广西苦瓜白粉病菌优势生理小种鉴定及ITS序列分析

【目的】明确广西苦瓜主产区白粉病病原菌种类和生理小种,为苦瓜白粉病防治及抗病育种提供科学依据。【方法】2016—2021年,在广西南宁、柳州、桂林、北海、玉林、贺州、崇左和贵港8个苦瓜产区采集并分离白粉病病原菌246份,通过显微镜观察分生孢子形态及ITS序列分析构建系统进化树明确苦瓜白粉病菌种类,并采用国际通用的13个甜瓜白粉病菌生理小种鉴别寄主和鉴别标准体系对白粉病菌的生理小种进行鉴定;通过调查白粉病菌优势生理小种在广西苦瓜栽培品种桂农科6号、清脆277、翠华和海加仕183上的危害程度和致病力分析,明确广西苦瓜主产区白粉病菌种类及生理小种的分化。【结果】通过形态学与分子生物学相结合的方法确定广西苦瓜白粉病病原菌为单囊壳白粉菌(Sphaerotheca fuliginea),存在小种1和2F两个生理小种,其中,2016—2021年生理小种1的平均分离频率为95.72%,是广西苦瓜白粉病菌的优势小种,生理小种2F仅在贵港苦瓜种植基地发现,平均分离频率为4.29%。苦瓜白粉病菌优势小种致病力测定结果显示,4个广西苦瓜栽培品种的病情指数逐年增加,生理小种1致病力强度呈上升趋势,田间病害发生较严重。【结论】导致广西苦瓜白粉病的病原菌为单囊壳白粉菌,存在小种1和2F两个生理小种,其中生理小种1为广西苦瓜白粉病菌优势小种。广西苦瓜白粉病菌菌株的遗传进化与地域有一定关系,但差异不明显。

几种化学诱导物对黄瓜白粉病抗性的诱导作用

在建立简单、有效、准确的叶圆片检测黄瓜白粉病抗性的基础上 ,系统地比较了 7种化学诱导物及其组合对黄瓜白粉病抗性的诱导作用。结果表明 ,草酸、水杨酸、苦参碱、苯基硫脲、复合磷均能显著诱导黄瓜对白粉病的抗性。其诱导效果为草酸 >水杨酸 >苦参碱 >苯基硫脲 >复合磷 ,氯化钾和硫酸锰的诱导效果不明显。当苯基硫脲、苦参碱与硫酸锰、氯化钾和复合磷分别组合时与单一诱导物相比 ,诱导效果明显增强 ;而当水杨酸、草酸与之组合时诱导效果明显减弱 ,这可能与离子间相互作用有关。

寡聚糖诱导黄瓜对白粉病抗病反应的超微结构研究

中科6号(2％氨基寡糖素)处理黄瓜植株叶片,5 d后接种白粉菌Sphaerotheca fuliginea(Schlecht.)Poll.,可诱导黄瓜Cucumis sativus产生对白粉病的抗病性,寄主细胞对病原菌的侵入产生了防卫反应结构和物质以及过敏性坏死反应。表现为寄主细胞壁加厚,染色加深,寄主细胞壁下产生多层次结构的乳突,在寄主细胞壁与质膜之间有黑色物质沉积;吸器外质膜皱褶,染色加深,吸器外基质中出现染色加深的颗粒状电子沉积物;寄主细胞质紊乱,细胞器解体,整个寄主细胞解体、坏死。

枯草芽孢杆菌CAB-1抑菌蛋白对黄瓜白粉病的防治作用

采用子叶喷雾法分别测定了枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CAB-1所产抑菌蛋白粗提物对黄瓜白粉病的保护和治疗生物活性。结果表明该抑菌蛋白粗提物能显著降低黄瓜白粉病的病情指数,其保护和治疗作用的效果分别为73.33%和76.85%;EC50分别为175μg.mL-1和125μg.mL-1。利用曲利苯兰染色法检测抑菌蛋白粗提物对黄瓜白粉菌Sphacrotheca fuliginea生长的影响,结果表明该抑菌蛋白粗提物能有效降低白粉菌分生孢子的萌发率及萌发的芽管个数,造成菌丝顶端畸形膨大呈球状并减少新生分生孢子的个数。接菌3 d后,对照的孢子萌发率为36.98%,而经抑菌蛋白粗提物处理后的孢子萌发率仅为4.8%;接菌7 d后对照每个分生孢子梗上串生孢子个数最多为7个,多数5～6个;而抑菌蛋白粗提物处理后每个分生孢子梗上串生孢子个数最多为2个,大部分为1个。

黄瓜白粉病菌对己唑醇抗性诱导及抗性菌株生物学性状的研究

室内通过紫外线照射和药剂驯化相结合的方法连续诱变7代,获得了黄瓜白粉病菌Sphaerotheca fuliginea对己唑醇的抗性菌株,该抗性菌株对己唑醇的抗性水平达到105倍,其产孢量和致病力比敏感菌株略高,但差异不显著,且对戊唑醇、腈菌唑、多抗霉素和嘧菌酯无交互抗性,对醚菌酯表现交互抗性,结果表明田间用己唑醇防治黄瓜白粉病可能存在抗性风险。

BTH和SA处理及白粉菌接种对甜瓜叶片光合特性的影响

以抗病品种Tam Dew和感病品种卡拉克赛为材料,研究了BTH和SA处理及白粉菌接种对甜瓜叶片叶面积、叶绿素含量、净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度的影响.结果表明,BTH和SA处理及白粉菌接种对甜瓜苗期叶面积扩展无显著影响;BTH和SA处理植株的叶片(第3叶)和新生叶片(第5叶)的净光合速率、叶绿素含量和气孔导度显著高于对照;白粉菌接种后,2个甜瓜叶片的叶绿素含量、净光合速率和气孔导度显著降低,而BTH和SA处理能缓解由白粉菌接种带来的叶绿素含量、净光合速率和气孔导度的下降趋势.说明BTH和SA处理能延长甜瓜叶片的光合寿命,延缓甜瓜叶片的叶绿素含量、净光合速率和气孔导度的下降趋势.

黄瓜感染白粉病菌后的生理变化

抗性不同的黄瓜品种接种白粉病菌后，对与抗性有关的光合作用、呼吸强度及叶绿索、可溶性糖、可溶性蛋白质的含量进行了测定。结果表明：抗病品种呼吸强度比对照明显升高，感病品种则低于对照；抗、中抗品种光合速率先升高，5～6d后开始下降，而感病品种的光合速率基本上低于对照，这与呼吸强度的变化相一致；无论抗病品种还是感病品种叶绿素含量均有增加，抗病品种增加幅度更大，说明黄瓜抗白粉病的能力与叶绿素含量呈正相关；接种后各品种糖含量的变化趋势基本一致，即降低-升高-再降低-再提高，而且均在第5d出现第1个峰值，第7d则出现最大幅度下降，可溶性糖含量明显低于对照，说明病菌的侵染消耗植株体内的糖，但并不能说明糖含量的降低与品种的抗病性密切相关；各黄瓜品种叶片可溶性蛋白质含量均高于对照，但感病品种比抗、中抗品种的峰值出现的要早，说明感病品种对病菌的侵染更敏感，品种的抗病性与对病菌侵染的反应呈负相关。

白粉病菌的生理小种及其对不同基因型甜瓜的致病性(英文)

用采自温室的８７ 个甜瓜的基因型来测定其对白粉病菌的致病反应，并检测甜瓜白粉病菌的生理小种。结果表明，Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａｆｕｌｉｇｉｎｅａ 是引起杭州春季白粉病发生的主要病原菌，甜瓜白粉病菌属于生理小种２ ，甜瓜不同株系叶片对白粉病菌的抗性，室内检测结果与其田间调查结果之间呈良好的正相关。在被检测的８７ 个甜瓜基因型株系中，有２４ 个基因型对白粉病菌生理小种２ 表现抗性。

大黄提取液防治黄瓜白粉病的初步研究

对中草药大黄提取液防治黄瓜白粉病的保护活性、稳定性、持效期及抑菌谱等作了初步研究。结果表明,大黄提取液的100倍液防效达90%以上,优于粉锈宁(15%WP)1000倍液的防效(73.41%);其酸碱稳定性与热稳定性都非常强;保护作用的持效期至少可达6d;抑菌谱测试结果表明,它对供试的小麦根腐病菌Cochliobolussativus等20种真菌都表现出一定的抑制作用。

植物内生放线菌防治西葫芦白粉病的初步研究

以西葫芦白粉病为对象,通过温室盆栽试验和叶盘筛选试验,从50个内生放线菌菌株中筛选出2个防病效果较好的菌株,叶盘筛选试验发现菌株GKSHJA和PR1-8的无菌滤液原液在接种病菌的同时使用防治效果最佳,分别达到60.98%和63.22%。温室人工接种白粉病菌的盆栽试验发现,GKSHJA无菌滤液原液在接种前、接种后24h喷雾,相对防治效果分别达55.22%和16.44%;菌株PR1-8的相对防效分别为51.94%和24.39%,且GKSHJA和PR1-8无菌滤液的5倍稀释液在接种病菌的同时使用也有一定的防病效果,其病情指数分别比对照降低了27.81%和30.19%。在自然感病的田间试验中,菌株GKSHJA和PR1-8无菌滤液的5倍稀释液对西葫芦白粉病的相对防效分别达到56.33%和69.88%。这些结果表明,菌株GKSHJA和PR1-8作为防治瓜类白粉病的生防菌株,具有开发应用潜力和前景。

蛇床子素对南瓜白粉病菌侵染的影响

采用室内离体叶片法,发现蛇床子素(osthol)处理能显著降低南瓜白粉病菌侵染的病情指数,接菌6d后对照的病情指数为68.89,经100μg/mL蛇床子素处理组的病情指数仅为15.56。显微观察发现蛇床子素可有效降低南瓜白粉病菌对寄主的入侵,并可有效抑制菌丝的生长。接菌后48h,对照菌丝的平均长度接近400μm,蛇床子素处理组菌丝平均长度仅有122μm。苯胺蓝染色后显微观察发现蛇床子素还可降低白粉病菌的产孢量。

黄瓜白粉病抗性及生理机制的研究

研究了黄瓜不同抗性品种在接菌前后酶活性与酚类物质含量的变化。结果表明:黄瓜对白粉病的抗性与植株组织中的过氧化物酶、多酚氧化酶、过氧化氢酶活性以及酚类物质含量密切相关。不同抗性黄瓜品种对白粉病的抗性与PPO活性、酚类物质含量可能存在一定的正相关。

黑龙江省黄瓜白粉病病原鉴定

对黑龙江省哈尔滨、齐齐哈尔、牡丹江、佳木斯和大庆等5个城市的11份黄瓜白粉病病样从分生孢子形状、大小、纤维体的有无、芽管着生位置、闭囊壳的特征以及鉴别寄主反应等方面进行了病原鉴定。结果表明,所有菌株分生孢子内均可见明显的纤维体,萌发管叉状,从分生孢子的侧面长出;闭囊壳内含1个子囊,每个子囊内有8个子囊孢子;均可侵染鉴别寄主Lagenaria leucantha。由此可知,引起黑龙江省黄瓜白粉病的病原为Sphaerotheca fuliginea。

三株链霉菌对黄瓜白粉病及黄瓜生长的影响

利用链霉菌防治黄瓜白粉病以及对黄瓜植株生长的温室试验表明,3株链霉菌M63、S15和S93对黄瓜白粉病具有保护性防治作用,与对照相比,浸种的平均防效分别为62.7%、40.3%和56.8%,清水对照的防效为0,M63和S93的防效显著优于S15(P=0.05),3株链霉菌在不同时间间隔的防效均显著高于清水对照,且随着叶面喷施后与接种白粉菌时间间隔的缩短,防效有增高趋势,而喷施特谱唑则表现了相反的趋势;3株链霉菌叶面喷施的防效差异不大,M63的防治效果较稳定;3株链霉菌浸种结合预防性叶面喷施的防病效果和变化趋势与单独叶面喷施链霉菌的防效相似。链霉菌对黄瓜白粉病的治疗效果不明显。研究还发现,M63和S93浸种处理显著地增加株高,相反S15显著降低了株高。3株链霉菌均显著地增加黄瓜植株的叶片数。总之,链霉菌M63的防效优于S15和S93,是一株有应用前景的生防菌株。

22种植物提取物对黄瓜白粉病菌的抑制作用

采用小株子叶法测试了22种植物提取物对黄瓜白粉病菌的抑制作用。其中水蓼、川黄柏、连翘等8种植物提取物对黄瓜白粉病菌具有较好抑制作用,EC50值均小于0.5%,除茵陈和马齿苋外,其他6种植物提取物对黄瓜白粉病的保护效果均高于治疗效果。8种植物提取物在1.25%浓度下对黄瓜白粉病的保护效果均高于化学药剂三唑酮100μg/mL(74.42%);1.25%的川黄柏、广藿香、马齿苋、蛇床子、南五味子提取物对黄瓜白粉病的治疗效果达到82%以上,高于三唑酮100μg/mL(78.89%),说明在黄瓜白粉病发生之前或初期使用这8种植物提取物能够达到较好的防治效果。

Ts-86提取液防治黄瓜白粉病的初步研究

测试了中草药Ts-86提取液对黄瓜白粉病的防治作用,并对其稳定性、持效期及抑菌谱等作了进一步研究。结果表明,Ts-86提取液的200倍液防效达93.35％,优于15％粉锈宁可湿性粉剂1 000倍液的防效;其酸碱稳定性与热稳定性较差,只在中性或微酸微碱条件下活性较高,且经100℃处理的活性最高;经100℃处理后,其500倍液防治作用的持效期可达6 d:抑菌谱相对广泛。

药剂对黄瓜白粉病菌的生物活性测定方法比较

采用叶圆片法、子叶法和改进的叶圆片法测定了虎杖(Polygonumcuspidatum眼Sieb.etZucc.演)的提取物P3D和三唑酮对黄瓜白粉病菌(Sphaerothecafuliginea)的生物活性。结果表明3种方法均能有效测定药剂对黄瓜白粉菌的生物活性熏改进的叶圆片法兼有叶圆片法和子叶法的优点,且操作简便易行,调查结果客观。

喜树碱对黄瓜白粉病和霜霉病及水稻纹枯病的抑菌活性

以喜树碱为原药,进行农用杀菌剂的开发与研究。室内盆栽的活体实验研究结果表明:喜树碱对水稻纹枯病Rhizoctonia solani,黄瓜白粉病Sphaerotheca fuliginea,黄瓜霜霉病Pseudoperonospora cubensis均有较高的杀菌活性,半数致死质量浓度和90%致死质量浓度分别为41.964,40.495,27.489mg·L-1和756.776,247.026,341.818mg·L-1。同时,黄瓜霜霉病的田间药剂试验结果表明,喜树碱对霜霉病菌有杀菌活性,其半数致死质量浓度和90%致死质量浓度分别为11.221和69.128mg·L-1,因此,喜树碱可能成为有效的生物源杀菌剂。

氟吡菌酰胺防治瓜类及草莓白粉病田间试验

为了筛选高效、安全的白粉病化学防治药剂,通过田间药效试验进行药剂筛选。试验结果表明,分别在药后7天和14天,氟吡菌酰胺防治甜瓜上白粉病的效果最高,防效均在95%以上。与之相比较,防治黄瓜上白粉病和草莓上的白粉病效果稍低,其防效也在90%以上。研究表明,氟吡菌酰胺防治白粉病效果良好、持效期长,是防治黄瓜、甜瓜、草莓白粉病的一种新型良好杀菌剂。

甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂ZJ0712对黄瓜白粉病和霜霉病的毒力及药效评价

ZJ0712，2-[2-（2，5-二甲基苯氧基）甲基苯基]-3-甲氧基丙烯酸甲酯，是我国自行创制的高效广谱杀菌剂。为评价该药剂10％SC对黄瓜白粉病和霜霉病的使用效果，进行了室内和田间药效评价。经室内检测，该药剂对白粉病菌Sphaerotheca fuliginea的EC50和EC90值分别为1．79和5．47μg/mL，对霜霉病菌Pseudoperonospora cubensis的EC50和EC90值分别为0．34和45．15μg/mL。田间试验结果表明，该药剂对白粉病在10～20g／hm^2、对霜霉病在37．5～150g／hm^2剂量下防效分别为85．79％～91．33％和86．70％～90．18％。该药剂在本试验剂量范围内对作物安全。