转录因子Sox-5负调控猪S100A12基因表达

本研究旨在确定猪S100A12启动子-1 013^-590区域中起负调控作用的转录因子。首先,通过双荧光素酶报告系统对猪S100A12启动子-1 013^-590区域转录活性进行研究,分别对S100A12启动子-1 013^+598、-931^+598、-830^+598、-711^+598和-590^+598转录活性进行检测。然后对-1 013^-931关键区域进行进一步缺失及突变研究,鉴定该区域负调控S100A12基因的转录因子及其结合位点。结果表明,猪S100A12启动子-1 013^-931区域缺失后,转录活性显著上升,表明该区域存在负调控猪S100A12基因转录因子结合位点。生物信息学手段预测发现,在-1 013^-931区域内存在1个Sox-5,2个GATA-1转录因子结合位点。当转录因子Sox-5结合位点进行缺失及突变时,猪S100A12转录活性显著上升。结果显示转录因子Sox-5负调控猪S100A12基因的表达。

敲低性别决定区Y-box蛋白5对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化的影响

[目的]探讨敲低性别决定区Y-box蛋白5(Sox-5)的表达水平及对胃癌细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。[方法]实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞和正常人胃黏膜上皮细胞中Sox-5 m RNA的相对表达水平;sh-NC和sh-Sox-5质粒转染BGC823细胞,蛋白免疫印迹实验检测Sox-5蛋白表达水平;MTT实验、划痕实验和Transwell实验分别检测BGC823细胞增殖活性、迁移能力和侵袭能力;蛋白免疫印迹实验检测扭曲蛋白(Twist)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。[结果]胃癌细胞中Sox-5 mRNA的相对表达水平高于正常人胃黏膜上皮细胞(P<0.01);与转染sh-NC组相比,转染sh-Sox5质粒组中Sox-5蛋白的相对表达水平降低(1.120±0.142 vs 0.124±0.010,t=9.032,P<0.001);与转染sh-NC组相比,转染sh-Sox-5组细胞增殖活性显著降低(1.32±0.10 vs 0.74±0.06,t=3.514,P=0.005),迁移率能力减弱(46.2%±4.7%vs 17.6%±2.5%,t=9.625,P<0.001),侵袭能力减弱(93.7±9.1 vs 113.7±6.5,t=3.103,P=0.036);敲低Sox-5蛋白表达后Twist和Vimentin蛋白表达减弱,E-cadherin蛋白表达增强(P均<0.001)。[结论]敲低胃癌细胞中Sox-5的表达,可抑制胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT。