胶质细胞内SNARE复合体功能及其与抑郁障碍发生的关系

抑郁障碍是现代人类致残和死亡的一个常见原因,部分患者对现有的抗抑郁障碍药物并不敏感,复发率极高。现有的抗抑郁障碍药物存在许多问题,迫切需要找到一种针对多个靶点的新型抗抑郁药。近年来的研究发现,可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptor,SNARE)复合体与抑郁障碍发生及进展密切相关。该文总结和归纳了胶质细胞内SNARE复合体在抑郁障碍发生过程中的潜在作用机制,并对相关研究进行综述,以期为临床上开发新型的抗抑郁障碍药物提供新的思路。

免疫细胞分泌研究进展

细胞分泌活动涉及一系列复杂的分子活动和信号转导过程 ,它是许多重要生命活动如神经递质的释放、内分泌激素分泌、蛋白质转运等的基础。故而有关细胞分泌活动的研究近年在国际上形成一个新的热点。有关免疫细胞中细胞因子的分泌机制研究的较少 ,将膜电容测量、电化学测量、光学测量、胞内信号分子光解等近年发展起来的生物物理方法引入免疫学领域 ,对研究免疫细胞的分泌调控和信号转导意义重大。

神经末梢突触囊泡相关的调节蛋白

神经末梢突触囊泡释放神经递质是一个受到精细调控的过程,涉及多种蛋白质间的网络状相互作用,包括蛋白复合物的组装和构象调节、突触囊泡的定向性运输、囊泡入坞、膜融合、递质释放以及囊泡膜和蛋白的重摄取等,这一大循环里的每一步都离不开各种相关蛋白的相互作用。该文围绕这些调控蛋白的分子结构、生理功能以及蛋白间的相互作用作一综述。

膜融合的研究进展及其在药物运输方面的应用

膜融合对于生物体的生命活动具有重要的调控作用。细胞内的膜融合在生物体的整个生命周期中发挥了促进细胞内物质运转的作用,病毒和细胞膜的融合可能标志着生物体生命的终结。然而,由于活细胞的复杂性,对细胞内膜融合过程的认识仅局限于少数细胞膜上的蛋白结构,如可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感性因子附着型的蛋白受体(Soluble N-ethyl maleimide sensitive factor attachment protein receptors,SNARE)及其在促进膜融合中的作用。为更好地研究膜融合的机理,常用相关人工模型系统模拟生物膜融合。本文对SNARE促进膜融合的机理、DNA及卷曲螺旋多肽介导的膜融合研究进展,以及膜融合在药物运输等方面的应用进行了概述。

SNARE蛋白复合物在神经疾病与精神病中的作用研究进展

突触传递是神经系统发挥功能的基础,由囊泡介导的物质转运是突触传递的基础。突触传递功能异常是神经与精神疾病的主要发病机制之一,可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体(SNARE)介导的突触囊泡的着位在神经递质释放中发挥关键作用,其异常将导致神经系统功能紊乱。因此,SNARE蛋白复合物与多种神经和精神疾病如癫痫、帕金森病、阿尔茨海默病、精神分裂症、抑郁症等的发生密切相关。阐明SNARE蛋白复合物在神经与精神疾病发病中的具体机制和作用,对神经与精神疾病的防治与药物开发有重要意义。

SNAP-25与神经病理性疼痛的关系研究

神经病理性疼痛(Neuropathic pain,NP)是由神经损伤引起的疼痛,表现为一种慢性、持续的症状,严重影响患者的生活质量。目前神经病理性疼痛的药物治疗效果不佳,且存在明显的不良反应,如阿片类药物具有较强的镇痛作用,但易引起药物成瘾和依赖性等不良反应。所以要想达到理想的治疗效果,探讨神经病理性疼痛的病理生理过程是不可或缺的。神经病理性疼痛的产生可能与兴奋性抑制失衡有关,由囊泡释放的神经递质与多种蛋白质相互作用,参与了疼痛信号的传递。可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感性因子附着型蛋白受体(Soluble N-ethylmaie-sensitive factor attachment protein receptors,SNARE)复合物SNAP-25在囊泡胞吐中起关键作用,通过下调SNAP-25来抑制突触前膜释放伤害性神经递质,进而达到镇痛效果。

YKT6蛋白的结构与功能及其在肿瘤中的研究进展

可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感性因子附着蛋白受体(SNARE)蛋白是一类跨膜蛋白,能够介导突触小泡融合、递质释放和蛋白质转运等多种细胞过程。YKT6是SNARE蛋白家族的一员,参与多种囊泡运输途径,包括分泌、内吞和自噬。此外,YKT6还与肿瘤的发生及进展具有密切联系。全文总结了YKT6蛋白的结构和功能及其在肿瘤发生及进展中的重要作用。

外源性一氧化碳对脓毒症时血小板异常释放的抑制作用及其分子机制

目的探讨外源性一氧化碳（CO）对脓毒症时血小板异常释放的抑制作用及其可能分子机制。方法采集健康成年志愿者空腹肘静脉血，采用差速离心法获得富含血小板血浆（PRP），按随机数字表法分为正常对照组、脂多糖（LPS）组（10mg／LLPS刺激）、无活性外源性一氧化碳释放分子2（iCORM-2）组（10mg／L LPS±50μmol／LiCORM-2干预）、外源性一氧化碳释放分子2（CORM-2）10μmlol／L和50μmol／L组（10mg／L LPS±CORM-2 10μmol／L或50μmol／L干预）。30rain后用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测上清液中血小板源性生长因子BB（PDGF—BB）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）水平；化学荧光素法检测血小板三磷酸腺苷（ATP）水平；流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白P-选择素水平；蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测血小板表面信号分子Toll样受体4（TLR4）表达及关键信号分子蛋白激酶c0亚型（PKC0）和突触融合蛋白结合蛋白1（STXBP-1）磷酸化；免疫共沉淀法检测STXBP-1介导的可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子黏附受体（SNAREs）复合体突触融合蛋白2-突触相关蛋白23-囊泡相关膜蛋白8（STχ2-SNAP23-VAMP8）的形成。结果①与正常对照组相比，LPS刺激后血小板释放PDGF-BB、MMP-2和ATP均显著增加，血小板表面P-选择素表达明显上调[PDGF—BB（μg/L）：127．53±1．78比94．35±5．84，MMP-2（ng／L）：51．87±9．20比35．83±3．17，ATP（μmol／L）：1．288±0．056比0．975±0．010，P-选择素：（3．93±0．19）％比（0．44±0．10）％，均P〈0．05]；10μmol／L和50μmol／LCORM-2干预均能有效抑制LPS诱导血小板释放PDCF—BB、MMP-2、ATP和P-选择素的高表达，并呈剂量依赖性[PDGF—BB（μg，L）：114．68±1．35、97．08±6．14比127．53±1．78，MMP-2（ng／L）：32．67±8．00、24．63±1．63比51．87±9．20，ATP（μmol／L）：0．999±0．015、0．965±0．008比1．288±0．056，P-选择素：（1．95±0．27）％、（0．94±0．11）％比（3．93±0．19）％，均P〈0．05]。②与正常对照组相比，LPS刺激后血小板TLR4表达以及PKC0和STXBP-1的磷酸化水平均显著增加[TLR4（灰度值）：1．21±0．38比0．67±0．06，P-PKC0（灰度值）：1．36±0．20比0．44±0．03，p-STXBP-1（灰度值）：1．13±0．06比0．59±0．04，均P〈0．05]；10μmol／L和50μmol／LCORM-2干预均能有效抑制血小板各指标，并呈剂量依赖性[TLR4（灰度值）：0．76±0．05、0．65±0．04比1．21±0．38，P-PKC0（灰度值）：0．71±0．07、0．47±0．10比1．36±0．20，P-STXBP-1（灰度值）：0．56±0．02、0．48±0．01比1．13±0．06，均P〈O．05]。③与正常对照组相比，LPS刺激后血小板中与STXBP-1耦联的STχ2、SNAP23和VAMP8均显著增加[STχ2（灰度值）：1．35±0．06比0．57±0．04，SNAP23（灰度值）：0．97±0．04比0．30±0．12，VAMP8（灰度值）：1．37±0．12比0．77±0．10，均P〈0．05]；10μmo]／L和50μmol／LCORM-2干预均能够有效抑制血小板SNAREs复合体的形成，并呈剂量依赖性[STχ2（灰度值）：0．77±0．02、0．39±0．03比1．35±0．06），SNAP23（灰度值）：0．41±0．03、0．22±0．08比0．97±0．04，VAMP8（灰度值）：0．85±0．07、0．66±0．07比1.37±0．12，均P〈O．05]。iCORM-2组与LPS组上述各指标比较差异均无统计学意义。结论脓毒症时血小板释放功能异常活跃，CORM-2干预能有效抑制血小板的过度释放，其机制可能与TLR4／PKC0／STXBP-1信号途径介导的SNAREs复合体形成有关。

SNARE／Munc18b复合体介导脓毒症血小板α颗粒释放及CORM-2的干预机制

目的探讨可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体及其调节因子突触融合蛋白结合蛋白b（SNARE/Munc18b）复合体介导的脓毒症血小板α颗粒释放及一氧化碳释放分子Ⅱ（CORM-2）的干预机制。方法采集健康成人肘静脉血，差速离心法分离出富含血小板血浆（PRP），并随机分为对照组、脂多糖（LPS）组（10 mg/L）、LPS＋iCORM-2组（10 mg/L LPS ＋ 50 μmol/L无活性CORM-2），LPS＋L-CORM-2组（10 mg/L LPS ＋ 10 μmol/L CORM-2）、LPS ＋ H-CORM-2组（10 mg/L LPS ＋ 50 μmol/L CORM-2）。各组于37？℃、湿度95%、5% CO2培养箱孵育30 min取上清液，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血小板α颗粒释放物质血小板因子4（PF4）、血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）和基质金属蛋白酶2（MMP-2）含量；流式细胞仪检测血小板P-选择素的表达；透射电镜和激光共聚焦显微镜下观察血小板α颗粒的分布；蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测血小板关键膜融合分子Munc18b及相关SNARE蛋白囊泡相关膜蛋白-8（VAMP-8）、突出相关蛋白-23（SNAP-23）、突出融合蛋白-11（STX-11）的表达；免疫沉淀法检测SNARE/Munc18b复合体的形成。结果与对照组比较，LPS组血小板α颗粒释放PF4、PDGF-BB、MMP-2、P-选择素的量明显升高；而低、高浓度CORM-2能有效抑制LPS刺激后血小板α颗粒的释放〔PF4（μg/L）：7.69±0.58、6.03±0.71比10.13±0.82，PDGF-BB（μg/L）：112.71±1.79、102.91±5.86比128.78±1.39，MMP-2（ng/L） ：32.94±2.73、27.58±3.36比53.26±1.21，P-选择素：（17.14±0.57）%、（15.35±0.68）%比（23.78±0.62）%，均P〈0.01〕，且呈剂量依赖趋势。透射电镜和激光共聚焦显微镜下观察，CORM-2能减少LPS刺激后血小板α颗粒向血小板膜周围分布，并可抑制与包膜融合。与对照组比较，LPS刺激后血小板Munc18b和相关SNARE蛋白表达，以及SNARE/Munc18b复合体形成均显著增加；而低、高浓度CORM-2能有效抑制LPS刺激后血小板Munc18b和SNARE蛋白表达以及SNARE/Munc18b复合体形成（Munc18b/GAPDH：0.80±0.08、0.69±0.01比0.99±0.09，VAMP-8/GAPDH：0.72±0.09、0.50±0.12比1.18±0.14，SNAP-23/GAPDH：1.18±0.22、0.63±0.10比1.90±0.08，STX-11/GAPDH：0.76±0.02、0.57±0.08比1.16±0.23，VAMP-8/Munc18b：0.65±0.09、0.53±0.07比1.21±0.20，SNAP-23/Munc18b：0.85±0.07、0.55±0.09比1.26±0.08，STX-11/Munc18b：0.78±0.05、0.61±0.10比1.39±0.16，均P〈0.01），且呈剂量依赖趋势。iCORM-2则无此作用。结论CORM-2干预能够有效抑制脓毒症时血小板α颗粒的异常释放，并呈剂量依赖趋势，其作用机制可能涉及SNARE/Munc18b复合体的形成。

SNARE蛋白在肿瘤发生发展中的研究进展

可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感性因子附着蛋白受体(soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor attachment protein receptors,SNAREs)是一组高度保守的膜相关蛋白,参与突触神经末梢的物质运输、膜融合和囊泡释放。近年研究表明,SNARE可以通过多种信号和转运途径参与肿瘤发生、发展等过程,包括细胞周期、自噬、凋亡、侵袭性伪足的形成、自分泌及旁分泌因子的运输、以及肿瘤免疫和化疗耐药等。敲除或过表达特定SNARE蛋白会导致细胞功能异常进而影响肿瘤的发生和发展。文章就SNARE蛋白的结构功能以及在肿瘤研究中的进展进行了综述。