不同预处理对喀西茄种子萌发及S-诱抗素对幼苗生长的影响

本试验以成熟的喀西茄果实为材料,探究不同预处理对喀西茄种子萌发及不同浓度S-诱抗素对喀西茄幼苗生长的影响,测定发芽率、发芽指数、POD活性、CAT活性及苗高、茎粗等指标。结果表明,在种子萌发预处理试验中,干湿处理2次(A2)能够显著提高喀西茄种子的萌发力和活力,提高种子萌发过程中各项形态指标及生理指标;经浓度为2.0 mL/L的S-诱抗素(S200)处理后的喀西茄幼苗,在苗高、茎粗、主根长、主根粗、POD活性、CAT活性和根系活力均达到最大值。研究表明,该处理方法可有效促进喀西茄幼苗的生长发育。

刺茄中分离的中国番茄黄化曲叶病毒及伴随的卫星DNA分子的全基因组结构

从云南砚山刺茄(Solanum aculeatissimum)上分离到病毒分离物Y322,全序列测定表明,Y322DNA-A全长2730个核苷酸,共编码6个ORF。基因组比较发现,Y322DNA-A与中国番茄黄化曲叶病毒(TYLCCNV)各分离物的同源性最高(88.3%～99.2%),而与其它双生病毒的同源性均在79.6%以下,表明Y322是TYLCCNV的一个分离物。利用DNAβ的特异性引物在Y322中扩增到DNAβ分子(Y322β),序列分析表明,其全长1331个核苷酸,与TYLCCNV伴随的DNAβ的同源性最高,达75.1%～93.1%,而与已报道的其它种类的DNAβ的同源性均低于55.4%。这是首次在刺茄中检测到中国番茄黄化曲叶病毒。

不同浓度赤霉素和双氧水对刺茄种子萌发的影响

刺茄种子在常规条件下很难萌发。为寻找促进刺茄种子萌发的试剂,试验以不同浓度的赤霉素（0-1 000mg/L）和双氧水（0%-3.0%）溶液处理刺茄种子,观察记录每天的发芽数,并从种子的发芽率、发芽势、发芽指数3个指标探讨赤霉素和双氧水对种子萌发的影响。结果表明：双氧水和低浓度赤霉素（0-400mg/L）对刺茄种子的萌发没有影响,而高浓度赤霉素（600-1 000mg/L）能显著提高种子萌发。

喀西茄内参基因实时荧光定量PCR表达稳定性评价

为了筛选在喀西茄(Solanum aculeatissimum)中表达稳定的内参基因,选取7个常用内参基因GAPDH、ACTIN、18sRNA、UBQ、TUA、EF1和CYP,利用实时荧光定量PCR技术,结合GeNorm、NormFinder和RefFinder软件对其在喀西茄不同组织、不同植物生长调节剂处理、非生物和生物胁迫下的表达稳定性进行评价。结果表明,TUA和18sRNA在喀西茄不同组织中的表达稳定性最好,18sRNA和ACTIN在不同植物生长调节剂处理条件下表达水平最稳定,EF1和GAPDH在干旱和盐条件下表达稳定性最好,TUA和EF1在所有喀西茄测试样品组中(包括不同组织、不同植物生长调节剂处理、非生物及生物胁迫)的表达稳定性最高,而CYP和ACTIN在喀西茄不同试验条件下的表达稳定性较差。

喀西茄WRKY基因的分离及其受黄萎病诱导的表达分析

利用已获得的喀西茄(Solanum aculeatissimum)接种黄萎病前后的根部转录组数据库,前期筛选得到了4个与植物WRKY转录因子蛋白一致性较高的Unigene序列。系统进化分析表明,这4个转录因子均含有典型的WRKY结构域,分别属于WRKY蛋白家族的第IC类、IIa类和III类。利用实时荧光定量PCR技术分析了这4个WRKY基因在喀西茄不同组织(根、茎和叶)以及接种黄萎病后根部不同时期的表达情况,结果表明,Unigene6502和Unigene20920在根部的表达量显著高于茎部和叶片,而CL1273.Contig2和CL3641.Contig1在叶片的表达量显著高于根部和茎部。这4个WRKY基因在喀西茄根部接种黄萎病菌后具有不同的表达模式,Unigene6502和Unigene20920接种后呈先上调后下调的表达模式,CL1273.Contig2和CL3641.Contig1分别呈上调和下调的表达模式。