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Arabidopsis small ubiquitin-related modifier protease ASP1 positively regulates abscisic acid signaling during early seedling development~~ 被引量:5
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作者 Qiongli wang Gao-Ping Qu +3 位作者 Xiangxiong Kong Yan Yan Jigang Li Jing Bo Jin 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2018年第10期924-937,共14页
The small ubiquitin-related modifier (SUMO) modification plays an important role in the regulation of abscisic acid (ABA) signaling, but the function of the SUMO protease, in ABA signaling, remains largely unknown... The small ubiquitin-related modifier (SUMO) modification plays an important role in the regulation of abscisic acid (ABA) signaling, but the function of the SUMO protease, in ABA signaling, remains largely unknown. Here, we show that the SUMO protease, ASPI positively regulates ABA signaling. Mutations in ASPI resulted in an ABA-insensitive phenotype, during early seedling develop- ment. Wild-type ASP1 successfully rescued, whereas an ASPI mutant (C577S), defective in SUMO protease activity, failed to rescue, the ABA-insensitive phenotype of asp1-1. Expression of ABI5 and MYB3o target genes was attenuated in asp^-I and our genetic analyses revealed that ASP1 may function upstream of ABI5 and MYB3o. 展开更多
关键词 ASP ABA Arabidopsis small ubiquitin-related modifier protease ASP1 positively regulates abscisic acid signaling during early seedling development ABI Figure
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肝细胞癌癌组织caspase-3和DcR3蛋白及SNHG12 mRNA水平变化及其临床意义探讨 被引量:4
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作者 杜联江 李京涛 崔杰 《实用肝脏病杂志》 CAS 2022年第5期706-709,共4页
目的研究肝细胞癌(HCC)患者癌组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和诱捕受体3(DcR3)蛋白表达及小分子核仁宿主基因12(SNHG12)mRNA水平变化及其临床意义。方法2016年5月~2019年5月我院收治的68例HCC患者,行肝叶切除术治疗,... 目的研究肝细胞癌(HCC)患者癌组织半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)和诱捕受体3(DcR3)蛋白表达及小分子核仁宿主基因12(SNHG12)mRNA水平变化及其临床意义。方法2016年5月~2019年5月我院收治的68例HCC患者,行肝叶切除术治疗,取癌组织和癌旁肝组织,采用EnVision法检测caspase-3和DcR3蛋白表达,采用RT-qPCR法检测SNHG12 mRNA水平,应用Logistic多元回归分析影响HCC患者死亡的危险因素。结果HCC患者癌组织caspase-3阳性率为47.1%,显著低于癌旁组织的77.9%(P<0.05),而DcR3阳性率为61.8%,SNHG12 mRNA水平为(2.9±0.8),显著高于癌旁组织【分别为33.8%和(1.6±0.5),P<0.05】;18例有淋巴结转移的癌组织caspase-3阳性率为33.3%,显著低于50例无淋巴结转移者的62.0%(P<0.05),而DcR3蛋白阳性率为88.9%,显著高于无淋巴结转移者的50.0%,SNHG12 mRNA水平为(2.6±0.4),显著高于无淋巴结转移者【(1.5±0.3),P<0.05】,45例肿瘤直径>5 cm癌组织SNHG12 mRNA水平为(2.7±0.4),显著高于23例无淋巴结转移者【(1.4±0.3),P<0.05】;随访结束时,本组68例HCC患者生存30例(44.1%),死亡38例(55.9%);多元Logistic回归分析显示,肿瘤直径大、合并肝硬化、存在淋巴结转移、Caspase-3低表达、DcR3高表达和SNHG12高水平是HCC患者死亡的危险因素。结论HCC患者癌组织存在基因水平和蛋白表达的显著变化,了解这些变化并探讨其临床意义,将为肝癌防治提供有价值的线索。 展开更多
关键词 肝细胞癌 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3 诱捕受体3蛋白 小分子核仁宿主基因12
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SENP-1/HIF-1α通路对慢性间歇性低氧诱导大鼠血管内皮损伤的影响
3
作者 贾远航 江义霞 +2 位作者 何振华 陈林 周芳 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1026-1034,共9页
目的:探讨小泛素样修饰特异性蛋白酶1(SENP-1)/低氧诱导因子1α(HIF-1α)通路对慢性间歇性低氧(CIH)诱导大鼠血管内皮损伤的影响,阐明其相关作用机制。方法:SD大鼠随机分为对照组和CIH组,再将每组分为2、4和6周3个时间点亚组,每亚组8只... 目的:探讨小泛素样修饰特异性蛋白酶1(SENP-1)/低氧诱导因子1α(HIF-1α)通路对慢性间歇性低氧(CIH)诱导大鼠血管内皮损伤的影响,阐明其相关作用机制。方法:SD大鼠随机分为对照组和CIH组,再将每组分为2、4和6周3个时间点亚组,每亚组8只。CIH组大鼠暴露于CIH舱中进行CIH诱导,制备阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)模型,对照组大鼠暴露于常氧环境中。于各时间点收集各组大鼠血清和胸主动脉组织。HE染色观察各组大鼠胸主动脉血管损伤情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠血清中一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)、血管性血友病因子(vWF)和血栓调节蛋白(TM)水平,Western blotting法检测各组大鼠胸主动脉组织中SENP-1、HIF-1α和血管内皮生长因子A(VEGFA)蛋白表达水平。体外培养大鼠主动脉内皮细胞(rAECs),经SENP-1 shRNA腺病毒(sh-SENP-1)感染构建SENP-1基因低表达的rAECs细胞株,采用CIH诱导建立血管内皮细胞损伤模型,分为CIH组、CIH+sh-NC组和CIH+sh-SENP-1组,另设对照组。CCK-8检测各组细胞增殖活性,ELISA法检测各组细胞培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞中NO、ET-1、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平。结果:随着CIH诱导时间的延长,与对照组比较,CIH组大鼠胸主动脉内膜逐渐粗糙并明显增厚,血清中NO水平逐渐减低(P<0.05),血清中ET-1、vWF和TM水平及胸主动脉组织中SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05)。与对照组比较,CIH组细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞培养上清中LDH活性及细胞中ET-1、MDA水平和细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞中NO水平和SOD活性降低(P<0.05),SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平升高(P<0.05);与CIH组比较,CIH+sh-SENP-1组细胞增殖活性升高(P<0.05),细胞培养上清中LDH活性及细胞中ET-1、MDA水平和细胞凋亡率降低(P<0.05),细胞中NO水平和SOD活性升高(P<0.05),SENP-1、HIF-1α和VEGFA蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:SENP-1/HIF-α通路在CIH诱导的大鼠胸主动脉损伤组织中高度活化,沉默SENP-1表达可减轻CIH诱导的血管内皮细胞损伤,其作用机制可能与下调SENP-1/HIF-α通路活化水平有关。 展开更多
关键词 慢性间歇性低氧 胸主动脉 小泛素样修饰特异性蛋白酶1 低氧诱导因子1Α 血管内皮损伤
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小胶质细胞中小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶3参与小鼠光化学栓塞法缺血性脑卒中早期的疾病进展 被引量:2
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作者 杜娟娟 叶蓁 +2 位作者 周涛 任艳华 廖敏 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期548-553,共6页
目的探讨小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶3(SENP3)在光化学栓塞法缺血性脑卒中小鼠小胶质细胞中的表达变化,以及与光化学法栓塞缺血性脑卒中疾病进展的关系。方法实验小鼠分对照组、缺血性脑卒中1 d组和缺血性脑卒中7 d组(每组3只),应用We... 目的探讨小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶3(SENP3)在光化学栓塞法缺血性脑卒中小鼠小胶质细胞中的表达变化,以及与光化学法栓塞缺血性脑卒中疾病进展的关系。方法实验小鼠分对照组、缺血性脑卒中1 d组和缺血性脑卒中7 d组(每组3只),应用Western blotting检测各组纹状体诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(ARG-1)和SENP3的表达和c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化水平;应用免疫荧光双标法检测小鼠纹状体小胶质细胞中iNOS和ARG-1的表达。结果与对照组相比,缺血性脑卒中1 d组SENP3的表达与JNK的磷酸化水平均显著上升,同时M1型小胶质细胞的标志物iNOS的表达水平显著上升;缺血性脑卒中7 d组M2型小胶质细胞的标记物ARG-1的表达显著增高。纹状体小胶质细胞特异性抗体1(Iba1)与iNOS、Iba1与ARG-1的免疫荧光双标结果与免疫印迹结果一致。结论光化学栓塞法缺血性脑卒中早期,小胶质细胞SENP3表达增加,进而影响JNK磷酸化的水平和小胶质细胞的极化,促进大脑炎症反应,参与缺血性脑卒中的疾病进展。 展开更多
关键词 光化学栓塞法缺血性脑卒中 小胶质细胞 小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶3 免疫印迹法 小鼠
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苓桂术甘汤加味联合卡托普利对慢性心力衰竭大鼠BNP、ET-1、Caspase-3水平影响的研究 被引量:6
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作者 张燕飞 张博 陈苏宁 《陕西中医》 CAS 2021年第6期701-704,共4页
目的:探讨苓桂术甘汤加味联合卡托普利对心力衰竭大鼠血清B型钠尿肽(BNP)、内皮素-1(ET-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平的影响。方法:选取40只SPF级SD大鼠,连续1周腹腔注射异丙肾上腺素,建立慢性心力衰竭大鼠模型,左室射... 目的:探讨苓桂术甘汤加味联合卡托普利对心力衰竭大鼠血清B型钠尿肽(BNP)、内皮素-1(ET-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)水平的影响。方法:选取40只SPF级SD大鼠,连续1周腹腔注射异丙肾上腺素,建立慢性心力衰竭大鼠模型,左室射血分数(LVEF)≤60%则造模成功。将造模成功的SD大鼠随机分为心衰组、中药组、西药组、联合组进行观察。结果:光镜下观察各组大鼠心肌病理形态学变化,与心衰组比较,给予药物治疗的三组心肌病理学形态有所改善,血清BNP、ET-1、Caspase-3水平降低,LVEF升高,心脏质量指数下降。结论:苓桂术甘汤加味联合卡托普利能减轻慢性心力衰竭大鼠心肌细胞的病理损伤,降低血清BNP、ET-1、Caspase-3水平及心脏质量指数,提高LVEF水平,改善心功能。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 B型尿钠肽 内皮素-1 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 苓桂术甘汤加味 大鼠
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小鼠小胶质细胞内SENP3介导的神经炎症在创伤性脑损伤中的作用机制研究 被引量:1
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作者 顾艳兰 赵思远 +5 位作者 陆秋霞 张优利 杜娟娟 任艳华 王万铁 廖敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1161-1168,共8页
目的:探讨创伤性脑损伤小鼠小胶质细胞中小泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)特异性蛋白酶3(SUMO-specific protease 3,SENP3)的作用及其机制。方法:体外培养小鼠小胶质细胞系BV-2并建立划痕损伤模型,模拟创伤性脑损... 目的:探讨创伤性脑损伤小鼠小胶质细胞中小泛素样修饰蛋白(small ubiquitin-like modifier,SUMO)特异性蛋白酶3(SUMO-specific protease 3,SENP3)的作用及其机制。方法:体外培养小鼠小胶质细胞系BV-2并建立划痕损伤模型,模拟创伤性脑损伤时小胶质细胞的病理生理变化。以划痕的损伤程度将实验分为对照组、轻度损伤组和重度损伤组。采用CCK-8法和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)试剂盒检测各组细胞的损伤程度。利用Western blot、免疫荧光染色、RT-PCR及SENP3特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲减技术检测创伤性脑损伤模型中小胶质细胞内SENP3与Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)信号通路的关系。结果:Western blot结果显示,随着损伤程度的加重及时间的推移,SENP3的表达水平逐渐升高(P<0.05或P<0.01),且丝裂原活化蛋白激酶激酶7(mitogen-activated protein kinase kinase 7,MKK7)的去SUMO化和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的磷酸化水平也逐渐上升(P<0.05或P<0.01)。免疫荧光染色结果显示,随着创伤性脑损伤程度的加重,小胶质细胞中SENP3积累增多,且小胶质细胞主要向M1型分化,炎症因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)及肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)的mRNA及蛋白水平在损伤后均显著升高(P<0.05)。用siRNA敲减SENP3后,JNK的磷酸化水平显著下降(P<0.01),且炎症因子IL-1β和TNF-α的蛋白表达水平也显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论:创伤性脑损伤后小胶质细胞内的SENP3促进了TLR4信号通路的激活及炎症因子的释放,从而促进创伤性脑损伤后神经炎症的发生和发展。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 神经炎症 小胶质细胞 小泛素样修饰蛋白特异性蛋白酶3
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SUMO特异性蛋白酶3在HBV复制中的作用机制
7
作者 李青 赖荣陶 +4 位作者 卢捷 李自强 谢青 王晖 郭清 《肝脏》 2019年第1期31-34,共4页
目的初步探讨SUMO特异性蛋白酶3(SENP3)在HBV感染中的作用机制。方法体外培养HepG2.2.15细胞,或利用HBV转基因小鼠肝脏组织,通过表达SiRNA干扰等,经蛋白质印迹、实时PCR、免疫组织化学染色等实验技术,检测SENP3在HBV感染细胞模型中的表... 目的初步探讨SUMO特异性蛋白酶3(SENP3)在HBV感染中的作用机制。方法体外培养HepG2.2.15细胞,或利用HBV转基因小鼠肝脏组织,通过表达SiRNA干扰等,经蛋白质印迹、实时PCR、免疫组织化学染色等实验技术,检测SENP3在HBV感染细胞模型中的表达。结果 HBV DNA与其PBMC中SENP3的含量呈反比。健康对照组PBMC中SENP3的平均蛋白水平是CHB患者的7.4倍(P<0.05)。HBV转基因小鼠肝脏中SENP3表达显著降低,小鼠肝脏组织中AKT磷酸化水平增高,是健康对照组的4.1倍(P<0.01)。SENP3在HBV DNA全基因重组质粒转染的HepG2受体细胞(HepG2.2.15)中表达量显著低于未转染HBV DNA的HepG2细胞。与HepG2细胞相比,HepG2.2.15细胞中AKT磷酸化水平显著增高,其含量平均是HepG2细胞的5.2倍(P<0.01);在HepG2.2.15细胞中转染SENP3质粒使其过表达,则AKT磷酸化水平降低,HBV DNA含量降低,并与SENP3质粒浓度呈负相关性;分别向HepG2.2.15细胞转染100ng和500ng的SENP3质粒,则细胞中HBV DNA含量由对照组中的7.983.03×106 IU/mL降低至3.45×106 IU/mL和1.92×106 IU/mL;应用siRNA干扰SENP3在HepG2.2.15细胞中的表达,则Akt磷酸化水平升高,其浓度是对照组的5.6倍(P<0.01)。结论机体HBV DNA载量与SENP3的表达量呈负相关,SENP3可通过抑制肝细胞AKT磷酸化水平,降低HBV DNA载量。 展开更多
关键词 SUMO 特异性蛋白酶3 HBV DNA AKT P-AKT
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小泛素样修饰物特异性蛋白酶3通过调节脂滴水平体外促进HepG2细胞丙型肝炎病毒复制
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作者 刘文竹 胡欣 +2 位作者 江伟 左秀静 朱华军 《实用肝脏病杂志》 CAS 2022年第2期161-165,共5页
目的探究丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞小泛素样修饰物特异性蛋白酶3(SENP3)对脂滴水平的调节及其对HCV复制的影响。方法以感染性HCV病毒颗粒感染人HepG2细胞,采用Western blot法检测感染前后SENP3蛋白表达水平。采用脂质体法转染SENP3-si... 目的探究丙型肝炎病毒(HCV)感染细胞小泛素样修饰物特异性蛋白酶3(SENP3)对脂滴水平的调节及其对HCV复制的影响。方法以感染性HCV病毒颗粒感染人HepG2细胞,采用Western blot法检测感染前后SENP3蛋白表达水平。采用脂质体法转染SENP3-siRNA至HepG2细胞,在感染HCV后采用Western blot法检测HCV核心蛋白表达量,采用qRT-PCR法检测HCV RNA水平,采用油红O染色观察细胞脂滴水平。以软脂酸处理敲低SENP3后的HepG2细胞,采用qRT-PCR法检测感染HCV后HCV RNA水平。结果在HCV感染HepG2细胞后1 d、3 d和6 d,HCV核心蛋白相对表达量分别为0.01±0.00、0.17±0.02和0.43±0.04,SENP3蛋白相对表达量分别为0.23±0.04、0.42±0.03和0.46±0.04,差异显著(P<0.05);转染SENP3-siRNA可有效降低SENP3表达并降低HCV感染后细胞HCV核心蛋白表达水平;SENP3敲低细胞HCV RNA相对水平为54.2±11.4%,较转染非特异性siRNA细胞显著降低(P<0.01);敲低SENP3蛋白表达后细胞脂滴数量显著减少;敲低SENP3的HepG2细胞感染HCV后HCV RNA相对水平为58.2±5.2%,较转染非特异性siRNA细胞显著降低(P<0.01),而以软脂酸处理敲低SENP3的HepG2细胞,在感染HCV后HCV RNA相对水平为74.6±6.4%,较未经软脂酸处理细胞显著升高(P<0.01)。结论在HCV感染肝细胞时SENP3可通过调节脂滴代谢促进HCV复制。 展开更多
关键词 HEPG2细胞 丙型肝炎病毒 小泛素样修饰物特异性蛋白酶3 脂滴
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小泛素样修饰物蛋白酶3调控小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞自噬
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作者 朱慧琴 邹嫣琼 +2 位作者 杨洁 易静 杨洁 《实验动物与比较医学》 CAS 2020年第4期270-278,共9页
目的探讨小泛素样修饰物(small ubiquitin-like modifier,SUMO)特异性蛋白酶3(SUMO-specific protease 3,SENP3)对小鼠肺组织细胞自噬的调控作用及分子机制。方法应用免疫荧光技术检测SENP3在肺组织细胞中的定位;对SENP3基因野生型C57BL... 目的探讨小泛素样修饰物(small ubiquitin-like modifier,SUMO)特异性蛋白酶3(SUMO-specific protease 3,SENP3)对小鼠肺组织细胞自噬的调控作用及分子机制。方法应用免疫荧光技术检测SENP3在肺组织细胞中的定位;对SENP3基因野生型C57BL/6J小鼠(SENP3^+/+)和SENP3基因敲除杂合子小鼠(SENP3^+/-)进行饥饿处理,诱导细胞自噬;应用免疫印迹法评估细胞自噬水平;应用电子显微镜观察和免疫荧光技术分析发生自噬的细胞类型;应用免疫共沉淀方法检测自噬相关分子卷曲螺旋状Myosin样Bcl-2相互作用蛋白1(coiled-coil myosin-like Bcl-2-interacting protein 1,BECN1)的SUMO化修饰。结果 SENP3在肺泡Ⅱ型上皮细胞中高表达。小鼠经饥饿处理后,肺泡Ⅱ型上皮细胞出现自噬现象,且SENP3^+/-小鼠较SENP3^+/+小鼠更明显。同时,肺组织样品中BECN1的SUMO2/3化修饰被SENP3去除。结论 SENP3抑制饥饿应激时小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的自噬,并可对细胞自噬程度进行精细调控。 展开更多
关键词 小泛素样修饰物蛋白酶3 自噬 肺泡Ⅱ型上皮细胞 小鼠
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SENP-1在慢性间歇性低氧诱导大鼠心肌损伤中的作用
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作者 贾远航 谭小武 +2 位作者 陈林 涂容芳 周芳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第10期1666-1672,共7页
目的探讨小泛素样修饰(SUMO)特异性蛋白酶1(SENP-1)对慢性间歇性低氧(CIH)诱导大鼠心肌损伤的影响及机制。方法将32只雄性SD大鼠分为对照组、CIH组、阴性对照腺相关病毒干预(AAV-shNC)组和SENP-1 shRNA腺相关病毒干预(AAV-shSENP-1)组,... 目的探讨小泛素样修饰(SUMO)特异性蛋白酶1(SENP-1)对慢性间歇性低氧(CIH)诱导大鼠心肌损伤的影响及机制。方法将32只雄性SD大鼠分为对照组、CIH组、阴性对照腺相关病毒干预(AAV-shNC)组和SENP-1 shRNA腺相关病毒干预(AAV-shSENP-1)组,每组8只。CIH诱导6周后,进行超声心动图检查;ELISA检测血清中肌钙蛋白I(cTNI)、肌酸激酶MB同工酶(CKMB)、肌红蛋白(Mb)、乳酸脱氢酶(LDH)和心肌组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;HE染色观察心肌组织病理变化;DCFH-DA荧光探针标记法检测心肌组织活性氧(ROS)水平;试剂盒法检测心肌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白SUMO化水平;qRT-PCR和Western blot法检测心肌组织SENP-1和HIF-1αmRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,CIH组大鼠心肌组织病理损伤严重,左心室舒张阶段末期内径(LVEDD)、左心室收缩阶段末期内径(LVESD)及血清cTNI、CKMB、Mb和LDH水平均升高(P<0.05),心肌组织中ROS、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及SENP-1和HIF-1αmRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),而左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)及血清GSH和SOD水平降低(P<0.05),心肌组织HIF-1α蛋白SUMO化水平降低(P<0.05)。与CIH组比较,AAV-shSENP-1组大鼠心肌组织病理损伤减轻,LVEDD、LVESD及血清cTNI、CKMB、Mb和LDH水平降低(P<0.05),心肌组织中ROS、MDA、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及SENP-1和HIF-1αmRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05),LVEF、LVFS和血清GSH、SOD水平升高(P<0.05),心肌组织HIF-1α蛋白SUMO化水平升高(P<0.05)。结论抑制SENP-1表达可减轻CIH诱导的大鼠心肌炎症和氧化应激水平,改善心肌损伤和心功能障碍,其作用机制可能与提高HIF-1αSUMO化水平,进而抑制HIF-1α表达有关。 展开更多
关键词 慢性间歇性低氧 小泛素样修饰特异性蛋白酶1 心肌损伤 低氧诱导因子-1Α
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去SUMO化蛋白酶的生物学功能与作用基础研究 被引量:7
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作者 程金科 左勇 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1117-1121,共5页
小泛素样修饰蛋白(SUMO)修饰是一种新发现的类泛素蛋白质修饰形式。SUMO修饰由活化酶E1、接合酶E2和连接酶E3等三个酶相继作用来完成。同时它又是一个动态的、可逆的过程,其去SUMO修饰的过程则是由SUMO特异性蛋白酶(SENP)家族来介导。... 小泛素样修饰蛋白(SUMO)修饰是一种新发现的类泛素蛋白质修饰形式。SUMO修饰由活化酶E1、接合酶E2和连接酶E3等三个酶相继作用来完成。同时它又是一个动态的、可逆的过程,其去SUMO修饰的过程则是由SUMO特异性蛋白酶(SENP)家族来介导。在蛋白质SUMO修饰的动态过程中,SENP介导的去SUMO过程是决定其靶蛋白质SUMO修饰水平的一个主要因素,同时也是SUMOylation被调节的一个主要环节。SENP家族包括SENP1、SENP2、SENP3、SENP5、SENP6、SENP7等成员,每个成员具有不同的细胞内定位和底物特异性。虽然对其生化特性进行了大量研究,但SENP在参与的细胞生命活动过程中的作用并未十分了解。我们通过分析SENP1和SENP2基因敲除小鼠的表型,发现了SENP1通过正反馈机制调控缺氧-HIF1α和雄激素受体所介导的信号通路,从而在HIF1α与AR所参与的生理病理过程中发挥了重要作用。同时,我们发现SENP2通过调控PcG的活性,参与心脏的发育过程。这些结果表明SENP在调控其靶蛋白所参与的信号通路中发挥了重要作用。 展开更多
关键词 小泛素样修饰蛋白 蛋白质修饰 SUMO特异性蛋白酶
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小泛素样修饰物修饰与肿瘤相关研究进展 被引量:2
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作者 丁小军 孙坚 《医学研究生学报》 CAS 2009年第7期778-780,784,共4页
小泛素样修饰物(SUMO)能与目标蛋白产生共价连接,调节靶蛋白的活性,从而改变其在细胞内的功能。SUMO与肿瘤的发生、发展和转移密切相关。多种癌蛋白、肿瘤抑制子、DNA修复蛋白和周期蛋白都是SUMO的靶蛋白,SUMO系统中的某些酶在肿瘤中的... 小泛素样修饰物(SUMO)能与目标蛋白产生共价连接,调节靶蛋白的活性,从而改变其在细胞内的功能。SUMO与肿瘤的发生、发展和转移密切相关。多种癌蛋白、肿瘤抑制子、DNA修复蛋白和周期蛋白都是SUMO的靶蛋白,SUMO系统中的某些酶在肿瘤中的表达也可能发生相应改变。现就与肿瘤相关的SUMO研究进展作一综述。 展开更多
关键词 肿瘤 小泛素样修饰物 小泛素样修饰物特异性蛋白酶
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小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1对脐静脉内皮细胞增殖、迁移和凋亡的影响
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作者 高瞻 王华 +5 位作者 肖凤君 曹晓培 孙慧燕 杨月峰 哈小琴 王立生 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期411-416,共6页
目的探讨小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1(SENP1)对脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移及凋亡的影响。方法用20个感染复数的p LKO.1-SENP1-小发夹RNA(shRNA)-绿色荧光蛋白(GFP)干涉慢病毒(SENP1干涉组)和p PIG-U6-随机序列(scramble)-GF... 目的探讨小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1(SENP1)对脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移及凋亡的影响。方法用20个感染复数的p LKO.1-SENP1-小发夹RNA(shRNA)-绿色荧光蛋白(GFP)干涉慢病毒(SENP1干涉组)和p PIG-U6-随机序列(scramble)-GFP对照慢病毒(GFP-SC对照组)感染HUVEC。病毒感染HUVEC 48 h后,用流式细胞仪检测慢病毒的感染效率,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western蛋白质印迹法检测HUVEC内SENP1基因和蛋白表达水平。用CCK8试剂盒检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞的迁移能力,流式细胞仪分析细胞凋亡率。结果 GFP-SC对照组和SENP1干涉组感染效率均>97%。与GFP-SC对照组比较,SENP1干涉组HUVEC SENP1基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。CCK8法测定结果表明,SENP1干涉组HUVEC增殖能力较GFP-SC对照组明显降低(P<0.01)。SENP1干涉组细胞迁移过Transwell小室的细胞数量明显低于GFP-SC对照组(P<0.01)。用低浓度血清(含2%胎牛血清)培养基诱导细胞凋亡24 h,SENP1干涉组细胞凋亡率即已升高到GFP-SC对照组的2倍左右(P<0.05);诱导凋亡至48 h,SENP1干涉组细胞凋亡率升高到对照组的3.2倍左右(P<0.05)。结论 HUVEC内SENP1表达水平的降低不仅可以显著抑制细胞增殖和迁移能力,亦可促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 脐静脉内皮细胞 小泛素相关修饰蛋白特异性蛋白酶1 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡
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SENP1与CerBb-2蛋白表达在乳腺癌中的临床意义 被引量:3
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作者 陈军 王坚 +2 位作者 顾红玉 李启驹 成志刚 《诊断学理论与实践》 2009年第2期175-179,共5页
目的:探讨乳腺癌组织中类泛素化蛋白酶1(SENP1)和原癌基因CerBb-2蛋白的表达,并分析两者与乳腺癌病理因素的关系。方法:采用ABC免疫组化染色法,检测乳腺癌及乳腺良性病变组织(对照组)中SENP1蛋白的表达;同时采用EnVision免疫组化染色方... 目的:探讨乳腺癌组织中类泛素化蛋白酶1(SENP1)和原癌基因CerBb-2蛋白的表达,并分析两者与乳腺癌病理因素的关系。方法:采用ABC免疫组化染色法,检测乳腺癌及乳腺良性病变组织(对照组)中SENP1蛋白的表达;同时采用EnVision免疫组化染色方法检测这2种组织中CerBb-2蛋白的表达。结果:SENP1蛋白在乳腺癌中的阳性率为60.78%(62/102),在乳腺良性病变中的阳性率为16.67%(5/30),两者间差异有统计学意义(P<0.01);SENP1的表达与乳腺癌分化程度、肿瘤细胞淋巴结转移情况和患者TNM分期相关(P<0.05)。乳腺癌组织中CerBb-2的阳性率为50.98%(52/102),对照组阳性率为10.00%(3/30),两者间差异有统计学意义(P<0.01)。乳腺癌组织中CerBb-2的表达与肿瘤临床分期及淋巴结转移情况相关(P<0.05)。SENP1的表达与CerBb-2的表达呈正相关。结论:SENP1和CerBb-2均对乳腺癌的增殖、生长、侵袭和转移起重要作用,有望成为肿瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 类泛素修饰 类泛素化蛋白酶 CERBB-2 免疫组织化学
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SUMO在恶性肿瘤中的表达及其分子机制 被引量:2
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作者 邓思远 贺德 《医学综述》 2020年第17期3434-3438,3443,共6页
小泛素样修饰物(SUMO)是新近发现的与泛素相似的一种修饰蛋白,其参与的SUMO化修饰是一种动态可逆的蛋白质翻译后修饰,SUMO可通过共价结合不同的底物蛋白,参与调节蛋白质稳定、亚细胞定位、基因转录调控、信号转导及促进蛋白酶体降解等。... 小泛素样修饰物(SUMO)是新近发现的与泛素相似的一种修饰蛋白,其参与的SUMO化修饰是一种动态可逆的蛋白质翻译后修饰,SUMO可通过共价结合不同的底物蛋白,参与调节蛋白质稳定、亚细胞定位、基因转录调控、信号转导及促进蛋白酶体降解等。SUMO化修饰在结肠癌、乳腺癌、前列腺癌等恶性肿瘤的发生、发展以及转移中扮演重要角色,但SUMO在恶性肿瘤发生发展过程中的分子机制及作用尚未完全明确。因此,深入探究SUMO化在各类癌症进程中发挥的作用,将为恶性肿瘤的诊治及预防提供新方法。 展开更多
关键词 小泛素样修饰物 SUMO特异性蛋白酶 翻译后修饰 恶性肿瘤 分子机制
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SENP1参与慢性间歇低氧小胶质细胞极化及神经元损伤机制的研究进展
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作者 汪宏伟 刘松 《医学综述》 2020年第1期1-5,共5页
慢性间歇低氧(CIH)诱导的中枢神经系统(CNS)炎症反应是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)神经认知功能障碍最重要的病理机制之一。小胶质细胞是维持CNS内环境稳定最重要的免疫反应细胞,不同的极化状态对神经元细胞产生损害或保护作... 慢性间歇低氧(CIH)诱导的中枢神经系统(CNS)炎症反应是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)神经认知功能障碍最重要的病理机制之一。小胶质细胞是维持CNS内环境稳定最重要的免疫反应细胞,不同的极化状态对神经元细胞产生损害或保护作用,准确调控小胶质细胞极化状态是控制炎症反应的关键,有助于维持神经认知功能正常。小类泛素相关修饰物(SUMO)修饰广泛参与机体蛋白翻译后修饰,SUMO特异性蛋白酶1是一种关键的去SUMO化蛋白酶,两者可能参与小胶质细胞极化状态、CNS炎症反应及神经元损伤或凋亡的调控。因此,深入了解CIH小胶质细胞极化及炎症反应机制,能为防治OSAHS神经认知功能障碍提供新思路。 展开更多
关键词 小类泛素相关修饰物 小类泛素相关修饰物特异性蛋白酶1 慢性间歇低氧 小胶质细胞 神经元
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Vav3对人胃癌细胞株BGC823凋亡抑制蛋白的调节及机制 被引量:1
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作者 檀碧波 李勇 +3 位作者 范立侨 赵群 王冬 刘羽 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期452-455,共4页
目的 探讨Vav3在胃癌组织中的表达以及抑制Vav3表达对人胃癌细胞株BGC823凋亡的影响及机制.方法 检测Vav3在胃癌组织、癌旁组织和人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.设计合成针对Vav3的小干扰RNA(siRNA)并转染BGC82... 目的 探讨Vav3在胃癌组织中的表达以及抑制Vav3表达对人胃癌细胞株BGC823凋亡的影响及机制.方法 检测Vav3在胃癌组织、癌旁组织和人胃癌细胞株BGC823、正常胃上皮细胞株GES-1中的表达.设计合成针对Vav3的小干扰RNA(siRNA)并转染BGC823细胞株.噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;流式细胞术检测Vav3-siRNA转染BGC823胃癌细胞后对凋亡率的影响;检测转染前后凋亡抑制蛋白家族中生存素(Survivin)、细胞凋亡抑制蛋白1(c-IAP1)、细胞凋亡抑制蛋白2 (c-IAP2)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、黑色素瘤凋亡抑制蛋白(Livin)及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3表达.结果 Vav3蛋白水平在胃癌组织(0.727±0.101)和BGC823(0.850±0.140)中显著高于癌旁组织(0.173±0.025)和GES-1细胞株(0.250±0.036,P<0.05).利用特异性siRNA抑制内源性Vav3的表达后,胃癌细胞株BGC823中Vav3表达明显受到抑制(P<0.05).MTT结果显示,Vav3-siRNA介导的基因沉默抑制了胃癌细胞BGC823的活性(P<0.05).流式细胞术显示,Vav3-siRNA转染后胃癌细胞的凋亡率[(40.4±5.53)%]明显高于对照组[(15.93±2.33)%];转染Vav3-siRNA的胃癌细胞Go/G1期比例[(57.93±3.17)%]明显高于对照组[(37.37±4.61)%],而转染组S期细胞的比例[(17.63±1.71)%]明显低于对照组[(34.52±4.60)%,P<0.05].Vav3-siRNA介导的基因沉默下调了Survivin、c-IAP1、c-IAP2、XIAP的表达(P<0.05),Livin表达变化不明显(P>0.05);同时Caspase-3的表达和活性都明显升高(P<0.05).结论 胃癌细胞中Vav3过表达,而Vav3的基因沉默可以明显促进细胞凋亡.Vav3的这一作用可能是通过调节部分凋亡抑制蛋白家族成员表达而实现的. 展开更多
关键词 胃癌 Vav3 小干扰RNA 凋亡抑制蛋白 半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白 酶-3
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亚低温对神经母细胞瘤细胞氧糖剥夺/复氧时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3表达的影响 被引量:1
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作者 孙贵亮 徐玉云 +2 位作者 王培 张高峰 王明山 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2021年第3期244-247,共4页
目的研究亚低温对小鼠神经母细胞瘤(mouse neuro-blastoma N2a,N2a)细胞氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3(small ubiquitin-like modifier proteins specific protea... 目的研究亚低温对小鼠神经母细胞瘤(mouse neuro-blastoma N2a,N2a)细胞氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤时小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3(small ubiquitin-like modifier proteins specific protease 3,SENP3)表达的影响。方法体外培养小鼠N2a细胞并予以OGD/R处理,建立模拟大脑缺血/再灌注的OGD/R模型以及亚低温模型;将N2a细胞按照随机数字表法分为3组(每组5孔):假手术组(S组)、OGD/R组和氧糖剥夺/复氧+亚低温组(OGD/R+HT组)。细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测OGD/R后N2a细胞活性,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率检测OGD/R后N2a细胞毒性,Hoechst33258染色观察N2a细胞凋亡,实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)分析SENP3 mRNA的相对表达量,Western blot法测定SENP3的蛋白水平。结果与S组比较,OGD/R组和OGD/R+HT组细胞存活率下降、LDH释放率升高、凋亡细胞数量增多、SENP3 mRNA的相对表达量和蛋白水平升高(P<0.05);与ODG/R组比较,OGD/R+HT组细胞存活率升高、LDH释放率降低、凋亡细胞数量减少、SENP3 mRNA的相对表达量和蛋白水平降低(P<0.05)。结论亚低温减轻N2a细胞OGD/R损伤机制与抑制SENP3的表达有关。 展开更多
关键词 亚低温 小鼠神经母细胞瘤细胞 氧糖剥夺/复氧 小泛素类修饰蛋白特异性蛋白酶3
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加味不忘散对AD模型大鼠海马区NLRP3炎症通路中相关因子表达的影响 被引量:7
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作者 何玲玲 李晓琼 +2 位作者 刘晓蕾 侯苗苗 李新毅 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期35-41,共7页
目的:通过观察加味不忘散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马区NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症通路中相关分子NLRP3,天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和白细胞介素-1β(IL^-1β)表达的影响,探讨其作用机制。方法:通过Morris... 目的:通过观察加味不忘散对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力及海马区NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症通路中相关分子NLRP3,天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)和白细胞介素-1β(IL^-1β)表达的影响,探讨其作用机制。方法:通过Morris水迷宫筛选出合格SD大鼠52只,随机均分为假手术组,AD模型组,加味不忘散低剂量组(1.5 g·kg^-1),加味不忘散高剂量组(3 g·kg^-1)。采用双侧海马注射β-淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)5μL(2 g·L^-1)建立AD模型大鼠。造模后分别予低、高剂量加味不忘散灌胃,每日1次,连续4周。灌胃结束后通过Morris水迷宫法检测大鼠学习记忆能力,判断造模是否成功;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠海马组织中NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,AD模型组大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.05);与AD模型组比较,加味不忘散低剂量组大鼠学习记忆能力无改善,NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达水平均无统计学差异,加味不忘散高剂量组大鼠学习记忆能力明显改善,NLRP3,Caspase-1,IL^-1βmRNA和蛋白的表达均明显下降(P<0.05)。结论:高剂量加味不忘散可改善大鼠学习记忆能力,其机制可能与下调NLRP3炎症通路中NLRP3及下游Caspase-1,IL^-1β的表达,抑制海马组织内的炎症反应有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 加味不忘散 NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)炎症小体 天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1) 白细胞介素-1β(IL^-1β)
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百事乐加味方对卒中后抑郁大鼠小胶质细胞焦亡的影响
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作者 王华 袁霞红 +3 位作者 刘羽 刘检 刘志恒 刘林 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第13期1933-1937,共5页
目的探讨百事乐加味方对卒中后抑郁(PSD)大鼠海马区小胶质细胞焦亡的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组(PSD模型)、阳性对照组(灌胃给药0.54×10^(2)g·kg^(-1)氟西汀+0.027 g·kg^(-1)阿司匹林)、实验组(灌胃给药2... 目的探讨百事乐加味方对卒中后抑郁(PSD)大鼠海马区小胶质细胞焦亡的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组(PSD模型)、阳性对照组(灌胃给药0.54×10^(2)g·kg^(-1)氟西汀+0.027 g·kg^(-1)阿司匹林)、实验组(灌胃给药23.5 g·kg^(-1)百事乐加味方)。用旷场实验、Morris水迷宫实验进行抑郁样行为学检测;用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)水平;用免疫荧光双标法检测海马区小胶质细胞标志物离子钙接头蛋白1(Iba-1)与Nod样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白共表达情况;用蛋白质印迹法检测海马组织中NLRP3、Caspase-1蛋白表达情况。结果假手术组、模型组、阳性对照组和实验组爬格次数分别为(57.60±10.55)、(33.00±10.37)、(53.00±13.05)和(53.00±19.46)次;目标象限停留时间分别为(50.15±4.75)、(38.70±3.32)、(49.31±2.78)和(47.00±7.71)s;血清中IL-1β含量分别为(117.86±8.45)、(145.35±14.36)、(122.08±10.30)和(123.65±9.53)pg·mL^(-1);NLRP3/Iba-1蛋白表达分别为20.93±0.53、65.27±0.61、33.37±0.44和43.43±0.40;Caspase-1/Iba-1蛋白表达水平分别为17.51±0.19、60.38±1.05、26.64±0.35和29.62±0.95;海马组织中NLRP3蛋白相对表达水平分别为0.38±0.04、0.95±0.08、0.49±0.03和0.55±0.06;Caspase-1蛋白相对表达水平分别为0.35±0.01、0.88±0.04、0.52±0.01和0.68±0.04。模型组上述指标与假手术组比较,实验组上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论百事乐加味方可以抑制PSD大鼠海马区小胶质细胞焦亡,减轻炎症反应,其机制可能与调控NLRP3/Caspase-1信号通路有关。 展开更多
关键词 百事乐加味方 小胶质细胞焦亡 Nod样受体蛋白3/胱天蛋白酶-1 脑卒中后抑郁
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