黄芪颗粒对病毒性心肌炎模型大鼠心肌细胞中Cav-3、Smad3表达的影响

目的:研究黄芪颗粒对病毒性心肌炎模型大鼠心肌细胞中小凹蛋白3(Cav-3)和Smad家族蛋白3(Smad3)表达的影响。方法:将90只大鼠随机分为正常组、模型组、参麦注射液组[阳性药物,0.2 g/(kg·d)]和黄芪颗粒低、中、高剂量组[0.42、0.84、1.68 g/(kg·d)],每组15只。除正常组外,其余各组大鼠均ip CVB3病毒复制病毒性心肌炎模型。造模同时各给药组大鼠ig相应药物,正常组和模型组大鼠ig生理盐水,连续15 d。各组分别于给药3、9、15 d后取5只大鼠进行实验,观察大鼠心肌组织病理改变,并进行评分;检测心肌细胞中Cav-3、Smad3 mRNA及其蛋白的表达。结果:给药15 d后,与正常组比较,模型组大鼠心肌纤维大量增生,发生明显病变,病理评分和心肌细胞中Cav-3、Smad3 mRNA及其蛋白水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠心肌组织病变得到改善,病理评分和心肌细胞中Cav-3、Smad3 mRNA及其蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:黄芪多糖可明显下调病毒性心肌炎模型大鼠心肌细胞中Cav-3、Smad3基因的表达,推测是其防治病毒性心肌炎的作用机制之一。

依托咪酯对脂多糖诱导人气道平滑肌细胞炎性损伤的改善作用及其机制

目的观察依托咪酯对脂多糖(LPS)诱导人气道平滑肌细胞(ASMCs)炎性损伤的改善作用,并探讨其机制。方法取对数生长期的人ASMCs分为对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组。对照组常规培养ASMCs;LPS组加入500 ng/mL的LPS;依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组加入500 ng/mL的LPS后,再分别加入5µg/mL、10µg/mL、20µg/mL的依托咪酯。各组细胞继续培养72 h,采用ELISA法检测细胞中炎性因子IL-2、IL-6、TNF-α,采用MTT法测算细胞存活率,采用流式细胞法检测细胞凋亡率,采用荧光定量PCR法检测细胞中转化生长因子(TGF)-β1、Smad家族蛋白3(Smad3)mRNA,采用蛋白印迹法检测细胞中TGF-β1、Smad3蛋白。结果与对照组相比,LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中IL-2、IL-6、TNF-α水平均升高(P均<0.05);与LPS组相比,依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中IL-2、IL-6、TNF-α水平均降低(P均<0.05),且依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组低于依托咪酯低浓度组(P均<0.05),依托咪酯高浓度组低于依托咪酯中浓度组(P<0.05)。对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞存活率分别为100.00%、40.08%±6.04%、52.87%±6.21%、66.48%±7.10%、81.26%±9.54%,组间相比,P均<0.05。对照组、LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞凋亡率分别为4.40%±1.09%、25.16%±5.07%、19.77%±4.03%、14.71%±2.25%、10.05%±2.05%,组间相比,P均<0.05。与对照组相比,LPS组、依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量、Smad3 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P均<0.05);与LPS组相比,依托咪酯低浓度组、依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组细胞中TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量、Smad3 mRNA和蛋白相对表达量均降低(P均<0.05),且依托咪酯中浓度组、依托咪酯高浓度组低于依托咪酯低浓度组(P均<0.05),依托咪酯高浓度组低于依托咪酯中浓度组(P<0.05)。结论5µg/mL、10µg/mL、20µg/mL的依托咪酯对LPS诱导人ASMCs炎性损伤均具有改善作用,可升高细胞存活率、降低细胞凋亡率,且20µg/mL依托咪酯的的改善作用最强。依托咪酯对LPS诱导人ASMCs炎性损伤的改善作用机制可能与抑制TGF-β1/Smad3信号通路的激活有关。