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东方百合‘Sorbonne’原生质体培养初步研究 被引量:11
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作者 秦晓杰 段华金 +4 位作者 朱永平 王小巧 李琼洁 赵兴富 和凤美 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期600-604,共5页
百合原生质体培养对百合远源杂交育种具有重要意义。本研究以东方百合‘Sorbonne’花托为外植体,诱导胚性愈伤组织,并对其原生质体提取和培养进行初步研究。结果表明:MS+Picloram 3mg/L为胚性愈伤组织诱导最佳培养基;胚性愈伤组... 百合原生质体培养对百合远源杂交育种具有重要意义。本研究以东方百合‘Sorbonne’花托为外植体,诱导胚性愈伤组织,并对其原生质体提取和培养进行初步研究。结果表明:MS+Picloram 3mg/L为胚性愈伤组织诱导最佳培养基;胚性愈伤组织在酶解液为2%纤维素酶R-10+0.5%离析酶R-10+0.05%果胶酶Y23+147mg/L二水合氯化钙+976mg/L2-吗啉乙磺酸+0.6mol/L甘露醇,酶解12h,制备的原生质体产量最高达4×10^5个/mL,活性达52%;在胚性愈伤组织诱导培养基中进行原生质体的悬滴培养、液体培养、固体培养、固液结合培养和看护培养。结果表明,看护培养是最佳培养方法,并在改良MS+Picloram 2mgm的培养基中培养2~3d观察到长细胞壁的原生质体,培养4~6d,可见原生质体的第一次分裂,培养40-45d,观察到原生质体分化成的细胞团。 展开更多
关键词 sorbonne 原生质体 再生细胞 分裂
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Isolation and callus formation of Gracilariopsis bailiniae(Gracilariales, Rhodophyta) protoplasts
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作者 CHEN Haihong CHEN Weizhou +2 位作者 SHI Jingyi CHEN Zepan ZHANG Yi 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2018年第6期2268-2277,共10页
This paper reports the first successful isolation of protoplasts from G racilariopsis bailiniae and their callus formation. The base solution type, concentration of isolating enzymes, concentration of sorbitol, incuba... This paper reports the first successful isolation of protoplasts from G racilariopsis bailiniae and their callus formation. The base solution type, concentration of isolating enzymes, concentration of sorbitol, incubation time, temperature and pH of the enzyme solution were tested to optimize the protoplast yield. The optimized isolation conditions were: 40% base solution 3(deionized water containing 25 mmol/L MESTris and 25 mmol/L CaCl 2 ·2 H 2 O) and 60% crude Marinomonas sp. YS-70 agarase solution, containing 2% w/v cellulase, 1% w/v macerozyme R-10 and 0.4 mol/L sorbitol, with incubation for 4 h at 28°C and pH 6.5. The highest yield of viable protoplasts, which was obtained in these conditions, was(1.75±0.25)×10 6 cells/g fresh weight. Cell wall regeneration of most protoplasts from G. bailiniae was complete within 60 h and the first division of cells happened after ≥3 days. Two division types were observed in the first division of protoplasts from G. bailiniae— asymmetric division and symmetric division. After the first division, the cells underwent a series of divisions to form callus cell masses. 展开更多
关键词 GRACILARIOPSIS bailiniae enzyme marine bacterium protoplast ISOLATION cell division CALLUS
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铁皮石斛叶肉原生质体的分离与培养研究 被引量:11
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作者 詹忠根 徐程 张铭 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 2004年第2期193-196,共4页
对铁皮石斛无菌试管苗叶片原生质体的游离及培养条件进行了研究.结果表明原生质体分离的适宜酶液配比是0.5%Pectinase和1.0%CellulaseOnozukaR-10,渗透压调节剂的浓度为0.5mol/L,以蔗糖作为渗透压调节剂优于甘露醇和葡萄糖,质壁分离处... 对铁皮石斛无菌试管苗叶片原生质体的游离及培养条件进行了研究.结果表明原生质体分离的适宜酶液配比是0.5%Pectinase和1.0%CellulaseOnozukaR-10,渗透压调节剂的浓度为0.5mol/L,以蔗糖作为渗透压调节剂优于甘露醇和葡萄糖,质壁分离处理后的叶片原生质体产量提高了16.6%,存活率提高了14.2%.培养在1/10MS附加2mg/LNAA+0.5mg/L6-BA和多种有机成分培养基上的铁皮石斛无菌苗叶片原生质体,3~5d后开始第一次分裂,30d后长成胚性细胞团.弱光照(1501x)和稍低的温度((21±0.5)℃)适于原生质体的培养. 展开更多
关键词 铁皮石斛 原生质体培养 细胞分裂 分离 兰科植物 中药 叶肉
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铁皮石斛与绞股蓝原生质体融合的初步研究 被引量:13
4
作者 魏小勇 张铭 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期811-814,共4页
目的 探索铁皮石斛与绞股蓝原生质体杂交融合 ,为中药材的改良提供新途径。方法 两种原生质体通过PEG法进行成对融合 ,融合子培养在添加 BA2 mg/L 及 NAA1m g/L 改良的 MS液体培养基中。结果 分离得到了高产量、活力强、纯度高的铁... 目的 探索铁皮石斛与绞股蓝原生质体杂交融合 ,为中药材的改良提供新途径。方法 两种原生质体通过PEG法进行成对融合 ,融合子培养在添加 BA2 mg/L 及 NAA1m g/L 改良的 MS液体培养基中。结果 分离得到了高产量、活力强、纯度高的铁皮石斛及绞股蓝叶肉原生质体。结论 融合获得了有活力的杂种细胞 ,培养 3d后 ,杂种细胞开始分裂 ,共进行了 展开更多
关键词 铁皮石斛 绞股蓝 原生质体 融合 细胞分裂
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提高马铃薯原生质体细胞分裂频率的研究 被引量:8
5
作者 李韬 戴朝曦 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期953-958,共6页
为了提高马铃薯原生质体培养时的细胞分裂频率 ,对原生质体游离、纯化 ,培养过程中的几个重要环节进行了研究。结果表明 :以蔗糖作为渗透压调节剂游离原生质体时 ,原生质体的损伤小、活力好、分裂频率高、原生质体自发融合频率低 ;采用... 为了提高马铃薯原生质体培养时的细胞分裂频率 ,对原生质体游离、纯化 ,培养过程中的几个重要环节进行了研究。结果表明 :以蔗糖作为渗透压调节剂游离原生质体时 ,原生质体的损伤小、活力好、分裂频率高、原生质体自发融合频率低 ;采用看护培养时 ,在同一属内 ,马铃薯物种的异同 ,饲养层愈伤组织与培养细胞的亲缘关系的远近 ,对饲养效果并无显著影响 ;进行单个原生质体培养时加入 1.2 %的马铃薯块茎浸提液可明显提高细胞分裂频率 ; 展开更多
关键词 马铃薯 原生质体 细胞分裂频率
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水稻原生质体细胞学状态与原生质体复壁分裂相关性初探 被引量:2
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作者 向太和 王利琳 +1 位作者 胡江琴 梁海曼 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 2004年第6期679-682,共4页
通过对水稻胚性和非胚性悬浮细胞培养物分别制备的原生质体进行细胞学观察和培养研究,得到如下结果:由酶解制备的胚性原生质体具有较完整的细胞膜、细胞膜上小球状突起较小、细胞质含有丰富的颗粒状内含物,经培养,胚性原生质体多能进行... 通过对水稻胚性和非胚性悬浮细胞培养物分别制备的原生质体进行细胞学观察和培养研究,得到如下结果:由酶解制备的胚性原生质体具有较完整的细胞膜、细胞膜上小球状突起较小、细胞质含有丰富的颗粒状内含物,经培养,胚性原生质体多能进行第1次分裂,并能持续分裂,最终分化出再生植株.而由酶解制备的非胚性原生质体的细胞膜上有裂隙产生、细胞膜上小球状突起较大、细胞质中颗粒状内含物较少、具有明显的大液泡,经培养,仅个别原生质体能以"酵母出芽"式进行不均等分裂,随后细胞自行解体.结果表明,由酶解制备的原生质体细胞膜是否完整,膜上突起的大小以及细胞质颗粒状内含物的多少与原生质体能否正常复壁分裂密切相关. 展开更多
关键词 水稻 原生质体 细胞膜 细胞内含物 细胞壁 细胞分裂
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影响马铃薯叶肉原生质体褐化的因素及AgNO_3对其褐化和分裂的作用 被引量:17
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作者 张淑红 王蒂 王清 《中国马铃薯》 2004年第2期77-81,共5页
影响马铃薯叶肉原生质体褐化的主要因素是6-BA和基因型,还有NAA等其它因素。在相同浓度的6-BA下,同一材料的原生质体褐化率在NAA1 2mg/L时最高,在0 8和1 0mg/L时相近。在相同NAA浓度下,6-BA浓度越高,同一材料的原生质体越容易褐化。原... 影响马铃薯叶肉原生质体褐化的主要因素是6-BA和基因型,还有NAA等其它因素。在相同浓度的6-BA下,同一材料的原生质体褐化率在NAA1 2mg/L时最高,在0 8和1 0mg/L时相近。在相同NAA浓度下,6-BA浓度越高,同一材料的原生质体越容易褐化。原生质体褐化率与基因型也有关。在相同的NAA和6-BA浓度配比下,6个材料的原生质体褐化难易顺序是CW-2-3>CW-1-4>CW-2-7,A-1>82-75>2-10,二倍体野生种的原生质体比双单倍体品系的更容易发生褐化。AgNO3可抑制马铃薯叶肉原生质体的褐化,从而提高细胞分裂频率。在本试验中,0 6mg/LAgNO3抑制效果最好,原生质体分裂频率最高。 展开更多
关键词 马铃薯 叶肉原生质体 褐化 细胞分裂 硝酸银 基因型 抑制作用 NAA 6-BA
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野大麦幼穗原生质体的分离和培养 被引量:6
8
作者 李彦舫 程肖蕊 +1 位作者 张亚兰 庞劲松 《植物学通报》 CSCD 1999年第1期67-71,共5页
以野大麦(Hordeumbrevisubulatum)的幼穗诱导愈伤组织,建立悬浮细胞系,利用胚性悬浮细胞系在不同的酶解条件和不同的酶解液中分离原生质体并进行培养,获得了细胞分裂,形成细胞团。
关键词 野大麦 原生质体 细胞分裂
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野大麦幼根和幼叶悬浮细胞系的原生质体培养 被引量:3
9
作者 程肖蕊 张亚兰 +1 位作者 杨松涛 李彦舫 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 1998年第2期22-26,共5页
以野大麦(Hordeumbrevisubulatum(Trin.)Link)的幼根、幼叶为外植体,诱导愈伤组织,建立悬浮细胞系。利用胚性悬浮细胞系进行质壁分离处理再游离原生质体,在不同的光照条件下进行原生质体培养,并... 以野大麦(Hordeumbrevisubulatum(Trin.)Link)的幼根、幼叶为外植体,诱导愈伤组织,建立悬浮细胞系。利用胚性悬浮细胞系进行质壁分离处理再游离原生质体,在不同的光照条件下进行原生质体培养,并由原生质体再生出小细胞团。 展开更多
关键词 野大麦 原生质体 细胞分裂 育种
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双亚5号亚麻与罗布麻原生质体解离及体细胞杂交 被引量:1
10
作者 姜丽 苗书魁 +1 位作者 计巧灵 朱国丽 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1336-1342,F0002,共8页
【目的】探索双亚5号亚麻与罗布麻原生质体制备、电融合和培养的适宜条件,为进一步深入进行亚麻与罗布麻体细胞杂交育种研究奠定基础。【方法】以已建立的双亚5号亚麻和罗布麻胚性细胞悬浮系为材料,制备原生质体并进行电融合,培养。【... 【目的】探索双亚5号亚麻与罗布麻原生质体制备、电融合和培养的适宜条件,为进一步深入进行亚麻与罗布麻体细胞杂交育种研究奠定基础。【方法】以已建立的双亚5号亚麻和罗布麻胚性细胞悬浮系为材料,制备原生质体并进行电融合,培养。【结果】制备亚麻和罗布麻原生质体的最佳渗透剂分别是5.6%蔗糖和0.7mol/L甘露醇;游离亚麻和罗布麻原生质体的最适酶组合都是0.5%CellulaseOnozukaR-10+1.0%CellulaseOnozukaRS+0.2%PectolyaseY-23;最佳酶解时间分别是4和3h;亚麻细胞最佳继代时间是转瓶后的第3d,在此条件下原生质体存活率均为92.0%,产量分别达到1.24×106和22.4×106个/mL;2种原生质体电融合的最佳参数依次为:AC8v/cm,持续25s—DC1500v/cm,脉冲宽度为60μs,脉冲次数1次—交流电时间为9s,重复次数2次。在此条件下融合率达到20.5%。【结论】亚麻与罗布麻原生质体在一定的条件下可实现体细胞杂交。 展开更多
关键词 亚麻 罗布麻 胚性细胞系 原生质体 电融合 再生愈伤组织
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萱草幼嫩花粉原生质体培养启动细胞分裂的超微结构研究 被引量:4
11
作者 吴燕 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第1期20-25,共6页
萱草(Hemerocallis fulva L.)幼嫩花粉,即后期小孢子原生质体在培养8天时进入有丝分裂或已形成二个细胞。此外,还观察到游离核分裂、无丝分裂、微核形成等现象。这显示了花粉原生质体分裂方式的多样性。在启动分裂时发生一系列变化:如... 萱草(Hemerocallis fulva L.)幼嫩花粉,即后期小孢子原生质体在培养8天时进入有丝分裂或已形成二个细胞。此外,还观察到游离核分裂、无丝分裂、微核形成等现象。这显示了花粉原生质体分裂方式的多样性。在启动分裂时发生一系列变化:如细胞核移位、大液泡消失、细胞质电子密度增加、细胞器增多、质体不含淀粉等。再生的细胞壁含许多小泡,很少纤丝,表现出现有培养条件下壁的形成能力薄弱。这是今后改进培养技术需要特别注意的问题。 展开更多
关键词 萱草 花粉 原生质体 细胞分裂 结构
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外源钙调素对白芷原生质体壁再生和第一次分裂的影响 被引量:7
12
作者 边艳青 孙大业 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1994年第3期293-297,共5页
外源钙调素对白芷原生质体壁再生和第一次分裂的影响边艳青,孙大业(河北师范大学生物系,石家庄050016)关键词:钙调素,细胞壁再生,原生质体第一次分裂自钙调素(CaM)被发现之后,许多工作(Chafouleas等19... 外源钙调素对白芷原生质体壁再生和第一次分裂的影响边艳青,孙大业(河北师范大学生物系,石家庄050016)关键词:钙调素,细胞壁再生,原生质体第一次分裂自钙调素(CaM)被发现之后,许多工作(Chafouleas等1982、1984;Rasmussen... 展开更多
关键词 白芷 细胞壁 调钙蛋白 原生质体
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葡萄原生质体培养中若干因素的研究 被引量:7
13
作者 朱延明 郭殿京 李光玉 《东北农学院学报》 CSCD 1993年第1期17-22,共6页
试验结果表明,处于对数生长期、再生能力强的培养细胞有利于原生质体分离和培养。原生质体分离和初期培养的适宜渗透浓度为0.5M;固体包埋法的效果明显优于液体培养,前者分裂率为后者的3.8倍,达13.8%;外源激素浓度以 B_5基本培养基添加 N... 试验结果表明,处于对数生长期、再生能力强的培养细胞有利于原生质体分离和培养。原生质体分离和初期培养的适宜渗透浓度为0.5M;固体包埋法的效果明显优于液体培养,前者分裂率为后者的3.8倍,达13.8%;外源激素浓度以 B_5基本培养基添加 NAA 2.0mg/L,BA 2.0mg/L,原生质体分裂率最高;葡萄糖取代常规稳压剂甘露醇,效果显著,细胞分裂率是后者的2.6倍。 展开更多
关键词 葡萄 原生质体 培养
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烟草未受精中央细胞及其它胚囊细胞的离体分裂 被引量:1
14
作者 傅缨 孙蒙祥 +1 位作者 杨弘远 周嫦 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第8期778-781,共4页
自70年代中期以来,未传粉子房和胚珠的离体培养已在多种植物中取得成功,得到的单倍体植株来源于胶囊中的卵细胞、助细胞以及反足细胞。而分离的未受精胚囊及其成员细胞的离体培养虽屡经尝试,迄今只有Kranz等诱导了玉米未受精卵细胞分裂... 自70年代中期以来,未传粉子房和胚珠的离体培养已在多种植物中取得成功,得到的单倍体植株来源于胶囊中的卵细胞、助细胞以及反足细胞。而分离的未受精胚囊及其成员细胞的离体培养虽屡经尝试,迄今只有Kranz等诱导了玉米未受精卵细胞分裂形成小愈伤组织,至于中央细胞与其它雌配子体细胞则无离体分裂的报道。本文报道大叶烟草未受精中央细胞首次培养成细胞团及其它胚囊细胞启动离体分裂的实验结果。 展开更多
关键词 烟草 中央细胞 胚囊细胞 分离
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5,6-二氯吲哚乙酸对水稻原生质体培养的影响 被引量:1
15
作者 陈季楚 张栋 +2 位作者 王六发 赵毓橘 夏镇澳 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1993年第2期137-142,共6页
建立了水稻(Kagama dango mochi品种)愈伤组织悬浮细胞系,用以分离原生质体。通过5,6—二氯吲哚乙酸(5,6—Cl_2—IAA),IAA、KT及2,4—D等几种激素和生长调节物质对水稻原生质体培养影响的比较,发现单附加IAA未能诱导细胞分裂,而单附加5,... 建立了水稻(Kagama dango mochi品种)愈伤组织悬浮细胞系,用以分离原生质体。通过5,6—二氯吲哚乙酸(5,6—Cl_2—IAA),IAA、KT及2,4—D等几种激素和生长调节物质对水稻原生质体培养影响的比较,发现单附加IAA未能诱导细胞分裂,而单附加5,6—Cl_2—IAA则诱导形成了再生愈伤组织。表明5.6—Cl_2—IAA 这一氯代生长素在原生质体培养方面具有较大的应用潜力。单附加KT也能诱导形成愈伤组织,表明启动细胞分裂并非需依赖外源生长素类物质,或生长素类物质与细胞分裂素类物质之间的协同作用。 展开更多
关键词 水稻 原生质体培养 二氯吲哚乙酸
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大麦叶肉原生质体的分离与培养初报 被引量:4
16
作者 黄培铭 颜昌敬 《上海农业学报》 CSCD 1990年第4期17-20,共4页
本实验以大麦叶肉原生质体为材料,采用常规原生质体分离培养方法,在含有1.5mg/l2,4-D、0.5 mg/l 6-BA和0.2 mg/l IAA的D_(2α)培养基中诱导了原生质体持续分裂,形成了小愈伤组织,但它未能进一步发育分化产生绿苗。通过对原生质体分离、... 本实验以大麦叶肉原生质体为材料,采用常规原生质体分离培养方法,在含有1.5mg/l2,4-D、0.5 mg/l 6-BA和0.2 mg/l IAA的D_(2α)培养基中诱导了原生质体持续分裂,形成了小愈伤组织,但它未能进一步发育分化产生绿苗。通过对原生质体分离、分裂影响因素的探讨,我们认为材料的生理状态以及遗传背景在培养中起了关键作用。 展开更多
关键词 大麦 叶肉原生质体 分离 培养 细胞
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Mechanisms of Organelle Inheritance in Dividing Plant Cells 被引量:1
17
作者 Michael B Sheahan Ray J Rose David W McCurdy 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2007年第8期1208-1218,共11页
Organelles form essential compartments of all eukaryotic cells. Mechanisms that ensure the unbiased inheritance of organelles during cell division are therefore necessary to maintain the viability of future cell gener... Organelles form essential compartments of all eukaryotic cells. Mechanisms that ensure the unbiased inheritance of organelles during cell division are therefore necessary to maintain the viability of future cell generations. Although inheritance of organelles represents a fundamental component of the cell cycle, surprisingly little is known about the underlying mechanisms that facilitate unbiased organelle inheritance. Evidence from a select number of studies, however, indicates that ordered organelle inheritance strategies exist in dividing cells of higher plants. The basic requirement for unbiased organelle inheritance is the duplication of organelle volume and distribution of the resulting organelle populations in a manner that facilitates unbiased partitioning of the organelle population to each daughter cell. Often, partitioning strategies are specific to the organelle, being influenced by the functional requirements of the organelle and whether the cells are mitotically active or re-entering into the cell cycle. Organelle partitioning mechanisms frequently depend on interactions with either the actin or microtubule cytoskeleton. In this focused review, we attempt to summarize key findings regarding organelle partitioning strategies in dividing cells of higher plants. We particularly concentrate on the role of the cytoskeleton in mediating unbiased organelle partitioning. 展开更多
关键词 Actin cytoskeleton cell division green fluorescent protein-fimbrin ABD2 organelle partitioning protoplast
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应用均匀设计研究电场刺激及培养因素对甘蓝叶原生质体分裂频率的影响
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作者 宋霞 谭远德 +2 位作者 宋明 鲜继凯 王晓佳 《西南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 1997年第2期112-117,共6页
应用均匀设计法探讨了电场刺激及培养因素对甘蓝叶原生质体分裂频率的影响。结果表明 ,电场方向和强度强烈地影响细胞分裂频率。培养成分对细胞分裂频率均有不同程度的影响。均匀设计能筛选最优的植物原生质体培养条件或培养基。结合“... 应用均匀设计法探讨了电场刺激及培养因素对甘蓝叶原生质体分裂频率的影响。结果表明 ,电场方向和强度强烈地影响细胞分裂频率。培养成分对细胞分裂频率均有不同程度的影响。均匀设计能筛选最优的植物原生质体培养条件或培养基。结合“回归 -通径”分析 。 展开更多
关键词 甘蓝 原生质体 细胞分裂 电场 分裂 频率
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