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米扎格列净通过抑制钠-葡萄糖共转运体1的功能抑制常染色体显性多囊肾细胞增殖和纤维化
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作者 刘雯瑜 吴双成 +4 位作者 张天琛 付莉莉 解良瑜 胡菀芊 郁胜强 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1343-1351,共9页
目的探究钠-葡萄糖共转运体1(SGLT1)抑制剂米扎格列净(MIZA)在常染色体显性多囊肾病(ADPKD)中的作用。方法用蛋白质印迹法、qPCR、免疫荧光染色测定PKD1^(-/-)小鼠和PKD1^(+/+)小鼠肾脏组织、人肾癌旁组织和人ADPKD组织中SGLT1的表达和... 目的探究钠-葡萄糖共转运体1(SGLT1)抑制剂米扎格列净(MIZA)在常染色体显性多囊肾病(ADPKD)中的作用。方法用蛋白质印迹法、qPCR、免疫荧光染色测定PKD1^(-/-)小鼠和PKD1^(+/+)小鼠肾脏组织、人肾癌旁组织和人ADPKD组织中SGLT1的表达和分布。用MIZA处理囊肿衬里上皮细胞OX161和肾小管上皮细胞UCL93,37℃孵育24、48和72 h后通过MTT实验和集落形成实验观察细胞增殖情况。以100μmol/L MIZA处理OX161细胞48 h后,通过qPCR测定细胞中α1-Ⅰ型胶原蛋白、α1-Ⅲ型胶原蛋白和纤连蛋白1的mRNA表达量。用犬肾细胞MDCK 3D囊肿形成实验验证MIZA对囊肿形成的作用。通过mRNA-seq数据分析筛选UCL93细胞和OX161细胞、OX161细胞和100μmol/L MIZA处理48 h后的OX161细胞的差异表达基因,利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库进行通路富集分析。结果SGLT1在ADPKD患者和PKD1^(-/-)小鼠多囊肾组织中的表达水平较正常肾脏组织升高(P<0.05,P<0.01),免疫荧光染色发现SGLT1主要表达在囊肿衬里上皮细胞。在体外实验中,MIZA呈浓度和时间依赖性地抑制多囊肾细胞的增殖和纤维化,3D形成实验表明MIZA抑制了囊肿的形成。mRNA-seq数据分析和KEGG富集分析结果显示,OX161细胞和100μmol/L MIZA处理48 h的OX161细胞的差异表达基因主要富集在PI3K-Akt、MAPK等信号通路,与OX161细胞和UCL93细胞的差异表达基因富集通路相同。结论SGLT1抑制剂MIZA可能通过PI3K-Akt、MAPK等通路抑制多囊肾细胞的增殖和纤维化,延缓多囊肾的生长,是ADPKD的一个潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 常染色体显性多囊肾病 钠-葡萄糖共转运体1 细胞增殖 纤维化 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 丝裂原活化蛋白激酶 信号通路
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绿色荧光蛋白与人肾脏NaDC3融合基因的构建及其在肾小管上皮细胞中的定位 被引量:6
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作者 程根阳 陈香美 +4 位作者 白雪源 冯哲 刘章锁 付博 洪权 《细胞生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期170-174,共5页
本文采用RT-PCR方法从人的正常肾组织中扩增出hNaDC3基因全长cDNA序列,采用基因重组技术将hNaDC3基因和绿色荧光蛋白基因融合,通过真核表达质粒-脂质体介导,导入LLG-PK1细胞系,激光共聚焦显微镜动态观察GFP-hNaDC3的定位情况。结果显示p... 本文采用RT-PCR方法从人的正常肾组织中扩增出hNaDC3基因全长cDNA序列,采用基因重组技术将hNaDC3基因和绿色荧光蛋白基因融合,通过真核表达质粒-脂质体介导,导入LLG-PK1细胞系,激光共聚焦显微镜动态观察GFP-hNaDC3的定位情况。结果显示pEGFP-C3空白质粒转染的LLC-PK1细胞表达了GFP,GFP在胞内分布以核浆为主,呈均匀致密的细颗粒荧光,胞核染色强,核仁荧光稀少,界线清楚。而pEGFP-C3-hNaDC3转染细胞株的绿色荧光蛋白,转染后第1天混合分布于细胞浆和细胞膜,以粗颗粒荧光为主,两者界限不清楚,胞浆中可见未染色的圆形空洞,未见胞核染色;第3天主要聚集于细胞膜,核周的胞浆中可见粗颗粒荧光物质,胞浆和胞膜界线清楚,胞核亦未见绿色荧光蛋白;第5天清晰聚集于细胞膜,细胞膜连接呈网状。因此hNaDC3蛋白在细胞质中生成后,定位于细胞膜并稳定表达。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 人肾脏NaDC3融合基因 肾小管上皮细胞中 定位 转运蛋白
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茵栀黄颗粒对胆管结扎大鼠肝细胞膜转运体Mrp2、Ntcp及Bsep表达的影响 被引量:11
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作者 张国强 周燕 +2 位作者 魏玉辉 朱琳 武新安 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1644-1648,共5页
目的通过考察茵栀黄颗粒(茵陈、栀子、金银花和黄芩)对肝细胞膜转运体多药耐药相关蛋白2(Multidrugresistance-associated protein 2,Mrp2/ABCC2)、Na+-牛黄胆酸共转运多肽(Na+/taurocholate cotransporter,Ntcp/SLC10A1)及胆盐输出泵(B... 目的通过考察茵栀黄颗粒(茵陈、栀子、金银花和黄芩)对肝细胞膜转运体多药耐药相关蛋白2(Multidrugresistance-associated protein 2,Mrp2/ABCC2)、Na+-牛黄胆酸共转运多肽(Na+/taurocholate cotransporter,Ntcp/SLC10A1)及胆盐输出泵(Bile salt export pump,Bsep/ABCB11)表达的影响。方法胆管结扎术制备胆汁淤积大鼠模型;生化检测和HE染色,观察茵栀黄颗粒的干预效果;流式细胞仪测定肝脏转运体Ntcp、Bsep和Mrp2的表达。结果与模型组相比,茵栀黄组肝细胞的脂肪病变和水肿较模型组显著减轻(P<0.05),Mrp2的表达显著升高(P<0.01);但Ntcp、Bsep的表达无明显变化。结论肝细胞膜转运体Mrp2的表达升高可能是茵栀黄颗粒的退黄利胆分子机制之一。 展开更多
关键词 茵栀黄颗粒 胆管结扎 多药耐药相关蛋白2 Na+-牛黄胆酸共转运多肽 胆盐输出泵
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大鼠缰内侧核神经元缺少MAP2和KCC2的表达 被引量:1
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作者 王德广 张红红 +2 位作者 张静 郑殿杰 陈幽婷 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期307-310,共4页
为了观察神经元结构蛋白微管相关蛋白2(MAP2)和钾离子-氯离子共转运体2(KCC2)在缰内侧核神经元内的表达,本实验采用2组成年SD大鼠,一组作常规灌注固定,冰冻切片,KCC2和MAP2的免疫荧光组织化学染色;另一组断头取脑,分别取缰内侧核和缰外... 为了观察神经元结构蛋白微管相关蛋白2(MAP2)和钾离子-氯离子共转运体2(KCC2)在缰内侧核神经元内的表达,本实验采用2组成年SD大鼠,一组作常规灌注固定,冰冻切片,KCC2和MAP2的免疫荧光组织化学染色;另一组断头取脑,分别取缰内侧核和缰外侧核,用Western blotting法检测KCC2和MAP2的表达。结果显示:KCC2和MAP2在缰内侧核内的表达非常弱,但在缰外侧核有丰富表达。以上结果表明,缰内侧核神经元缺少神经元结构蛋白MAP2和KCC2的表达。 展开更多
关键词 缰内侧核 微管相关蛋白2 钾离子-氯离子共转运体2 大鼠
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心力衰竭治疗药物新进展 被引量:6
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作者 刘莹 高宇 《实用药物与临床》 CAS 2021年第12期1137-1140,共4页
心力衰竭是各种心脏疾病的最终阶段,也是心血管疾病的主要死因。近年来根据不同心衰发病机制研发的针对不同靶点治疗心衰的新药问世,使心衰患者的临床症状得以缓解,预期寿命延长,同时也为临床医生在治疗方案上提供了更多选择。本文将对... 心力衰竭是各种心脏疾病的最终阶段,也是心血管疾病的主要死因。近年来根据不同心衰发病机制研发的针对不同靶点治疗心衰的新药问世,使心衰患者的临床症状得以缓解,预期寿命延长,同时也为临床医生在治疗方案上提供了更多选择。本文将对治疗心衰的3种最新药物(沙库巴曲缬沙坦、维利西呱、达格列净)进行综述。 展开更多
关键词 血管紧张素受体-脑啡肽酶抑制剂 沙库巴曲缬沙坦 维利西呱 钠-葡萄糖协同转运蛋白2 达格列净
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钠磷协同转运蛋白与慢性肾脏病矿物质和骨异常
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作者 朱伟平 李中和 史伟 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期560-565,共6页
矿物质和骨异常(MBD)是慢性肾脏病(CKD)常见的并发症。以往对CKD-MBD的研究主要集中在钙离子代谢紊乱,并证实血钙水平主要受甲状旁腺激素(PTH)和1,25(OH)2D3的调控。近年研究发现CKD患者血清磷水平与血管钙化、心血管死亡风险存在明显... 矿物质和骨异常(MBD)是慢性肾脏病(CKD)常见的并发症。以往对CKD-MBD的研究主要集中在钙离子代谢紊乱,并证实血钙水平主要受甲状旁腺激素(PTH)和1,25(OH)2D3的调控。近年研究发现CKD患者血清磷水平与血管钙化、心血管死亡风险存在明显相关性。无机磷参与细胞结构组成和许多重要的生物功能,在细胞中活跃地进行逆化学和电势梯度跨细胞膜运输。无机磷的转运由钠磷协同转运蛋白(Npt)完成,位于细胞膜的Npt利用Na+浓度梯度所提供的自由能作为驱动力增加磷的摄入。目前至少已从哺乳动物细胞分离出三种Npt,成骨细胞和破骨细胞表面都有Npt的表达。Npt是体内无机磷的一种重要转运蛋白,通过对Npt参与体内磷代谢调控机制的研究,可能为矿物质和骨代谢紊乱的治疗带来新的切入靶点。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 钠磷协同转运蛋白 矿物质和骨异常
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达格列净对2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者机体中性粒细胞与淋巴细胞比值、血小板与淋巴细胞比值、C反应蛋白、白介素6的影响 被引量:3
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作者 张耀颐 田晨光 《中国当代医药》 CAS 2021年第13期119-122,共4页
目的探究达格列净对2型糖尿病(T2DM)合并颈动脉粥样硬化患者机体中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)的影响。方法选取2019年8月~2020年1月郑州大学第二附属医院收治的100例T2DM... 目的探究达格列净对2型糖尿病(T2DM)合并颈动脉粥样硬化患者机体中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、C反应蛋白(CRP)、白介素6(IL-6)的影响。方法选取2019年8月~2020年1月郑州大学第二附属医院收治的100例T2DM合并动脉粥样硬化患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为Dap组与Con组,每组各50例。Con组患者采用原降糖方案,Dap组患者采用原降糖方案基础上加用达格列净,治疗20周。比较两组患者治疗前后的NLR、PLR、CRP、IL-6水平。结果治疗前两组患者的NLR、PLR、CRP及IL-6水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者的NLR、PLR、CRP及IL-6水平低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后Dap组患者的NLR、PLR、CRP及IL-6水平低于Con组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论达格列净可降低T2DM合并颈动脉粥样硬化患者NLR、PLR、CRP及IL-6水平,改善机体的低炎症反应状态。 展开更多
关键词 钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂 C反应蛋白 中性粒细胞与淋巴细胞比值 白介素6
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Berberine enhanced antidiabetic effects and attenuated untoward effects of canagliflozin in streptozotocininduced diabetic mice 被引量:1
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作者 JIANG Xin TIAN Cai-ming XIE Wei-dong 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1058-1059,共2页
OBJECTIVE To determine whether berberine can enhance the antidiabetic effects and alleviate the adverse effects of canagliflozin in diabetes mellitus.METHODS Streptozotocin-induced diabetic mice were introduced,and th... OBJECTIVE To determine whether berberine can enhance the antidiabetic effects and alleviate the adverse effects of canagliflozin in diabetes mellitus.METHODS Streptozotocin-induced diabetic mice were introduced,and the combined effects of berberine and canagliflozin on glucose metabolism and kidney functions were investigated.RESULTS Berberine combined with canagliflozin(BC)increased reduction of fasting and postprandial blood glucose,diet,and water intake compared with berberine or canagliflozin alone.Interestingly,BC showed greater decrease in blood urea nitrogen and creatinine levels and lower total urine glucose excretion than canagliflozin alone.In addition,BC showed increased phosphorylated 5′AMP-activated protein kinase(pA MPK)expression and decreased tumor necrosis factor alpha(TNFα)levels in kidneys compared with berberine or canagliflozin alone.CONCLUSION These results indicated that BC is as tronger antidiabetic than berberine or canagliflozin alone with less negative side effectson the kidneys of diabetic mice.The antidiabetic effect is likely mediated by synergically promoting the expression of p AMPK and reducing the expression of TNFαin kidneys.This study first proved that canagliflozin combined withberberine is apromising treatment for diabetes mellitus.However,the exact mechanisms should be further investigated in future studies. 展开更多
关键词 canagliflozin BERBERINE diabetes mellitus AMP-activated protein kinase sodium-glucose cotransporter-2
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肝再生过程中胆汁酸对肝细胞cyclinD1和NTCP蛋白表达的影响 被引量:2
9
作者 董秀山 贺杰峰 赵浩亮 《山西医科大学学报》 CAS 2015年第12期1169-1171,共3页
目的观察大鼠肝再生过程中胆汁酸对肝细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和Na+依赖牛磺胆酸钠协同转运蛋白(NTCP)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠72只随机分为胆酸缺乏组、胆酸负荷组和对照组,分别饲以2%无水考来烯胺饲料、0.2%胆酸饲料和标准饲... 目的观察大鼠肝再生过程中胆汁酸对肝细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和Na+依赖牛磺胆酸钠协同转运蛋白(NTCP)表达的影响。方法雄性Wistar大鼠72只随机分为胆酸缺乏组、胆酸负荷组和对照组,分别饲以2%无水考来烯胺饲料、0.2%胆酸饲料和标准饲料,7 d后行70%肝部分切除术。分别在术后6 h,12 h Western blot检测再生肝组织cyclin D1的蛋白表达,术后24 h检测NTCP的蛋白表达。结果术后6 h,胆酸缺乏组肝组织cyclin D1相对表达量显著低于对照组(0.09±0.02 vs 0.18±0.05,P<0.05),而胆酸负荷组(0.31±0.11)显著高于对照组(P<0.05)和胆酸缺乏组(P<0.01);术后12 h,胆酸缺乏组、胆酸负荷组和对照组肝组织cyclin D1的相对表达量分别为0.59±0.21,0.87±0.32和0.54±0.18,胆酸缺乏组与对照组间无统计学差异,但均显著低于负荷组(P<0.05)。术后24 h,胆酸缺乏组的NTCP蛋白相对表达量最高(0.51±0.11),而胆酸负荷组NTCP的表达量(0.23±0.05)最低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠肝再生过程中,体内缺乏胆汁酸可显著降低肝组织cyclin D1蛋白的表达,同时伴有和肝细胞极性密切相关的NTCP蛋白表达的上调。 展开更多
关键词 肝再生 胆汁酸 细胞周期蛋白D1 Na+依赖牛磺胆酸钠协同转运蛋白
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卡格列净对早期糖尿病肾病尿白蛋白/肌酐比值和尿足细胞相关蛋白裂隙素的影响 被引量:7
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作者 孙艳 代丹娇 +1 位作者 陈智伟 张华清 《内科理论与实践》 2021年第6期387-391,共5页
目的:探讨卡格列净(钠-葡萄糖耦联转运体2抑制药)对早期糖尿病肾病尿白蛋白/肌酐比值(urinary albumin-to-creatinine ratio,UACR)和尿液足细胞相关蛋白裂隙素的影响。方法:选取2018年1月至2019年7月期间在南方科技大学医院内分泌科住院... 目的:探讨卡格列净(钠-葡萄糖耦联转运体2抑制药)对早期糖尿病肾病尿白蛋白/肌酐比值(urinary albumin-to-creatinine ratio,UACR)和尿液足细胞相关蛋白裂隙素的影响。方法:选取2018年1月至2019年7月期间在南方科技大学医院内分泌科住院的116例早期糖尿病肾病患者,随机数字表法1∶1分为卡格列净组和对照组,各58例。最终105例(90.5%)患者完成全部研究,卡格列净组51例,对照组54例。卡格列净组常规予以卡格列净100~300 mg/d,对照组接受基础胰岛素加氯沙坦钾片100 mg/d,均治疗24周。分别在治疗前、治疗12周及24周对患者生化指标进行检测,在此期间检测UACR、尿液足细胞相关蛋白裂隙素进行组间及组内自身对照比较。结果:卡格列净组和对照组在12周及24周后UACR及裂隙素2组指标较治疗前均有改善(P<0.05)。治疗前与治疗12周后,UACR及裂隙素2组指标差异无统计学意义(P>0.05);治疗24周,卡格列净组的UACR及裂隙素显著优于对照组(P<0.05)。结论:卡格列净可以持续降低早期糖尿病肾病患者尿液中足细胞相关蛋白裂隙素含量,推测钠-葡萄糖耦联转运体2抑制药肾脏保护作用独立于降糖之外。 展开更多
关键词 卡格列净 钠-葡萄糖耦联转运体2抑制剂 糖尿病肾病 尿白蛋白/肌酐比值 足细胞相关蛋白
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钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂治疗晚期心力衰竭1例
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作者 刘凡凡 张越强 +2 位作者 杨文静 王晓艳 陈还珍 《安徽医药》 CAS 2023年第6期1258-1262,共5页
目的 探讨晚期心力衰竭治疗策略。方法 报告钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂治疗晚期心力衰竭病人1例。该晚期心力衰竭病人合并多种并发症,应用多种利尿剂效果不佳后给予口服50 mg卡格列净,每日1次。结果 病人心力衰竭症状得以改... 目的 探讨晚期心力衰竭治疗策略。方法 报告钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂治疗晚期心力衰竭病人1例。该晚期心力衰竭病人合并多种并发症,应用多种利尿剂效果不佳后给予口服50 mg卡格列净,每日1次。结果 病人心力衰竭症状得以改善,N末端-B型钠尿肽前体(NT-proBNP)短期内下降及肾小球滤过率(eGFR)短期上升。结论 SGLT2抑制剂对晚期心力衰竭病人的治疗,短期有效,前景可期。 展开更多
关键词 心力衰竭 钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂 卡格列净 利尿 病例报告
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钠离子牛磺胆酸共转运多肽缺陷病及其对母胎影响的研究进展
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作者 赵欢 余晓明 白晓霞 《国际妇产科学杂志》 CAS 2023年第6期684-688,共5页
钠离子牛磺胆酸共转运多肽(sodium-taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)缺陷病是一种溶质载体家族10成员1(solute carrier family 10 member 1,SLC10A1)双等位基因突变引起的胆汁酸代谢障碍性疾病,分布具有区域和种族差异,其... 钠离子牛磺胆酸共转运多肽(sodium-taurocholate cotransporting polypeptide,NTCP)缺陷病是一种溶质载体家族10成员1(solute carrier family 10 member 1,SLC10A1)双等位基因突变引起的胆汁酸代谢障碍性疾病,分布具有区域和种族差异,其中SLC10A1 c.800C>T(p.Ser267Phe)是我国的高频突变。NTCP缺陷病患儿主要表现为病理性黄疸,少部分有生长、运动和神经系统发育迟缓的表现,成年患者临床症状和体征不明显,生化检查提示血清总胆汁酸水平升高、部分伴有转氨酶和25-羟维生素D3水平降低。NTCP缺陷病性高胆汁酸血症需与乙型肝炎病毒感染、丁型肝炎病毒感染、自身免疫性肝炎及妊娠期肝内胆汁淤积症等鉴别,妊娠合并NTCP缺陷病性高胆汁酸血症对母胎的影响迄今少有相关报道。综述NTCP缺陷病的分子遗传机制、临床表现、实验室检查、诊断、治疗及其对母胎的影响,为该病患者的明确诊断和正确干预提供依据。 展开更多
关键词 遗传变异 溶质载体蛋白质类 胆汁淤积 肝内 钠离子牛磺胆酸共转运多肽缺陷病 SLC10A1基因
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糖尿病合并心力衰竭老年患者SGLT2抑制剂应用研究进展
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作者 张倩 董利平 《河北北方学院学报(自然科学版)》 2022年第10期54-57,共4页
糖尿病及心力衰竭是老年人常见病、多发病,由于存在多种共同危险因素,两种疾病常共存,且预后不佳。钠-葡萄糖共转运蛋白2(sodium-glucose cotransport protein 2,SGLT2)抑制剂是一种新型降糖药物,近年大型临床试验证实其不仅可降低血糖... 糖尿病及心力衰竭是老年人常见病、多发病,由于存在多种共同危险因素,两种疾病常共存,且预后不佳。钠-葡萄糖共转运蛋白2(sodium-glucose cotransport protein 2,SGLT2)抑制剂是一种新型降糖药物,近年大型临床试验证实其不仅可降低血糖,还具有改善心力衰竭预后、保护肾功能等作用。对于多病共存的老年患者,合理使用此类药物可有效改善疾病预后。综述了SGLT2抑制剂的药理作用、作用机制、适用范围及老年患者用药注意事项等,以期为此类药物合理应用提供参考。 展开更多
关键词 钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂 老年 糖尿病 心力衰竭 合理用药
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SGLT2i通过HIF1α/NRF2/HO-1通路对缺氧-复氧心肌细胞老化的保护作用
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作者 张瑶 杨少娟 +2 位作者 薛佳佳 江燕丽 刘侃玲 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期301-306,共6页
目的探讨钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)卡格列净在缺氧心肌细胞修复损伤中的作用及机制。方法应用H9C2大鼠心肌细胞构建缺氧-复氧模型,将心肌细胞分为对照组、单纯SGLT2i组、缺氧-复氧组及缺氧-复氧+SGLT2i组。采用蛋白免疫印迹... 目的探讨钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂(SGLT2i)卡格列净在缺氧心肌细胞修复损伤中的作用及机制。方法应用H9C2大鼠心肌细胞构建缺氧-复氧模型,将心肌细胞分为对照组、单纯SGLT2i组、缺氧-复氧组及缺氧-复氧+SGLT2i组。采用蛋白免疫印迹和荧光定量PCR检测心肌细胞老化相关因子SA-β-gal、p16、p21、p53及抗氧化应激相关核因子2相关因子(NRF2)和血红素氧合酶1(HO1)以及具有转录调节作用的低氧诱导因子1α(HIF1α)表达水平,采用微量酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),免疫荧光检测HIF1α和NRF2核定位,双荧光素酶报告基因实验检测HIF1α与NRF2基因的相互作用。结果与对照组相比,缺氧-复氧组心肌细胞老化相关因子SA-β-gal、p16、p21和p53表达水平明显上升,氧化应激水平增强。给予SGLT2i预处理后,老化相关因子表达水平下降,氧化应激水平下调。进一步检测发现,缺氧-复氧组抗氧化应激相关分子NRF2和HO1蛋白表达下降,并伴随HIF1α表达上升;给予SGLT2i后NRF2与HIF1α表达恢复至正常水平;而下调NRF2基因表达则消除了SGLT2i对缺氧心肌细胞的保护作用。双荧光素酶报告基因检测发现,HIF1α可直接与NRF2基因启动子区域结合,并转录调控其表达。结论SGLT2i通过抑制低氧诱导的HIF1α激活,上调NRF2抗氧化通路,改善缺氧-复氧心肌细胞的氧化应激损伤和老化,对心肌细胞起保护作用。 展开更多
关键词 钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂 老化 心肌细胞 低氧诱导因子 核因子2相关因子 氧化应激
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黄蜀葵花总黄酮对肾脏葡萄糖重吸收影响的实验研究
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作者 陈娟 孙红 +4 位作者 黄莉吉 张舒 周希乔 葛静 余江毅 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期691-699,共9页
目的探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对肾小管葡萄糖重吸收的影响。方法24只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成3组:对照组、高脂喂养组(HFD)组及HFD+TFA组,每组8只。体外采用人近端小管上皮HK2细胞,棕榈酸(PA)处理模拟脂毒,并予TFA干预,分别为... 目的探讨黄蜀葵花总黄酮(TFA)对肾小管葡萄糖重吸收的影响。方法24只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分成3组:对照组、高脂喂养组(HFD)组及HFD+TFA组,每组8只。体外采用人近端小管上皮HK2细胞,棕榈酸(PA)处理模拟脂毒,并予TFA干预,分别为对照组、PA组及PA+TFA组。油红O染色评估肾皮质组织及胞内脂质含量,免疫荧光染色、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western blotting检测钠-葡萄糖共转运蛋白2(SGLT2)表达,并评估各组细胞葡萄糖摄取能力。组间比较采用单因素方差分析。结果HFD组小鼠肾小管中脂质沉积明显,而对照组小鼠肾小管中未观察到脂滴。与HFD组相比,HFD+TFA组小鼠肾小管中红染脂滴明显减少(P<0.001)。免疫荧光结果显示,3组小鼠肾小管均表达SGLT2,HFD组及HFD+TFA组小鼠SGLT2蛋白表达水平高于对照组(P<0.05)。然而,HFD+TFA组SGLT2蛋白表达水平较HFD组小鼠明显减弱(P=0.049)。qRT-PCR结果显示,HFD组小鼠SGLT2 mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.001),而TFA干预后SGLT2 mRNA表达水平减弱。细胞实验观察到,TFA可显著减轻PA对细胞的毒性,缓解胞内脂质沉积,减弱SGLT2表达,并抑制细胞葡萄糖摄取能力(P<0.05)。结论TFA减轻肾小管脂质沉积,改善葡萄糖重吸收功能,其肾脏保护效应可能与介导SGLT2调控肾小管葡萄糖重吸收有关。 展开更多
关键词 黄蜀葵花总黄酮 脂质沉积 钠-葡萄糖共转运蛋白2
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肺泡微石症患者磷酸钠协同转运蛋白基因的检测及其变异 被引量:7
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作者 杨洋 乔俊华 +4 位作者 安继红 张越 于庭 郏博 马忠森 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期908-911,共4页
目的 检测3例肺泡微石症患者的磷酸钠协同转运蛋白基因(SLC34A2)基因变异情况,探讨该基因对人肺泡上皮细胞A549系(简称A549细胞)中钙、磷转运的影响。方法采用分段PCR和基因测序的方法对3例肺泡微石症患者的SLC34A2基因进行检测,... 目的 检测3例肺泡微石症患者的磷酸钠协同转运蛋白基因(SLC34A2)基因变异情况,探讨该基因对人肺泡上皮细胞A549系(简称A549细胞)中钙、磷转运的影响。方法采用分段PCR和基因测序的方法对3例肺泡微石症患者的SLC34A2基因进行检测,用Trizol法从新鲜肺组织中获得RNA,逆转录.PCR调取目的基因,构建该基因真核表达载体,质脂体方法转染A549细胞,逆转录-PCR检测SLC34A2mRNA的表达,检测细胞上清液中钙、磷含量。细胞实验分为转染组(5×10^5/孔,4孔)、对照组(5×10^5/孔,1孔)和空白组(5×10^5/孔,1孔),实验重复6次。计量资料采用单因素方差分析,多组间两两比较采用SNK-q检验。结果3例肺泡微石症患者中未发现变异的外显子。获得完整的SLC34A2eDNA,成功构建pcDNA3.1(±)-SLC34A2真核表达载体,并转染A549细胞。转染组SLC34A2mRNA的吸光度值(2.48±0.45)明显高于对照组(0.55±0.07)和空白组(0.60±0.06),差异均有统计学意义(q值分别为16.25和15.78,均P〈0.01);转染组细胞上清液中钙、磷含量[(0.110±0.016)mmol/L和(3.8±0.4)mmol/L]明显低于对照组[(0.254±0.047)mmol/L和(7.3±0.8)mmol/L]和空白组[(0.262±0.041)mmol/L和(7.1±0.4)mmol/L],差异均有统计学意义(q值为8.657~13.892,均P〈0.01)。结论随着SLC34A2基因的表达量增加,细胞外液钙、磷含量随之下降。SLC34A2的变异可能未发生在基因组水平。 展开更多
关键词 钠-磷协同转运蛋白质类 基因 肺泡微石症
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基于SGLT2受体蛋白的新型糖尿病药物的研究进展 被引量:8
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作者 陈福欣 龚频 周安宁 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2012年第8期687-692,共6页
目的钠-葡萄糖共转运蛋白2(SGLT2)是肾小管上负责将尿糖重新吸收为血糖的重要转运蛋白,对该蛋白的抑制可以使糖从血液中转移进入尿液。本文总结了目前各大药物公司在研的SGLT2抑制剂的构效关系及其临床研究进展。方法综述了近年来国内... 目的钠-葡萄糖共转运蛋白2(SGLT2)是肾小管上负责将尿糖重新吸收为血糖的重要转运蛋白,对该蛋白的抑制可以使糖从血液中转移进入尿液。本文总结了目前各大药物公司在研的SGLT2抑制剂的构效关系及其临床研究进展。方法综述了近年来国内外相关报道,对O,C,N-糖苷类和非糖苷类SGLT2抑制剂的药理、药效和药代学进行讨论,并就其临床研究及开发上市状况进行概述。结果 SGLT2抑制剂的结构与其药理活性和代谢稳定性间的关系是该类药物研发的重点。结论 SGLT2抑制剂与降糖作用的构效关系,对开发新一代治疗糖尿病药物具有重要意义。 展开更多
关键词 二型糖尿病 SGLT2 转运蛋白 降糖
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甘草酸单铵保护利福平致大鼠肝损伤的机制初探 被引量:4
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作者 周利婷 宋燕青 +2 位作者 曲晓宇 张四喜 武新安 《中国医院药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期1650-1654,共5页
目的:本文基于肝细胞膜转运体多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein 2,Mrp2)和Na+-牛磺酸钠共转运体(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,Ntcp),初步探究甘草酸单铵(monoammonium glycyrrhizinate,MAG)对利福平... 目的:本文基于肝细胞膜转运体多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance protein 2,Mrp2)和Na+-牛磺酸钠共转运体(sodium taurocholate cotransporting polypeptide,Ntcp),初步探究甘草酸单铵(monoammonium glycyrrhizinate,MAG)对利福平(rifampicin,RIF)致大鼠肝损伤的保护作用及机制。方法:Wistar雄性大鼠随机分为3组:对照组(control组):灌胃等容量的生理盐水;RIF肝损伤组(RIF组):灌胃RIF60 mg·kg-1·d-1;MAG治疗组(MAG+RIF组):灌胃MAG45 mg·kg-1·d-13 h后灌胃RIF60 mg·kg-1·d-1。给药第7,14,21天时,各组分别随机取5只大鼠分离血清测定生化指标;取肝组织做病理切片,观察肝脏组织病理学变化并进行肝组织学活动指数(HAI)评分;采用Western blotting法检测肝组织Mrp2和Ntcp蛋白表达量。结果:与对照组相比,RIF组给药7,14,21 d时,其部分血清生化指标呈明显上升趋势,肝脏病理学HAI分值显著增加(P<0.01);MAG+RIF组血清生化指标与对照组之间无显著差异,与RIF组相比其HAI评分显著降低(P<0.05)。给药7,14,21 d时,RIF组较对照组Mrp2的表达均显著升高(P<0.05),而MAG+RIF组Mrp2的表达均显著低于RIF组(P<0.05)。给药期间,各组Ntcp的表达均无显著差异(P>0.05)。结论:利福平肝损伤机制可能与其上调Mrp2有关,MAG可保护利福平诱导的肝损伤,且其保肝作用可能与其下调Mrp2有关。 展开更多
关键词 利福平 甘草酸单铵 多药耐药相关蛋白2 Na+-牛磺酸钠共转运体
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抗2型糖尿病药物靶标计量分析及趋势研究 被引量:1
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作者 郝博济 刘序 +1 位作者 赵梓辰 杜鹏 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1236-1241,共6页
本文借助Thomson Reuters Pharma信息平台,以不同靶标药物在各研发阶段的数量分布为主要参考指标,辅以相关文献和典型药物资料,对抗2型糖尿病药物的研发现状进行了统计、分析和研究(截至2012年5月),并对其可能的发展趋势和方向做出了判... 本文借助Thomson Reuters Pharma信息平台,以不同靶标药物在各研发阶段的数量分布为主要参考指标,辅以相关文献和典型药物资料,对抗2型糖尿病药物的研发现状进行了统计、分析和研究(截至2012年5月),并对其可能的发展趋势和方向做出了判断和预测。得出以下主要结论:①IR是目前2型糖尿病常用药物普遍采用的靶标,但在研药物靶标正呈现多样化。②GLP-1受体和DPP-IV是新药开发最具潜力的靶标,大批新药项目在研,已上市药物也取得了巨大成功。③PPAR靶标药物已被大量研究用于2型糖尿病的治疗,在研药物关注瞄准两个以上PPAR靶点的多重激动剂,然而,一大批终止研发的PPAR新药项目以及对PPAR药物安全性的忧虑使PPAR靶标药物的研发前景蒙上阴影。④SGLT2靶标药物已有多例进入III期临床试验,距离成功只有一步,考虑到该类药物终止研发的数量较少以及还未发现明显的不良反应,SGLT2靶标药物具有较大的研发空间和良好的发展前景。⑤GK和GPR119是抗2型糖尿病领域的新兴靶标,最高研发阶段为II期临床试验。 展开更多
关键词 胰岛素受体 胰高血糖素样肽-1受体 二肽基肽酶IV 过氧化物酶体增殖物活化受体 钠-葡萄糖协同转运蛋白2 葡萄糖激酶 G蛋白偶联受体119
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吡格列酮经PPARγ/ERK通路刺激胚胎成纤维细胞钠氢交换子的转运
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作者 李月红 王梅 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期692-695,共4页
目的研究吡格列酮对钠氢离子转运体(NHE1)的转运作用及传导通路,探讨噻唑烷二酮类药物引起水肿的机制。方法野生及PPARγ^(-/-)鼠胚胎成纤维细胞分为:对照组(DMEM培养液),ERK抑制剂(10μmol/L PD98059)组,PPARγ拮抗剂(5μmol/L GW9662)... 目的研究吡格列酮对钠氢离子转运体(NHE1)的转运作用及传导通路,探讨噻唑烷二酮类药物引起水肿的机制。方法野生及PPARγ^(-/-)鼠胚胎成纤维细胞分为:对照组(DMEM培养液),ERK抑制剂(10μmol/L PD98059)组,PPARγ拮抗剂(5μmol/L GW9662)组,基因转录抑制剂(5μmol/LActiomycin D)组。测定各组细胞在0.3μmol/L吡格列酮灌注下NHE1的活性,Western blot法测定ERK磷酸化。结果吡格列酮增加野生鼠NHE1活性48.1%±3.1%,其作用被ERK抑制剂及PPARγ拮抗剂阻止,而不被基因转录抑制剂阻止;吡格列酮刺激野生鼠ERK磷酸化,对PPARγ^(-/-)鼠无此作用。结论吡格列酮经PPARγ/ERK通路,不依赖基因转录,刺激鼠胚胎成纤维细胞NHE1的转运,促进钠潴留。 展开更多
关键词 吡格列酮 过氧化物酶体增殖物活化受体 细胞外信号调节激酶 胚胎成纤维细胞 Na^+/H^+离子转运体
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