De novo mutation loci and clinical analysis in a child with sodium taurocholate cotransport polypeptide deficiency: A case report

BACKGROUND Sodium taurocholate cotransport polypeptide(NTCP)deficiency disease is a genetic metabolic disorder due to mutations in the SLC10A1 gene and impaired bile acid salt uptake by the basolateral membrane transport protein NTCP in hepatocytes.A variety of clinical manifestations and genetic mutation loci have been reported for this disease.However,specific therapeutic measures are lacking,and the long-term effects are unknown.CASE SUMMARY An infant with elevated bile acids and behavioral neurodevelopmental delay failed to respond to bile acid-lowering therapy.Genetic testing for metabolic liver disease revealed that the child had NTCP deficiency due to the SLC10A1 mutation:c.422dupA(p.Y141X),which is a novel mutation site.The current followup revealed a gradual decrease in bile acid levels after 1 year of age,but the child still had behavioral neurodevelopmental delays.CONCLUSION The clinical manifestations,genetic characteristics,treatment and long-term prognosis due to NTCP deficiency remain poorly defined and need to be further confirmed by more studies and reports.

Discovery of a novel sodium taurocholate cotransporting polypeptide(NTCP) inhibitor: Design, synthesis, and anti-proliferative activities

Sodium taurocholate cotransporting polypeptide(NTCP)is identified as the functional receptor for HBV entry,which is responsible for upregulated HBV transcription in the HBV life cycle.Besides,NTCP is also implicated in the progression of HBV-induced hepatocellular carcinoma(HCC).Thereby,NTCP-targeting entry inhibitors are proposed to suppress HBV infection and replication in HBV-induced hepatoma therapy.Herein,we integrated in silico screening and chemical synthesis to obtain a small-molecule NTCP inhibitor B7,which exhibited moderate anti-proliferative activities against HepG2 cells and anti-HBV activity in vitro.Additionally,CETSA assay,molecular docking,and MD simulation validated that B7 could bind to NTCP.Furthermore,western blot analysis demonstrated that B7 induced apoptosis with an increased expression of Bax and caspase 3 cleaving as well as a decreasing expression of Bcl-2 in HepG2 cells.Taken together,our study identified B7 as a novel NTCP inhibitor with anti-proliferation activities which might provide a new opportunity for HCC therapy.

水飞蓟宾对利福平和异烟肼致肝损伤中胆汁酸转运体Ntcp与Bsep的影响

目的 初步探讨水飞蓟宾能否通过激动Nrf2/ARE信号通路,激活下游胆汁酸相关的转运体牛磺胆酸钠转运蛋白(Ntcp)及胆盐输出泵(Bsep)Bsep的表达,从而改善异烟肼/利福平(INH/RFP)INH/RFP引起的肝损伤。方法:选用SPF级ICR小鼠随机分成5组:对照组(CON组),模型组(IR组),水飞蓟宾干预组(SY50组,SY100组,SY200组),除对照组外,干预组及IR组根据体质量给予75 mg/kgINH+150 mg/kgRFP,对照组给予空白溶剂,干预组分别同时给予水飞蓟宾低剂量50 mg/kg(IR+SY50),中剂量100 mg/kg(IR+SY100)以及高剂量200 mg/kg(IR+SY200),连续灌胃给药14 d。第15天给予异氟烷吸入麻醉后摘眼球取血,离心后用于生化指标测定,取脏组织于10%福尔马林固定用于病理切片、HE染色;4%多聚甲醛固定用于目标蛋白免疫组化测定;Western blot测定目标蛋白Ntcp、Bsep及核Nrf2的表达。结果 与CON组相比,IR组均能够引起生化指标ALT、AST、TBil、DBil、ALP、TBA的显著变化,与IR组相比,低剂量的水飞蓟宾干预组ALT、Tbil、TBA降低明显,中剂量的水飞蓟宾能显著降低ALT、AST、Tbil、TBA,高剂量的水飞蓟宾能显著降低除ALP以外的所有指标,差异有统计学意义(P<0.05)。IR组Ntcp,Bsep蛋白表达均下调,而水飞蓟宾能显著上调这些蛋白的表达,IR组下调Nrf2核蛋白的表达,与水飞蓟宾合用后,Nrf2核蛋白的表达显著上调。结论 水飞蓟宾可能通过激活Nrf2入核,调控下游胆汁酸转运体Ntcp、Bsep的表达,治疗INH/RFP引起的肝损伤。

钠离子牛磺胆酸共转运多肽缺陷病及其对母胎影响的研究进展

钠离子牛磺胆酸共转运多肽(sodium-taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)缺陷病是一种溶质载体家族10成员1(solute carrier family 10 member 1,SLC10A1)双等位基因突变引起的胆汁酸代谢障碍性疾病,分布具有区域和种族差异,其中SLC10A1 c.800C>T(p.Ser267Phe)是我国的高频突变。NTCP缺陷病患儿主要表现为病理性黄疸,少部分有生长、运动和神经系统发育迟缓的表现,成年患者临床症状和体征不明显,生化检查提示血清总胆汁酸水平升高、部分伴有转氨酶和25-羟维生素D3水平降低。NTCP缺陷病性高胆汁酸血症需与乙型肝炎病毒感染、丁型肝炎病毒感染、自身免疫性肝炎及妊娠期肝内胆汁淤积症等鉴别,妊娠合并NTCP缺陷病性高胆汁酸血症对母胎的影响迄今少有相关报道。综述NTCP缺陷病的分子遗传机制、临床表现、实验室检查、诊断、治疗及其对母胎的影响,为该病患者的明确诊断和正确干预提供依据。

茵陈蒿汤对肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝组织NTCP表达的影响

目的研究茵陈蒿汤对肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝组织中钠-牛璜胆酸盐共转运多肽(Na+/taurocholateCotransporting Polypeptide,NTCP)表达的影响,探讨茵陈蒿汤的作用机制。方法选用雄性SD大鼠45只,随机分为3组:正常对照组、模型对照组和茵陈蒿汤组。观察大鼠的体质量、肝功能、肝组织病理变化和肝脏NTCP的表达。结果治疗后茵陈蒿汤组大鼠的体质量为(196.33±3.42)g,高于模型对照组[(182.80±5.89)g(P<0.05)]。茵陈蒿汤组大鼠血清TB、DB、ALT、AST、ALP水平分别为(13.90±2.88)μmol·L-1、(7.47±2.70)μmol·L-1、(75.33±9.42)U.L-1、(216.64±31.20)U.L-1、(226.40±32.86)U.L-1,均低于模型对照组(34.72±3.65)μmol·L-1、(19.33±3.27)μmol·L-1、(123.73±18.51)U.L-1、(353.78±63.08)U.L-1、(355.49±63.08)U.L-(1P<0.05)。苏木精-伊红染色法显示茵陈蒿汤组大鼠肝细胞的坏死、炎症、水肿程度与模型对照组组比较均有减轻。免疫组化染色示茵陈蒿汤组大鼠肝细胞NTCP阳性表达高于模型对照组。荧光定量RT-PCR检测显示茵陈蒿汤组大鼠肝细胞NCTP mRNA表达(2-△△CT值为2.38±0.76)高于模型对照组(2-△△CT值为1.48±0.38)(P<0.05)。结论茵陈蒿汤能增加肝内胆汁淤积湿热证大鼠的体质量,有效改善胆汁淤积、肝功能及减轻肝脏病理损害。茵陈蒿汤能提高肝内胆汁淤积湿热证大鼠肝细胞NTCP的表达。

小鼠肝组织NTCP表达与肝纤维化程度相关性的研究

目的观察不同肝纤维化程度小鼠肝组织中Na^+-牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)表达水平的变化,探讨NTCP表达与肝纤维化严重程度的相关性。方法经口灌胃方法给予10%CCl4油剂建立小鼠肝纤维化模型;在CCl4给药不同时间点取肝组织进行Masson及天狼猩红染色,判断肝纤维化程度;实时荧光定量PCR方法检测不同程度肝纤维化小鼠肝组织中NTCP mRNA水平;Western blot方法检测不同程度肝纤维化小鼠肝组织中NTCP蛋白表达水平。结果与正常对照小鼠相比,肝纤维化程度评分为F1~F2的小鼠肝组织中NTCP mRNA及蛋白表达的水平均有显著增加;而与肝纤维化程度评分为F1~F2的小鼠相比,肝纤维化程度评分为F3~F4的小鼠肝组织中NTCP mRNA及蛋白的表达水平则显著下降。结论 NTCP的表达在肝纤维化发生早期升高,在肝纤维化晚期降低,其表达水平的动态变化有可能提示肝纤维化的发展进程。

钠牛磺胆酸共转运多肽缺陷病的发病机制、临床表现及诊疗进展

钠牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病是SLC10A1双等位基因突变导致的一种新的遗传性胆汁酸代谢病,在我国可能并不罕见。NTCP缺陷病以儿童期显著而持续性的高胆汁酸血症为主要临床特征,并可能参与新生儿高胆红素血症、婴儿早期胆汁淤积症和妊娠胆汁淤积症的形成。NTCP缺陷病目前缺乏特异性治疗手段,但通常预后良好。SLC10A1基因分析有助于该病患者及时确诊,同时避免不必要的检查和干预。

HBV进入抑制剂研究近况与展望

钠离子牛磺胆酸共转运多肽(Na+-taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染的受体,此发现为抗HBV新药研发提供了新靶标。本文综合了近3年来对NTCP受体的研究,全面阐述了目前HBV治疗中的瓶颈、NTCP发现的意义及其表达调节,以及进入抑制剂的种类、作用机制和研究进展。进入抑制剂将成为抗HBV感染的新靶点,并有可能成为抗HBV感染的新的策略之一。

第10个溶质转运蛋白家族(SLC10)的细胞功能

溶质转运蛋白(solute carrier,SLC)是细胞内最大的一类转运蛋白,目前被分为55个家族,包括至少362个成员。这里介绍了第10个溶质转运蛋白家族(SLC10)各成员的鉴定、表达和功能方面的研究进展,并对该家族成员顶端钠依赖性胆汁酸转运蛋白(apical sodium-dependent bileacid transporter,ASBT)和Na^+/牛磺胆酸共转运多肽(Na^+/taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)的底物特异性及其抑制剂在药物开发方面的研究做了简要介绍。对SLC10的功能研究可以为治疗高胆固醇血症新药的开发提供理论指导,也可以为人类一些与SLC10突变相关的其他疾病的诊断和治疗开辟新的途径。

利胆退黄汤对ANIT诱导的胆汁淤积型黄疸模型大鼠的治疗作用

目的:探讨利胆退黄汤对胆汁淤积型黄疸大鼠的疗效及其作用机制。方法:Wistar雄性大鼠48只,随机分成6组:对照组,模型组,阳性药组,利胆退黄汤低、中、高剂量组,每组8只。除对照组外,其余5组均一次性灌胃α-萘基异硫氰酸盐(alpha-naphthylisothiocyanate,ANIT)溶液(5mL/kg)造模,诱发大鼠急性肝内胆汁淤积病变。造模48h后,利胆退黄汤低、中、高剂量组给药量分别是10、20、40g/(kg·d),阳性药组给予茵栀黄颗粒1.6g/kg灌胃,同时对照组和模型组每天给予生理盐水灌胃,连续给药7天,各组大鼠采集血液及肝脏组织,分析血清指标、肝脏组织中钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(Sodium taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)、胆汁酸盐输出泵(Bile salt export Pump,BSEP)蛋白表达、mRNA表达和观察病理切片。结果:与对照组比较,模型组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-glutamyl transpeptidase,γ-GT)、总胆红素(Total bilirubin,TBil)、直接胆红素(Direct bilirubin,DBil)、总胆汁酸(Total bile acid,TBA)水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,利胆退黄汤低、中、高剂量组血清指标显著降低(P<0.05)。与对照组比较,模型组大鼠肝脏组织中NTCP、BSEP蛋白表达及mRNA表达均明显降低(P<0.05)。与模型组比较,利胆退黄汤低、中、高剂量组大鼠肝组织中NTCP、BSEP蛋白表达及m RNA表达均明显升高(P<0.05);病理切片观察可见模型组大鼠肝细胞肿大,排列无序不规整,显点状或灶性坏死,轮廓不清,胆管上皮细胞增生,肝窦变大,可见大量炎细胞浸润,利胆退黄汤低、中、高剂量组大鼠肝组织病理炎细胞浸润和脂肪细胞减少,肝细胞肿胀明显改善,肝细胞排列比较规整,细胞大小大致相等。与阳性药组比较,利胆退黄汤高剂量组大鼠肝组织病理改善较明显,血清中ALT、ALP、AST、γ-GT、TBA水平均显著升高(P<0.05),NTCP蛋白表达及mRNA表达均显著升高(P<0.05)。结论:利胆退黄汤可降低调节ANIT诱导的胆汁淤积型黄疸大鼠血清中ALT、AST、ALP、TBil、DBil、TBA的水平,且疗效优于茵栀黄颗粒。利胆退黄汤可能通过调节NTCP、BSEP mRNA的表达来改善胆汁淤积大鼠的肝胆功能。

SLC10A1基因p.S267F位点单核苷酸多态性对慢性乙型肝炎患者肝功能的影响

目的探讨SLC10A1基因p.S267F位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)对慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者肝功能的影响。方法纳入初治CHB患者153例,其中p.S267F位点野生型(C/C)132例,突变型(C/T)21例。T检验比较p.S267F位点野生型与突变型CHB患者各项肝功能指标间的差异。结果 SLC10A1基因p.S267F位点突变型CHB患者的ALT、AST、TBIL和DBIL水平均显著低于野生型患者(P<0.05);两组患者ALP、GGT和TBA水平间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论 SLC10A1基因p.S267F位点突变型CHB患者的肝功能损伤程度低于野生型CHB患者,SLC10A1基因p.S267F位点突变可能是CHB患者肝损加重的保护因素。

高脂血症大鼠肝脏中牛磺胆酸钠转运蛋白的表达状况

目的:本研究以牛磺胆酸钠转运蛋白(Na+/taurocholate cotransporting polypeptide,Ntcp)为研究对象,通过分析Ntcp在高脂血症大鼠模型肝脏中的表达状况,寻求新的高脂血症治疗措施.方法:取♂Wistar大鼠(体质量150 g±5 g)60只,随机均分为实验组及对照组.喂食90 d,建立高脂血症模型,喂食期间定期取血检测胆固醇及胆汁酸含量,建模成功后,分别取两组大鼠肝脏组织.应用逆转录-聚合酶链反应(RT-polymerase chain reaction,RTP C R)技术检测肝脏组织的N t c p基因表达的状况.应用免疫组织化学SP(streptavidinperosidase)法检测肝脏组织的Ntcp蛋白表达的状况.结果:实验组胆固醇及胆汁酸含量提高明显.电泳结果显示:两组肝脏组织都出现了位于425 bp的内参β-actin基因的扩增带和位于325 bp的Ntcp基因扩增带,实验组Ntcp基因扩增带亮度减弱;免疫组织化学结果显示:实验组Ntcp表达阳性率为23.6%,对照组N t c p表达阳性率为75.2%,差异有统计学意义(χ2=9.858,P<0.05).结论:实验组大鼠的Ntcp基因的表达明显减弱,提示我们Ntcp基因可能会成为高脂血症及其相关疾病新的药物治疗靶点.

功能性受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白-Huh7细胞株的构建及其HBV易感性

目的功能性受体钠离子牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)表达短暂,导致乙型肝炎病毒(HBV)感染肝癌细胞模型的效率低下且不稳定。文中旨在将GV358-NTCP转染Huh7细胞构建NTCP-Huh7细胞,并鉴定其是否具有HBV易感性。方法使用GV358作为慢病毒载体,和NTCP编码基因连接后获得重组质粒GV358-NTCP,构建NTCP基因重组慢病毒,将GV358-NTCP转染Huh7细胞构建NTCP-Huh7细胞。采用HBV感染NTCP-Huh7细胞(NTCP-Huh7组)和Huh7细胞(Huh7组)。将HBV分别与NTCP-Huh7组和Huh7组细胞共孵育18 h,换液后继续培养,并在第2、4、6、8、10、12天做相关检测。检测上清中HBsAg、HBeAg、HBc Ag、HBV DNA以及细胞内HBV ccc DNA含量,确定NTCP-Huh7重组细胞是否具有HBV易感性。结果 Western blot结果表明NTCP-Huh7细胞株可稳定表达NTCP蛋白。其孵育第8天,NTCP-Huh7组HBsAg、HBeAg(0.866±0.040、0.603±0.053)明显高于Huh7组(0.237±0.063、0.209±0.112),且在第8天达到最高峰,第4、6、10天亦明显高于Huh7组(P<0.05)。NTCP-Huh7组第4、6、8、10、12天上清中HBV DNA、HBV ccc DNA明显高于Huh7组(P<0.05)。免疫荧光法显示NTCP-Huh7细胞内检测到核心抗原,Huh7细胞内未检测到。结论构建GV358-NTCP重组质粒转染Huh7后,获得的NTCP-Huh7细胞具有HBV易感性。

海藻多糖对利福平和异烟肼诱导的大鼠肝损伤保护作用

目的考察海藻多糖(SP)对异烟肼(INH)与利福平(RIF)合用所致氧化型肝损伤的保护作用以及对肝脏转运体Na+-牛磺胆酸共转运多肽(Ntcp)的调控作用。方法 Wistar雄性大鼠24只,随机分为正常组、INH-RIF组和SP组,每组8只。INH-RIF组:灌胃INH和RIF各100 mg/(kg·d);SP组:灌胃SP 720 mg/(kg·d),3 h后灌胃INH和RIF各100 mg/(kg·d)。在给药21 d后,处死大鼠,通过血清生化指标、肝脏病理、氧化指标及Ntcp蛋白表达对各组大鼠进行评价对比。结果与INH-RIF组相比,SP组明显降低血清天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶和总胆汁酸(P<0.05或P<0.01),缓解肝脏的病变;能降低丙二醛含量,增加肝脏谷胱甘肽含量,对Ntcp的表达具有明显的上调作用(P<0.05或P<0.01)。结论 SP能明显改善INH与RIF诱导的肝脏氧化损伤,且能增加肝脏转运体Ntcp的表达,缓解肝脏病变。

2例钠牛磺胆酸共转运多肽缺陷病患儿临床分析

钠牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病是近年来新发现的一种遗传性胆汁酸代谢障碍性疾病,本研究旨在提高对NTCP缺陷病的认识,选取华中科技大学附属湖北省妇幼保健院儿童内分泌遗传代谢科分别以生长发育落后及黄疸就诊的2例患儿,虽临床表现不同,但均发现有顽固性的高胆汁酸血症,并伴有25-羟维生素D下降,行基因分析发现SLC10A1突变,临床确诊为NTCP缺陷病,经积极对症治疗后临床症状缓解,预后较好。该研究提示,对于显著而持续性的高胆汁酸血症的新生儿及儿童患者,需考虑NTCP缺陷病可能。NTCP缺陷病患儿远期可能出现身材矮小等生长发育落后情况,生长激素或可改善NTCP缺陷病患者的终身高。

Analysis of hepatitis B virus preS1 variability and prevalence of the rs2296651 polymorphism in a Spanish population

AIM To determine the variability/conservation of the domain of hepatitis B virus(HBV) pre S1 region that interacts with sodium-taurocholate cotransporting polypeptide(hereafter, NTCP-interacting domain) and the prevalence of the rs2296651 polymorphism(S267 F, NTCP variant) in a Spanish population. METHODS Serum samples from 246 individuals were included and divided into 3 groups: patients with chronic HBV infection(CHB)(n = 41, 73% Caucasians), patients with resolved HBV infection(n = 100, 100% Caucasians) and an HBV-uninfected control group(n = 105, 100% Caucasians). Variability/conservation of the amino acid(aa) sequences of the NTCPinteracting domain,(aa 2-48 in viral genotype D) and a highly conserved pre S1 domain associated with virion morphogenesis(aa 92-103 in viral genotype D) were analyzed by next-generation sequencing and compared in 18 CHB patients with viremia > 4 log IU/mL. The rs2296651 polymorphism was determined in all individuals in all 3 groups using an in-house real-time PCR melting curve analysis.RESULTS The HBV pre S1 NTCP-interacting domain showed a high degree of conservation among the examined viral genomes especially between aa 9 and 21(in the genotype D consensus sequence). As compared with the virion morphogenesis domain, the NTCPinteracting domain had a smaller proportion of HBV genotype-unrelated changes comprising > 1% of the quasispecies(25.5% vs 31.8%), but a larger proportion of genotype-associated viral polymorphisms(34% vs 27.3%), according to consensus sequences from Gen Bank patterns of HBV genotypes A to H. Variation/conservation in both domains depended on viral genotype, with genotype C being the most highly conserved and genotype E the most variable(limited finding, only 2 genotype E included). Of note, proline residues were highly conserved in both domains, and serine residues showed changes only to threonine or tyrosine in the virion morphogenesis domain. The rs2296651 polymorphism was not detected in any participant.CONCLUSION In our CHB population, the NTCP-interacting domain was highly conserved, particularly the proline residues and essential amino acids related with the NTCP interaction, and the prevalence of rs2296651 was low/null.

Elucidation of the early infection machinery of hepatitis B virus by using bio-nanocapsule

Currently, hepatitis B virus(HBV), upon attaching to human hepatocytes, is considered to interact first with heparan sulfate proteoglycan(HSPG) via an antigenic loop of HBV envelope S protein. Then, it is promptly transferred to the sodium taurocholate cotransporting polypeptide(NTCP) via the myristoylated N-terminal sequence of pre-S1 region(from Gly-2 to Gly-48, HBV genotype D), and it finally enters the cell by endocytosis. However, it is not clear how HSPG passes HBV to NTCP and how NTCP contributes to the cellular entry of HBV. Owing to the poor availability and the difficulty of manipulations, including fluorophore encapsulation, it has been nearly impossible to perform biochemical and cytochemical analyses using a substantial amount of HBV. A bio-nanocapsule(BNC), which is a hollow nanoparticle consisting of HBV envelope L protein, was efficiently synthesized in Saccharomyces cerevisiae. Since BNC could encapsulate payloads(drugs, genes, proteins) and specifically enter human hepatic cells utilizing HBV-derived infection machinery, it could be used as a model of HBV infection to elucidate the early infection machinery. Recently, it was demonstrated that the N-terminal sequence of pre-S1 region(from Asn-9 to Gly-24) possesses low p H-dependent fusogenic activity, which might play a crucial role in the endosomal escape of BNC payloads and in the uncoating process of HBV. In this minireview, we describe a model in which each domain of the HBV L protein contributes to attachment onto human hepatic cells through HSPG, initiation of endocytosis, interaction with NTCP in endosomes, and consequent provocation of membrane fusion followed by endosomal escape.

茵陈蒿汤防治大鼠非酒精性脂肪性肝病效果及其对肝组织NTCP表达的影响

目的观察茵陈蒿汤防治大鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的效果及其对肝组织钠离子牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)表达的影响,探讨茵陈蒿汤防治NAFLD的机制。方法将45只SD大鼠随机分为3组各15只,模型组、干预组每天给予高脂饲料灌胃进行NAFLD造模,同时干预组每天给予茵陈蒿汤10 m L/kg灌胃,对照组每天给予普通饲料喂养。12周后分批处死,取大鼠腹主动脉血及肝脏组织;生化分析仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)、甘油三酯(TG),HE染色观察肝组织病理变化; Real time PCR、Western blotting法分别检测肝脏组织中NTCP mRNA及蛋白表达。结果与对照组比较,模型组血清ALT、AST、TBA、TG水平均升高(P均<0. 05);干预组血清ALT、AST、TBA、TG水平均较模型组下降(P均<0. 05),而与对照组间差异无统计学意义(P均> 0. 05)。HE染色显示,模型组肝组织可见空泡样变性、炎性细胞浸润和棕黄色胆汁颗粒,而干预组较模型组肝组织脂肪变性、炎性细胞浸润均有一定程度缓解。与对照组比较,模型组肝组织中NTCP mRNA及蛋白表达水平均下调(P均<0. 05);干预组肝组织中NTCP mRNA及蛋白表达水平均较模型组上调(P均<0. 05),而与对照组间差异无统计学意义(P均> 0. 05)。结论茵陈蒿汤可能通过上调NTCP基因表达,减轻肝细胞内胆汁淤积,进而改善肝脏功能,减轻NAFLD大鼠肝脏病理损害。

钠牛磺胆酸共转运多肽缺陷病临床特征及SLC10A1基因突变分析

目的总结钠牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病的临床和基因突变特征。方法选取2020年6月—2021年6月于广州市妇女儿童医疗中心经基因检测确诊的10例NTCP缺陷病患儿(年龄<18岁),分析一般资料(性别、年龄、身高、体质量、家族史和既往病史)、临床表现、病情转归、实验室检查(血常规、肝功能、嗜肝病毒、自身免疫性肝炎筛查)及基因突变检测结果。结果10例患儿生长发育均正常,其中男8例,女2例;确诊年龄3~37个月。首次就诊病因包括新生儿黄疸延长(5/10,50%)、转氨酶升高(2/10,20%)、体检(2/10,20%)和肺炎(1/10,10%)。所有患儿确诊时血清TBA水平均明显升高;ALT、AST水平升高2例;TBil水平升高1例,且以DBil水平升高为主(DBil/TBil>50%)。经第二代基因测序,10例患儿均为SLC10A1基因纯合突变:c.800C>T(p.Ser267Phe,chr14∶70245193)。结论尽管NTCP缺乏症往往无明显症状,但部分患儿早期可表现为婴儿胆汁淤积症,对于显著而持续的高胆汁酸血症,且血清总TBA水平与其他肝功能指标的变化趋势不一致时,应考虑NTCP缺陷病可能。

钠-牛磺胆酸共转运多肽缺陷患儿的肝功能及基因特点

目的探讨钠-牛磺胆酸共转运多肽(NTCP)缺陷病患儿的肝功能及基因特点。方法选取经基因测序确诊的NTCP缺陷病患儿(n=11)及其父母(n_(父)=11,n_(母)=11)为研究对象,收集NTCP缺陷病患儿的年龄、出生史、家族史及新生儿期黄疸等一般临床资料;抽取患儿入院治疗前空腹静脉血,检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)及胆汁酸(TBA);抽取患儿及父母外周血采用高通量测序法进行基因检测,对患儿突变基因与其父母基因进行Sanger验证,并运用Rare Exome Variant Ensemble Learner(REVEL)、Sortig Intolerant from Tolerant(SIFT)、PolyPhen-2、Mutationtation Taster、Genomic Evolutionary Rate Profiling(GERP^(+))综合性预测软件对突变位点进行危害预测;随访患儿1年,检测血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBTL及IBIL等肝功能指标。结果11例NTCP缺陷病患儿,男6例(54.5%)、女5例(45.4%),确诊年龄40~221d、平均(99.82±69.63)d,血清ALT、AST、TBA、TBIL、DBIL及IBIL升高分别为8例(72.7%)、8例(72.7%)、11例(100%)、6例(54.5%)、7例(63.6%)及4例(36.4%);所有患儿均为SLC10A1基因(c.800C>T)纯合突变,父母为(c.800C>T)突变携带者,除检测到与疾病表型高度相关的SLC10A1基因突变外,还检测到与临床相关性不明确突变位点134个;治疗后患儿随访肝功能指标,除TBA外,其余指标下降良好,随着访时间延长TBA呈现下降趋势。结论NTCP缺陷病患儿肝功能异常以TBA增高为主要特征;SLC10A1基因突变是直接原因,已发现多个突变位点可致病,目前c.800C>T是热点突变,患者可呈杂合或纯合突变。