Molecular mechanisms of apoptosis in hepatocellular carcinoma cells induced by ethanol extracts of Solanum lyratum Thumb through the mitochondrial pathway

AIM To explore the induction effects and mechanism of Solanum lyratum Thumb(ST) on human hepatocellularcarcinoma SMMC-7721 cells through the mitochondrial pathway.METHODS The experiments were conducted on three groups: an experimental group (with ST ethanol extracts' concentration being 2.5, 5 and 10 mg/L), a negative control group (with only nutrient solution, 0 mg/L ST ethanol extracts), and a positive control group (2.5 mg/L DDP). The inhibition rate of cell proliferation was checked by using the methyl thiazolyl tetrazolium method, and cell apoptosis was tested by TUNEL method. Furthermore, RT-PCR was used to examine m RNA expression of Fas, Fas L, caspase-8, caspase-3, p53 and Bcl-2 genes.RESULTS Compared with the negative control group, the inhibition and apoptosis rates of the experimental group with different concentrations of ST extracts on human hepatocellular carcinoma SMMC-7721 cells significantly increased(P<0.05). Besides, the m RNA expression of Fas L and Bcl-2 significantly decreased(P<0.05) while the m RNA expression of Fas, caspase-8, caspase-3 and p53 increased significantly. When compared with the positive control group, the experimental groups with 5 mg/L ST ethanol extracts showed effects similar to the positive control group.CONCLUSION ST ethanol extracts induced the apoptosis of hepatocellular carcinoma SMMC-7721 cells through up-regulated Fas, caspase-8, caspse-3 and p53, and down-regulated Fas L and Bcl-2 in the mitochondrial pathway.

HPLC法测定中药白英中薯蓣皂苷元的含量

目的 用HPLC法测定不同来源自英中薯蓣皂苷元的含量。方法 选用Apollo C18色谱柱（4．6mm×250mm．5μm），流动相为乙腈-水（体积比为90：10），检测波长为210nm，柱温为室温。结果薯蓣皂苷元的质量浓度在0．04～0．20g·L^-1。内与峰面积呈良好线性关系，方法 的平均回收率为104．5％（n=9）；不同来源的白英药材中薯蓣皂苷元的含量有较大差异。结论 方法操作简便、准确、灵敏度高，为白英药材质量控制提供了定性和定量依据。

白英提取物诱导人肝癌BEL-7404细胞凋亡作用

目的 探讨中药白英提取物对肝癌BEL 74 0 4细胞系的凋亡作用。方法 用不同浓度的白英提取物处理肝癌BEL 74 0 4细胞 ,通过观察细胞形态、DNA凝胶电泳法研究白英提取物诱导肝癌BEL 74 0 4细胞产生凋亡现象。结果 光学显微镜下可见细胞呈凋亡特征性变化 ,凝胶电泳可见细胞DNA有规律断裂形成梯形图谱。结论 白英可诱导肝癌BEL 74 0

白毛藤全草水提取物诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡作用及其机制研究

目的：探讨survivin、bax基因在白毛藤诱导人胃癌细胞凋亡中的作用。方法：不同浓度白毛藤作用于BGC-823细胞48h后，荧光显微镜观察BGC-823细胞凋亡情况，RT—PCR法检测survivin、bax基因表达量的变化。结果：白毛藤能诱导BGC-823细胞凋亡，并且上调bax和降低survivin表达。结论：白毛藤能促进BGC-823细胞凋亡，其机制可能与激活bax、抑制survivin表达有关。

白英总碱对小鼠Lewis肺癌细胞移植瘤生长的抑制作用

目的探讨白英总碱对小鼠肺癌细胞Lewis移植瘤生长的抑制作用。方法小鼠腹腔接种Lewis肺癌细胞复制肿瘤模型,给予环磷酰胺和不同剂量的白英总碱干预后,测量肿瘤体积和质量,计算肿瘤生长抑制率,并比较不同剂量白英总碱的抗肿瘤作用的强度。结果白英总碱高、中、低剂量组(48,24,12 mg·kg-1)相对肿瘤增殖率分别为79.06%、36.88%、55.59%,抑瘤率分别为32.02%、52.40%、46.08%,其中中剂量组相对肿瘤增殖率作用最明显(P<0.01),并且符合相对肿瘤增殖率<40%有效性的判断标准。结论白英总碱对小鼠肺癌细胞Lewis移植瘤的生长具有抑制作用。

用紫外分光光度计法测定复方白毛藤注射液中硫酸黄连素含量

为了给复方白毛藤制剂有效成分含量检测提供有效方法,采用紫外分光光度法测定了复方白毛藤注射液中硫酸黄连素的含量.结果表明,在332nm波长处硫酸黄连素的吸收度与药物浓度呈良好线性关系,其回归系数为0.9990,被测样品中硫酸黄连素回收率为98.76%,变异系数为0.77%,硫酸黄连素的含量在24h内稳定性好.

白英果红色素的稳定性研究

对温度、金属离子、酸碱、光、氧化剂和还原剂对白英果红色素稳定性的影响进行了研究。结果表明:白英果红色素热稳定性较好,耐酸和弱碱,抗氧化性和抗还原性较好,光照、常见金属离子中Fe3+和Al3+引起白英果红色素的损失较大。

白英提取物抑瘤有效成分的初步筛选

目的从分离白英水提液得到的不同组分中筛选抑瘤作用的主要有效成分,对不同肿瘤细胞体外增殖的抑制作用进行验证,为研究其诱导细胞凋亡机制奠定基础。方法选取人宫颈癌细胞He La、人胃癌细胞BGC-823细胞为研究对象,用阳性对照药(5-Fu)及白英不同组分进行干预。CCK-8法检测药物抑瘤率,并计算IC50值,比较组间药效强度。HE、AO/EB染色及镜下观察给予不同浓度药物处理时细胞数目、形态和细胞凋亡情况的变化。结果白英提取物不同组分均有一定的抗肿瘤作用,其中皂苷元的抑瘤作用最强,以中剂量(0.067 6 mg/mL)效果最好,对2种肿瘤细胞抑瘤率分别达到86.21%和88.92%。结论白英提取物具有抑制肿瘤细胞增殖的活性,能诱导肿瘤细胞凋亡,实验组与阳性对照组比较,差异无统计学意义。

白英中甾体类总生物碱的含量测定研究

目的:建立白英中甾体类总生物碱含量的测定方法。方法:采用醇提-酸醇水解法提取白英中的总生物碱,分离得到甾体类总生物碱,用紫外-可见分光光度法,以澳洲茄胺为对照,溴甲酚绿为显色剂,在412 nm处测定吸光度值,计算白英中甾体总生物碱的含量。结果:澳洲茄胺在1.6μg/m L^9.6μg/m L范围内与吸光度值呈良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率为88.70%~102.2%(n=9),RSD为3.09%~4.96%,不同来源的白英药材中甾体总生物碱的含量有一定的差异。结论:该方法准确、简单、灵敏,适合测定白英药材中甾体类总生物碱的含量,并且可为白英的质量评价提供理论参考。

大孔吸附树脂分离纯化白英果红色素的研究

比较AB-8、S-8、X-5、NKA-9、D-3520、NKA6种吸附剂对白英果红色素类化合物的吸附及脱附性能。在静态吸附试验研究的基础上,筛选出效果较好的X-5树脂进行动态试验研究。结果表明:X-5树脂在室温下对白英果红色素动态吸附-脱附较优的工艺参数为:上柱液自然pH值(5.12),上柱速度3BV/h,溶液处理量6BV/次;脱附剂为95%乙醇,脱附剂的流速3BV/h,脱附剂用量6BV/次。此工艺条件能够满意地分离纯化白英果红色素,树脂可重复使用30次以上。

白英抗肿瘤相关基因及信号通路的研究

白英具有清热利湿、消肿解毒的功效,现代药理学研究表明其具有抗肿瘤、增强免疫、抗氧化等作用。近年来白英在恶性肿瘤疾病中应用较为广泛,其对肺癌、胃癌、肝癌等有一定的临床疗效。现结合近年来的实验研究就白英抗肿瘤的相关基因及信号通路作一综述。

白英水提取物的化学成分研究

目的对茄科中药白英(Solanum lyratum Thunb.)水提取物中的化学成分进行研究。方法利用各种色谱法进行分离,根据理化性质和波谱数据鉴定结构。结果从白英的水提取物中分离得到9个苯丙素类化学成分,分别鉴定为绿原酸(1)、隐绿原酸(2)、新绿原酸(3)、erythro-1,2-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,3-propanediol(4)、threo-1,2-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,3-propanediol(5)、erythro-2,3-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-methoxypropanol(6)、threo-2,3-bis-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-methoxypropanol(7)、丁香脂素(8)和鹅掌楸苷(9)。结论除化合物1外,其余化合物均首次从该植物中分离得到。