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Molecular Cloning the Gene of Small Heat Shock Protein in the Mitochondria and Endoplasmic Reticulum of Tomato 被引量:17
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作者 刘箭 庄野真理子 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第2期138-145,共8页
A cDNA Library was constructed with the heat shocked tomato ( Lycopersicon esculentum Mill.) flowers and then was screened with the probes of mitochondrial and endoplasmic reticulum conservative regions that were clon... A cDNA Library was constructed with the heat shocked tomato ( Lycopersicon esculentum Mill.) flowers and then was screened with the probes of mitochondrial and endoplasmic reticulum conservative regions that were cloned by using RT-PCR. The complete cDNAs of mitochondrial and endoplasmic reticulum small heat shock protein ( shsp) were selected out from the cDNA library. Furthermore, the temperature responses of these shsp genes were determined. Northern hybridization showed that the heat response temperatures of both genes in tomato flower were lower than that in leaf and that mitochondria shsp in leaf was cold-inducible. In this paper, the molecular features of the cloned genes, the causes of the uncommon heat response temperatures of sHSP in newer and the cold inducible character of mitochondria shsp gene in leaf were discussed. 展开更多
关键词 Lycopersicon esculentum small heat shock protein MITOCHONDRIA endoplasmic reticulum high temperature stress low temperature stress
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Expression profiles of two small heat shock proteins and antioxidant enzyme activity in Mytilus galloprovincialis exposed to cadmium at environmentally relevant concentrations 被引量:5
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作者 由丽萍 宁璇璇 +4 位作者 陈磊磊 张林宝 赵建民 刘小莉 吴惠丰 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期334-343,共10页
Small heat shock proteins encompass a widespread but diverse class of proteins, which play key roles in protecting organisms from various stressors. In the present study, the full-length cDNAs of two small heat shock ... Small heat shock proteins encompass a widespread but diverse class of proteins, which play key roles in protecting organisms from various stressors. In the present study, the full-length cDNAs of two small heat shock proteins (MgsHSP22 and MgsHSP24.1) were cloned from Mytilus galloprovincialis, which encoded peptides of 181 and 247 amino acids, respectively. Both MgsHSP22 and MgsHSP24.1 were detected in all tissues examined by real-time PCR, with the highest expression being observed in muscle and gonad tissues. The real-time PCR results revealed that Cd significantly inhibited MgsHSP22 expression at 24 h and MgsHSP24.1 at 24 and 48 h under 5 ug/L Cd2+ exposure. MgsHSP24.1 expression was also significantly inhibited after 50 ug/L Cd2+ exposure for 48 h. With regard to antioxidant enzymes, increased GPx and CAT activity were detected under Cd2+ stress (5 and 50 ug/L), while no significant difference in SOD activity was observed throughout the experiment. Overall, both MgsHsps and antioxidant enzymes revealed their potential as Cd stress biomarkers in M. galloprovincialis. 展开更多
关键词 Mytilus galloprovincialis small heat shock protein superoxide dismutase (SOD) catalase (CAT) glutathione peroxidase (GPx) CADMIUM
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Expression of Heat Shock Protein 70 and 27 in Non-small Cell Lung Cancer and Its Clinical Significance 被引量:5
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作者 黄畦 祖育昆 +1 位作者 付向宁 邬堂春 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2005年第6期693-695,共3页
The heat shock proteins (HSPs) 70 and HSP 27 expression in patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) was studied and the relation.ship between HSP 70 and HSP 27 with the clinicopathological features of NSCL... The heat shock proteins (HSPs) 70 and HSP 27 expression in patients with non-small cell lung cancer (NSCLC) was studied and the relation.ship between HSP 70 and HSP 27 with the clinicopathological features of NSCLC was investigated. The expression of HSP 70 and HSP 27 was detected in tumor tissues from 60 patients with NSCLC by S-P immunohistochemistry. The findings were analyzed in combination with the histological types, histopathological differentiation, lymph node metastasis, patients' clinical stages, smoking history and gender. The results showed that of the 60 NSCLC tissue specimens studied, the immunoreactivity of HSP 70 and HSP 27 was detected in 47 (78.3 %) and 43 (71.7 %) specimens, respectively. A positive correlation was found between the overexpression of HSP 70 and HSP 27. The histopathological differentiation, lymph node metastasis, clinical stages and smoking history were correlated to the expression of HSP 70, but not to the expression of HSP 27. No statistical significance was observed in histological types and gender with respect to both HSP 70 and HSP 27 expression. It is suggested that the HSP 70 expression is a powerful and significant prognostic indicator and is related to histopathological differentiation, lymph node metastasis, patients' clinical stages, smoking history, whereas HSP 27 expression is not. 展开更多
关键词 non-small cell lung cancer heat shock protein 70 and 27 IMMUNOHISTOCHEMISTRY
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Expression analysis of two reverse duplicated small heat shock protein genes in rice(Oryza sativa L.) 被引量:1
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作者 GUO Hong-xia ZENG Wen-zhi +8 位作者 WANG Chuang-yun FENG Jing-lei TANG Hui-wu BAI Mei LIU Yao-guang ZHAO Li WANG Lu-jun FAN Tao GUO Jing-xin 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2016年第8期1685-1692,共8页
supported by grants from the National Natural Science Foundation of China (30671178);the Shanxi Province Science Foundation for Youths, China (2014021029-2)
关键词 small heat shock proteins(shsps) expression characteristics semi-quantitative RT-PCR GUS staining rice
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Over-expression of heat shock protein 27 attenuates doxorubicin-induced cardiac dysfunction in mice 被引量:15
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作者 Liu,L Zhang,X +5 位作者 Qian,B Min,XY Gao,X Li,CF Cheng,YL Huang,J 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1239-1239,共1页
关键词 过表达 热休克蛋白 阿霉素 心脏功能紊乱
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番茄转ER-sHSP基因植株构建及其抗冷性研究 被引量:14
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作者 赵春梅 王丽 +1 位作者 伊淑莹 刘箭 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期989-994,共6页
将CaMV35S启动子驱动的内质网小分子热激蛋白基因导入番茄,比较转基因、未转基因和转空载体番茄的抗冷能力。冷胁迫下,同对照相比,转基因番茄的冷害症状轻,叶绿素含量的损失少,体内积累的丙二醛(MDA)含量少,电解质外渗程度低,具有较高... 将CaMV35S启动子驱动的内质网小分子热激蛋白基因导入番茄,比较转基因、未转基因和转空载体番茄的抗冷能力。冷胁迫下,同对照相比,转基因番茄的冷害症状轻,叶绿素含量的损失少,体内积累的丙二醛(MDA)含量少,电解质外渗程度低,具有较高的净光合速率和最大光化学效率,并易于恢复由低温所引起的光抑制,表明转基因番茄具有较强的冷胁迫耐性,说明内质网小分子热激蛋白在植物抗冷过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 番茄 内质网 小分子热激蛋白 转基因 冷胁迫
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小分子热激蛋白在植物应对高温胁迫中的作用
7
作者 徐彤 王英琪 +4 位作者 李渊 安本泽 蒋敏 杨文飞 吴云飞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第7期1343-1350,共8页
小分子热激蛋白(sHSPs)是一类不依赖于腺嘌呤核苷三磷酸并具有分子伴侣功能的功能保守型蛋白质。sHSPs在植物受到高温胁迫时产生的热激反应中尤为重要,通过防止错误蛋白质的热集聚、与其他热激蛋白互作,促使错误蛋白质被降解或重新折叠... 小分子热激蛋白(sHSPs)是一类不依赖于腺嘌呤核苷三磷酸并具有分子伴侣功能的功能保守型蛋白质。sHSPs在植物受到高温胁迫时产生的热激反应中尤为重要,通过防止错误蛋白质的热集聚、与其他热激蛋白互作,促使错误蛋白质被降解或重新折叠,进而帮助植株响应高温。同时,sHSP的表达受到热休克元件、热休克转录因子、长链非编码RNA(lncRNA)、小分子RNA(miRNA)及一些植物激素的调控。本文总结了植物sHSPs结构功能、调控机制及相关研究进展,着重阐述了植物sHSPs在高温胁迫下的响应机制,为研究植物响应高温的机制提供参考。 展开更多
关键词 小分子热激蛋白 高温胁迫 激素 植物
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坛紫菜两种小分子热激蛋白(sHSP)基因的克隆及表达特征分析 被引量:8
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作者 陈玉婷 徐燕 +2 位作者 纪德华 陈昌生 谢潮添 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期182-192,共11页
小分子热激蛋白(s HSP)不仅在应激条件下高效表达,还在正常状态的细胞中广泛存在,参与一些重要细胞生理活动的调节。为研究坛紫菜应答高温和失水等逆境胁迫的分子机制,本研究以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础,采用RACE或直接... 小分子热激蛋白(s HSP)不仅在应激条件下高效表达,还在正常状态的细胞中广泛存在,参与一些重要细胞生理活动的调节。为研究坛紫菜应答高温和失水等逆境胁迫的分子机制,本研究以坛紫菜转录组测序获得的unigene序列为基础,采用RACE或直接PCR扩增,克隆获得了坛紫菜2种s HSP的全长基因:Ph Hsp22和Ph Dna J。序列分析结果表明,Ph Hsp22序列全长857 bp,包含一个519 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含172个氨基酸,分子量为19.1 ku,等电点为5.24(收录号:KM102540);Ph Dna J序列全长1 616 bp,包含一个1 290 bp的开放阅读框,所编码的多肽包含429个氨基酸,分子量为46.1 ku,等电点为6.43,属于Hsp40亚家族(收录号:KM102541)。基因表达水平的定量分析结果表明,两个基因在高温胁迫不同时间水平和不同失水胁迫程度下的表达均呈现出一致的表达模式,即在胁迫初期表达水平显著上调,但随着胁迫的持续,这两个基因的表达水平开始逐渐下调。结果表明,这2个基因在逆境胁迫下的表达可能存在一个反馈调节机制。 展开更多
关键词 坛紫菜 小分子热激蛋白 RACE 荧光定量PCR
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小地老虎AiHSP19.3基因鉴定及其对高温和杀虫剂胁迫的响应
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作者 邵云飞 张今 +5 位作者 王莹莹 江连强 刘苏 仇腾腾 范子明 李茂业 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期80-87,共8页
小地老虎Agrotis ipsilon是一种重要的农业害虫。小分子热激蛋白(sHSP)是细胞抵御外界胁迫的关键蛋白,本文旨在探索sHSP基因在小地老虎不同发育阶段以及在高温和杀虫剂胁迫下的响应模式。使用同源检索方法从小地老虎转录组中鉴定到了一... 小地老虎Agrotis ipsilon是一种重要的农业害虫。小分子热激蛋白(sHSP)是细胞抵御外界胁迫的关键蛋白,本文旨在探索sHSP基因在小地老虎不同发育阶段以及在高温和杀虫剂胁迫下的响应模式。使用同源检索方法从小地老虎转录组中鉴定到了一个sHSP基因的cDNA序列,命名为AiHSP 19.3。通过RT-PCR技术克隆该序列,利用实时荧光定量PCR技术分析AiHSP 19.3基因在小地老虎不同发育阶段和不同组织中的转录模式,并分析了该基因在高温和杀虫剂胁迫下的转录水平。结果表明,小地老虎AiHSP 19.3基因的开放阅读框为516 bp,编码含171个氨基酸,分子量为19.3 kD的蛋白,具有sHSP典型的α-晶状体结构域(ACD)。在供试小地老虎的不同发育阶段和3龄幼虫组织中均能检测到AiHSP 19.3的转录,其中在6龄幼虫和3龄幼虫脂肪体内转录水平最高。小地老虎幼虫经高温和3种杀虫剂(高效氯氟氰菊酯、氯虫苯甲酰胺及辛硫磷)处理后AiHSP 19.3的转录水平显著提高,表明该基因可能在响应高温及杀虫剂胁迫中起到重要作用。 展开更多
关键词 小地老虎 小分子热激蛋白 高温 杀虫剂 转录模式
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松材线虫Bx-sHSP16A基因克隆及蛋白质结构研究 被引量:2
10
作者 刘立宏 王峰 +3 位作者 王步勇 马玲 杨洋 崔伟婵 《中国农学通报》 CSCD 2013年第22期40-45,共6页
分子伴侣小热激蛋白(sHSPs)是线虫度过高温环境的关键因子。为开发直接针对松材线虫的防治技术提供理论依据,对松材线虫小热激蛋白Bx-sHSP16A基因进行了研究。采用SL法进行基因全长克隆,STRING9.0进行蛋白质互作网络分析,NAMD2.9进行分... 分子伴侣小热激蛋白(sHSPs)是线虫度过高温环境的关键因子。为开发直接针对松材线虫的防治技术提供理论依据,对松材线虫小热激蛋白Bx-sHSP16A基因进行了研究。采用SL法进行基因全长克隆,STRING9.0进行蛋白质互作网络分析,NAMD2.9进行分子动力学模拟。本研究克隆到松材线虫小热激蛋白基因Bx-sHSP16A。Bx-sHSP16A具α-crystallin保守结构域"F-polar-R-polar-aromatic-x-L-P"序列和"I/L-x-I"序列,初步判断具备分子伴侣功能。Bx-sHSP16A与多个蛋白发生互作,深入研究这些蛋白有助于了解Bx-sHSP16A在应激反应路径中的作用。Bx-sHSP16A二聚体中A亚基的"I/L-x-I"序列可以嵌入B亚基的去水合位点,契合后氢键稳定,说明Bx-sHSP16A可以形成多聚体。在应激反应过程中,去水合位点与多聚体聚合相关,Bx-sHSP16A以多聚体形式发挥分子伴侣功能。 展开更多
关键词 松材线虫 小热激蛋白 多聚体
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转ER-sHSP基因番茄植株的耐盐性检测 被引量:2
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作者 赵春梅 刘箭 《中国农学通报》 CSCD 2013年第16期79-83,共5页
旨在检测内质网小分子热激蛋白(ER-sHSP)的过量表达对植物耐盐性的影响。利用Hoagland营养液配制200mmol/LNaCl溶液并处理转ER-sHSP基因番茄2周,测定植物的生物量、脯氨酸含量、SOD酶活、MDA含量及相对电导率。结果显示:与对照相比,转... 旨在检测内质网小分子热激蛋白(ER-sHSP)的过量表达对植物耐盐性的影响。利用Hoagland营养液配制200mmol/LNaCl溶液并处理转ER-sHSP基因番茄2周,测定植物的生物量、脯氨酸含量、SOD酶活、MDA含量及相对电导率。结果显示:与对照相比,转基因番茄抗盐表型明显,植物干鲜重分别比对照增加57%和53%,脯氨酸含量和SOD酶活性的平均值分别是对照番茄的1.7倍和3倍,但MDA含量和相对电导率却显著降低(P<0.01)。综上所述,转基因番茄具有较高的耐盐能力,说明ER-sHSP在植物的耐盐机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 盐胁迫 内质网 小分子热激蛋白 分子伴侣 盐胁迫 内质网 小分子热激蛋白 分子伴侣
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家蝇小热休克蛋白(sHsp20.6)的生物信息学分析 被引量:7
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作者 李显航 刘红美 《生物信息学》 2013年第1期65-71,共7页
研究家蝇小热休克蛋白sHsp20.6的生物学功能。方法应用生物信息学的方法和工具对家蝇sHsp20.6的理化性质、疏水性、跨膜区和信号肽、膜体分析、二级结构功能域、蛋白质的功能分类预测、多重序列比对与系统发育树构建、三级结构建模进行... 研究家蝇小热休克蛋白sHsp20.6的生物学功能。方法应用生物信息学的方法和工具对家蝇sHsp20.6的理化性质、疏水性、跨膜区和信号肽、膜体分析、二级结构功能域、蛋白质的功能分类预测、多重序列比对与系统发育树构建、三级结构建模进行分析。结果表明:家蝇sHsp20.6是一个亲水蛋白,分子量为20.64kD,等电点为5.66,不具有跨膜区和信号肽,包含有一个HSP20的结构域,主要构成原件为α螺旋和无规则卷曲,三维结构预测显示该蛋白为棒状结构,C端结构域具有7个片层结构。聚类分析显示,家蝇sHsp20.6蛋白与昆虫中的直系同源小热休克蛋白(orthologoussmallheatshockprotein)聚为一类。 展开更多
关键词 家蝇 小热休克蛋白 生物信息学
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Pyrococcus furiosus小分子热休克蛋白Pfu-sHSP的克隆表达和纯化
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作者 陈华友 谭小力 +1 位作者 张志燕 褚仲梅 《信阳师范学院学报(自然科学版)》 CAS 2009年第1期71-73,共3页
用PCR扩增嗜高温菌Pyrococcus furiosus的小分子热休克蛋白基因后,克隆于质粒pT7473中.该小分子热休克蛋白Pfu-sHSP含有较多的稀有密码子,在大肠杆菌BL21(DE)3几乎无表达,而在带有大肠杆菌稀有密码子AGA(arg)AGG(arg),AUA(ile)和CUA(leu... 用PCR扩增嗜高温菌Pyrococcus furiosus的小分子热休克蛋白基因后,克隆于质粒pT7473中.该小分子热休克蛋白Pfu-sHSP含有较多的稀有密码子,在大肠杆菌BL21(DE)3几乎无表达,而在带有大肠杆菌稀有密码子AGA(arg)AGG(arg),AUA(ile)和CUA(leu)的BL21—Codonplus(DE)3—RIL中能大量表达.大量表达Pfu-sHSP蛋白的细胞用超声波破碎后,离心沉淀用85℃水浴20 min,再离心,上清液再以Q Sepha-rose Fast Flow阴离子交换和S-200凝胶过滤层析进一步纯化,可以得到90%以上的蛋白. 展开更多
关键词 小分子热休克蛋白 PYROCOCCUS furiosus 分子伴侣
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ERsHSP的过量表达减缓番茄体内低温诱导的UPR应答
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作者 赵春梅 薛仁镐 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2011年第4期296-299,304,共5页
本文对过表达内质网小分子热激蛋白(ERsHSP)的转基因番茄植株进行了抗寒性和UPR应答分析。结果表明,同对照相比,过表达ERsHSP的转基因番茄具有较强的抗寒性,其冷害症状轻,叶绿素含量的损失少,体内积累的MDA含量少,电解质外渗程... 本文对过表达内质网小分子热激蛋白(ERsHSP)的转基因番茄植株进行了抗寒性和UPR应答分析。结果表明,同对照相比,过表达ERsHSP的转基因番茄具有较强的抗寒性,其冷害症状轻,叶绿素含量的损失少,体内积累的MDA含量少,电解质外渗程度低并具有较高的净光合速率;低温能够诱导番茄体内BiP和Calnexin mRNA表达量的增加,但相同胁迫条件下,转基因番茄中BiP和Calnexin mRNA的表达量显著低于对照;处理72h时,对照中BiP和Calnexin mRNA的表达量达到最高,随后开始下降,而转基因番茄中BiP和Calnexin mRNA的表达量呈稳定上升趋势。说明过表达ERsHSP能够减缓并维持低温胁迫下转基因番茄中的UPR应答,减轻低温诱导的ER胁迫。 展开更多
关键词 未折叠蛋白应答 内质网胁迫 分子伴侣 小分子热激蛋白 低温胁迫
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农药与紫外胁迫对白蛾周氏啮小蜂小分子热激蛋白sHSP12.2基因表达的影响 被引量:2
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作者 范伟健 相伟芳 +5 位作者 王静 白鹏华 潘丽娜 杨艺新 朱耿平 李敏 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期128-136,共9页
【目的】研究寄生性天敌昆虫热激蛋白HSPs的功能,为探讨寄生性天敌昆虫的小分子热激蛋白对农药与紫外胁迫下的抗逆性作用提供基础。【方法】克隆白蛾周氏啮小蜂的一个小热激蛋白基因Ccshsp12.2,对其从系统发育、核苷酸替换速率和密码子... 【目的】研究寄生性天敌昆虫热激蛋白HSPs的功能,为探讨寄生性天敌昆虫的小分子热激蛋白对农药与紫外胁迫下的抗逆性作用提供基础。【方法】克隆白蛾周氏啮小蜂的一个小热激蛋白基因Ccshsp12.2,对其从系统发育、核苷酸替换速率和密码子使用偏好性等方面进行分析,并利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术研究其经紫外照射及用阿维菌素、苏云金杆菌、灭幼脲和高效氯氰菊酯4种农药处理后,Ccshsp12.2的表达量变化。【结果】获得了含有完整编码区的Ccshsp12.2基因序列,编码206个氨基酸,分子量为23.1 kDa;进化分析结果表明白蛾周氏啮小蜂等寄生性类群与麦茎蜂等自由生活类群聚成2个分支。选取的9条基因平均Ka/Ks(即dN/dS)值为0.906 556,主要接受负选择压力。寄生性昆虫的平均密码子选择偏好性指数为0.344,自由生活昆虫的平均密码子选择偏好性指数为0.353。RT-qPCR试验结果显示,与对照相比,经农药和紫外线的处理后,白蛾周氏啮小蜂Ccshsp12.2表达量均有所上调,达3.36~6.17倍。【结论】通过分子进化分析,发现不同生活方式的昆虫其热激蛋白所受的进化压力有显著差别;紫外照射及阿维菌素等4种农药均能显著诱导Ccshsp12.2基因表达上调。本研究结果将为白蛾周氏啮小蜂HSPs的抗逆性研究提供依据。 展开更多
关键词 白蛾周氏啮小蜂 抗逆性 小分子热激蛋白12.2 基因表达 昆虫
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棉铃虫小分子热激蛋白sHSP22.0基因的克隆及表达谱分析 被引量:1
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作者 杨朔 刘少凯 +6 位作者 赵少轩 朱宇辰 徐磊 李童云 刘晓光 安世恒 魏纪珍 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期61-69,共9页
棉铃虫Helicoverpa armigera是一种重要的农业害虫,本文旨在研究小分子热激蛋白在其生长发育过程、抵御高温及Cry1Ac杀虫蛋白中的功能。利用PCR结合RACE技术克隆了棉铃虫sHSP22.0(small heat shock protein 22.0)基因,通过生物信息学软... 棉铃虫Helicoverpa armigera是一种重要的农业害虫,本文旨在研究小分子热激蛋白在其生长发育过程、抵御高温及Cry1Ac杀虫蛋白中的功能。利用PCR结合RACE技术克隆了棉铃虫sHSP22.0(small heat shock protein 22.0)基因,通过生物信息学软件分析了棉铃虫sHSP22.0基因序列,利用实时荧光定量qRT-PCR分析了该基因在棉铃虫不同生长发育阶段和组织中的表达模式;并分析了该基因受高温及Cry1Ac全长蛋白的诱导效应。获得了棉铃虫sHSP22.0(GenBank登录号:XP_021196802.1)761 bp cDNA片段,其开放阅读框576 bp,编码191个氨基酸,具有小分子热激蛋白典型的α-晶体结构域(α-crystallin domain,ACD)。sHSP22.0在棉铃虫4龄和5龄期特异性表达,尤其在5龄幼虫的表皮、中肠和后肠内特异性表达。该小分子热激蛋白受温度和Cry1Ac全长蛋白的诱导后显著高表达。sHSP22.0不仅在暴食期及肠道内特异性表达,而且响应Cry1Ac全长蛋白的诱导,表明它在棉铃虫消化吸收及抵御外源物的活动中可能起到重要的作用。 展开更多
关键词 棉铃虫 小分子热激蛋白 shsp22.0 温度 Cry1Ac全长蛋白
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AtsHsp17.6-CⅠ和AtsHsp17.6-CⅡ基因对非生物胁迫的应答研究
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作者 曾卫军 原慧 覃建兵 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期744-749,共6页
小分子热激蛋白是植物受到热胁迫后的主要表达产物之一,与植物细胞耐热有密切关系。该研究发现,拟南芥小分子热激蛋白基因AtsHsp17.6-CⅠ和AtsHsp17.6-CⅡ除热激之外,重金属离子Ni+、Pb2+、Cu2+、Zn2+和Al3+均能诱导这2个热激蛋白基因... 小分子热激蛋白是植物受到热胁迫后的主要表达产物之一,与植物细胞耐热有密切关系。该研究发现,拟南芥小分子热激蛋白基因AtsHsp17.6-CⅠ和AtsHsp17.6-CⅡ除热激之外,重金属离子Ni+、Pb2+、Cu2+、Zn2+和Al3+均能诱导这2个热激蛋白基因的表达;氧化胁迫和渗透胁迫同样也能诱导它们表达。该研究将由CaMV35S启动子驱动的这2个小分子热激蛋白基因导入拟南芥,RT-PCR分析表明,2个小分子热激蛋白基因在转基因植物中呈现组成型表达。实验结果表明,组成型表达小分子热激蛋白基因AtsHsp17.6-CⅠ的转基因植物表现出对6μmol.L-1Cd2+胁迫、0.4%NaCl胁迫的耐受性。研究表明,这2个小分子热激蛋白基因可能参与着多种抗逆途径,推测其能够减轻或抵抗逆境胁迫引起的伤害并对其进行修复。 展开更多
关键词 小分子热激蛋白 非生物胁迫 抗逆
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莲草直胸跳甲热激基因sHsp21在湖南和海南两个地理种群中的差异表达分析
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作者 靳继苏 周忠实 郭建英 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期898-904,共7页
sHsp21(小热激蛋白)是小热激蛋白家族的成员,在外界环境压力下能够被诱导,热激后能够调节蛋白质的折叠和保护细胞免受外界胁迫。本文研究了入侵杂草空心莲子草Alternanthera philoxeroides生防天敌莲草直胸跳甲的一个关键基因sHsp21,并... sHsp21(小热激蛋白)是小热激蛋白家族的成员,在外界环境压力下能够被诱导,热激后能够调节蛋白质的折叠和保护细胞免受外界胁迫。本文研究了入侵杂草空心莲子草Alternanthera philoxeroides生防天敌莲草直胸跳甲的一个关键基因sHsp21,并对其进行热激诱导表达以及RACE全长扩增。获得全长cDNA 693 bp并完整的开放阅读框567 bp,共编码188个氨基酸。以30℃为对照,分别测定莲草直胸跳甲Agasicles hygrophila Selman&Vogt长沙种群和海南种群在模拟夏季特定10∶00-14∶00时段36℃、39℃高温条件下sHsp21的表达量。连续热激6 d,每天4 h热激后取样,实时荧光定量PCR分析显示:湖南种群高温39℃和36℃诱导下sHsp21表达量都显著高于对照组30℃;海南种群36℃诱导下的表达量与对照组30℃差异不显著,39℃诱导下的表达量显著高于对照组30℃和36℃。结果表明,sHsp21在湖南和海南两地理种群不同耐热能力上起到重要作用,并且sHsp21的高表达可能对其虫体产生副作用,为下一步深入探究其生物学功能奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 莲草直胸跳甲 小热激蛋白 荧光定量PCR 地理种群
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水稻小热休克蛋白OsHSP20抗体特性鉴定及应用
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作者 何婧 刘寒 +2 位作者 郭留明 李静 张恒木 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期235-240,共6页
【目的】在前期克隆了一个水稻小热休克蛋白(OsHSP20)的基础上,进一步分析该蛋白多克隆抗体的免疫反应特性和应用范围,为深入鉴定该类基因的功能奠定基础。【方法】利用合成多肽和其原核表达产物分别免疫家兔制备了相应的多克隆抗体;ACP... 【目的】在前期克隆了一个水稻小热休克蛋白(OsHSP20)的基础上,进一步分析该蛋白多克隆抗体的免疫反应特性和应用范围,为深入鉴定该类基因的功能奠定基础。【方法】利用合成多肽和其原核表达产物分别免疫家兔制备了相应的多克隆抗体;ACP(Antigen-coated plate)-ELISA和dot-ELISA用于分析比较多克隆抗体效价和灵敏度;Western blot用于鉴定多克隆抗体的特异性和应用范围。【结果】Western blot分析显示,利用重组OsHSP20蛋白及其合成多肽所制备的多克隆抗体均可以在原核表达OsSHSP样品中特异性检测到1条大小与预期一致(37kD)的条带,表明两种方法获得的多克隆抗体都具有高度的特异性;ACP(Antigen-coated plate)-ELISA和dot-ELISA分析表明,利用重组蛋白制备的多克隆抗体效价和灵敏度均高于利用多肽制备的抗体。进一步的Westernblot分析显示该抗体可用于多种植物小热休克蛋白(SHSP)的检测。【结论】制备了OsHSP20蛋白质抗体,且具有高度的特异性和较高的效价和灵敏度,可广泛地用于多种单、双子叶植物HSP20蛋白的表达分析,有助于OsHSP20及其他植物同源蛋白的功能鉴定。 展开更多
关键词 小热休克蛋白 多克隆抗体 蛋白质印迹法
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橡胶树sHSP基因家族的表达谱分析
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作者 纪向云 印汉 +2 位作者 任小青 李德军 夏志辉 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第12期3424-3432,共9页
小热激蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类胁迫诱导蛋白,不仅参与植物发育还响应生物与非生物胁迫。本研究通过分析转录组数据获得橡胶树12个sHSP基因家族成员。生物信息学分析和表达谱分析结果表明:蛋白保守结构预测显示12个s... 小热激蛋白(small heat shock protein,sHSP)是一类胁迫诱导蛋白,不仅参与植物发育还响应生物与非生物胁迫。本研究通过分析转录组数据获得橡胶树12个sHSP基因家族成员。生物信息学分析和表达谱分析结果表明:蛋白保守结构预测显示12个sHSP均具有α-晶体蛋白保守结构域;二级结构预测结果显示,12个sHSP均由α-螺旋、β-转角、延伸链和大量的随机卷曲组成。通过RT-PCR技术分析,结果发现这12个sHSP家族基因在橡胶树不同组织和叶片不同发育时期中表达有明显差异,HbsHSP15.8、HbsHSP16.2、HbsHSP17.3、HbsHSP17.4、HbsHSP17.5b、HbsHSP18.2、HbsHSP18.3、HbsHSP22.5、HbsHSP22.6和HbsHSP23.9在胶乳中高表达,HbsHSP17.4在树皮中高表达,HbsHSP17.5a在树茎中高表达,HbsHSP25.8则在树叶中表达量最高。乙烯利处理后,12个sHSP家族基因的表达总体呈下降趋势。在不同死皮等级橡胶树中12个sHSP家族基因的表达也具有明显差异,与健康树相比,HbsHSP15.8、HbsHSP17.4、HbsHSP17.5a、HbsHSP17.5b、HbsHSP18.2、HbsHSP18.3、HbsHSP22.6、HbsHSP23.9和HbsHSP25.8在死皮树中的表达量呈下降趋势;HbsHSP16.2、HbsHSP17.3和HbsHSP22.5的表达量呈上升趋势。因此推测橡胶树sHSP家族基因可能参与橡胶树生物与非生物逆境胁迫响应,以及可能在乙烯作用途径中发挥作用。 展开更多
关键词 橡胶树 小热激蛋白 表达谱分析 胁迫响应
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