鹿药药学研究概况

在广泛文献检索基础上,对鹿药的成分、药理作用和临床应用等研究进展进行概述,为深入开发和利用鹿药提供科学资料。

鹿药提取物清除羟基自由基的研究

采用浸提、索氏提取、大孔吸附树脂分离等技术制备鹿药提取物，包括：鹿药水提液、醇提液、醇提水溶液，醇提液浓缩后经大孔树脂柱水洗后依次用妒为30％、50％、70％、90％的乙醇洗脱分离得到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ4部分干物质，从Ⅲ中分离得到5个黄酮类化合物：3-甲氧基-8-甲基槲皮素（A）、8-甲基木犀草素（B）、3L甲氧基木犀草素（C）、木犀草素（D）和槲皮素（E）．采用邻二氮菲-Fe^2＋-H2O2氧化法测定鹿药提取物抗氧化清除羟基自由基（HO·）的能力，结果表明，在试验浓度范围内，除鹿药醇提液之外，其他提取物制备液都具有清除HO·的作用，清除率23．30％～98．07％，其中5个黄酮单体化合物清除HO·的能力较强，且随浓度增大清除作用增强，并且作用强度明显好于对照维生素C．可见鹿药中具有较好的抗氧化活性成分．

节节草多糖的体外抗氧化活性

从节节草中提取多糖并进行纯化,分别研究其多糖粗品及纯化品对.OH、O2-.、NO2-的清除作用和对油脂氧化的抑制作用,并与VC进行比较。结果表明:两种多糖对.OH、O2-.及NO2-具有不同程度的清除能力,清除效果与多糖质量浓度均呈现一定的量效关系,节节草多糖粗品的清除能力强于纯化品,对油脂氧化有显著的抑制作用,但两种多糖抗氧化效果均弱于VC。

高速逆流色谱分离与鉴定鹿药中黄酮类化合物

采用高速逆流色谱(HSCCC)与其它色谱联用的方法分离纯化鹿药中的化学成分,得到5个黄酮类化合物:5,7,3′,4′-四羟基-3-甲氧基-8-甲基黄酮(1)、8-甲基木犀草素(2)、3′-甲氧基木犀草素(3)、木犀草素(4)和槲皮素(5),它们均为首次自该种及该属植物中分离得到。HSCCC以V(氯仿):V(甲醇):V(水)=4:3:2混合液为溶剂,上相为固定相,下相为流动相,分离纯化得到3个分别含化合物1,4和5的主要部分,经HPLC检验纯度分别为98.3%,96.7%和95.3%;还有1个含有化合物2和3的较纯部分,通过SephadexLH-20柱色谱,以V(甲醇):V(水)=1:1混合液洗脱将二者分离。通过理化性质及紫外、红外、质谱、核磁等波谱分析确定化合物结构。

竹叶菜中的核苷类化学成分

目的 :为了开发利用竹叶菜资源 ,对竹叶菜的化学成分进行了研究。方法 :运用硅胶柱层析法分离其化学成分 ,用UV、IR、NMR、MS及X晶体衍射的方法进行结构鉴定。结果 :从甲醇提取物中分离得到 3个核苷类化合物 ,分别鉴定为胸腺嘧啶脱氧核苷 (Ⅰ ) ,腺嘌呤核苷 (Ⅱ ) ,2′ 脱氧腺苷 (Ⅲ )。结论 :首次对竹叶菜的核苷类化学成分进行了报道 。

鹿药属植物叶表皮特征及其系统学意义

采用光学显微镜和扫描电镜对鹿药属12种植物的叶表皮进行了观察,首次报道了12种鹿药属(Sm ilaci-na)植物叶表皮的微形态特征。结果表明:气孔器普遍存在于叶的下表皮,少数种的上表皮也有分布,均为不规则形。叶表皮细胞形状为多边形或不规则形,垂周壁式样可区分为近平直、浅波状和波状。在扫描电镜下,叶表皮气孔器外拱盖内缘为近平滑、浅波状或波状;角质膜条纹状,有的条纹隆起,有的条纹上附有颗粒和晶簇。气孔器的分布、气孔器外拱盖内缘形态以及角质膜等特征对该属部分种的区分具有一定的参考价值。

伴有前庭症状的突发性聋患者的临床分析

目的分析伴有前庭症状的突发性聋患者的临床诊治情况。方法对解放军总医院耳鼻咽喉科2002年1月~2007年5月期间住院治疗的47名（48耳）伴有前庭症状的突聋患者的临床资料进行综合回顾分析。结果47例患者中，女25人（26耳），年龄15～64岁，平均45．7岁；男22人（22耳），年龄14-57岁，平均42．3岁；单耳发病46人（97．9％），双耳同时发病1人（2．1％），其中左耳23耳（47．9％），右耳25耳（52．1％）；中重度聋6耳（12．5％），重度聋22耳（45．8％），极度聋20耳（41．7％）；听力曲线低频下降型5耳（10．4％），平坦型10耳（占20．8％），高频下降型33耳（68．8％）；经过一个疗程治疗后，治愈3耳（6．3％），显效5耳（10．4％），有效11耳（22．9％），无效29耳（60．4％）。结论伴有前庭症状的突聋患者听力损失严重，常规治疗效果不佳，预后差，其治疗方法需进一步探索。

湘西节节草总黄酮的超声波提取及抗氧化研究

以湘西蕨类植物节节草为原料,采用超声波辅助法提取总黄酮。通过单因素及正交试验优化提取工艺条件,考察总黄酮对羟自由基的清除效果及在不同时间、温度下对油脂的抗氧化性能。结果表明,当在乙醇体积分数45%、料液比1:30(g/mL)、超声提取时间30min、超声温度60℃最佳条件下,节节草中总黄酮得率为1.16%。该黄酮提取物对羟自由基清除效果随浓度的增大而升高,对茶籽油的抗氧化效果较动物油脂好。

鹿药化学成分及其抗肿瘤活性

目的研究鹿药Smilacina japonica A.Gray根茎及根的的化学成分及其抗肿瘤活性。方法鹿药乙醇提取物采用大孔吸附树脂、硅胶、凝胶色谱柱和重结晶等方法分离纯化,根据波谱数据及理化性质鉴定所得化合物的结构。然后,MTT法考察其对人结肠癌细胞株Caco-2、人乳腺癌细胞株MCF-7、人胃癌细胞株BGC-823和人肺腺癌细胞株SPC-A1的抑制作用。结果从中分得3个化合物,分别鉴定为26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(25R)-呋甾-5-烯-3β,12,17α,22ξ,26-五醇-12-O-乙酰基-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、薯蓣皂苷(2)、(25R)-海柯皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-[β-D-吡喃木糖基(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷(3)。其中,化合物1对SPC-A1细胞、化合物3对Caco-2和MCF-7细胞增殖有较强的抑制作用,化合物2对Caco-2细胞有抑制作用。结论首次从鹿药中分离得到3个甾体皂苷均具有一定的抗肿瘤活性。

大孔树脂对节节草总黄酮吸附分离特性研究

考察了D-101大孔吸附树脂对节节草黄酮类物质的吸附及解吸特性,对黄酮类物质的吸附平衡和吸附动力学进行了深入探讨。结果表明,D-101树脂对节节草总黄酮的吸附等温线符合Langmuir方程,吸附动力学规律可用二级速率方程表示。D-101大孔吸附树脂纯化节节草黄酮类物质的适宜工艺参数为:黄酮质量浓度为2mg/mL、pH2.1、吸附液料比20:1、静置时间60min、50mL95%乙醇溶液为洗脱剂时,洗脱率达到99.01%。纯化后,黄酮质量分数从10.54%提高到60.01%。

Sevag法脱鹿药多糖蛋白工艺条件优化

为了优化Sevag法脱鹿药粗多糖蛋白工艺条件,以牛血清白蛋白为标准品测定蛋白质含量,以葡萄糖为标准品测定多糖含量,以蛋白质脱除率、多糖保留率及综合评分为指标,通过正交试验考察氯仿与正丁醇的比例、多糖液与Sevag液的比例、振荡时间、洗脱次数四因素对脱蛋白效果的影响,确定鹿药多糖脱蛋白的最佳工艺条件。结果表明Sevag法脱鹿药多糖蛋白的最佳条件为氯仿∶正丁醇=4∶1,多糖溶液(2 mg/mL)∶Sevag试剂=2∶1,振荡时间15 min,洗脱6次,从综合评分来看,主要的影响因素是脱蛋白次数和振荡时间。Sevag法脱鹿药多糖蛋白的方法简便,工艺稳定且可有效提高多糖的纯度。

大孔吸附树脂纯化鹿药总皂苷和总黄酮的研究

目的优化鹿药总皂苷和总黄酮成分的大孔吸附树脂分离纯化最佳工艺。方法以总皂苷和总黄酮为考察指标,对大孔吸附树脂的类型以及样品溶液的质量浓度、pH值、洗脱剂的体积分数、用量进行了优化,同时对大孔吸附树脂的重复性、使用周期进行考察。结果优选出D101大孔吸附树脂作为富集、纯化总皂苷和总黄酮的上柱树脂;获得D101大孔吸附树脂柱层析各项优化参数,即上样液质量浓度为1.5g生药.mL-1(其中皂苷质量浓度为6.52mg.mL-1,黄酮质量浓度为4.81mg.mL-1),上样液pH为4.0～5.0,依次用8BV水、4BV体积分数30%乙醇和4BV体积分数70%乙醇以2BV.h-1的流速洗脱,收集体积分数70%乙醇洗脱液。结论优选出的工艺稳定可行。

鹿药游离氨基酸提取工艺

以鹿药为试验材料,采用超声波辅助浸提法,通过单因素试验和正交试验,分别对料液比、提取时间、提取温度及超声功率等因素进行考察,优选鹿药游离氨基酸的最佳提取工艺条件。同时,利用氨基酸自动分析仪对鹿药游离氨基酸进行组分及含量测定分析。结果表明:料液比1∶30、提取时间30 min、提取温度40℃、超声功率80 W,超声提取鹿药游离氨基酸的提取率最高。鹿药由16种不同氨基酸组成,其中必需氨基酸占总氨基酸含量的47.93%。料液比对游离氨基酸提取率影响较显著,且游离氨基酸含量随鹿药采收期的延长呈下降趋势。

硬粒小麦与偏凸山羊草部分双二倍体的核型研究

通过硬粒小麦（AABB，2n＝28）与偏凸山羊草（DDMvMv，Zn＝28）杂交，今成选育出遗传上相对稳定的部分双二倍体。利用核型分析，初步鉴定出该部分双二倍体具有编凸山羊草的染色体组，从而证实了杂种的真实性。该部分双二倍体的获得为将硬粒小麦，特别是偏凸山羊草的优异基因向小麦转移奠定了基础。

大孔吸附树脂对湘西节节草多糖的吸附特性及机理

从湘西节节草中提取多糖并用D-101大孔吸附树脂进行纯化,研究了树脂对多糖的吸附热力学及吸附动力学特性,探索了吸附及解吸附的最佳工艺条件。结果表明,不同吸附量下大孔吸附树脂对多糖的吸附焓变ΔH均为正值,且ΔH绝对值均小于临界值40 kJ/mol,表明树脂对节节草多糖的吸附为物理吸附过程,吸附模型可用Langmuir和Freundlich方程描述,吸附过程是一个吸热、熵增加过程,吸附动力学规律可用一级速率方程表示。D-101大孔吸附树脂对节节草多糖吸附的最佳条件为:上样液多糖质量浓度2.0 g/L、上样液体积与树脂10∶1(mL∶g)、pH值6.0、120次/min恒温振荡12 h,最大吸附率为59.51%;解吸附的最佳条件为:以0.2 mol/L的NaCl溶液为洗脱剂,洗脱剂体积与树脂20∶1(mL∶g),解吸率超过95%;纯化后多糖纯度为39.29%,是纯化前(8.42%)的4.67倍。

云南高黎贡山管花鹿药茎叶营养成分分析

测定了云南高黎贡山管花鹿药茎叶的营养成分 ,并与常见蔬菜及一些粮谷类食物进行了比较 ,结果显示 :管花鹿药茎叶含多种营养成分 ,干品蛋白质含量高达 4 4 92 %、氨基酸含量为 2 6 4 %、含有多种人体必需的常微量元素 ,矿质元素含量呈十分典型的高钾低钠特点 :钾含量高达 395 0mg/kg ,而钠含量仅为 0 14mg/kg ,Fe、Mn、Zn等元素含量也较高 。

响应面分析法优选鹿药总皂苷提取工艺

目的利用响应面法优化鹿药总皂苷的提取工艺。方法采用中心组合设计方法,研究乙醇浓度、提取次数、提取时间及其交互作用对鹿药总皂苷提取率的影响。结果最佳提取工艺条件为:70%乙醇、回流提取2次、每次110 min。结论在最佳工艺条件下,鹿药总皂苷的提取率为4.63%,高于其他条件下的提取率,该工艺条件可为鹿药总皂苷的工业生产提供依据。

星点设计-响应面法优选鹿药总黄酮提取工艺

目的利用响应面法优选鹿药总黄酮的提取工艺条件。方法以乙醇体积分数、溶媒用量、提取时间为主要影响因素,以总黄酮提取率为评价指标,用响应面法选择提取工艺的最佳条件。结果响应面法筛选的最佳提取工艺为:82.6%乙醇,溶媒用量11.4倍量,提取时间1.91h,理论提取率为2.31%,实际测得值为2.26%。结论星点设计-响应面法优选鹿药中总黄酮提取工艺,方法简单,结果可靠。

鹿药中总黄酮含量的测定

[目的]建立鹿药Smilacina japonica A.Gray中活性成分——黄酮类化合物含量的测定方法。[方法]采用铝盐络合显色分光光度法,以芦丁为对照品,NaNO2-Al（NO3）3-NaOH为显色剂,采用正交试验确定显色剂各组分的最佳用量,在505 nm波长处测定光密度,计算鹿药中的总黄酮含量。[结果]正交试验结果表明,最佳显色剂各组分用量为50 mg/ml NaNO22.0 ml,100 mg/ml Al（NO3）30.5 ml,40mg/ml NaOH15.0 ml。该测定方法在浓度为0.004-0.028 mg/ml时,芦丁光密度与浓度的线性关系良好,R^2=0.999 6。鹿药植株不同部位总黄酮的含量,以鹿药茎叶中较高,为1.8%,根茎中为0.43%,种子中含量极低;不同采收时期中,以9月中旬采收的根茎中总黄酮含量较高。[结论]该方法操作简便、快速、可行,可用于测定鹿药不同部位及不同采收期根茎中总黄酮含量,研究结果为鹿药的质量评价及开发利用提供了理论依据。

管花鹿药微量元素的测定

用高频电感耦合等离子体发射光谱法 (ICP—AES)测定了管花鹿药茎叶的微量元素。结果表明 :管花鹿药含有丰富的微量元素 。