目的:检测Smad7蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及临床意义,探讨其在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法:利用免疫组织化学染色,检测31例原发性口腔鳞癌患者肿瘤组织及癌旁标本中Smad7的表达,并分...目的:检测Smad7蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及临床意义,探讨其在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法:利用免疫组织化学染色,检测31例原发性口腔鳞癌患者肿瘤组织及癌旁标本中Smad7的表达,并分析其与淋巴结转移之间的关系;利用CCK-8及细胞划痕实验检测Smad7基因沉默对肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响;通过Smad7 si RNA干扰HN4细胞,影响Smad7蛋白的表达,利用免疫印迹及q RT-PCR检测其对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标蛋白及RNA表达的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:在口腔鳞癌肿瘤组织中,Smad7蛋白在细胞核和细胞质的表达均显著高于对应的癌旁组织。Smad7的表达与患者颈淋巴结转移显著相关。Smad7 si RNA干扰HN4细胞后,细胞的增殖能力减弱,迁移能力增强。Smad7 si RNA干扰使得HN4细胞神经钙黏附素(N-cadherin)蛋白的表达量升高,而上皮钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量下降,N-cadherin蛋白及波形蛋白(Vimentin)RNA表达量显著升高,与对照组相比有显著差异。结论:Smad7的表达与口腔鳞癌患者颈淋巴结转移相关,且Smad7在口腔鳞癌肿瘤细胞的增殖及侵袭转移中发挥重要作用。展开更多
文摘目的:探讨外源性转入并上调表达抑制性信号蛋白Sm ad7对TGF-β1作用下大鼠腹膜间皮细胞Sm ad2表达的影响。方法:通过脂质体介导的方法,将表达Sm ad7的重组质粒(PCDNA3-Sm ad7)转染培养的大鼠腹膜间皮细胞,分别培养于不同浓度TGF-β1培养液(0、1.25、2.5和10μg/L),用RT-PCR及W estern b lotting的方法检测不同时间(0、5、15、30、60和120 m in)Sm ad2、Sm ad7表达的水平。结果:正常间皮细胞Sm ad2 mRNA和蛋白在TGF-β1刺激后5 m in开始表达,呈时间依赖性,在30 m in达到高峰,而后逐渐减弱;Sm ad7 mRNA和蛋白也在TGF-β1刺激后5 m in可见表达,但此后逐渐减弱,30 m in达到最低,60 m in又开始逐渐增强。Sm ad2和Sm ad7mRNA和蛋白,随TGF-β1浓度的增高而表达增强。转染后大鼠腹膜间皮细胞可见Sm ad7 mRNA和蛋白表达显著上调,并可持续高表达。转染后的腹膜间皮细胞在TGF-β1刺激下,Sm ad2 mRNA及蛋白的表达均低下,刺激0、5、15、30、60和120 m in后Sm ad2 mRNA表达分别低33%、56%、67%、71%、63%和57%(P<0.05)。Sm ad2蛋白表达分别低78%、89%、89%、88%和76%(P<0.05)。结论:上调表达抑制性信号蛋白Sm ad7可显著抑制腹膜间皮细胞中受体调控信号蛋白Sm ad2的表达和活性,提示Sm ad7可能对TGF-β1起反向调控作用。
文摘目的:检测Smad7蛋白在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及临床意义,探讨其在口腔鳞癌细胞增殖和迁移中的作用。方法:利用免疫组织化学染色,检测31例原发性口腔鳞癌患者肿瘤组织及癌旁标本中Smad7的表达,并分析其与淋巴结转移之间的关系;利用CCK-8及细胞划痕实验检测Smad7基因沉默对肿瘤细胞增殖及迁移能力的影响;通过Smad7 si RNA干扰HN4细胞,影响Smad7蛋白的表达,利用免疫印迹及q RT-PCR检测其对上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标蛋白及RNA表达的影响。采用SPSS18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:在口腔鳞癌肿瘤组织中,Smad7蛋白在细胞核和细胞质的表达均显著高于对应的癌旁组织。Smad7的表达与患者颈淋巴结转移显著相关。Smad7 si RNA干扰HN4细胞后,细胞的增殖能力减弱,迁移能力增强。Smad7 si RNA干扰使得HN4细胞神经钙黏附素(N-cadherin)蛋白的表达量升高,而上皮钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量下降,N-cadherin蛋白及波形蛋白(Vimentin)RNA表达量显著升高,与对照组相比有显著差异。结论:Smad7的表达与口腔鳞癌患者颈淋巴结转移相关,且Smad7在口腔鳞癌肿瘤细胞的增殖及侵袭转移中发挥重要作用。