松辽黑猪HBEGF基因多态性及其与繁殖性状的关联分析

【目的】分析肝素结合型表皮生长因子样生长因子(heparin-binding EGF-like growth factor,HBEGF)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点在松辽黑猪中的遗传多样性及其与繁殖性状的相关性。【方法】选择90头健康经产松辽黑猪母猪,采用Sanger直接测序法检测HBEGF基因的SNP位点,利用SPSS 26.0软件分析HBEGF基因SNP位点与松辽黑猪繁殖性状(总产仔数、产活仔数、初生重、3周龄重、断奶重、断奶仔猪数和乳头数)的相关性。【结果】在松辽黑猪HBEGF基因第5外显子及第2、3、4、5内含子上共发现22个SNPs位点,其中有8个SNPs位点与繁殖性状存在显著关联。g.142114384 A>G和g.142104389_142104388ins A>G位点存在AA、AG和GG 3种基因型;g.142114375 C>A位点存在CC、CA和AA 3种基因型;g.142111433 C>T位点存在CC和CT 2种基因型;g.142106003 G>A和g.142105707_142105706ins G>A位点存在GG、GA和AA 3种基因型;g.142105965 C>G位点存在CC、CG和GG 3种基因型;g.142105878_142105877ins C>T位点存在CC、CT和TT 3种基因型。卡方适合性检验结果显示,g.142114375 C>A、g.142111433 C>T和g.142104389_142104388ins A>G位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。g.142114384 A>G、g.142114375 C>A、g.142106003 G>A、g.142105878_142105877ins C>T和g.142104389_142104388ins A>G位点均为中度多态(0.25<PIC<0.5),g.142111433 C>T、g.142105965 C>G和g.142105707_142105706ins G>A位点均为低度多态(PIC<0.25)。关联分析结果表明,g.142114384 A>G位点AA基因型个体总产仔数、产活仔数、断奶仔猪数均显著高于GG基因型,GG基因型个体初生重显著高于AG基因型,GG基因型个体乳头数显著高于AA、AG基因型(P<0.05);g.142114375 C>A位点AA基因型个体总产仔数、产活仔数均显著高于CC基因型(P<0.05),AA基因型个体断奶仔猪数显著高于CC、CA基因型(P<0.05);g.142111433 C>T位点CC基因型个体乳头数显著高于CT基因型(P<0.05);g.142106003 G>A位点GG基因型个体乳头数显著高于AA基因型(P<0.05);g.142105965 C>G位点CC、GG基因型个体总产仔数、产活仔数和断奶仔猪数均显著高于CG基因型(P<0.05);g.142105878_142105877ins C>T位点CC、TT基因型个体断奶仔猪数显著高于CT基因型,TT基因型个体乳头数显著高于CC基因型(P<0.05);g.142105707_142105706ins G>A位点AA基因型个体3周龄重和断奶重均显著高于GG基因型(P<0.05);g.142104389_142104388ins A>G位点AG基因型个体总产仔数、产活仔数均显著高于AA基因型(P<0.05)。【结论】HBEGF基因中存在8个SNPs位点,与松辽黑猪总产仔数、产活仔数、初生重、3周龄重、断奶重、断奶仔猪数和乳头数均有显著关联。

发酵中草药副产物对松辽黑猪生长性能、血清生化指标及免疫功能的影响

试验旨在研究不同水平发酵中草药副产物对育肥期松辽黑猪生长性能、血清生化指标、抗氧化能力及免疫功能的影响。选取50头育肥后期的松辽黑猪(93.85±4.11) kg,随机分为5组,每组5个重复,每个重复2头猪。对照组松辽黑猪饲喂基础日粮,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组、试验Ⅳ组分别在基础日粮中添加1%发酵中草药副产物、1%未发酵中草药副产物、3%发酵中草药副产物、3%未发酵中草药副产物。预试期6 d,正式试验期54 d。结果显示,与对照组相比,试验Ⅰ组、试验Ⅲ组松辽黑猪的平均日增重(ADG)分别提高了17.42%、24.69%,料重比(F/G)分别降低了5.05%、10.33%(P<0.05)。试验Ⅰ组、试验Ⅲ组松辽黑猪血清免疫球蛋白A (IgA)含量分别比对照组提高了5.30%和13.49%。与对照组相比,试验Ⅲ组中松辽黑猪血清胰岛素生长因子-1 (IGF-1)含量增加了14.00%(P<0.05),三碘甲腺原氨酸(T3)含量增加了38.19%(P<0.05)。试验Ⅲ组松辽黑猪血清丙二醛(MDA)含量比对照组降低了50.76%(P<0.05)。研究表明,在松辽黑猪育肥期的日粮中添加3%发酵中草药副产物能够提高机体抗氧化能力和免疫水平,增加生长类激素的分泌水平,提高生长性能。

发酵中草药副产物对松辽黑猪屠宰性能和肉品质及经济效益的影响

试验旨在研究不同水平发酵中草药副产物对育肥期松辽黑猪屠宰性能、肉品质及经济效益的影响。试验选取50头育肥后期的松辽黑猪[(93.85±4.11)kg],随机分为5组,每组5个重复,每个重复2头。对照组饲喂基础日粮组,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别饲喂基础日粮+1%发酵中草药、基础日粮+1%未发酵中草药、基础日粮+3%发酵中草药、基础日粮+3%未发酵中草药。预试期6 d,正试期54 d。结果表明:与对照组相比,试验Ⅲ组平均背膘厚显著下降24.21%(P<0.05),其余试验组也呈下降趋势,其中试验Ⅰ组下降9.76%,试验Ⅱ组下降2.62%,试验Ⅳ组下降22.27%,但无显著差异(P>0.05);试验Ⅰ组的熟肉率增加了5.95%(P>0.05),试验Ⅲ组增加了6.57%(P<0.05);氨基酸含量均无显著差异(P>0.05);与对照组相比,试验Ⅰ组油酸含量提高了8.88%(P<0.05),试验Ⅲ组提高10.23%(P<0.05),试验Ⅱ组提高9.52%(P<0.05),试验Ⅳ组提高9.21%(P<0.05);试验组的经济效益均高于对照组,试验Ⅰ组增加82.90元,试验Ⅱ组增加2.00元,试验Ⅲ组增加31.10元,试验Ⅳ组增加5.34元。研究表明,在松辽黑猪育肥期的日粮中添加发酵的人参茎叶、玉竹、甘草等中草药副产物,能够降低猪肉平均背膘厚,提高熟肉率和油酸含量,从而改善猪肉品质,提高其营养价值。结合养殖经济效益综合考虑,在日粮中添加1%发酵中草药副产物最为合适。

松辽黑猪FOXA 2基因第3外显子多态性及其与繁殖性状的关联分析

【目的】分析叉头框家族转录因子A2(forkhead box A2,FOXA2)基因第3外显子多态位点在地方猪种中的遗传多样性及其与松辽黑猪繁殖性状的相关性。【方法】采集90头健康经产松辽黑猪母猪耳组织,采用直接测序法检测FOXA 2基因第3外显子SNP位点,利用SPSS 26.0软件分析FOXA 2基因第3外显子SNP位点多态性(基因型频率、基因频率、遗传纯合度、遗传杂合度、有效等位基因数、多态信息含量)及其与松辽黑猪母猪繁殖性状(总产仔数、产活仔数、乳头数以及仔猪初生重、3周龄重、断奶重、断奶仔猪数)的相关性。【结果】松辽黑猪FOXA 2基因第3外显子共检测出3个SNPs位点,1337 bp处SNP位点(C1337A)上发现CC、CA和AA 3种基因型;1343 bp处SNP位点(C1343G)上发现CC、CG和GG 3种基因型;1626 bp处SNP位点(C1626T)上发现CC、CT和TT 3种基因型。卡方适合性检验表明,松辽黑猪FOXA 2基因第3外显子的C1337A、C1626T位点符合哈迪-温伯格平衡状态(P>0.05),C1343G位点偏离哈迪-温伯格平衡状态(P<0.05)。多态信息含量(PIC)计算显示,C1337A、C1626T位点为中度多态(0.25<PIC<0.50),C1343G位点为高度多态(PIC>0.50)。关联分析结果表明,C1337A位点的CC基因型个体总产仔数显著高于CA基因型(P<0.05),AA基因型个体所产仔猪3周龄重、断奶重极显著高于CC、CA基因型(P<0.01);C1626T位点的CC基因型个体所产仔猪3周龄重、断奶重极显著或显著高于CT、TT基因型(P<0.01;P<0.05),CC基因型个体乳头数显著高于CT基因型个体(P<0.05)。【结论】FOXA 2基因第3外显子存在3个多态性位点,与松辽黑猪总产仔数、3周龄重、断奶重和乳头数均有显著关联性。

松辽黑猪IGF-Ⅰ基因的单核苷酸多态性(SNP)及其与生长和胴体性状的关联性

采用PCR-SSCP技术分析了IGF-Ⅰ基因的5’UTR、外显子4在松辽黑猪群体中的遗传多态性。结果在所扩增的IGF-Ⅰ基因的5’UTR中的2个目的片段均未发现PCR-SSCP遗传多态;在第4外显子中发现PCR-SSCP多态,有2种等位基因A和B,有3种基因型AA型、AB型、BB型。对多态片段的测序分析表明:在IGF-Ⅰ基因第4外显子中存在有1碱基A→G突变。适合性卡方检验表明,该位点的不同基因型频率处于Hardy-Weinberg平衡。用最小二乘法分析IGF-Ⅰ基因第4外显子不同基因型与松辽黑猪生长和胴体性状的相关性,发现IGF-Ⅰ不同基因型对断奶后日增重有显著影响,AA型显著高于AB型和BB型(P<0.01)。AA型猪的瘦肉率显著低于AB型和BB型(P<0.01),而AA型猪的平均背膘厚显著高于AB型和BB型(P<0.01),对其他性状的影响差异不显著。结果表明,松辽黑猪IGF-Ⅰ基因应是影响生长和胴体性状的一个主效基因或与影响这些性状的主效基因紧密连锁。

松辽黑猪雌激素受体基因对部分繁殖性状的影响

以松辽黑猪为研究对象,采用PCR-RFLPs方法检测其雌激素受体(ESR)基因的PvuⅡ多态性,分析了该基因与产仔数及其他繁殖性状之间的关系。结果表明:ESR基因型间总产仔数(TNB)和产活仔数(NBA)差异显著(P<0.05),BB和AA纯合子间TNB和NBA分别相差2.395和2.250头;各基因型在初生窝重、20日龄重、60日龄重之间差异不显著(P>0.05)。

松辽黑猪、大白猪免疫指标和生产性能的比较研究

以松辽黑猪和大白猪为研究对象,在70日龄时采集血液测定白细胞总数、血清IgG、IL-12、IFN-γ含量及中性粒细胞NBT还原力等免疫指标,并测定了猪初生重、断奶重、下网重及180日龄重、180日龄背膘厚、眼肌面积等生产性能指标。结果表明,白细胞总数、中性粒细胞NBT还原力、外周血单个核细胞培养上清IL-12含量和单个核细胞培养上清IFN-γ含量在松辽黑猪和大白猪间差异不显著(P>0.05);松辽黑猪血清IgG含量显著高于大白猪(P<0.05),IL-12和IFN-γ含量极显著高于大白猪(P<0.01);松辽黑猪和大白猪初生重、断奶重、下网重、180日龄背膘厚差异不显著(P>0.05),大白猪180日龄体重极显著高于松辽黑猪(P<0.01)。本试验结果为揭示中外猪种抗病力差异的免疫学机理提供了参考资料。

松辽黑猪H-FABP基因位点多态性研究

为检测松辽黑猪H-FABP基因位点多态性,应用PCR-RFLP技术(HinfI、HaeIII和MspI3种限制性内切酶)检测了62头松辽黑猪5’-上游区和第二内含子的遗传变异情况。结果发现松辽黑猪在MspI多态位点上表现为单一的AA型;而在HinfI多态位点上表现为多态性,等位基因H的基因频率为0.7177,在HaeIII位点上也表现出多态性,等位基因d的基因频率为0.6210。研究结果表明松辽黑猪H-FABP基因5’-上游区和第二内含子存在多态性。

日粮中添加杜仲粉对松辽黑猪生长性能、胴体性状、肉质性状及经济效益的影响

为了研究杜仲粉对育肥后期松辽黑猪生长性能、胴体性状、肉质性状及经济效益的影响,选择育肥后期85 kg左右的松辽黑猪30头,随机分为3组(1个对照组,2个试验组),每组10头。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮的基础上分别添加1%、2%的杜仲粉。通过30 d的舍内饲养试验,对其生长性能、胴体性状、肉质性状、经济效益进行分析。结果表明:与对照组相比,1%杜仲粉添加组仅离心失水率显著降低(P<0.05),其他指标差异不显著,而2%杜仲粉添加组平均日增重、屠宰率、瘦肉率、熟肉率显著提高(P<0.05),pH24显著降低(P<0.05),料重比、脂肪率、黄度(b*)、离心失水率极显著降低(P<0.01)。试验结果表明:饲料中添加2%的杜仲粉可以显著提高育肥猪的生长性能,改善胴体性能,提高肉质性状。饲料中添加1%的杜仲粉盈利最高。

松辽黑猪脏器总RNA提取方法的改进及应用

[目的]改进松辽黑猪脏器总RNA的高效快速提取方法,为检测脏器组织RNA提供基础。[方法]采用液氮研磨,利用Trizol使细胞膜破裂,并通过氯仿、异丙醇、无水乙醇处理,使RNA与杂质分离,得到高质量的RNA。[结果]得到的松辽黑猪脏器总RNA浓度和纯度都比较高,并且未被降解。[结论]该方法提取的RNA质量没有DNA污染、纯度高、没有降解、完整性好,稳定可靠,并且用时少。

松辽黑猪METTL23基因多态性及其与繁殖性状的关联分析

为探究松辽黑猪METTL23基因多态性及其与繁殖性状的关联性,试验选取178头松辽黑猪母猪为研究对象,利用Sanger直接测序法查找METTL23基因外显子1~5的单核苷酸多态性(SNP),使用SPSS 19.0软件分析METTL23基因SNP位点与松辽黑猪繁殖性状(总产仔数、产活仔数、断奶仔猪数、初生重、3周龄重、断奶重、乳头数)的关联性。结果显示,仅在松辽黑猪METTL23基因外显子4发现1个SNP位点,命名为A62G,在A62G位点上检测到3种基因型,分别是AA、AG和GG。GG和G分别为优势基因型和优势等位基因,且A62G位点处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。该位点的遗传纯合度(Ho)为0.6516,高于遗传杂合度(He,0.3484),说明其在松辽黑猪群体中的变异较小;多态信息含量(PIC)为0.2877,属于中度多态位点(0.25<PIC<0.5),说明该遗传标记能够提供一定量的遗传信息。关联分析结果表明,GG基因型个体总产仔数、产活仔数和断奶仔猪数均显著或极显著高于AA基因型个体(P<0.05;P<0.01),总产仔数还显著高于AG基因型个体(P<0.05);AG基因型个体断奶仔猪数显著高于AA基因型个体(P<0.05);初生重、3周龄重、断奶重、乳头数各基因型间差异均不显著(P>0.05)。综上所述,METTL23基因外显子4存在多态性位点A62G,该位点与松辽黑猪产仔数存在显著关联,可作为松辽黑猪产仔数的遗传标记,用于分子育种。

松辽黑猪IGF-Ⅰ基因5′调控区序列特征分析

对松辽黑猪类胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)基因5′调控区进行了T-A克隆和序列测定,在分析序列结构特征的基础上与GenBank中野猪、大白猪、牛、山羊、绵羊进行了比较基因组学和系统进化研究。结果表明:松辽黑猪IGF-Ⅰ基因5′调控区存在C/EBPb、MATal、Oct-1、CF-1等多个潜在的转录因子结合位点,可能与IGF-Ⅰ的转录调控和起始以及特异表达有关。在该非编码序列中,重复序列所占比率为2.22%,不存在SINEs、LINEs、LTR类反转录元件和DNA转座子元件,而发现存在1个(CA)18微卫星位点。在松辽黑猪IGF-Ⅰ基因5′调控区,松辽黑猪与野猪、大白猪、牛、山羊、绵羊各物种间同源性大小分别为99.0%、98.8%、90.7%、91.6%、90.6%。MUPD法构建的分子系统进化树聚类结果表明,野猪与大白猪先聚为一类,再与松辽黑猪聚类形成一个大分支,而山羊和绵羊先聚成一类,再与牛聚类形成一个大分支,然后再与猪的一支汇合在一起。

松辽黑猪血液蛋白质多态性的研究

本研究采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法检测了松辽黑猪28个样本的13个血清蛋白(酶)位点。结果表明:除Alb、Pa2、Cp为单态外,Pa1、Po1、Po2、Tf、Ptf、Akp、Hpx、Am1、Am2、Es均存在多态性,分别受2～4个等位基因控制。卡方检验结果表明,Pa1、Pa2、Ptf、Akp不处于Hardy-Weinberg平衡状态,其余的Po1、Po2、Tf、Am1、Am2、Hpx、Es都处于Hardy-Weinberg平衡状态。松辽黑猪群体内有效等位基因数、遗传杂合度、以及遗传均质度分别为2.077 9、0.508 3和0.128 8。

松辽黑猪×野猪杂交猪H-FABP mRNA基因的组织分布研究

[目的]研究松辽黑猪×野猪杂交猪H-FABP mRNA基因的组织分布,为探明该基因的生理功能提供依据。[方法]采用RT-PCR技术获得松野杂交猪的cDNA,经PCR扩增后对目的片段进行电泳鉴定和测序,检测H-FABP mRNA在松辽黑猪×野猪杂交猪组织中的分布情况。[结果]在选取的皮下脂肪、腹脂、乳腺、背最长肌、臂三头肌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、回肠、十二指肠共12种组织中,H-FABP mRNA均有表达。[结论]H-FABP基因在组织中广泛分布说明了其功能的重要性及多重性。

红曲霉合生元对松辽黑猪血清指标及背最长肌中MSTN、MyoD基因mRNA相对表达量影响

该试验旨在研究不同水平红曲霉合生元对松辽黑猪血清蛋白、血清转氨酶、血脂指标及背最长肌中MSTN、MyoD基因mRNA相对表达量的影响。选60头初始体重为(70.00±2.16)kg的松辽黑猪,随机分为3组,每组5个重复,每重复4头(公母各半)。对照组饲喂基础饲粮,试验A组饲喂添加0.5%红曲酶合生元的基础饲粮,试验B组饲喂添加1.0%红曲酶合生元的基础饲粮,预饲期7d,试验期60d。结果表明:1)与对照组相比,A组与B组的血清TP、GLO水平显著升高(P<0.05),血清GPT水平显著下降(P<0.05);以上指标A组与B组之间无显著性差异(P>0.05)。B组血清TG水平比对照组和A组均显著下降(P<0.05)。A组和B组血清TC水平均比对照组极显著下降(P<0.01),且B组比A组显著下降(P<0.05)。2)与对照组相比,A组和B组MSTN基因mRNA相对表达量均显著下降(P<0.05),MyoD基因mRNA相对表达量均显著升高(P<0.05),ADG与LP也均显著升高(P<0.05);以上指标,A组与B组之间均无显著性差异(P>0.05)。结果表明:育肥期松辽黑猪饲粮中添加红曲酶合生元可以促进机体蛋白代谢,降低血清胆固醇,改善肝脏功能;显著降低背最长肌中MSTN基因mRNA相对表达量,提高背最长肌中MyoD基因mRNA相对表达量;具有提高育肥猪瘦肉率的效果。建议添加量为0.5%。

松辽黑猪与大约克夏配套系生产性能与胴体品质研究

该试验以松辽黑猪为母本,大约克夏为父本,对约松配套系的繁殖性能进行了研究分析,并对子代育肥猪的生产性能、胴体品质以及肉质特性进行了测定分析。结果表明,配套系的繁殖性能不如松辽黑猪,但好于大白猪;生长育肥性能好于松辽黑猪,与大白猪的水平相当;胴体品质达到松辽黑猪的水平,与大白猪接近;肉质方面虽比松辽黑猪略差,但也达到了优质猪肉的水平。该试验表明约松配套系是具有一定潜力、值得培育的新品系。

松辽黑猪染色体组型及显带的研究

采用外周血淋巴细胞培养方法以及C-显带和G-显带技术,对松辽黑猪进行了染色体组型分析及显带研究,并分析了各号染色体的相对长度、着丝点指数及臂比。结果表明,松辽黑猪的染色体数目为2n=38,公猪为3:8,XY;母猪为3:8,XX。松辽黑猪的C-带具有多态性,G-带带型与其他家猪相比没有明显差异。

松辽黑猪、雷香猪、杜长大白猪肉质性状及肌肉营养成分比较研究

为了比较松辽黑猪、雷香猪、杜长大白猪肉质性状及肌肉营养成分,选取松辽黑猪、雷香猪、杜长大白猪进行屠宰,对肉质性状、肌肉氨基酸及脂肪酸含量进行测定,结果表明:松辽黑猪剪切力、肌内脂肪含量显著高于杜长大白猪(P<0.05),熟肉率显著高于雷香猪(P<0.05),雷香猪剪切力、肌内脂肪含量极显著高于杜长大白猪(P<0.01);松辽黑猪和雷香猪肌肉中丙氨酸含量极显著高于杜长大白猪(P<0.01),甘氨酸含量松辽黑猪显著高于雷香猪(P<0.05),极显著高于杜长大白猪(P<0.01);雷香猪亚油酸含量显著低于杜长大白猪(P<0.05)。文章对优质高端黑猪肉生产群体的选择提供了参考。

松辽黑猪繁殖性状的相关及通径分析

对松辽黑猪总产仔数(x1)、产活仔数(x2)、出生均重(x3)、出生窝重(x4)、20日龄窝重(x5)、断奶仔猪数(x6)、35日龄断奶窝重(y)7个繁殖性状进行了通径分析和回归分析。结果表明各个繁殖性状在表型值上都存在不同程度的相关,其中对断奶窝重影响最大的为断奶仔猪数,其次为20日龄窝重、产活仔数及总产仔数。建立最优回归方程为y=20.031–1.958x1+0.405x5+8.

松辽黑猪×野猪杂交猪H-FABP mRNA基因的组织分布研究

1材料与方法 1．1材料松辽黑猪X野猪杂交猪（含野猪血缘50％）组织样品采自吉林省农业科学院畜牧分院，采集的皮下脂肪、腹脂、乳腺、背最长肌、臂三头肌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、回肠、十二指肠共计12种组织样品迅速置于液氮中，实验室-80℃保存。