采用蛋白印迹法检测细胞中TGF-β1、Smad3蛋白。结果与对照组相比,LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中IL-2、IL-6、TNF-α水平均升高(P均<0.05);与LPS组相比,依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中IL-2、IL-6、TNF-α水平均降低(P均<0.05),且依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组低于依托咪酯低浓度组(P均<0.05),依托咪酯高浓度组低于依托咪酯中浓度组(P<0.05)。对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞存活率分别为100.00%、40.08%±6.04%、52.87%±6.21%、66.48%±7.10%、81.26%±9.54%,组间相比,P均<0.05。对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞凋亡率分别为4.40%±1.09%、25.16%±5.07%、19.77%±4.03%、14.71%±2.25%、10.05%±2.05%,组间相比,P均<0.05。与对照组相比,LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量、Smad3 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与LPS组相比,依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量、Smad3 mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),且依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组低于依托咪酯低浓度组(P均<0.05),依托咪酯高浓度组低于依托咪酯中浓度组(P<0.05)。结论5µg/mL、10µg/mL、20µg/mL的依托咪酯对LPS诱导人ASMCs炎性损伤均具有改善作用,可升高细胞存活率、降低细胞凋亡率,且20µg/mL依托咪酯的的改善作用最强。依托咪酯对LPS诱导人ASMCs炎性损伤的改善作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路的激活有关。

Smads蛋白家族与TGF-β的细胞内信号转导

Smads蛋白家族参与 TGF-β的细胞内信号转导 ,TGF-β通过与 型和 型受体结合 ,形成受体复合物 , 型受体磷酸化激活 R- Smads,R- Sm ads与 Co- Smads结合成为转录复合物进入细胞核内 ,通过与 DNA结合的直接方式或与 DNA结合蛋白结合的间接方式 ,结合 SBEs,最终导致 PAI- 1等目的基因的转录 ,在此过程中 ,某些促进因子和 (或 )抑制因子的协调作用使 TGF-β的信号转导处于一种协调有序的状态中。

口腔扁平苔藓中TGF-β信号通路及其信号转导蛋白Smads家族

口腔扁平苔藓(OLP)是一种T细胞相关的伴有慢性浅表性炎症的黏膜角化异常性疾病,TGF-β信号通路及其信号转导蛋白Smads家族在疾病的发生发展中起着重要作用。TGF-β及Smads蛋白在OLP患者外周血及局部组织细胞中的表达相较于健康人群均有差异。此外,TGF-β信号通路及Smads蛋白家族在多种免疫相关疾病中也都起着不可忽视的作用,系统了解相关的研究进展能让我们更全面地认识TGF-β信号通路,有益于深入研究OLP。

TGF-β1/CTGF信号通路及其在黄韧带肥厚中作用机制的研究进展

腰椎管狭窄症是中老年人群的常见病,而黄韧带肥厚是腰椎管狭窄症的重要发病原因之一。通常认为,机械应力和损伤炎症是黄韧带肥厚的致病原因。黄韧带肥厚的主要病理变化是纤维化改变,但具体分子机制目前仍不明确。转化生长因子-β1通过影响结缔组织生长因子(CTGF)的表达,促进细胞外基质的合成和胶原纤维的增生,进而促进黄韧带细胞的纤维化,最终导致黄韧带肥厚。CTGF蛋白是黄韧带肥厚过程中重要的信号通路蛋白,这为黄韧带肥厚的药物治疗研究提供了可能,同时为腰椎管狭窄症的早期诊断和非手术治疗提供了新思路。

益气养阴消癥通络中药对糖尿病肾病大鼠TGF-β/Smads信号传导系统的影响

目的观察益气养阴消癥通络中药对糖尿病肾病(DN)大鼠TGF-β/Smads信号传导系统的影响。方法选择46只健康雄性SD大鼠,随机分为对照组10只,造模组36只。除对照组外,造模组大鼠1次性ip链脲佐菌素(STZ)60 mg/kg,造模组在糖尿病模型成模后,随机分为模型组、贝那普利组、中药组。成模1周后开始给药,贝那普利组以10 mg/(kg.d)ig给药,中药组以26 g/(kg.d)ig给药,各组连续给药23周后处死动物。HE、PAS染色观察组织病变程度,免疫组化检测TGF-β1、p-Smad2/3的改变,Western-blotting检测Smad7蛋白表达水平。结果与模型组相比,益气养阴消癥通络中药能够显著减轻DN大鼠肾组织病理损害,免疫组化以及Westernblotting显示,益气养阴消9通络中药能够显著下调TGF-β1、p-Smad2/3蛋白的表达,上调Smad7蛋白的表达。结论益气养阴消癥通络中药能够减轻DN的病理损害,这一作用的实现可能是部分通过TGF-β/Smads信号传导途径实现的,即降低受体激活型Smad表达,上调抑制型Smad7表达。

果蝇Mad蛋白MH2结构域的晶体结构

Decapentaplegic(Dpp)属于转化生长因子β(Transforming growth factor β,TGF-β)超家族,在果蝇(Drosophila)发育过程中起着调节细胞增殖、分化和胚胎模式化等重要作用.Smad蛋白家族的成员能够特异性地介导TGF-β信号在细胞内的传递.Mother Against Dpp(Mad)是第一个发现的Smad蛋白,本研究解析了其MH2(mad homology2)结构域(Mad-MH2)的晶体结构,分辨率为2.80,该结构和已知的哺乳动物Smad蛋白的MH2结构具有较高的相似性.未磷酸化的Mad-MH2在结晶过程中形成了同源三聚体,而且在溶液中表现出浓度依赖的寡聚趋势.结构分析显示,Mad-MH2同源三聚体的形成主要由C末端的SSVS序列介导;进一步体外生化实验表明,最后两个Ser残基的磷酸化可以大大增强Mad-MH2的聚合能力.有意思的是,一个不对称单位中的同源三聚体中,只有两个Mad-MH2分子的C末端具有稳定的空间构象;通过和R-Smad/Smad4异源三聚体结构的比较,本研究认为Mad-MH2同源三聚体中带有柔性SSVS末端序列的分子比较容易被Co-Smad替代,进而形成具有生理功能的异源三聚体.