温针疗法联合豨莶草对风湿性关节炎大鼠滑膜细胞活性及SphK1/S1P/S1PR1信号的影响

目的:探讨温针疗法联合豨莶草对风湿性关节炎大鼠滑膜细胞活性及SphK1/S1P/S1PR1信号的影响。方法:将50只大鼠按照随机数字法分为正常组、RA组、温针组、药物组及联合组,各10只。除正常组外其余大鼠均建立RA大鼠模型,建模成功后,温针组进行温针治疗,药物组大鼠灌胃豨莶草提取物,联合组温针治疗后灌胃豨莶草提取物,其余组灌胃同体积的生理盐水。采用排水法检测各组大鼠足部体积;HE染色观察踝关节病理;提取各组滑膜细胞,MTT法检测存活,Hoechst检测凋亡率;免疫印迹检测SPHK1、S1PR1及ERK1/2蛋白水平。结果:与正常组相比,RA大鼠治疗14 d、18 d及21 d的足部体积均升高(P<0.05),与RA组相比,温针组、药物组及联合组大鼠治疗同一时间足部体积均降低(P<0.05),与温针组比较,联合组较(P<0.05);正常组大鼠踝关节面光滑、滑膜完整、无炎症浸润及水肿,RA组大鼠踝关节炎性细胞浸润严重,滑膜组织增厚,关节腔隙狭窄及软骨破坏,温针组及药物组大鼠踝关节炎性浸润减少,滑膜增生降低,与药物组比较,联合组大鼠踝关节滑膜厚度未见增厚,炎性细胞浸润减少;与正常组比较,RA组滑膜细胞存活OD值升高,凋亡率无意义,与RA组比较,温针组存活OD值降低,凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05),与温针组比较,联合组滑膜细胞存活OD值降低,凋亡率升高,差异比较有统计学意义(P<0.05);与正常组比较,RA组SPHK1、S1PR1及ERK1/2蛋白升高(P<0.05),与RA组比较,温针组SPHK1、S1PR1及ERK1/2蛋白均降低(P<0.05),与温针组相比,联合组SPHK1、S1PR1及ERK1/2蛋白更低(P<0.05),其余组别差异无统计学意义(P>0.05)。结论:风湿性关节炎大鼠采用温针疗法联合豨莶草干预可抑制滑膜细胞活性,改善大鼠足部体积,这可能与抑制SphK1/S1P/S1PR1信号转导相关。

SphK1/S1P/S1PR2信号通路促进肌生成:运动改善骨骼肌健康的新视角

背景:近年来,运动改善骨骼肌的健康已成为学者们关注的一个重要研究内容,适宜的运动对骨骼肌具有积极的作用,其中在运动激活鞘氨醇激酶1(sphingosine kinase1,SphK1)/鞘氨醇-1-磷酸(sphingosine-1-phosphate,S1P)/鞘氨醇-1-磷酸受体2(sphingosine-1-phosphate receptor2,S1PR2)信号通路如何改善骨骼肌的健康,正受到科研人员的重视。目的:研究运动经SphK1/S1P/S1PR2信号通路如何改善骨骼肌的健康,探索治疗相关肌肉疾病的新方法,以改善人的骨骼肌健康。方法:检索Web of Science、PubMed、中国知网、万方和维普数据库从建库至今与文章主题相关的文献,以“signaling pathway,SphK1,S1P,S1PR2,skeletal muscle,satellite cell,myogenesis,exercise”为英文检索词,以“信号通路,SphK1,S1P,S1PR2,骨骼肌,卫星细胞,肌生成,运动”为中文检索词,最终纳入69篇文献进行分析。结果与结论:①SphK1/S1P/S1PR2信号通路是一个复杂的调控网络,通过SphK1催化产生的S1P,与S1PR2等受体的相互作用,触发下游信号转导过程,进而调控细胞、组织、器官和系统的多种生物学功能。②SphK1/S1P/S1PR2信号通路能调控卫星细胞增殖和成肌细胞分化,改善肌生成。③文章通过文献资料调研法分析了SphK1/S1P/S1PR2信号通路的生理基础以及运动对其影响的可能性。急性有氧运动可提高骨骼肌中SphK1的表达,人体和动物研究中已证实急性和长期运动均可提高骨骼肌中S1P水平,另外研究表明长期抗阻运动可提高S1PR2在骨骼肌中的表达,部分实验结果表明急性和长期运动对肌肉或者血液中S1P水平无显著影响,出现不同结果的原因可能是选择的研究对象、方式、强度及频率不同,而具体机制尚不明确。④研究认为,运动能够促进SphK1/S1P/S1PR2信号通路在骨骼肌中的表达,调控下游相关信号通路,并且针对这一信号通路的研究可能为骨骼肌疾病的治疗提供新的策略和方法,从而改善骨骼肌健康。⑤未来应深化对SphK1/S1P/S1PR2信号通路与骨骼肌健康关联的研究,进一步揭示其与卫星细胞、成肌细胞的调控关系及与上下游通路的相互作用,挖掘其临床应用价值,制定康复方案时考虑该通路变化,探索不同运动对该通路的影响机制,并将其作为潜在治疗靶点,结合人体肌肉模型提升研究深度和准确性。

槐耳多糖调节SPHK1/S1P/S1PR3信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响

目的:探究槐耳多糖(HP)调节SPHK1/S1P/S1PR3信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:MTT检测槐耳多糖(0、25、50、100、200、400μg/mL)处理的宫颈癌细胞活力,筛选最佳药物浓度。实验分为对照组(Control组)、槐耳多糖低、中、高浓度组(HP-L、HP-M、HP-H组)和槐耳多糖高浓度+SphK1激活剂K6PC-5组(HP-H+K6PC-5组),观察细胞增殖、迁移和侵袭情况;western blot检测SPHK1、S1P、S1PR3、Snail、N-cadherin、E-cadherin蛋白水平。结果:处理24、48、72h后,与0μg/mL比较,50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL和400μg/mL的HP处理的细胞活力显著降低(P<0.05)。HP-L组、HP-M组和HP-H组细胞Edu阳性率、侵袭细胞数、划痕愈合率及Snail、N-cadherin、SPHK1、S1P、S1PR3水平显著低于Control组(P<0.05),E-cadherin水平显著升高(P<0.05)。HP-H+K6PC-5组细胞Edu阳性率、侵袭细胞数、划痕愈合率及Snail、N-cadherin、SPHK1、S1P、S1PR3水平显著高于HP-H组(P<0.05),E-cadherin水平显著降低(P<0.05)。结论:HP可能通过抑制SPHK1/S1P/S1PR3信号通路抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移。

阿芬太尼调节SphK1/S1P信号通路对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响

目的探究阿芬太尼(ALF)调节鞘氨醇激酶1(SphK1)/1-磷酸鞘氨醇(S1P)信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌纤维化的影响。方法取雄性SD大鼠,采用左冠状动脉前降支结扎法构建AMI模型,并将造模成功的大鼠随机分为AMI模型组(Model组)和低剂量ALF组(ALF-L组,予0.25 mg/kgALF)、高剂量ALF组(ALF-H组,予0.5 mg/kgALF)、高剂量ALF+SphK1激活剂组(ALF-H+K6PC-5组,予0.5 mg/kgALF+1μg/g K6PC-5),同时设置仅进行开/关胸操作而不作左冠状动脉前降支结扎的假手术组(Sham组),每组15只。各药物组大鼠腹腔注射相应药液,每天1次,连续4周。末次给药12 h后,检测各组大鼠的心功能指标[左室收缩压(LVSP)、左室射血分数(LVEF)、左室收缩期内径(LVSD)、左室短轴缩短率(LVFS)],观察其心肌梗死情况、心肌组织病理改变和纤维化程度,检测其血清脑钠肽(BNP)、心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)水平以及心肌组织中Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、collagenⅢ、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、SphK1、S1P蛋白的表达水平。结果与Sham组比较,Model组大鼠心肌组织细胞排列紊乱,可见大量炎症细胞浸润;LVSP、LVFS、LVEF均显著降低(P<0.05);LVSD,心肌梗死面积、心肌组织胶原容积分数,血清BNP、cTnⅠ水平,心肌组织中collagenⅠ、collagenⅢ、MMP-2、SphK1、S1P蛋白的表达水平均显著升高或增大(P<0.05)。与Model组比较,ALF各剂量组大鼠心肌组织病理改变和纤维化程度均有所改善或减轻,ALF-H组大鼠各定量指标均显著改善且显著优于ALF-L组(P<0.05);K6PC-5可显著逆转高剂量ALF对大鼠上述各定量指标的改善作用(P<0.05)。结论ALF可减轻AMI大鼠心肌纤维化,改善其心功能,该作用可能与抑制SphK1/S1P信号通路有关。

S1PR1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨1-磷酸神经鞘氨醇受体(sphingosine-1-phosphate receptor 1,S1PR1)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:回顾性分析具有完整临床病理资料的胃癌患者328例,选用免疫组化方法检测S1PR1的表达,并分析其与胃癌临床病理特征和预后的关系。结果:S1PR1在临床Ⅰ+Ⅱ期组织中阳性率为55.3%,在临床Ⅲ+Ⅳ期组织中阳性率为70.2%,两者差异具有统计学意义(P<0.05),S1PR1与胃癌淋巴结转移、肿瘤最大径之间具有统计学差异(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤分化程度、Lauren分型无统计学差异。S1PR1阳性表达者相比阴性表达者总生存期较短,差异具有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中S1PR1的表达明显高于癌旁组织(P<0.05)。结论:S1PR1与胃癌患者的临床分期及肿瘤淋巴结转移密切相关,S1PR1阳性表达与患者预后较差有关,这为未来胃癌的治疗提供了新的思路。

S1PR2、ApoH、Let-7d在主动脉夹层中的表达及临床意义分析

目的分析S1PR2、ApoH、Let-7d在主动脉夹层中的表达及临床意义。方法选择2021年1月~2023年9月在南阳市中心医院利用胸腹主动脉CTA确诊主动脉夹层患者60例作为研究组,另选取同时期50例健康体检者作为对照组,以数字减影血管造影检查结果为金标准,将研究组患者按照病情严重程度分为轻度组(n=21)、中度组(n=19)、重度组(n=20)。比较2组人群S1PR2、ApoH、Let-7d表达、不同程度下各组人群S1PR2、ApoH、Let-7d表达、各种检测方式与三者联合检测检测对比、ROC曲线分析S1PR2、ApoH、Let-7d及三者联合诊断价值、S1PR2、ApoH、Let-7d水平与主动脉夹层疾病中的相关性。结果与对照组相比,研究组人群S1PR2、Let-7d表达较低、ApoH表达较高(P<0.05);重度组人群S1PR2、Let-7d表达均低于轻度、中度人群,重度组人群ApoH表达高于轻度、中度人群;本次研究中使用S1PR2阳性为5例、ApoH阳性为6例、Let-7d阳性为4例均低于联合检测阳性例数;三者联合AUC值(0.743)均高于S1PR2(0.552)、ApoH(0.343)、Let-7d(0.493);且三项联合灵敏度、特异度、准确度较高(P<0.05);以S1PR2、ApoH、Let-7d与主动脉夹层疾病中的相关性分析,S1PR2与主动脉夹层疾病的相关性呈现出负相关(r=-5.137,P=0.027)、ApoH与主动脉夹层疾病的相关性呈现出正相关(r=4.211,P=0.044)、Let-7d与主动脉夹层疾病的相关性呈现出负相关(r=-6.291,P=0.016)。结论S1PR2、ApoH、Let-7d在主动脉夹层疾病中的表达水平存在一定的相关性,将这三种指标结合起来,能够指导主动脉夹层疾病治疗及预后评估判断提供一定的理论基础。

GSTP1通过调控STAT3信号通路促进乳腺癌细胞增殖与阿霉素耐药

目的 探讨谷胱甘肽S-转移酶P1(GSTP1)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与阿霉素耐药性的影响及其作用机制。方法 Western blotting检测野生型乳腺癌细胞MCF-7和阿霉素耐药乳腺癌细胞MCF-7/ADR中的GSTP1表达量,通过在MCF-7细胞中转染Flag-GSTP1质粒过表达GSTP1,在MCF-7/ADR细胞中转染GSTP1敲低慢病毒(shGSTP1)干扰GSTP1表达;平板克隆形成实验、CCK-8法和流式细胞术检测转染后乳腺癌细胞的增殖能力、阿霉素耐药性及凋亡水平的变化。Western blotting检测GSTP1表达水平的变化对STAT3通路激活的影响。结果 GSTP1在MCF-7细胞中表达量极低,且显著低于MCF-7/ADR细胞系。GSTP1过表达的MCF-7/ADR细胞克隆形成数量显著多于野生型MCF-7细胞(P<0.05)。过表达GSTP1显著提升了MCF-7细胞的增殖能力,而在MCF-7/ADR细胞系干扰GSTP1表达水平后显著抑制了细胞增殖能力(P<0.05)。CCK-8结果显示,在0.1、1、10、50μmol/ml不同浓度的阿霉素处理下,GSTP1表达水平与MCF-7细胞对阿霉素的耐药性呈正相关(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,GSTP1过表达组(Flag-GSTP1)和对照组(Flag)的凋亡率分别为(11.41±1.16)%和(21.1±1.72)%,GSTP1过表达显著抑制了阿霉素诱导的细胞凋亡(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,GSTP1的过表达激活了STAT3信号通路,同时在MCF-7/ADR细胞系中抑制STAT3显著降低了GSTP1的表达水平(P<0.05)。结论 GSTP1通过上调STAT3表达调节乳腺癌细胞MCF-7的增殖能力和对阿霉素的耐药性。

S1P/S1PR1信号通路通过调控ROS/NLRP3对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞上皮间充质转化的影响

目的探究S1P/S1PR1信号通路对高糖诱导的大鼠肾小管上皮细胞上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响及其可能的作用机制。方法采用不同浓度葡萄糖处理细胞,ELISA法检测细胞内S1P表达,Western blot检测S1PR1蛋白表达;将细胞分为正常对照组、HG组及HG+siS1PR1组,RT-PCR检测细胞E-cadherin、Vimentin、Fibronectin及Twist mRNA的表达,Western blot检测E-cadherin、α-SMA、Vimentin、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白表达,流式细胞术检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;将细胞分为正常对照组、S1P组及S1P+siS1PR1组,Western blot检测Vimentin、Snail、α-SMA、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白表达,荧光显微镜测定ROS水平。结果ELISA结果显示,高糖刺激下细胞内S1P含量明显升高。Western blot结果显示,30 mmol·L^(-1)浓度时S1PR1蛋白表达量与对照组相比明显升高;阻断S1PR1后可以抑制高糖诱导的Fibronectin、Vimentin及Twist mRNA表达,上调E-cadherin mRNA的表达,Western blot结果显示,E-cadherin蛋白表达升高,Vimentin,α-SMA蛋白表达下降,同时可抑制细胞内ROS的产生和NLRP3,ASC,NF-κB蛋白水平;加入S1P激活剂后细胞内ROS水平,Vimentin、α-SMA、Snail、NLRP3、ASC及NF-κB蛋白水平表达均升高,阻断S1PR1后表达均降低。结论高糖能诱导肾小管上皮细胞EMT,其机制可能与S1P/S1PR1信号通路作用于ROS/NLRP3轴有关。

S1P信号通路在眼部疾病的研究进展

鞘脂代谢广泛参与不同细胞的功能调控,其在眼组织中也起重要作用。1-磷酸鞘氨醇(S1P)是鞘脂代谢的终末产物,并已经证实在眼科疾病的发生和发展中起重要的作用。S1P信号通路广泛存在于眼部各类细胞中,参与调控细胞增生、分化、迁移和凋亡等过程。S1P通过与相应受体结合激活多种信号通路,进而在眼部发挥广泛的生理及病理性作用。近年来研究发现,S1P信号通路既可以介导眼内血管和神经的正常发育、维持眼部组织正常结构和参与眼内脂质代谢,也与免疫相关炎症反应、病理性纤维化和细胞功能屏障破坏等相关病理改变有密切关系。本文主要对S1P信号通路的基本概况、眼部生理性作用以及在眼前节和眼后节疾病病理改变中的作用进行综述,为眼科疾病的治疗提供新的方向和作用靶点。

血根碱调节SphK1/S1P信号通路对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用

目的:探讨血根碱调节SphK1/S1P信号通路对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用。方法:将75只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、血根碱组、PF543组(SphK1抑制剂)、血根碱+PMA(SphK1激活剂)组,每组15只。除假手术组外,其余各组均建立缺血性脑卒大鼠模型。造模后评估各组大鼠神经功能,苏木精—伊红(HE)染色法观察大鼠海马组织病理形态变化。检测大鼠脑组织含水量和脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)水平。采用TTC法检测脑梗死面积,TUNEL法检测神经元凋亡率,蛋白质免疫印迹(western blotting)法检测Bax、Bcl-2、SphK1蛋白表达。结果:模型组大鼠海马神经元严重损伤,大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、MDA水平、Bax、SphK1蛋白表达水平、脑梗死面积、神经元凋亡率显著升高,脑组织SOD、CAT活性、Bcl-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05);血根碱组和PF543组大鼠神经功能缺损评分、脑组织含水量、MDA水平、Bax、SphK1蛋白表达水平、脑梗死面积、神经元凋亡率显著降低,脑组织SOD、CAT活性、Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05)。SphK1激活剂PMA可部分逆转血根碱对大鼠的保护作用。结论:血根碱可能通过抑制氧化应激和神经元凋亡,阻断SphK1/S1P信号通路,对缺血性脑卒中大鼠发挥神经保护作用。

Research progress of sphingosine 1-phosphate and its signal transduction in central nervous system diseases

Sphingosine 1-phosphate(S1P),as a sphingolipid metabolite,has become a key substance in regulating various physiological processes,involved in differentiation,proliferation,migration,morphogenesis,cytoskeleton formation,adhesion,apoptosis,etc.process.Sphingosine 1-phosphate can not only activate the S1P-S1PR signaling pathway by binding to the corresponding receptors on the cell membrane,but also play a role in the cell.In recent years,studies have found that there is a certain relationship between its level changes and the occurrence and development of central nervous system diseases.This article reviews the latest knowledge of sphingosine-1-phosphate in the occurrence and treatment of nervous system diseases,and further clarifies its molecular mechanism in the treatment and development of central nervous system diseases.

三阴性乳腺癌患者中S1PR1、Caspase-3的表达及其与病理特征的关系分析

目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)患者中S1PR1、Caspase-3的表达及其与病理特征的关系。方法回顾性分析76例乳腺癌患者的病历资料,其中TNBC患者20例(TNBC组),非TNBC患者56例(非TNBC组)。采用免疫组化法检测两组乳腺癌标本中的S1PR1、Caspase-3表达,分析二者阳性表达与TNBC病理特征的关系。结果TNBC组标本中S1PR1、Caspase-3的阳性表达率高于非TNBC组(P<0.05)。不同淋巴结转移情况、TNM分期的TNBC患者的S1PR1、Caspase-3表达存在显著差异(P<0.05)。结论S1PR1、Caspase-3在TNBC患者中表达升高,且二者的表达与淋巴结转移情况、TNM分期具有密切联系。

和血柔肝方对肝纤维化大鼠SphK1/S1P/S1PR信号通路的影响

目的观察和血柔肝方对肝纤维化大鼠SphK1/S1P/S1PR信号通路相关因子表达的影响,探讨其治疗肝纤维化的作用机制。方法SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组和造模组,造模组大鼠每周2次颈背部皮下注射60%CCl4溶液(CCl4∶橄榄油=3∶2),剂量3 mL/kg,连续12周,复制肝纤维化大鼠模型。造模成功后,将造模组大鼠随机分为模型组、秋水仙碱组及和血柔肝方低、中、高剂量组,每组10只。各给药组分别予相应药液灌胃,对照组和模型组予等体积蒸馏水,每日1次,连续4周。给药结束后分别检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST),HE染色观察大鼠肝组织病理变化,RT-PCR检测大鼠肝组织鞘氨醇激酶1(SphK1)、1-磷酸鞘氨醇受体3(S1PR3)、细胞外信号调节激酶1(ERK1)、第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)及转化生长因子-β(TGF-β)mRNA表达,Western blot检测大鼠肝组织SphK1、S1PR3、ERK1、PTEN和TGF-β蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠体质量、肝质量、肝系数和脾系数显著降低(P<0.01,P<0.05),血清ALT、AST含量显著增加(P<0.01),肝脏呈深褐色、无光泽,肝体缩小,包膜粗糙,散在大小不等的结节,肝小叶结构破坏,汇管区和中央静脉间有明显桥接纤维间隔形成,并伴有少量炎性细胞浸润,肝组织TGF-β、SphK1、TRAF2、PTEN、ERK1和S1PR3 mRNA表达显著升高(P<0.01,P<0.05),TGF-β、SphK1、PTEN、ERK1、S1PR3蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,各给药组大鼠体质量、肝质量、肝系数、脾质量和脾系数差异无统计学意义(P>0.05),和血柔肝方高剂量组大鼠肝脏形态和肝小叶结构改善,纤维间隔明显减少,炎性细胞浸润减少,和血柔肝方各剂量组大鼠肝组织TGF-β、SphK1、TRAF2、PTEN、ERK1和S1PR3 mRNA表达显著降低(P<0.01),TGF-β、SphK1、PTEN、ERK1、S1PR3蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论和血柔肝方可减轻CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝脏炎症及纤维化状态,尤以和血柔肝方高剂量组疗效显著,其可能通过抑制SphK1/S1P/S1PR信号轴活化状态、减少TGF-β产生,发挥治疗肝纤维化的作用。

探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫组化检测在前列腺诊断中的应用

目的 探究Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin免疫组化技术检测在前列腺病理诊断中的应用价值。方法选取2021年2月—2022年2月南通市第二人民医院收治的202例行早期穿刺及电切的前列腺患者为研究对象,依照病理诊断进行分组,其中良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia, BPH)组患者171例,前列腺癌(prostatic carcinoma,prostatic cancer, PCa)组患者31例,对两组样本中Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等前列腺标志物相应阳性表达情况进行比较,以病理确诊结果作为金标准,统计各免疫指标诊断效能以及联合诊断效能。结果 与BPH组患者相比,PCa组患者的Ki67、P504s、LIMK1及Cofilin指标的表达水平显著更高,而p63表达量显著更低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ki67、p63、LIMK13项指标单独检测PCa的灵敏度均达到90%以上;而P504s和Cofilin指标单独检测的灵敏度分别为83.87%、87.10%;Ki67、p63、P504s、LIMK1、Cofilin5项指标联合检测的灵敏度、特异度和准确度均较高,分别达到96.77%、98.24%和98.02%。结论 Ki67、p63、P504s、LIMK1及Cofilin等各前列腺癌的标志物均具有一定的阳性及阴性检出率,各免疫指标联合检测对前列腺癌的鉴别和诊断具有一定的参考和指导价值。

抑制S1PR2的活性可下调高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞SphK1和MCP-1的表达

目的观察高糖及1-磷酸鞘氨醇受体2(S1PR2)特异性拮抗剂JTE-013对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)鞘氨醇激酶1(Sph K1)、S1PR2、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响。方法将培养的大鼠GMC分为正常糖对照组(NG,含5.5 mmol/L葡萄糖)、甘露醇渗透压对照组(HM,含5.5 mmol/L葡萄糖、24.5 mmol/L甘露醇)、高糖组(HG,含30 mmol/L葡萄糖)、JTE-013干预组(HJ,含30 mmol/L葡萄糖、10μmol/L JTE-013)。实时定量PCR检测培养0、12、24、48 h的细胞中Sph K1、S1PR2、MCP-1 mRNA的表达,ELISA检测培养细胞上清中MCP-1的蛋白表达。结果与NG组相比,高糖培养下的大鼠GMC中Sph K1、S1PR2 mRNA的表达在12 h下降,之后随着时间延长基因的表达量升高,48 h达最高。MCP-1 mRNA的表达随培养时间的延长而升高,12 h表达已升高,24 h表达为最高,48 h的表达下降。高糖诱导大鼠GMC的MCP-1蛋白分泌增加,呈时间依赖性。GMC经JTE-013处理后,高糖继续培养24 h,与HG组相比,HJ组Sph K1、S1PR2、MCP-1 mRNA及MCP-1蛋白的表达明显下降。结论抑制S1PR2的活性可引起高糖培养下的大鼠GMC中Sph K1、MCP-1表达下调。

开玄解毒方通过调控S1P水平改善咪喹莫特诱导银屑病样小鼠皮损症状

目的:探讨开玄解毒方对于咪喹莫特诱导银屑病样小鼠模型的症状、体征改善及其对1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)水平的调节作用。方法:选用BALB/c小鼠25只,随机均分为正常组、模型组、甲氨蝶呤组、开玄解毒中剂量组和高剂量组,除正常组外,其余组采用外涂咪喹莫特法建立银屑病样皮损模型,连续干预7 d后取材。期间对皮损拍照并计算银屑病面积和严重程度指数(psoriasis area and severity index,PASI)评分;HE染色观察皮损病理改变及测量表皮厚度;对脾脏及胸腺拍照并称重;免疫组化法检测表皮Ki67、S1P表达;蛋白质印迹法检测皮损KRT17、Claudin、Occludin表达;qRT-PCR检测IL-17、IL-23、S1PRs mRNA表达水平。结果:与模型组比较,开玄解毒方可缓解咪喹莫特诱导的小鼠银屑病样皮损,降低PASI评分,减轻表皮增生程度(P均<0.01),改善胸腺、脾脏指数及血管增生情况(P<0.01或P<0.05),降低炎症因子IL-17、IL-23 mRNA表达(P<0.01),修复皮肤屏障(P<0.05)。同时,开玄解毒方可下调表皮中S1P及S1PRs mRNA表达(P<0.05)。结论:开玄解毒方能够减轻银屑病局部皮损症状,其药效机制可能与调节S1P水平有关。

S1P/S1P受体通路:炎症性肠病治疗新靶点的研究进展

目前,开发可以稳定治疗炎症性肠病(IBD)的靶向口服药物仍是一个临床待解决的难题。近年来有研究证实,鞘氨醇-1-磷酸(S1P)/S1P受体通路可以调节淋巴细胞归巢和免疫调控,抑制肠道炎症,保护肠道内皮屏障,并对肠道微生物代谢产生影响,可能在IBD治疗中发挥关键作用。本文就S1P/S1P受体通路对IBD的影响及其潜在的作用机制作一综述。

不同细菌性血流感染所致脓毒症患者血清PGE2、S1P1和sTREM-1的表达及预后评估价值

目的探讨不同细菌性血流感染所致脓毒症患者血清中前列腺素-2(PGE2)、1磷酸鞘氨醇受体1(S1P1)和可溶性髓系细胞触发受体-1(sTREM-1)的表达差异及对患者预后的评估价值。方法选取2018年1月至2020年1月该院重症医学科(ICU)收治的血流感染脓毒症患者165例,按感染细菌的不同分为革兰阳性菌血流感染组(G+血流感染组,50例)和革兰阴性菌血流感染组(G-血流感染组,115例),患者从入住ICU至好转出院或死亡观察期不低于28 d,根据观察期最后一天患者情况分为存活组与死亡组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组PGE2、sTREM-1水平,采用化学发光免疫分析仪检测S1P1水平,预后评价采用受试者工作特征(ROC)曲线,各指标间的相关性采用Pearson相关性分析。结果G+血流感染组PGE2、sTREM-1水平均低于G-血流感染组,S1P1水平高于G-血流感染组,差异有统计学意义(P<0.05);存活组PGE2、sTREM-1水平均低于死亡组,S1P1高于死亡组,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示,PGE2、S1P1、sTREM-1评估血流感染脓毒症患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.960(95%CI:0.929~0991)、0.962(95%CI:0.928~0.996)、0.979(95%CI:0.957~1.000)。不同细菌性血流感染所致脓毒症患者血清PGE2与S1P1呈负相关,PGE2与sTREM-1呈正相关,S1P1与sTREM-1呈负相关(r=-0.573、0.574、-0.656,均P<0.001)。结论PGE2、S1P1和sTREM-1对血流感染脓毒症患者预后评估价值均较高,可作为血流感染脓毒症患者预后的预测指标。随着病情的加重,血流感染脓毒症患者PGE2水平会升高,sTREM-1水平随之升高,S1P1水平随之下降。

skp2及p27Kip1蛋白与晚期胃癌患者临床预后的关系

目的探讨细胞S期激酶相关蛋白(skp)2及p27Kip1蛋白与晚期胃癌患者临床预后的关系。方法选取2013年5月至2015年1月开滦点医院林西医院收治130例晚期胃癌患者,免疫组化法检测skp2和p27Kip1蛋白表达水平,采用单因素和多因素Cox回归模型,探讨skp2和p27Kip1蛋白表达与晚期胃癌临床预后的关系。结果晚期胃癌组织skp2和p27Kip1阳性表达在不同卡氏功能状态(KPS)评分、肿瘤直径、手术、腹腔淋巴结转移、肝转移、临床分期及组织学分化患者中差异存在统计学意义(P<0.05),而性别、年龄、化疗、放疗及腹水等指标差异未见统计学意义(P>0.05)。年龄、KPS评分、肿瘤直径、手术、化疗、放疗、腹腔淋巴结转移、肝转移、腹水、临床分期、组织学分级、skp2蛋白表达和p27Kip1蛋白表达水平是晚期胃癌患者5年存活的影响因素。Cox回归分析结果显示,KPS评分(≤60分)、组织学分级(低分化)、腹腔淋巴结转移、skp2蛋白阳性表达和p27Kip1蛋白阴性表达是晚期胃癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论晚期胃癌组织中skp2蛋白阳性表达和p27Kip1蛋白阴性表达是晚期胃癌临床预后差的独立危险因素,可作为晚期胃癌治疗方案、预后评估等方面的有效指标。

吡非尼酮与槲皮素通过S1P/SPHK信号通路抗小鼠肺纤维化比较研究

目的:探讨比较吡非尼酮与槲皮素两药对肺间质纤维化的治疗作用以及与S1P/SPHK信号通路的相关性。方法:本课题组通过建立IPF动物模型,将小鼠分为模型组、对照组、吡非尼酮组、槲皮素组,对小鼠肺间质纤维化模型进行病理学观察,运用Real-time PCR检测小鼠肺组织中SphK1mRNA表达水平,Western-blot法检测小鼠肺组织中纤维化相关蛋白FN、α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ和SphK1蛋白表达水平,ELISA法检测小鼠血清和肺组织中S1P表达水平。结果:吡非尼酮与槲皮素均可以减轻博来霉素致小鼠肺纤维化损伤,有效抑制肺纤维化相关蛋白FN,α-SMA,Collagen I,的表达水平,抑制S1P、SphK1表达。结论:吡非尼酮与槲皮素均可以通过调节S1P/SphK1信号通路发挥治疗改善小鼠肺纤维化的作用,两者比较无显著性差别。