胰岛素样生长因子结合蛋白3在脑梗死模型的表达及Smad信号通路的参与机制

目的 探讨Smad信号通路机制在脑梗死模型大鼠中的作用以及脑组织胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的表达变化与神经功能的关系。方法 60只健康成年雄性SD大鼠随机分为模型组、假手术组及正常对照组,每组20只,模型组采用线栓法建立脑梗死模型,假手术组仅暴露颈内动脉后直接缝合皮肤,建模成功后1周评估各组大鼠的改良神经功能缺损(mNSS)评分。采用苏木精-伊红染色法检测脑组织病理学变化情况,采用Western blot法对大鼠脑组织中IGFBP-3、Smad2、Smad4蛋白水平进行检测,并采用逆转录聚合酶链反应测定大鼠脑组织中IGFBP-3、Smad2、Smad4 mRNA水平。用Spearman相关性分析IGFBP-3、Smad2、Smad4、P21表达水平之间的相关性。结果 苏木精-伊红染色结果显示,模型组大鼠出现明显脑组织水肿,表现为脑细胞排列紊乱,小胶质细胞数量变多,脑细胞核仁出现模糊,其中脑梗死面积为20.55%。与假手术组和正常对照组比较,模型组大鼠mNSS评分、IGFBP-3、Smad2、Smad4蛋白及mRNA相对表达水平明显升高,P21蛋白及mRNA相对表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。Spearman相关性分析显示,模型组大鼠脑组织中IGFBP-3 mRNA表达水平与mNSS评分、Smad2 mRNA、Smad4 mRNA呈显著正相关(r=0.568,r=0.623,r=0.597,P<0.01);IGFBP-3 mRNA表达水平与P21呈显著负相关(r=-0.573,P<0.01)。结论 脑梗死大鼠脑组织IGFBP-3水平显著升高,且IGFBP-3水平与脑梗死大鼠神经功能之间关系密切,其作用机制可能与Smad信号通路有关。

Smad蛋白在BMP-2诱导成骨分化过程中的作用

目的研究Smad蛋白在骨形态发生蛋白-2(BMP-2)诱导成骨分化过程中作用,探讨Smad蛋白在成骨分化期间信号传导的机制。方法将取自MDX大鼠颅盖骨组织分离获得成骨细胞进行培养,培养的成骨细胞分组,加入不同浓度的BMP-2或BMP-2与Trx2SARA混合物后,用反义PCR和Western Blot斑点杂交对各组诱导成骨分化的情况进行分析。体内实验中肌肉局部埋植BMP-2或BMP-2和Trx2SARA,取不同时间点处死动物,制备组织切片,用SO染色进行组织学观察。结果BMP-2处理的成骨细胞碱性磷酸酶增加,降钙素mRNA增加,Smad蛋白的表达水平呈剂量依赖性增加。Trx2SARA处理组出现碱性磷酸酶和降钙素mRNA下调。体内实验组织切片SO染色显示,BMP-2处理组大部分异位组织由增殖中、肥厚前和肥厚软骨细胞构成,而Trx2SARA处理组很少向软骨源细胞分化。结论Smad蛋白在BMP-2诱导成骨分化中发挥重要的信号传导作用。

骨形态发生蛋白7/Smads信号通路及其在肝纤维化进程中的作用

肝纤维化是由于各种病因导致肝损伤后,机体对损伤进行修复的过程。近年来研究发现骨形态发生蛋白(BMP)7及其下游的Smads蛋白可以通过不同的途径拮抗转化生长因子(TGF)β1的致肝纤维化作用,包括诱导细胞外基质降解,抑制细胞凋亡,减少多种促炎症因子的表达,促进肝细胞再生等,探讨了BMP-7/Smads信号通路在肝纤维化过程中的作用。

丹酚酸B对人肺成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达的影响及其机制

目的:观察丹酚酸B(Sal B)对人肺成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad信号通路相关蛋白表达的影响,探讨其抑制TGF-β1活化肺成纤维细胞作用的信号机制。方法:体外培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,随机分为对照组(未加入TGF-β1或Sal B)、Sal B(10μmol·L-1)组、TGF-β1(10μg·L-1)组和TGF-β1(10μg·L-1)+Sal B(10μmol·L-1)组。Western blotting法检测各组细胞内p-Smad2、p-Smad3、TGF-βⅠ型受体(TβRⅠ)和Smad7蛋白表达。结果:与对照组比较,TGF-β1组细胞内p-Smad2、p-Smad3和TβRⅠ蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),Smad7蛋白表达水平明显下降(P<0.05);与对照组比较,Sal B组细胞内p-Smad2、p-Smad3、TβRⅠ和Smad7蛋白表达水平无明显变化(P>0.05);与TGF-β1组比较,TGF-β1+Sal B组细胞内p-Smad2、p-Smad3和TβRⅠ蛋白表达水平均下降(P<0.05),Smad7蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论:Sal B能够通过抑制肺成纤维细胞TGF-β1/Smad信号通路,从而发挥其抑制TGF-β1活化肺成纤维细胞的作用。

复方芪参提取物对瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad蛋白连接区的影响

目的研究复方芪参提取物(CASE)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)内Smad蛋白连接区的影响。方法 MTT法检测CASE对新生牛血清(NBS)诱导的KFs增殖的影响;细胞免疫荧光染色法观察不同浓度(7.5、15、30mg/L)CASE对TGF-β1诱导的KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化的影响;人体正常成纤维细胞(NFs)作为对照。结果 CASE(15、30、60mg/L)能够显著抑制NBS诱导的KFs的增殖,其IC50为18.90mg/L;TGF-β1能够诱导KFs内Smad2L和Smad3L蛋白磷酸化,而CASE(7.5、15、30mg/L)对这两种蛋白的磷酸化均具有明显的抑制作用,而TGF-β1对NFs中Smad2L和Smad3L蛋白表达无明显影响。结论 CASE能够抑制KFs细胞的增殖,其作用机制可能与抑制Smad2连接区和Smad3连接区磷酸化有关。

姜黄素调控TGF-β1/Smad信号通路改善大鼠腹膜透析相关腹膜纤维化及机制研究

目的 探讨姜黄素对大鼠腹膜透析(peritoneal dialysis, PD)相关腹膜纤维化(peritoneal fibrosis, PF)的影响及可能作用机制。方法 随机选取10只雄性Wistar大鼠作为正常组(生理盐水),剩余大鼠随机分为模型组(生理盐水)及姜黄素低(15 mg·kg-1·d-1)、中(30 mg·kg-1·d-1)、高(60 mg·kg-1·d-1)剂量组,每组各10只,给药同时腹腔内注射4.25%葡萄糖PD溶液(100 mL/kg),连续30 d。4 h腹膜平衡试验评估腹膜功能;测量腹膜厚度;腹膜组织行HE和Masson染色观察腹膜病理变化;ELISA法检测腹膜组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)及白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;蛋白质印迹法检测腹膜组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad2/3、p-Smad2/3、Smad7、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,ColⅠ)蛋白相对表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠腹膜超滤体积降低,葡萄糖转运量升高,腹膜厚度增加(P<0.05),结构紊乱、间皮细胞变形、炎症细胞严重浸润、胶原蛋白严重沉积;腹膜组织中TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高,TGF-β1、p-Smad2/3、α-SMA及ColⅠ蛋白相对表达水平升高,Smad7蛋白相对表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,姜黄素低、中、高剂量组大鼠腹膜组织超滤体积升高,葡萄糖转运量降低,腹膜厚度减少(P<0.05),结构逐渐完整,炎症浸润及胶原蛋白沉积情况有所减轻;腹膜组织中TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低,TGF-β1、p-Smad2/3、α-SMA及ColⅠ蛋白相对表达水平降低,Smad7蛋白相对表达水平升高(P<0.05);姜黄素改善PD相关PF大鼠的效果呈剂量依赖性作用。结论 姜黄素可减轻PD相关PF大鼠腹膜组织病理损伤,改善腹膜功能障碍,其作用机制可能与减轻炎性反应,阻滞TGF-β1/Smad信号通路激活,进而抑制PF发生、发展有关。

六味地黄汤对多囊卵巢综合征大鼠性激素水平及转化生长因子β/Smads信号通路相关因子的影响

目的观察六味地黄汤对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠性激素及转化生长因子β/Smads(TGF-β/Smads)信号通路相关因子的影响。方法随机将20只雌性SD大鼠分为空白对照组5只,造模组15只。造模组大鼠予来曲唑溶液8 mL/kg灌胃,连续21天造模,同时空白对照组予等量1%羧甲基纤维素溶液(CMC)灌胃,造模成功后将造模组大鼠进一步分为模型组、中药组、中西医结合组,每组5只。中药组大鼠予六味地黄汤生药7.5 g/(kg·d)灌胃,中西医结合组大鼠在中药组基础上予炔雌醇环丙孕酮溶液10 mL/(kg·d)灌胃,模型组和空白对照组予0.9%氯化钠注射液7.5 mL/(kg·d)灌胃,均连续21天。用酶联免疫吸附法检测各组大鼠血清黄体生成激素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E_(2))、睾酮(T)水平,蛋白免疫印迹法检测各组大鼠卵巢组织TGF-β_(1)、Smad3、Smad4、Smad7蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组LH、T水平升高(P<0.05);与模型组比较,中药组、中西医结合组LH、T水平均降低(P<0.05),而中药组LH、T水平与中西医结合组比较差异无统计学意义(P>0.05)。4组FSH、E_(2)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,模型组TGF-β_(1)、Smad3、Smad4、Smad7蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,中药组TGF-β_(1)、Smad3、Smad4蛋白表达水平均降低(P<0.05),Smad7蛋白表达水平升高(P<0.05),中西医结合组Smad3、Smad4、Smad7蛋白表达水平均降低(P<0.05),而TGF-β_(1)蛋白表达水平与模型组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与中西医结合组比较,中药组TGF-β_(1)蛋白表达水平降低(P<0.05),Smad3、Smad4、Smad7蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论六味地黄汤能改善PCOS大鼠的性激素水平,调节TGF-β/Smads信号通路相关因子的表达。

TGF-β_1/Smads和ERK表达异常在高盐饮食诱导的大鼠血管重构中的作用

目的:研究转化生长因子β1(TGF-β1)/Smads和细胞外信号调节激酶(ERK)表达在高盐饮食诱导的大鼠血管重构中的作用及替米沙坦的干预效应。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常盐对照组(C组),8%高盐模型组和8%高盐+替米沙坦干预组(T组),每2周测量尾动脉压1次,根据尾动脉压又将8%高盐模型组分为模型高血压组(MH组)和模型正常血压组(MN组),喂养共24周。HE染色和Masson染色观察主动脉和肠系膜动脉重构。通过real-time PCR测定主动脉中膜TGF-β1、Smad2和Smad3和Smad7 mRNA表达,同时免疫组化法检测主动脉和肠系膜动脉中膜增殖细胞核抗原(PCNA)、TGF-β1、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)及Smad7的蛋白表达和分布。结果:与C组相比,MH组大鼠血压升高(P<0.05),MH组和MN组主动脉和肠系膜动脉中膜胶原容积分数(CVF)和中膜厚度(MT)显著增加(P<0.01),主动脉TGF-β1、Smad2和Smad7 mRNA表达增高(P<0.05),主动脉和肠系膜动脉中膜PCNA、TGF-β1、p-Smad2/3和p-ERK 1/2蛋白表达显著升高(P<0.05),Smad7表达明显降低(P<0.05);经替米沙坦干预后,主动脉和肠系膜动脉中膜CVF和MT减小(P<0.01),PCNA、TGF-β1、p-Smad2/3和p-ERK1/2表达减少(P<0.05),Smad7表达上升(P<0.05)。结论:TGF-β1/Smads和ERK表达异常共同参与高盐饮食致主动脉和肠系膜动脉重构的机制;替米沙坦抗动脉重构的作用可能部分是通过阻断血管紧张素Ⅱ1型(AT1)受体影响TGF-β1/Smads和ERK表达实现的。

左归丸含药血清通过ERK/TGF-β/Smads信号级联调控MC3T3-E1细胞增殖与分化

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)/转化生长因子β(TGF-β)/Sma和Mad相关蛋白(Smads)信号级联在左归丸含药血清干预成骨前体细胞系MC3T3-E1细胞增殖与分化中的作用。方法:以倍美力为阳性对照药,对Sprague-Dawley(SD)雌性大鼠灌服高、中、低剂量的左归丸混悬液,7 d后腹主动脉取血分离含药血清。采用噻唑蓝(MTT)法检测左归丸含药血清对MC3T3-E1细胞的增殖作用,采用改良钙钴染色法检测碱性磷酸酶(ALP)表达,采用茜素红染色法检测钙化结节,采用Western blotting法检测核结合因子α1(Cbfα1)和Ⅰ型胶原(ColⅠ)蛋白表达,采用real-time RT-PCR法检测TGF-β1、Smad4和Smad2 mRNA表达。结果:左归丸含药血清对MC3T3-E1细胞的促增殖作用呈剂量和时间相关性,其中以低剂量且体积分数为15%作用48 h后对MC3T3-E1的促增殖作用最大;左归丸含药血清能促进MC3T3-E1细胞ALP表达,增强细胞基质钙化,提高Cbfα1和ColⅠ蛋白分泌,上调TGF-β1、Smad4和Smad2 mRNA表达;加入ERK1/2信号通路特异性阻滞剂PD98059后,MC3T3-E1细胞增殖降低,ALP表达下降,细胞基质钙化减弱,Cbfα1和ColⅠ蛋白分泌降低,Smad4和Smad2 mRNA表达下调,TGF-β1mRNA表达进一步上调。结论:左归丸可能通过干预ERK/TGF-β/Smads信号级联而调控成骨细胞的增殖和分化,这可能是其防治骨质疏松症的机制之一。

六味地黄丸含药血清及梓醇对肾小管上皮细胞HK-2转化生长因子β1/Smad通路的影响

目的:观察六味地黄丸含药血清及其主要单体梓醇对肾小管上皮细胞株HK-2转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号通路的影响。方法:制备大鼠六味地黄丸含药血清,采用四甲基偶氮唑盐法和乳酸脱氢酶释放实验确定药物最适作用浓度。六味地黄丸含药血清和梓醇作用于TGF-β1刺激(或不刺激)的HK-2细胞,并设肝细胞生长因子(hepatocyte growthfactor,HGF)为阳性对照,采用蛋白质印迹法观察Smad通路分子Smad2、Smad7和Ski相关活性蛋白N(Ski-related novel protein N,SnoN)蛋白表达的情况。结果:与HGF作用相似,10%浓度六味地黄丸含药血清可抑制TGF-β1诱导的HK-2细胞Smad2蛋白磷酸化并促进核转录抑制因子SnoN的表达。梓醇亦可显著抑制HK-2细胞Smad2蛋白磷酸化。六味地黄丸含药血清及梓醇对HK-2细胞Smad7蛋白表达未见明显调控作用。结论:在TGF-β1刺激HK-2细胞模型中,六味地黄丸含药血清拮抗Smad通路活化的作用与HGF相似,梓醇是六味地黄丸中主要发挥作用的单体之一。

乙型肝炎病毒对肝内TGF-β_1/Smads信号通路的作用

目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)对肝内TGF-β1蛋白表达及Smads信号通路的作用,为制定慢性乙肝肝纤维化临床治疗策略提供理论依据。方法:(1)运用免疫组化PV-6000法检测对照组和慢性乙肝组肝组织中TGF-β1、HBsAg和HBcAg的表达,并采用荧光定量PCR法测定慢性乙肝患者血清HBV DNA含量。(2)应用体外细胞培养技术培养HBV刺激的人肝星状细胞系LX-2细胞,Western blotting方法测定其细胞内TGF-β1、Smad3和Smad7的蛋白表达。结果:(1)慢性乙肝组肝组织内TGF-β1的表达高于对照组(P<0.01);肝内TGF-β1表达水平与血清HBV DNA含量呈正相关(P<0.01),且HBcAg阳性肝组织水平较高(P<0.01)。(2)体外细胞学实验中,HBV刺激组LX-2细胞内TGF-β1和Smad3蛋白含量高于对照组和HBV+抗-TGF-β1组(P<0.01);Smad7蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)TGF-β1在慢性乙肝患者肝组织中的表达与血清HBV DNA含量及肝内HBcAg的表达有关。(2)在TGF-β1/Smads信号通路中,HBV致纤维化作用机制以Smad3的正性调控为主,Smad7的作用不明显。

扶正化瘀方影响转化生长因子β1/Smad信号通路的抗肝纤维化作用机制

目的:探讨扶正化瘀方影响转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/Smad信号转导的抗肝纤维化作用机制。方法:本研究分体内实验和体外实验两部分。在体内实验中,37只雄性Wistar大鼠分为正常组(5只)、模型组(18只)和扶正化瘀方组(14只)。模型组和扶正化瘀组大鼠采用二甲基亚硝胺(dimethylnitrosamine,DMN)腹腔注射复制大鼠肝纤维化模型。灌胃治疗4周后,采用盐酸水解法检测肝组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,蛋白质印迹法分析肝组织中TGF-β1、TGF-β1Ⅰ型受体(TGF-β1 type Ⅰ receptor,TβR-Ⅰ)、Smad2、Smad3及磷酸化Smad2/3蛋白的表达。体外实验采用培养4d的原代大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC),分为对照组、TGF-β1组、10%扶正化瘀方药物血清组及TβR-Ⅰ胞内激酶抑制剂(SB-431542)组。后3组用2.5ng/mLTGF-β1刺激24h后,对照组及TGF-β1组加10%正常大鼠血清,10%扶正化瘀方药物血清组加10%服用扶正化瘀方的大鼠血清,SB-431542组加10%正常大鼠血清及10μmol/LSB-431542。共孵育24h后,免疫荧光染色检测HSC中α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Smad3蛋白的表达,蛋白质印迹法分析HSC中α-SMA蛋白的表达。结果:体内实验发现,扶正化瘀方可明显降低纤维化肝组织中异常升高的Hyp含量及TGF-β1、TβR-Ⅰ、磷酸化Smad2/3蛋白的表达。体外研究发现,正常HSC中α-SMA、TβR-Ⅰ表达较低,TGF-β1刺激可显著上调其表达;扶正化瘀方药物血清共孵育后,可明显抑制TGF-β1诱导的HSC中α-SMA的表达;正常HSCSmad3主要表达在细胞质中,细胞核中表达较低,TGF-β1可显著刺激Smad3向细胞核转移,扶正化瘀方药物血清可明显抑制TGF-β1诱导的Smad3核转位。结论:扶正化瘀方可下调纤维化大鼠肝脏及HSC中的TGF-β1/Smad病理信号转导通路,这可能是扶正化瘀方抗肝纤维化的部分作用机制。

经典转化生长因子β/Smad信号和Wnt/β-catenin信号间的相互作用

TGF-β信号通路是调节细胞生长和分化的的重要通路,此外还参与纤维化疾病发生和肿瘤发生发展的调控。Wnt信号通路是调节胚胎发育和肿瘤侵袭转移的重要通路。近10年来研究表明,这两条通路在调节胚胎发育、纤维化疾病发生以及肿瘤的演进等过程中共同发挥着重要作用,两者之间存在着密切联系,这两条通路存在Smad、轴蛋白(Axin)、蓬乱蛋白(Dvl)和β-连环蛋白(β-catenin)几个典型的相互作用的交叉点。本文着重阐述经典的TGF-β信号通路和Wnt信号通路在这几个交叉点的相互作用模式,以更好地应对纤维化疾病和肿瘤的进展。

益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/smad信号通路及结缔组织生长因子的影响

目的:观察益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β/smad信号通路及结缔组织生长因子(connectivetissue growth factor,CTGF)的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠30只诱导建立单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,益气活血方大、中、小剂量组和西药组,另取健康雄性Wistar大鼠6只设为假手术组。3周后处死大鼠,称取体质量;取血清检测肌酐(creatinine,Cr)、尿素氮(bloodurea nitrogen,BUN)水平;取肾脏组织采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法检测各组转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)、smad2、smad7、CTGF mRNA和蛋白表达水平;苏木精-伊红染色和Masson染色检测各组肾间质纤维化指数。结果:模型组大鼠血清Cr和BUN值较假手术组偏高;与模型组比较,大剂量益气活血方可以降低Cr和BUN值,但差异无统计学意义。苏木精-伊红染色和Masson染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少,胶原成分显著增加。益气活血方大剂量组、中剂量组和西药福辛普利钠组大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况较模型组明显减轻,胶原成分明显减少。与假手术组比较,模型组大鼠肾脏组织中TGF-β、smad2和CTGFmRNA以及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),smad7的表达水平则明显降低(P<0.05)。与模型组比较,益气活血方大剂量组和中剂量组大鼠TGF-β、smad2、CTGF mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.01,P<0.05),smad7表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。结论:UUO大鼠肾组织中CTGF mRNA的表达可能通过TGF-β/smad信号通道进行调节;益气活血方可以通过下调TGF-β、smad2和上调smad7的表达来抑制CTGF表达,进而遏制肾纤维化的进展。

玉屏风多糖对TGF-β1诱导的肝星状细胞增殖的作用及与Smads通路的关系

目的研究外源性转化生长因子-β1(TGF-β1)对肝星状细胞(HSC)的激活作用,观察玉屏风多糖(YPF-P)对TGF-β1干预的HSC中Smads通路的影响。方法肝星状细胞株HSC-T6用YPF-P(25、50、100 mg/L)处理48 h,同时设空白对照和TGF-β1干预的对照,MTT法检测HSC细胞增殖情况,半定量RT-PCR法检测HSC中Smad2、Smad3、Smad7和结缔组织生长因子(CTGF)mRNA的表达。在此基础上,HSC细胞分别用YPF-P(50 mg/L)、Smads通路阻断剂SIS3(10μmol/ml)、SIS3(10μmol/ml)+YPF-P(50 mg/L)处理48 h,同时设空白对照和TGF-β1干预的对照,Western blot法检测HSC中CTGF蛋白的表达。结果各剂量组YPF-P均能明显抑制TGF-β1干预的HSC增殖,下调Smad2、Smad3、CTGF mRNA的表达,上调Smad7 mRNA的表达。SIS3+YPF-P组CTGF蛋白表达明显下降。结论 TGF-β1明显促进HSC增殖,YPF-P可抑制HSC的活化增殖,其抗纤维化机制可能与阻断HSC中的Smads信号转导通路进而下调CT-GF的表达有关。

Smurf1调节因子在骨形态发生蛋白诱导骨生成中的作用

骨形态发生蛋白(BMP)是明确具有诱导成骨作用的生长因子。其通过结合靶细胞表面受体,活化细胞内一系列Sm ad蛋白,经Sm ad蛋白介导,将信号转导至细胞核内,在一系列辅助因子的作用下,启动成骨基因的表达。细胞内源性Smurf1对这一整个过程起抑制作用。本文就Smurf1调节因子在骨形态发生蛋白诱导骨生成中的作用做一综述。

转化生长因子-β1、Smad3、Smad4和Smad7在结直肠癌发生中的作用

背景:结直肠腺瘤-腺癌序列是目前公认的结直肠癌发生学说,但关于结直肠腺瘤,特别是高危型结直肠腺瘤中转化生长因子(TGF)-β1通路蛋白表达的临床研究较少。目的:探讨TGF-β1、Smad3、Smad4和Smad7在结直肠癌发生中的作用。方法:选取2000年8月～2006年12月六安市人民医院结直肠息肉标本110例(包括腺瘤性和非腺瘤性息肉)、结直肠癌40例和正常结直肠组织20例,以免疫组化染色检测TGF-β1、Smad3、Smad4和Smad7在各组中的表达,并分析高危型腺瘤中TGF-β1、Smad3、Smad4和Smad7表达与临床病理特征的关系。结果:TGF-β1、Smad3、Smad4、Smad7在息肉组、结直肠癌组和对照组中的表达有显著差异(P<0.05),其表达与高危型腺瘤患者的临床病理特征均不相关。高危型腺瘤和Dukes A期结直肠癌中TGF-β1、Smad3、Smad7的表达有显著差异(P<0.05),而Smad4表达无显著差异。结论:TGF-β1通路可能参与了结直肠癌的发生过程,TGF-β1、Smad3和Smad7可能在结直肠腺瘤的癌变早期起作用。

miR-126对心肌梗死大鼠TGF-β/Smads信号通路的影响

目的:研究微小RNA(miR)-126对心肌梗死(MI)大鼠转化生长因子(TGF)-β/Smads信号通路的影响。方法:30只大鼠被随机均分为实验对照组、MI模型组和miR组(在MI模型组基础上转染miR-126)。比较三组心功能指标:LVEF、LVEDd、LVESd及LVFS,心肌组织变化、心肌细胞凋亡率、TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白相对表达量。结果:与实验对照组比较,MI模型组、miR组LVEDd、LVESd、细胞凋亡率[(9.53±1.17)%比(42.38±3.44)%比(21.35±3.12)%]、TGF-1β[(0.49±0.08)比(1.32±0.25)比(0.85±0.14)]、Smad2蛋白相对表达量[(1.03±0.17)比(1.98±0.46)比(1.42±0.19)]均显著升高,MI模型组、miR组LVEF[(87.61±1.59)%比(48.87±4.47)%比(66.65±5.11)%]、LVFS[(36.26±5.08)%比(23.88±3.21)%比(32.43±2.62)%]均显著降低(P<0.05或<0.01);且与MI模型组比较,miR组LVEDd、LVESd、细胞凋亡率、TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白相对表达量[(1.75±0.36)比(1.31±0.15)]均显著降低,LVEF、LVFS均显著升高(P均<0.01)。HE染色结果显示MI模型组和miR组心肌细胞炎症浸润、细胞间胶原纤维及神经元细胞损伤程度均显著高于实验对照组,且miR组上述情况显著轻于MI模型组。结论:miR-126可显著抑制TGF-β/Smads信号通路,减少大鼠心肌细胞的凋亡,对心肌梗死具保护作用。

皮肤黑素瘤细胞3种Smad的表达

目的 探讨Smad2、Smad3、Smad4在皮肤黑素瘤细胞中的表达情况。方法 应用反转录-实时荧光定量PCR方法和蛋白印迹方法,分别检测人皮肤黑素瘤A375细胞和人正常黑素细胞中Smad2、Smad3、Smad4的mRNA及蛋白表达。结果 A375细胞中Smad2、Smad3、Smad4的mRNA和蛋白表达均显著低于人正常黑素细胞（t=2.361-4.214,P〈0.01）。结论在黑素瘤细胞的转化生长因子β（TGF-β）/Smad信号通路中Smad2、Smad3、Smad4均出现表达下调,可能参与了皮肤黑素瘤发病。

TGF-β/Smads信号转导通路与胃癌关系的研究进展

转化生长因子β(TGF-β)是具有多种生物学活性的多肽类细胞因子,参与调节细胞多种生物学功能。TGF-β信号通路具有调控细胞增殖和分化的作用,由Smads蛋白介导的TGF-β信号转导是该通路最经典的转导方式。近年研究表明,TGF-β/Smads信号通路任何环节的功能障碍均有可能导致该信号转导异常,从而影响胃癌的发生、发展。本文就TGF-β/Smads信号转导通路与胃癌的关系作一综述。