斜带石斑鱼sox3基因cDNA的克隆及其时空表达特征分析

采用RACE-PCR方法从斜带石斑鱼的下丘脑SMART cDNA中克隆sox3基因,并研究其时空表达模式。研究结果表明,sox3 cDNA片段全长1152bp,共编码300个氨基酸。该基因在未受精卵和桑椹胚期仅可检测到微弱的转录本,从高囊胚期开始转录,一直到鱼苗1天,都维持着较高的表达水平。在肝和肾等6种组织中均检测不到转录本的存在,而在包括垂体和下丘脑等6种脑组织中可检测到不同强弱的转录本,呈现出很强的中枢神经系统的表达特异性。在未成熟卵巢中可检测到大量转录本的存在,在成熟卵子中可检测到微弱的转录本,而在处于变性期的性腺中检测不到转录本的存在,呈现出很强的雌性性腺特异性。由此我们推断,sox3基因在石斑鱼的中枢神经系统发育和卵子发生过程中起了重要作用。

MicroRNA-193b通过靶向调控SOX3基因对宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨miRNA-193b对宫颈癌细胞Hela增殖、凋亡的作用机制。方法将对数生长期的宫颈癌Hela细胞随机分为miRNA-193b模拟物(miRNA-193b-mimics)组、miRNA-193b模拟物阴性对照(miRNA-193b-mimics-NC)组及对照(Control)组。Real-time PCR检测三组细胞miRNA-193b表达水平;CCK-8法检测Hela细胞的细胞活力;EDU染色和细胞克隆实验检测Hela细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Real-time PCR、Western blot检测SOX3mRNA和蛋白的相对表达水平;双荧光素酶活性实验验证miRNA-193b对SOX3的靶向作用。结果与Control组和miRNA-193b-mimics-NC相比,miRNA-193b-mimics组细胞miRNA-193b表达水平明显增加(P<0.05);细胞活力与增殖能力明显下降,细胞凋亡比例明显升高(P<0.05);SOX3 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因结果显示SOX3为miRNA-193b的靶基因。结论MicroRNA-193b调控宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的作用机制可能与靶向调控SOX3表达有关。

东北虎Sox3和Sox4基因的保守区序列分析

应用特异于 HMG- box区域的兼并引物 ,以基因组 DNA为模板扩增了东北虎的 SOX基因 .在扩增产物中发现一条 2 2 0 bp的扩增带 .经过克隆、序列测定和同源性检索 ,发现一个基因片段与人、小鼠、鸡和爪蟾 Sox3的同源性分别为 95 %、95 %、92 %和 88% ;与人和小鼠 SRY基因的同源性分别为 75 %和 73% .因此该片段应当为东北虎的 Sox3基因片段 ,被命名为 Pt Sox3.另一片段与人、小鼠、爪蟾和大鼠 Sox4的同源性分别为 98%、97%、95 %和 94% ;与人和小鼠 SRY基因的同源性分别为 5 6 %和 5 4%被命名为 Pt

SOX3基因的功能及其突变

Sinclair等人在1990年首次发现了性别决定基因SRY（Sex Determining Region Y gene）,它在人类性别决定上起着关键作用。该基因位于Y染色体短臂拟常染色质区,其开放阅读框包含1个外显子,可编码204个氨基酸的蛋白质。

金钱鱼Sox3基因cDNA克隆及组织表达

金钱鱼是中国重要经济型鱼类,但其人工繁殖难以取得成功。本研究利用cDNA末端快速扩增法(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)克隆了金钱鱼(Scatophagus argus)Sox3基因cDNA全长序列,分析该基因序列在不同物种间的差异,并用RT-PCR半定量方法分析其在雌、雄组织中的表达差异。结果表明:金钱鱼Sox3 c DNA全长1270 bp,包括5’非翻译区(5’-UTR)217 bp、3’非翻译区(3’-UTR)150 bp和开放阅读框(open reading frame,ORF)903 bp,编码300个氨基酸,该氨基酸序列34104位为HMG保守盒。金钱鱼Sox3氨基酸序列与大黄鱼(Larimichthys crocea)的同源性最高,为99.3%,其次是金头鲷(Sparus aurata),为98.7%。Sox3前体蛋白的系统进化树显示,金钱鱼与大黄鱼亲缘关系最近。金钱鱼Sox3基因的组织表达有明显的组织特异性及性别差异,在性腺中表达量最高,雄性个体脑和垂体次之,肌肉、肾脏、心脏和肠有低量的表达,肝脏、脾脏、胃和鳃中未检测到表达;雌性个体在卵巢中观察到表达水平最高,脑、垂体和鳃次之,脾脏、肌肉、肾脏、心脏和肠中有低量的表达,肝脏和胃中未检测到表达。本研究为研究Sox3基因在金钱鱼人工繁殖与养殖产业方面提供理论参考。

Sox1基因在爪蟾早期发育中的时空表达图式(英文)

克隆了非洲爪蟾的Sox1基因并研究了它在非洲爪蟾早期发育过程中的时空表达图式,比较了Sox1—3基因在发育的脑和眼中的表达图式。序列比对分析显示Sox1—3蛋白在其HMG框结构域具有高度的保守性。通过RT-PCR方法分析了Sox1基因在爪蟾早期不同发育时段的表达情况,结果显示Sox1基因从未受精卵到尾芽期均有表达,但表达强度有所差异。原位杂交结果显示,在早期卵裂阶段和囊胚期,Sox1基因主要在动物极表达;从神经板期开始,Sox1基因主要在中枢神经系统和眼原基中表达。在蝌蚪期,Sox1与Sox2、Sox3在脑部和眼睛的表达区域有所不同。对于爪蟾Sox1基因时空表达图式的研究将有助于阐明SoxB1基因家族在脊椎动物神经系统发生过程中的作用。