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Sox30基因敲除致小鼠睾丸间质细胞增殖异常的研究 被引量:1
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作者 唐莹 姜晓 +5 位作者 韩飞 周洋西 崔志鸿 刘晋祎 杨惠芳 曹佳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1063-1073,共11页
目的探讨Sox30基因敲除对小鼠睾丸间质细胞增殖的影响。方法采用HE染色法观察10周龄Sox30基因野生型(Sox30^(+/+))、杂合型(Sox30^(-/+))及纯合缺失型(Sox30^(-/-))小鼠睾丸组织病理形态;采用免疫组化技术检测睾丸组织中间质细胞特异性... 目的探讨Sox30基因敲除对小鼠睾丸间质细胞增殖的影响。方法采用HE染色法观察10周龄Sox30基因野生型(Sox30^(+/+))、杂合型(Sox30^(-/+))及纯合缺失型(Sox30^(-/-))小鼠睾丸组织病理形态;采用免疫组化技术检测睾丸组织中间质细胞特异性表达蛋白3β-HSD的表达水平;采用慢病毒感染及siRNA干扰技术构建Sox30基因过表达及敲低TM3细胞模型,并在此细胞模型基础上分别采用CCK-8法、流式细胞术、RT-qPCR法以及Western blot法检测细胞存活率、细胞周期分布及周期相关基因的mRNA及蛋白表达水平。采用JASPAR数据库预测Sox30与周期相关基因的启动子区结合位点。结果与Sox30^(+/+)和Sox30^(-/+)小鼠比较,HE染色结果显示Sox30^(-/-)小鼠睾丸组织中间质细胞显著增生,同时免疫组化染色发现表达3β-HSD的间质细胞增多。与Vector组相比,Sox30组TM3细胞存活率降低(P<0.05),G1期细胞周期阻滞(P<0.05),同时细胞周期相关基因CyclinD1、Cdk2等mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与Sox30-NC组比较,siSox30-3组TM3细胞存活率增加(P<0.05),G1期细胞周期阻滞恢复(P<0.05),同时细胞周期相关基因CyclinD1、Cdk2等mRNA和蛋白表达水平显著恢复(P<0.05)。JASPAR预测发现CyclinD1、Cdk2的启动子区域均存在Sox30蛋白质可能的结合位点。结论Sox30基因敲除可导致小鼠间质细胞增殖异常,CyclinD1和Cdk2可能是Sox30调控细胞周期的重要靶基因。 展开更多
关键词 sox30 小鼠睾丸间质细胞 TM3细胞 细胞周期
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肺癌中SOX30基因对PKP2基因表达的调控 被引量:2
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作者 马帮靖 郝翔麟 +3 位作者 韩飞 刘晋祎 曹佳 张爱华 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第6期641-646,共6页
目的:探讨 SOX 30基因与 PKP 2基因在肺癌中的表达调控关系。方法:利用TCGA数据库数据分析 SOX 30与 PKP 2在肺癌中的相关性,利用JASPAR数据库分析 PKP 2启动子区SOX30蛋白转录结合位点;利用qRT-PCR检测HBE、A549、H460、H520、H358、H1... 目的:探讨 SOX 30基因与 PKP 2基因在肺癌中的表达调控关系。方法:利用TCGA数据库数据分析 SOX 30与 PKP 2在肺癌中的相关性,利用JASPAR数据库分析 PKP 2启动子区SOX30蛋白转录结合位点;利用qRT-PCR检测HBE、A549、H460、H520、H358、H1975、SPC-A1、95D、LTEP等细胞中 PKP 2的mRNA表达情况,采用qRT-PCR及Western Blot检测H460及H520细胞转染SOX30表达载体后对PKP2的mRNA与蛋白表达的影响,用qRT-PCR检测 SOX 30基因敲除小鼠肺组织中 PKP 2 mRNA表达情况。结果: TCGA数据库数据分析表明在肺腺癌中 SOX 30与 PKP 2表达呈正相关( n =576, r =0.156, P =0.000), PKP 2启动子区存在多个SOX30转录结合位点;肺癌细胞系中 PKP 2 mRNA表达下调,与 SOX 30基因表达趋势一致;过表达 SOX30 后,H460细胞中PKP2 mRNA及蛋白水平显著上调( P <0.05),而H520细胞中PKP2 mRNA及蛋白水平未见显著变化;敲除 SOX 30后,小鼠肺组织中 PKP 2 mRNA表达水平显著下调。结论: SOX 30是调控 PKP 2表达的关键分子, SOX 30 -PKP 2可能在肺腺癌中发挥重要作用。 展开更多
关键词 sox30 PKP2 肺肿瘤 基因表达 转录调控
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Sox30基因在大鼠睾丸发育中的表达与甲基化分析 被引量:1
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作者 马学翔 董严 +5 位作者 韩飞 李小娜 时小燕 陈洪强 郝翔麟 刘晋祎 《实用临床医药杂志》 CAS 2016年第1期5-7,12,共4页
目的分析Sox30基因在大鼠胚胎发育以及性腺中的表达和甲基化情况。方法取大鼠胚胎发育不同时期组织、出生后至73 d雌雄大鼠性腺和成年不同组织,利用RT-PCR分析该基因的表达情况。利用亚硫酸氢钠处理后测序法(BSP)分析Sox30基因甲基化发... 目的分析Sox30基因在大鼠胚胎发育以及性腺中的表达和甲基化情况。方法取大鼠胚胎发育不同时期组织、出生后至73 d雌雄大鼠性腺和成年不同组织,利用RT-PCR分析该基因的表达情况。利用亚硫酸氢钠处理后测序法(BSP)分析Sox30基因甲基化发生情况。结果 Sox30基因在大鼠胚胎发育10.5 d就开始表达;出生后Sos30主要在睾丸中表达,且表达逐渐增加,而在卵巢、子宫中不表达;成年大鼠的脑、心、肝、肾、脾、胰、肺、垂体、肠、肌肉、海马等组织中该基因低表达或者不表达。Sox30表达受甲基化调控,低表达或者不表达组织中该基因明显高甲基化。结论 Sox30基因表达受到其启动子区域甲基化调控,成年大鼠中该基因仅在睾丸中高表达,表明该基因与雄性性别发育以及睾丸的功能维持有关。 展开更多
关键词 sox30基因 DNA甲基化 睾丸
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SOX30基因敲除对雄性小鼠睾丸组织结构及激素分泌的影响 被引量:3
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作者 王平 姜晓 +6 位作者 韩飞 崔志鸿 唐莹 周洋西 刘文斌 曹佳 刘晋祎 《癌变.畸变.突变》 CAS 2020年第5期329-335,共7页
目的:分析SOX30基因敲除后对雄性小鼠睾丸组织结构及激素分泌的影响,探讨SOX30基因在雄性生殖系统中的作用。方法:采用基因重组方法构建SOX30基因敲除小鼠模型,并根据基因型鉴定结果将小鼠分为野生型(WW)、杂合型(KW)和纯合型(KK)共3组... 目的:分析SOX30基因敲除后对雄性小鼠睾丸组织结构及激素分泌的影响,探讨SOX30基因在雄性生殖系统中的作用。方法:采用基因重组方法构建SOX30基因敲除小鼠模型,并根据基因型鉴定结果将小鼠分为野生型(WW)、杂合型(KW)和纯合型(KK)共3组,分别称取各基因型小鼠(2.5月龄)体质量和各脏器质量并计算脏器系数。HE染色后观察各基因型小鼠睾丸及附睾病理改变并测量统计睾丸曲细精管直径。酶联免疫吸附法(ELISA)检测睾丸组织匀浆液中睾酮(T)和抑制素B(INH-B)激素水平。免疫荧光法检测睾丸组织中支持细胞和间质细胞特异性蛋白SOX9和3β-HSD的表达变化。结果:与WW型和KW型比较,KK型小鼠睾丸脏器指数显著降低(P<0.05),曲细精管内生精细胞排列紊乱,可见巨细胞及空泡变性,精子数量显著减少(P<0.05),曲细精管外间质增生明显,附睾内未发现成熟精子。与WW型比较,KK型小鼠曲细精管管腔直径缩小(P<0.05)。与WW型和KW型比较,KK型小鼠睾丸组织匀浆液中T和INH-B水平显著降低(P<0.05)。WW型和KK型小鼠睾丸组织中SOX9蛋白表达阳性细胞数量无明显差异,而KK型小鼠睾丸组织中3β-HSD蛋白表达阳性细胞数量较WW型明显升高(P<0.05)。结论:SOX30敲除可导致睾丸组织出现明显的病理损伤,SOX30参与调控小鼠睾丸T和INH-B激素合成,在维持睾丸的正常功能方面具有重要作用。 展开更多
关键词 sox30基因 基因敲除 雄性 小鼠 生殖
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小鼠生殖细胞特异性转录因子SOHLH1调控Sox30基因表达的机制 被引量:2
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作者 齐婉婧 孙奇 +4 位作者 李媛 张雪 金美玉 何岩 郑志红 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期36-41,共6页
目的SOHLH1(Spermatogenesis-and oogenesis-specific bHLH transcription factor-1)和SOX30(SRY box)是与精子发生相关的转录因子,Sohlh1与Sox30的基因敲除雄鼠均丧失生育能力。出生后7天Sohlh1基因敲除雄鼠DNA芯片显示Sox30表达显著下... 目的SOHLH1(Spermatogenesis-and oogenesis-specific bHLH transcription factor-1)和SOX30(SRY box)是与精子发生相关的转录因子,Sohlh1与Sox30的基因敲除雄鼠均丧失生育能力。出生后7天Sohlh1基因敲除雄鼠DNA芯片显示Sox30表达显著下调,本文探究了早期发育相关转录因子SOHLH1对精子发生后期的关键基因Sox30基因的转录调控作用。方法构建Sox30启动子荧光素酶表达质粒,瞬时共同转染Sox30荧光素酶表达质粒和Sohlh1真核表达质粒并利用荧光素酶活性测定实验检测荧光值。通过染色质免疫共沉淀实验检测SOHLH1与Sox30启动子DNA序列特异序列的结合情况筛选主要激活位点。结果共转染Sohlh1真核表达质粒和Sox30启动子区域荧光素酶质粒的实验组荧光素酶活性高于对照组。SOHLH1与Sox30启动子上的特异性位点结合,在-489 bp位点的结合作用最强。结论精子发生早期重要转录因子SOHLH1可以直接激活顶体形成相关基因Sox30转录,-489 bp(CAGGTG)为主要特异性结合位点,丰富了精子发生中延时翻译表达调控的现象并进行了调控机制的初步探索。 展开更多
关键词 精子发生 sox30 CHIP SOHLH1 小鼠
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SOX30基因调控桥粒基因DSC3抑制肺腺癌的增殖与迁移 被引量:1
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作者 马帮靖 郝翔麟 +4 位作者 韩飞 陈洪强 刘晋祎 曹佳 张爱华 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2018年第3期165-170,175,共7页
目的:探讨SOX30基因对桥粒基因DSC3的表达调控及其在肺腺癌发生中的作用。方法:利用基因功能富集分析(GO分析)获取SOX30调控的重要基因及通路;利用JASPAR数据库预测DSC3启动子区SOX30蛋白结合位点;利用TCGA数据库分析SOX30与DSC3在肺癌... 目的:探讨SOX30基因对桥粒基因DSC3的表达调控及其在肺腺癌发生中的作用。方法:利用基因功能富集分析(GO分析)获取SOX30调控的重要基因及通路;利用JASPAR数据库预测DSC3启动子区SOX30蛋白结合位点;利用TCGA数据库分析SOX30与DSC3在肺癌中表达的相关性,并用逆转录PCR检测A549细胞高表达SOX30后对DSC3 mRNA表达的影响;同时检测SOX30基因敲除小鼠肺组织中DSC3 mRNA的表达情况;利用平板细胞集落形成实验及细胞划痕愈合实验分析DSC3是否参与SOX30对肺腺癌细胞的增殖与迁移抑制。结果:GO分析显示SOX30基因与黏着斑、锚定连接、黏着连接等细胞连接基因表达显著相关;DSC3启动子区存在多个SOX30蛋白结合位点;SOX30与DSC3在肺腺癌中表达正相关(r=0.154,P=0.000);高表达SOX30后,A549细胞中DSC3 mRNA水平较对照组显著上调(P<0.05);敲除SOX30基因后,纯合子(SOX30-/-)小鼠肺组织中DSC3 mRNA水平显著低于杂合子(SOX30+/-)及野生型(SOX30+/+)小鼠(P均<0.01);在高表达SOX30后的A549细胞中,干扰DSC3的表达后将显著减弱SOX30对A549细胞的增殖和迁移抑制(P均<0.05)。结论:SOX30是调控DSC3表达的关键分子,DSC3是SOX30发挥抑癌功能的重要下游基因,SOX30-DSC3调控可能在肺腺癌发生发展中起重要作用。 展开更多
关键词 sox30 DSC3 肺癌 调控 增殖 迁移
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SOX30基因在结直肠癌中的表达与甲基化分析
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作者 史荣辉 韩飞 +6 位作者 董严 张明谦 姜晓 尹俐 刘文斌 曹佳 刘晋祎 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2015年第3期168-171,176,共5页
目的:探讨新发现的抑癌基因SRY盒包含基因30(SOX30)在结直肠癌中的表达及甲基化变化。方法:用逆转录PCR(RTPCR)检测结直肠癌细胞株(HCT8、HCT116和SW480)中SOX30 m RNA的表达,利用去甲基化药物5-Aza-Cd R处理结直肠癌细胞株72h后检测SO... 目的:探讨新发现的抑癌基因SRY盒包含基因30(SOX30)在结直肠癌中的表达及甲基化变化。方法:用逆转录PCR(RTPCR)检测结直肠癌细胞株(HCT8、HCT116和SW480)中SOX30 m RNA的表达,利用去甲基化药物5-Aza-Cd R处理结直肠癌细胞株72h后检测SOX30基因高甲基化与其表达调控的关系。应用甲基化特异性PCR(MSP)检测上述3株结直肠癌细胞株及54例结直肠肿瘤组织和10例癌旁组织SOX30基因的甲基化发生情况,通过硫化测序PCR(BSP)验证结直肠癌组织和癌旁组织SOX30基因的甲基化改变,并对甲基化情况与结直肠癌患者病理特征进行相关性分析。结果:SOX30 m RNA在上述3株结直肠癌细胞株中表达与对照组相比均较低,且均发生明显高甲基化;去甲基化药物处理上述3株细胞株后,SOX30 m RNA的表达明显得到恢复。SOX30基因在大部分结直肠癌组织中均呈现高甲基化状态,甲基化发生率为79.6%(43/54);而在相应的癌旁组织中甲基化检出率较低,仅为20%(2/10)。对结直肠癌患者中SOX30基因甲基化与其临床病理学资料进行相关性分析发现,SOX30基因高甲基化与患者的肿瘤病理分型显著相关(P=0.045),而与患者的性别、年龄、吸烟与否、TNM分期和Ducks分期无显著相关性(P均>0.05)。结论:SOX30基因在结直肠癌中发生明显高甲基化修饰改变,其基因表达水平明显下调,而且其甲基化修饰率与患者肿瘤病理分型相关,提示SOX30可能在结直肠癌的发生过程中起重要作用。 展开更多
关键词 SRY盒包含基因30 DNA甲基化 结直肠癌 甲基化特异性PCR 硫化测序PCR
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Multifaceted roles and functions of SOX30 in human cancer
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作者 Na Sun Cheng Wang +3 位作者 Pingping Gao Rui Wang Yi Zhang Xiaowei Qi 《Cancer Innovation》 2024年第2期11-27,共17页
SRY-box transcription factor 30(SOX30)participates in tumor cell apoptosis in lung cancer.The occurrence of somatic SOX30 mutations,the expression signature of SOX30 in normal and cancer tissues,the correlation of SOX... SRY-box transcription factor 30(SOX30)participates in tumor cell apoptosis in lung cancer.The occurrence of somatic SOX30 mutations,the expression signature of SOX30 in normal and cancer tissues,the correlation of SOX30 with immune cells and immune-related genes,and the clinical significance of SOX30 in various cancers have stimulated interest in SOX30 as a potential cancer biomarker.SOX30 influences drug sensitivity and tumor immunity in specific cancer types.In this review,we have comprehensively summarized the latest research on the role of SOX30 in cancer by combining bioinformatics evidence and a literature review.We summarize recent research on SOX30 in cancer regarding somatic mutations,trials,transcriptome analysis,clinical information,and SOX30-mediated regulation of malignant phenotypes.Additionally,we report on the diagnostic value of SOX30 mRNA expression levels across different cancer types.This review on the role of SOX30 in cancer progression may provide insights into possible research directions for SOX30 in cancer and a theoretical basis for guiding future studies. 展开更多
关键词 cancer progression PROGNOSIS sox30
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The transcription factor Sox30 is involved in Nile tilapia spermatogenesis 被引量:2
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作者 Ling Wei Yaohao Tang +5 位作者 Xianhai Zeng Yueqin Li Song Zhang Li Deng Lingsong Wang Deshou Wang 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2022年第7期666-676,共11页
Spermatogenesis is a complex process in which spermatogonial stem cells differentiate and develop into mature spermatozoa.The transcriptional regulatory network involved in fish spermatogenesis remains poorly understo... Spermatogenesis is a complex process in which spermatogonial stem cells differentiate and develop into mature spermatozoa.The transcriptional regulatory network involved in fish spermatogenesis remains poorly understood.Here,we demonstrate in Nile tilapia that the Sox transcription factor family member Sox30 is specifically expressed in the testes and mainly localizes to spermatocytes and spermatids.CRISPR/Cas9-mediated sox30 mutation results in abnormal spermiogenesis,reduction of sperm motility,and male subfertility.Comparative transcriptome analysis shows that sox30 mutation alters the expression of genes involved in spermatogenesis.Further chromatin immunoprecipitation followed by high-throughput sequencing(Ch IP-seq),Ch IP-PCR,and luciferase reporter assays revealed that Sox30 positively regulates the transcription of ift140 and ptprb,two genes involved in spermiogenesis,by directly binding to their promoters.Our data,taken together,indicate that Sox30 plays an essential role in Nile tilapia spermatogenesis by directly regulating the transcription of the spermiogenesis-related genes ift140 and ptprb. 展开更多
关键词 Nile tilapia sox30 SPERMATOGENESIS Transcriptional regulation
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利用shRNA慢病毒高效敲降雄性小鼠睾丸基因
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作者 龚洁 卜治文 +2 位作者 徐晨 叶岚 谢婕 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第6期749-755,共7页
目的:建立快速、高效制备小鼠睾丸基因敲降的平台。方法:设计和构建靶向睾丸特异性表达基因Sox30转录本的shRNA表达载体(pSliencer-GFP-shSox30)及其对照质粒(pSliencer-GFP-shScramble),与慢病毒颗粒包装后通过网微注射转导至出生24 d... 目的:建立快速、高效制备小鼠睾丸基因敲降的平台。方法:设计和构建靶向睾丸特异性表达基因Sox30转录本的shRNA表达载体(pSliencer-GFP-shSox30)及其对照质粒(pSliencer-GFP-shScramble),与慢病毒颗粒包装后通过网微注射转导至出生24 d小鼠睾丸生精小管管腔,利用免疫荧光等检测慢病毒敲降鼠体内靶向基因的效率及敲降Sox30后对生殖细胞发育的影响。结果:慢病毒处理敲降后,相比对照组小鼠,shSox30病毒敲降组小鼠睾丸组织中Sox30蛋白表达水平显著下调,生精管腔中圆形精子发育阻滞在2~3步,Ⅶ~Ⅷ期生精管腔中无长型精子。结论:shRNA慢病毒有效降低小鼠睾丸靶基因的表达水平,在制备睾丸特定基因敲降动物模型中具有巨大优势。 展开更多
关键词 RNA干扰 动物模型 sox30 小鼠 睾丸
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