胍丁胺鞘内注射对骨癌痛大鼠痛行为及脊髓CXCL13表达的影响

目的探讨胍丁胺鞘内注射对骨癌痛大鼠痛行为及脊髓趋化因子CXC配体13(CXCL13)表达的影响。方法成年雌性SD大鼠60只,体质量200~220 g,采用随机数字表法分为3组:假手术组(A组)、骨癌痛组(B组)、骨癌痛+胍丁胺组(C组),各20只。B、C组采用大鼠胫骨上端骨髓腔内注入Walker 256癌细胞的方法建立骨癌痛模型,A组胫骨髓腔内注射等量生理盐水,B、C两组鞘内置管。造模成功后,C组鞘内注射胍丁胺160 mg/kg,连续6天;B组鞘内给予等量生理盐水,连续6天;A组不作处理。于造模后第12天用von Frey丝测定3组大鼠机械缩足反射阈值(MWT);痛阈测定结束后,麻醉处死大鼠,取脊髓组织,采用免疫荧光法检测CXCL13在神经元中的表达;采用Western blot法分析CXCL13蛋白表达及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测CXCLl3 mRNA的表达。结果建模后12天,与A组比较,B、C组大鼠MWT明显低于A组,与B组比较,C组MWT高于B组,差异均有统计学意义(P<0.05)。建模后12天,与A组比较,B、C组大鼠CXCL13在脊髓背角神经元中表达增加,CXCL13蛋白及其mRNA表达明显增加(P<0.05);与B组比较,C组大鼠CXCL13在脊髓背角神经元中表达降低,CXCL13蛋白及其mRNA表达明显减少(P<0.05)。结论鞘内注射胍丁胺可有效改善大鼠骨癌痛痛觉过敏行为,其机制可能与抑制大鼠脊髓CXCL13表达有关。

脊髓趋化因子CXC配体13在大鼠神经病理性痛中的作用

目的评价脊髓趋化因子CXC配体13（CXCL13）在大鼠神经病理性痛中的作用。方法雄性成年sD大鼠108只，体重150～200g，采用随机数字表法，将其分为4组（n=27）：假手术组（s组）、神经病理性痛组（NP组）、小干扰RNA（siRNA）阴性对照（NC．siRNA）组（NS组）和CXCL13-siRNA组（cs组）。NP组、Ns组和cs组采用结扎L5脊神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型，S组仅暴露L5脊神经，但不结扎。Ns组和cs组分别鞘内注射Nc-siRNA慢病毒和CXCL13-siRNA慢病毒10μl。分别于术后3、7和14d时测定机械痛阈，然后处死大鼠，取脊髓组织，采用免疫荧光法检测CXCL13和Neun的共表达情况以及星形胶质细胞活化情况。采用Westernblot法测定CXCL13和GFAP的蛋白表达，采用RT-PCR法测定CXCL13和GFAP的mRNA表达。结果与s组比较，NP、NS组和Cs组术后各时点机械痛阈下降，脊髓CXCL13和GFAP的蛋白及其mRNA表达上调（P〈0．05）；与NP组比较，cs组术后各时点机械痛阈升高，脊髓CXCL13和GFAP的蛋白及其mRNA表达下调（P〈0．05），Ns组各时点机械痛阈、脊髓CXCL13和GFAP的蛋白及其mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论脊髓CXCL13通过激活星形胶质细胞参与大鼠神经病理性痛的形成和维持。