转录因子Sp1在肝细胞癌中的表达

目的通过研究转录因子Sp1在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及转化生长因子(TGF)β1对肝癌细胞中Sp1 mRNA转录表达的影响,探讨Sp1在HCC中表达的意义及其在细胞凋亡中的作用。方法免疫组织化学方法对51例HCC组织与10例良性病变而切除的正常肝组织中转录因子Sp1进行蛋白检测;体外培养肝癌细胞株HepG2,施加外源性TGFβ1,逆转录-聚合酶链反应方法检测HepG2细胞中Sp1 mRNA的表达,并用流式细胞仪检测细胞受到干预后的凋亡情况。结果 Sp1蛋白在HCC组织中的表达率明显高于正常肝组织(P<0.01);施加外源性TGFβ1与对照组相比HepG2细胞Sp1mRNA的表达显著降低(P<0.01),且HepG2细胞凋亡率随着TGFβ1浓度的增高而上升。结论 Sp1蛋白在HCC中的过表达在肿瘤发生发展中起一定作用;TGFβ1诱导肝癌细胞凋亡,而Sp1基因的抑制在TGFβ1诱导肝癌细胞凋亡中可能起一定作用。

转录因子Sp1siRNA表达质粒的构建及对Huh-7肝癌细胞增殖的作用

目的:通过转录因子Sp1的siRNA表达质粒作用于Huh-7肝癌细胞动物模型,探讨Sp1在肝癌细胞增殖方面的作用。方法:构建靶向抑制Sp1基因的siRNA表达质粒,转染表达有绿色荧光蛋白的肝癌Huh-7细胞,筛选稳定表达的siRNA转染克隆;Western印迹法检测Sp1的表达变化,CCK8法和裸鼠皮下成瘤实验分别检测转染后Huh-7细胞在体内及体外的增殖情况。结果:Sp1-siRNA表达质粒特异性抑制Huh-7细胞Sp1的表达,筛选后得到稳定的Sp1-siRNA细胞克隆,其细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。裸鼠皮下成瘤实验显示,质粒转染细胞接种21 d时Sp1-siRNA细胞种植瘤平均体积为(82.40±8.61)mm3,明显小于对照组的(160.00±20.27)mm3。结论:Sp1对Huh-7肝癌细胞具有重要的调控作用,siRNA抑制Sp1表达后可在体内外抑制Huh-7肝癌细胞增殖。

转录因子Sp1在肿瘤细胞CD59表达调控中的作用

目的:构建针对Sp1基因siRNA真核表达载体,转染前列腺癌细胞PC-3,研究反式作用因子Sp1对CD59表达的影响。方法:应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,构建含特异性Sp1基因的重组载体pSUPER-siSp1,脂质体法转染前列腺癌细胞,G418筛选建立稳定表达转染基因的细胞株,RT-PCR和Western blot检测转染细胞中Sp1和CD59基因的表达,染料释放试验判断CD59基因抑制后对补体溶破的抵抗作用。结果:成功构建了Sp1基因siRNA真核表达载体,转染PC-3细胞可表达荧光蛋白,稳定转染的PC-3细胞CD59基因的mRNA和蛋白水平降低,染料释放实验表明CD59基因受抑制后对补体溶破的抵抗作用降低。结论:siRNA-Sp1重组载体有效地抑制了CD59的表达,降低CD59的抗补体活性,结果证明反式作用因子Sp1是CD59表达调控中重要的转录因子,为探讨CD59在肿瘤细胞中高表达的研究奠定了基础。

转录因子Sp1在乳腺癌组织中的表达及其预后意义

背景与目的:已知转录因子Sp1参与几乎所有的细胞功能,包括细胞增殖、凋亡、分化和新生物的转化,在恶性肿瘤侵袭与转移中发挥重要作用,但不同来源肿瘤的Sp1表达也不尽相同。本研究旨在探讨Sp1在乳腺癌组织中的表达及其与乳腺癌侵袭、转移及预后的关系。方法:用免疫组化EnVision法检测60例乳腺癌及12例癌旁乳腺组织中Sp1的表达情况。结果:Sp1在乳腺癌组织中的阳性率为71.67%(43/60),在癌旁乳腺组织中的阳性率为33.33%(4/12)。乳腺癌组织中Sp1表达与乳腺癌患者TNM分期呈正相关(r=0.349,P<0.05),与癌组织浸润呈正相关(r=0.407,P<0.01),与淋巴结转移呈正相关(r=0.314,P<0.05)。单因素生存分析显示乳腺癌组织Sp1阳性组的总生存率低于阴性组(分别为41.86%和82.35%,P<0.05)。Cox模型多因素分析显示乳腺癌组织Sp1表达、TNM分期、癌组织浸润及淋巴结转移是影响乳腺癌患者预后的独立因素。结论:Sp1可能参与了乳腺癌的侵袭与转移,是乳腺癌预后不良因素之一;检测Sp1的表达并结合肿瘤浸润和临床分期分析能提高对乳腺癌患者预后判断的准确性。

转录因子Sp1表达与肝癌临床病理特征及预后的关系

目的:通过研究肝癌组织内转录因子Sp1的表达及其与肝癌患者临床病理特征及预后的关系,探讨转录因子Sp1作为肝癌预后预测指标的可行性。方法:对98例根治性切除术的肝细胞肝癌肿瘤组织芯片进行免疫组化检测Sp1的表达情况,分析其与肝癌患者临床病理特征及预后之间的关系。结果:免疫组化结果显示Sp1在肝癌组织中表达明显高于对应正常肝脏组织,在有微血管侵犯的患者中升高尤其明显。进一步分析显示Sp1表达与肝癌患者术后总体生存率呈负相关,而与肝癌患者术后复发率呈正相关。结论:转录因子Sp1在肝癌中明显高表达,可作为肝癌患者预后的独立预测指标。

核转录因子Sp1在二氧化硅活化的Ⅱ型肺泡细胞中的表达及作用

目的 研究二氧化硅（SiO2）刺激的Ⅱ型肺泡细胞（A549）中核转录因子Sp1表达和定位的动态变化，探讨其在矽肺发生发展中的作用。方法 复制SD大鼠矽肺模型，免疫组化检测体内SiO2刺激的Ⅱ型肺泡细胞中核转录因子Sp1蛋白表达的定位及其动态变化；逆转录-聚合酶链反应检测体外SiO2刺激的A549细胞中核转录因子Sp1 mRNA的动态变化；免疫细胞化学、Western印迹检测体外SiO2刺激的A549细胞中核转录因子Sp1蛋白表达的定位及其动态变化。结果 大鼠矽肺模型中，SiO2刺激组与空白对照组相比，Ⅱ型肺泡细胞中核转录因子Sp1蛋白表达上调，于第7-14天达高峰；体外SiO2作用A549细胞30—960min，Sp1 mRNA表达呈现先升后降，峰值位于60min；Sp1总蛋白和核蛋白表达亦呈现先升后降的趋势，总蛋白表达峰值位于120min，核蛋白峰值位于240min；Sp1蛋白于60min开始发生明显的核移位，240min时核移位最明显。结论 SiO2能通过增强Ⅱ型肺泡细胞（A549）中Sp1的表达和核移位，从而在矽肺的发生发展过程中起重要的作用。

MMP-11和转录因子Sp1在结肠癌中的表达及意义

目的检测基质金属蛋白酶-11(MMP-11)和转录因子Sp1在结肠癌中的表达,探讨二者表达的相关性及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测72例结肠癌患者肿瘤组织及20例癌旁正常组织中MMP-11和转录因子Sp1的表达。结果 MMP-11和转录因子Sp1在72例结肠癌中表达的阳性率分别为63.89%(46/72)和66.67%(48/72),与在20例正常结肠组织中表达阳性率(分别为20%和10%)的差异有统计学意义(P<0.05)。MMP-11的过表达与结肠癌的TNM分期、分化程度及淋巴结转移相关(P<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤大小无明显相关性;在结肠癌组织中MMP-11和转录因子Sp1的表达之间呈明显正相关(r=0.45,P<0.01)。结论 MMP-11和转录因子Sp1与结肠癌的生物学行为密切相关,可作为预测结肠癌浸润和转移潜能及评估预后的参考指标之一。

转录因子Sp1在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

0引言 肺癌是全球发病率及死亡率最高的恶性肿瘤[1],5年总体生存率低于15%[2]。肺癌治疗失败的主要原因在于远处转移,且对化疗药物不甚敏感,一线化疗的有效率小于40%[3-4],因此,寻找肺癌治疗的新方法是目前研究的主要方向[5-7]。

转录因子Sp1和VEGF在乳腺癌中的表达和意义

目的:检测转录因子Sp1和VEGF在乳腺癌中的表达,探讨两者表达的相关性及临床意义。方法:采用免疫组织化学方法检测68例乳腺癌患者肿瘤组织及18例癌旁组织中Sp1和VEGF的表达。结果:Sp1和VEGF在68例乳腺癌中表达的阳性率分别为72.05%(49/68)和64.71%(44/68),与在18例正常乳腺组织中表达阳性率(分别为33.3%和16.67%)的差异有统计学意义(P均<0.01)。Sp1的过表达与乳腺癌的TNM分期、脉管浸润及淋巴结转移相关(P<0.05),而与患者的年龄、肿瘤大小、组织学分级无明显相关性;在乳腺癌组织中Sp1和VEGF的表达之间呈明显正相关(P<0.01)。结论:Sp1和VEGF的表达与乳腺癌的生物学行为密切相关,且Sp1高表达与乳腺癌的血管生成及患者的预后相关。

转录因子Sp1与肿瘤关系研究的新进展

Sp1参与了细胞的生长和分化等重要的生命过程,是目前研究极为广泛和系统的转录因子之一。在肿瘤的生长和转移过程中,Sp1可以通过调控癌基因、抑癌基因、细胞周期调控分子和生长相关信号转导通路、血管生成相关因子和细胞的凋亡过程,对各型肿瘤细胞产生重要影响。Sp1的表达水平和活性均受到严格的调控,具体机制包括对Sp1蛋白本身的修饰以及其它分子对Sp1的调控作用等。以Sp1作为靶点的新的肿瘤治疗方法,将会对临床肿瘤化疗策略产生深远的影响。

转录因子Sp1和存活素在乳腺癌中的表达及相关性研究

目的探讨转录因子Sp1和存活素(Survivin)在乳腺癌中的表达及意义并分析两者相关性。方法纳入我院2013年6月—2015年6月确诊为乳腺癌的患者70例,应用免疫组织化学染色的方法检测Sp1和Survivin在70例乳腺癌及20例癌旁正常组织中的表达,并检测两者的表达与乳腺癌临床病理参数的关系。结果 Sp1和Survivin在乳腺癌中表达的阳性率分别为71.43%和78.57%,正常乳腺组织中表达阳性率分别为30%和10%,差异有统计学意义(P<0.05),两者的表达与乳腺癌患者的淋巴结转移、TNM分期、脉管浸润有关(P<0.05);而与患者的年龄、肿瘤大小、组织学分级无相关性(P>0.05);在乳腺癌组织中Sp1和Survivin的表达之间呈正相关(r=0.517,P<0.01)。结论转录因子Sp1和Survivin与乳腺癌的发病密切相关,可能作为临床判断乳腺癌的辅助性指标,二者联合检测对预后的判断具有一定的指导价值。

实验性大鼠矽肺纤维化中核转录因子Sp1的表达及作用

目的初步探讨核转录因子Sp1在实验性矽肺发生发展中的作用。方法复制SD大鼠矽肺模型,用免疫组织化学法检测体内SiO2刺激的肺巨噬细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞等肺纤维化效应细胞中核转录因子Sp1蛋白表达的定位和动态变化。结果大鼠实验性矽肺模型中,SiO2刺激组与空白对照组相比,肺巨噬细胞、肺泡Ⅱ型上皮细胞、肺间质细胞中转录因子Sp1蛋白表达上调,于染尘后第14天达高峰。结论SiO2能上调肺内多种细胞Sp1的表达,Sp1可能在矽肺的发生发展过程中起重要作用。

转录因子Sp1在胰腺癌中的表达及其与预后的关系

目的研究转录因子Sp1在胰腺导管腺癌组织中的表达特征,并探讨其表达对胰腺导管腺癌患者预后的影响。方法采用免疫组织化学技术检测60例胰腺导管腺癌组织Sp1的表达情况,分析该因子的表达与胰腺导管腺癌患者预后的关系。结果Sp1在胰腺导管腺癌组织中的阳性表达率为75%(45/60),伴有门静脉侵犯和神经侵犯患者Sp1阳性表达明显高于不伴有门静脉侵犯和神经侵犯患者,而Sp1的阳性表达和肿瘤的部位、分化程度、淋巴结转移、是否伴有十二指肠侵犯及肿瘤分期无明显相关。Sp1阳性组患者中位生存期12个月,Sp1阴性组患者中位生存期19个月,Sp1阴性组患者生存期长于Sp1阳性组生存期,有显著性差异。结论Sp1在胰腺导管腺癌中呈过度表达和活化,Sp1对胰腺导管腺癌侵犯门静脉和胰周神经具有提示作用,是一个预后不良的指标。

鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子SP-1

目的:鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机理。方法:在鉴定L-plastin启动子近3’端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,寻找调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子,并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子,利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子,并检测切除该片段序列后荧光素酶活性变化。结果:TFSEARCH软件分析表明在距转录起始点-54--41bp处含有SP-1转录因子结合位点GGTGGGGCGGGGA,凝胶滞后实验和超滞后实验表明SP-1是结合于L-plastin启动子3’端该序列的转录因子,删除SP-1结合位点后荧光素酶活性下降。结论:SP-1是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子。

转录因子Sp1和Sp3对JurkatT细胞端粒酶活性的调节作用

目的探讨转录因子Sp1、p3对JurkatT细胞端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)的调节作用。方法用脂质体将Sp1、Sp3表达载体转入JurkatT细胞,用Westernblotting方法检测蛋白表达水平;用端粒酶PCR-ELISA法检测细胞端粒酶活性并用银染显示端粒酶活性梯度;用RT-PCR方法检测hTERTmRNA水平。结果Sp1、Sp3载体转化36h的细胞Sp1、Sp3蛋白水平分别升高59.6%(P<0.01)和36.8%(P<0.05);随着Sp1表达水平的增加,端粒酶活性和hTERTmRNA水平明显增加,增加率分别为38.5%(P<0.05)和25.4%(P<0.05)。而Sp3表达载体对端粒酶活性和hTERTmRNA水平无明显影响。结论转录因子Sp1通过调节hTERTmRNA转录水平而调节JurkatT细胞端粒酶活性,Sp3无此作用。

川西獐牙菜醇提物上调HepG2细胞膜转运蛋白MRP3、核转录因子SP1及核受体CPF、PXR表达

目的体外培养HepG2细胞观察川西獐牙菜醇提物(Swertia mussitii Franch)对多药耐药相关蛋白3(multidrug resistance protein 3,MRP3)、核转录因子SP1(specificity protein 1 transcription factor,SP1)及核受体孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)、CYP7A启动子结合因子(CYP7A promoter-binding factor,CPF)表达的影响。方法用MTT比色法检测川西獐牙菜醇提物的最佳作用浓度,再分别于0、12、24、48、72h刺激HepG2细胞,抽提细胞的RNA、总蛋白和核蛋白,采用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测膜转运蛋白MRP3、转录因子SP1及核受体PXR、CPF在转录与蛋白水平的表达变化。每个时间点设立阴性对照DMSO组和阳性对照熊去氧胆酸(ursodeoxycholic acid,UDCA)组。结果川西獐牙菜醇提物可显著诱导HepG2细胞膜转运蛋白MRP3的mRNA和蛋白水平的高表达,其作用强于UDCA(P<0.05)。川西獐牙菜醇提物也可明显上调核转录因子SP1及核受体PXR的mRNA和蛋白表达水平,作用强于UDCA。对CPF表达的上调作用与UDCA相当(P<0.05)。结论川西獐牙菜醇提物可刺激HepG2细胞膜转运蛋白MRP3上调,且有可能是通过核转录因子SP1及核受体PXR、CPF上调其表达。

阿托伐他汀对HepG2细胞活性氧及转录因子Sp1mRNA表达的影响

目的探讨阿托伐他汀对HepG2细胞增殖、葡萄糖摄取、氧化应激和转录因子Sp1mRNA表达的影响及其分子机制。方法实验分为:对照组;阿伐他汀组。用MTT法检测对细胞增殖的影响;用微量化的葡萄糖氧化酶法检测细胞对葡萄糖的摄取作用;用流式细胞术检测细胞活性氧含量;用RT-PCR方法检测Sp1mRNA表达。结果阿托伐他汀作用48 h后对细胞增殖具有抑制作用(P<0.05);对细胞摄取利用葡萄糖具有促进作用(P<0.05);和对照组比较细胞活性氧含量显著减少(P<0.05);RT-PCR结果表明:转录因子Sp1mRNA表达和对照组比较明显增强(P<0.05)。结论阿托伐他汀对HepG2细胞增殖的抑制和改善葡萄糖利用作用可能与减轻氧化应激有关,可能与通过增强转录因子Sp1的表达导致相关基因的表达而产生的有利作用有关。

骨桥蛋白、转录因子Sp1在不同转移潜能的大肠癌细胞株中的表达

目的了解转录因子Sp1、骨桥蛋白OPN在不同转移潜能的人大肠癌细胞株中的表达。方法以体外建系的大肠癌细胞株SW480、SW620为研究对象,通过Real-time PCR、Western-blot、细胞免疫荧光化学染色方法从mRNA和蛋白水平分别检测Sp1、OPN的表达。结果Real-time PCR的结果提示SW480(Duke’s B期)、SW620(Duke’s C期)两株细胞株都表达Sp1mRNA、OPN mRNA,Western-blot检测Sp1、OPN蛋白在两种大肠癌细胞株中均有表达,SW620细胞株Sp1、OPN表达水平高于SW480(P<0.05)。结论Sp1、OPN在大肠癌细胞株SW480、SW620中均有表达,与大肠癌肿瘤分期、侵袭转移相关。

人成纤维细胞转录因子Sp1Sp3对p16^(INK4a)基因的调控

p16 INK4a是一种细胞周期蛋白依赖激酶 (cdk)的抑制因子 ,它通过抑制cdk4与cdk6的活性 ,使视网膜母细胞瘤抑制蛋白Rb处于低磷酸化状态 ,从而使细胞阻滞于G1期 .对p16 INK4aATG上游 6 2 2bp片段进行序列分析发现 ,该区域富含GC ,其中有 5个GC盒 (分别命名为GC Ⅰ～GC Ⅴ ) .将上述片段插入到荧光素酶报告载体pGL3 Basic ,分别对 5个GC盒进行点突变后转染人胚肺二倍体成纤维细胞 (2BS)发现 ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ位点的突变体显著下调p16 INK4a启动子的活性 ,而Ⅲ、Ⅴ位点突变体无明显作用 .电泳迁移率变动分析 (EMSA)证实 ,GC Ⅰ ,Ⅱ ,Ⅳ能与转录因子Sp1和Sp3结合 ,而且结合条带可被转录因子Sp1和Sp3的抗体所拮抗 .共转染Sp1有助于增加启动子的活性 ,而共转染Sp3则有较弱的抑制作用 ,证明p16 INK4a的转录受到Sp1与Sp3的调控 .

Sp1/Krüppel样转录因子家族研究进展

Spl/Kruppel样转录因子(Spl-like and Kruppel-like tran- scription factors,Spl/KLFs)是参与真核细胞转录的高度相关锌指蛋白,以细胞和启动子特异性方式通过调控富含GC启动子的基因表达,参与调节细胞功能如细胞增生、凋亡、分化和肿瘤形成.